高效液相色谱法测定加米霉素注射液杂质的研究

正兽药在维持畜牧业快速、健康、可持续发展过程中发挥着十分重要的作用。但是由于抗生素的滥用和耐药菌株的大量出现,导致抗菌药物防治效果不佳,动物疾病的防控难度越来越大,亟需全面科学地了解药物的最佳使用方式。加米霉素是大环内酯类抗生素,为15元环的半合成氮杂内酯类抗生素,主要通过与细菌核糖体50S亚基结合,阻止多肽链延长,抑制细菌蛋白质的合成。加米霉素是抗菌谱广、抗菌活性较强的抗生素,主要用于防治溶血性曼氏杆菌、多杀巴氏杆菌、睡眠嗜组织菌、     

高效液相色谱法测定阿奇霉素的含量

为了测定阿奇霉素的含量,试验采用高效液相色谱(HPLC)法,以Kromasil C_(18)为色谱柱(250.0 mm×4.6 mm,5.0μm),以0.067 mol/L磷酸二氢铵(三乙胺调p H值为6.5)︰乙腈=70︰30为流动相,流速为1.0 m L/min,用UV230+型紫外-可见波长检测器,检测波长为210 nm,用外标法定量。结果表明:阿奇霉素在1.4~3.4 mg/m L的浓度范围内线性关系良好(r=0.999 8,n=6);样品的平均回收率为100.20%,相对标准偏差(RSD)=0.38%(n=3);样品测定方法重现性的RSD=0.49%(n=6),说明该方法可用于阿奇霉素含量的测定。     

高效液相色谱法测定甲砜霉素含量

用高效液相色谱法测定甲砜霉素含量,色谱柱用C18(5μm,4.6mm×150mm),柱温为室温,流动相为乙腈-水(46),检测波长225nm,流速1.0nfl/min,进样量20μl.方法的线形范围为0.025～0.2mg/ml,r=0.9990.     

反相高效液相色谱法测定克林霉素含量

本实验建立了一种快速检测克林霉素HPLC，用反相C18柱分离克林霉，用乙酰胺做内标，在UV205mm条件下，用乙腈－磷酸盐缓冲液－四氢呋喃（V：V：V＝29：70：1）作流动相测定克林霉素含量。结果表明：标准曲线范围在0.05-40mg/mL回归方程为Y＝0.6547X-0.0034(R^3=0.9992）。     

高效液相色谱法测定泰拉霉素注射液中泰拉霉素的含量

为了建立测定泰拉霉素注射液中泰拉霉素含量的高效液相色谱方法,试验采用Waters XBridge C_(18)(150 mm×4.6 mm,5.0μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(pH值为7.0,45∶25∶30)为流动相进行洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为205 nm,柱温为35℃,进样量为25μL。结果表明:泰拉霉素A和B色谱峰峰形良好,且均能达到完全分离;在0.05~5.00 mg/mL范围内线性关系良好(R~20.999);精密度和稳定性等考察结果的相对标准偏差(RSD)均小于2.0%;而加样回收率均在97%~104%之间,RSD均小于1.0%,均符合方法学要求。6份泰拉霉素注射液供试品中泰拉霉素A和B的相对含量符合要求,泰拉霉素的总含量也符合要求。说明试验建立的高效液相色谱法能够定量测定泰拉霉素的含量。     

高效液相色谱法测定饲料中甲砜霉素含量

建立了测定饲料中甲砜霉素的含量的高效液相色谱检测方法。2g饲料样品,乙酸乙酯提取后蒸干,加入4%氯化钠,正己烷脱脂后乙酸乙酯反提,蒸干,流动相溶解后上机。色谱柱为C18,流动相为甲醇-水(25:75,V/V),检测波长225nm,流速1.2mL/min,柱温室温。在0.1～500μg/mL的质量浓度内甲砜霉素的峰面积与质量浓度呈良好的线性关系(r=0.9997),平均回收率超过76%,RSD小于12%。     

加米霉素注射液含量的高效液相色谱检测法的建立

为了建立加米霉素注射液含量的高效液相色谱检测法,为其检测提供依据,试验选用样品浓度为0.3 mg/mL,进样量为20μL,流速为1.0 mL/min,柱温为40℃,溶剂为乙腈,作为初步的色谱条件,比较不同比例流动相、不同色谱柱的峰形及分离效果,确定最优色谱条件,并考察该方法的线性关系、重复性、稳定性及添加回收率,并利用该方法对样品进行检测。结果表明:通过筛选确定了液相色谱检测条件,色谱柱为资生堂CAPCELL PAK C_(18) MGⅡ(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为磷酸盐缓冲液(取0.01 mol/L磷酸氢二钾溶液,用20%磷酸溶液调节pH值至8.0)∶乙腈(20∶80),检测波长为210 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为40℃。用该条件进行检测,加米霉素标准品在1.714～450.0μg/mL范围内呈良好的线性关系(R~2=0.999 7);重复性试验平均含量为98.18%,相对标准偏差(RSD)为0.85%;在高、中、低3个水平下的回收率为98%～102%,平均回收率为99.71%,RSD为0.94%;用确定的液相色谱检测条件对8批中试样品的含量进行测定,结果RSD为0.23%。说明该方法重复性好、准确性高,可用于加米霉素注射液含量的检测。     

高效液相色谱法测定盐霉素预混剂中盐霉素A的含量

建立了测定盐霉素预混剂中盐霉素A含量的高效液相色谱分析方法。采用C18色谱柱,甲醇-水-冰醋酸(94︰6︰0.1)等度洗脱,甲醇-硫酸-香草醛(95︰2︰3)为衍生试剂,流速0.7 mL/min;衍生温度98 ℃;检测波长520 nm;进样量20 μL。结果表明,盐霉素A在0.4～0.6 mg/mL范围内线性关系良好（r2=0.9998）,平均回收率100.6%。该方法简便、准确、可行。     

超高效液相色谱法测定原料药中加米霉素的含量

研究建立超高效液相色谱-光电二极管阵列法（UPLC-PDA）测定加米霉素原料中主成分加米霉素的含量。采用反相超高效液相色谱法对加米霉素进行色谱分离和快速定量测定。方法采用ACQUITY UPLCTM CSH C18色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm)为分离柱,柱温：35℃;以氨水(0.1:30)-乙腈为流动相（30:70）进行等度洗脱;流速：0.45 mL/min;进样量：1 μL;检测波长为208 nm。通过光谱图、保留时间和峰面积参数对加米霉素进行定性、定量检测。加米霉素在80~1600 μg/mL的范围内线性关系良好（R2=0.9996）;方法检测限为40 μg/mL、定量限为80 μg/mL,系统适应性试验色谱柱耐受性良好,添加回收率99.80%,完全满足检测需求。研究建立的UPLC方法色谱分离较好,分析速度较快,前处理简单,适用于加米霉素原料中主成分加米霉素含量的检测。     

高效液相色谱法测定喹乙醇含量

喹乙醇为喹恶啉类合成抗菌药物，化学名称为2-[N-（2-羟基-乙基）-氨基甲酰]-3-甲基-喹恶啉-1，4-二氧化物。采用高效液相色谱法测定其含量，方法简便快捷，结果准确可靠。     

高效液相色谱法测定喹乙醇含量

喹乙醇具有促进动物生长、提高饲料转化率及广谱抗菌作用。相对其他兽药 ,添加成本较低 ,大部分饲料厂 ,特别是中小饲料厂多用其作为畜禽配合饲料的药物添加剂。由于喹乙醇具有中等至明显的蓄积毒性 ,饲料中添加量过大或混合不均匀、饲喂时间过长等均能引起鸡、鸭中毒。我国目前正加紧实施饲料安全工程 ,加大对违规使用饲料药物添加剂行为的打击力度。开展饲料及饲料添加剂中喹乙醇含量检测工作非常重要 ,参考有关资料 ,根据喹乙醇的理化特性 ,笔者摸索出了一套饲料及饲料添加剂中喹乙醇含量的测定方法 ,方法简便、灵敏、准确 ,现介绍如下。…     

高效液相色谱法测定环丙氨嗪的含量

建立了环丙氨嗪含量测定的高效液相色谱方法。采用Phenomenex Prodigy C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),甲醇:乙腈:缓冲液(每1000mL水中加3.72g磷酸氢二钾和6.48g磷酸二氢钾)=5:2:93为流动相,流速为2.0mL/min,检测波长214nm,柱温20℃。该方法线性范围为0.00799～0.01229mg/mL,r=0.99,系统精密度RSD=0.25%(n=6),平均回收率为99.2%(RSD=0.82%)。     

高效液相色谱法测定磺胺间甲氧嘧啶的含量

建立了兽药磺胺间甲氧嘧啶钠注射液中磺胺间甲氧嘧啶含量的高效液相色谱测定法。以C18为固定相,0.1%磷酸溶液-乙腈(80∶20)为流动相,流速1.0 m L/min,柱温40℃,检测波长270 nm,采用外标法进行定量。磺胺间甲氧嘧啶的线性范围为5.0~100.0μg/m L,回归方程为Area=40.333×Amt-18.843(n=5),相关系数大于0.999。从高(120%)、中(100%)和低(80%)三个添加水平的检测结果可以看出,磺胺间甲氧嘧啶的回收率为96.27%~98.30%。该方法简单,准确,精密度好,回收率高,可以用于测量磺胺间甲氧嘧啶钠注射液中磺胺间甲氧嘧啶的含量。     

高效液相色谱法测定叶酸片的含量

叶酸是由喋呤啶、对氨基苯甲酸和谷氨酸等组成的化合物,是一种水溶性B族维生素,相当于蝶酰谷氨酸.固定相为:依利特hypersil BDSC18色谱柱(4.62505u),乙腈-甲醇-水-冰醋酸(25∶10∶65∶0.1)为流动相,检测波长为254nm;叶酸在20～280μg·mL-1范围内呈良好的线性关系.叶酸的平均回收率为99.3％.本法简便、重现性好、回收率高,可用于叶酸片中叶酸的含量测定.     

高效液相色谱法测定盐酸林可霉素预混剂中林可霉素的含量

兽药盐酸林可霉素预混剂含量测定收载于《进口兽药质量标准》1999年版,是采用生物效价管碟法测定,该方法操作步骤复杂,影响因素多,检测时间长.参考《中国兽药典》2010年版收载的盐酸林可霉素检测方法,利用HPLC法进行检测,使用C18色谱柱,柱温(30±5)℃,以0.05mol/L硼砂溶液∶甲醇(1∶1)为流动相,检测波长为214nm.林可霉素峰与林可霉素B峰分离良好,林可霉素峰与相邻杂质峰的分离度符合要求,变异系数(RSD)小于1.5％.结果表明通过高效液相色谱法(HPLC)能快速准确地测定兽药盐酸林可霉素预混剂中林可霉素的含量.     

高效液相色谱法测定低聚壳聚糖含量

本实验建立高效液相色谱法测定原料和复合预混料中低聚壳聚糖含量。采用ODSC18柱(150mm×4.6mm,5μm),以磷酸盐缓冲液(pH=2.8～3.0)-乙腈(95+5,V+V)为流动相,流速为1.5mL/min,检测波长为195nm,柱温为35℃。在此色谱条件下,低聚壳聚糖在0.056～0.450mg/mL浓度范围内呈良好线性关系,r=0.9998,方法平均回收率为98.8%,相对标准偏差(RSD)为1.1%(n=9)。本法操作简便、快速、结果准确,可作为低聚壳聚糖含量测定的质控方法。     

高效液相色谱法测定氟甲喹可溶性粉含量

采用高效液相色谱法测定氟甲喹可溶性粉的含量,采用C 18 色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水-磷酸(35∶65∶0.5,V/V)为流动相,柱温25 ℃,流速1.0 mL/min,检测波长248 nm.方法的线性范围 100～400 μg/mL,线性方程A=2.455×104C 28 111,r=0.999 9,平均回收率100.3%,RSD= 0.74%.本法具有专属性,可将氟甲喹与已知的杂质进行有效分离.     

高效液相色谱法测定替米考星含量

建立了替米考星含量测定的HPLC方法。采用C18色谱柱(5μm,4.6 mm×250mm),乙腈+四氢呋喃+磷酸二丁胺为流动相,流速1.0 mL/m in,检测波长280 mn,以HPLC外标法测定替米考星含量。结果表明,实验测得的峰面积与对应的浓度呈良好的线性关系,其线性范围为0.25~0.75 mg/mL(r=0.999 9),平均回收率为99.81%。本法简便、准确、快速,是测定替米考星含量的良好方法。     

高效液相色谱法测定六茜素含量

采用小杨酸作内标,以甲醇：水（８０：２０）为流动相,紫外３０２ｎｍ为检测波和荨闻六茜素含量测定的反相高效液相色谱法。其对六茜的最低深度为０．５ｍｇ／Ｌ,六茜素质量浓度Ｙ在１～８０ｍｇ／Ｌ范围内与六茜素峰高和内标峰高的比Ｘ成良好的线性关系,回归方程为Ｙ＝２９．６９９Ｘ＋０．０４５,ｒ＝０．９９９９。日内与日间精密分别为０．９７％和１．０１％,对３批六茜素样品的含量测定结果表明,该方法简便、快速、准确