沙门菌马流产凝集试验阳性血清国家参考品的制备及标定

为研制沙门菌马流产凝集试验阳性血清国家参考品,以提高沙门菌马流产凝集试验抗原国家参考品、抗原及阳性血清国家参考品、阳性血清的半成品和成品检验的可靠性和可重复性,本研究按照沙门菌马流产凝集试验阳性血清制备的现行标准及标准物质研究的相关规定,规范了沙门菌马流产凝集试验阳性血清参考品的制备及检定方法。用沙门菌马流产凝集试验抗原国家参考品测定阳性血清效价,将血清稀释至1∶1 600、1∶3 200、1∶6 400,分别准确定量分装后,按照特定的冻干曲线冻干,分别用抗原国家参考品测定冻干血清的效价,测定3种效价血清的均一性和稳定性,将阳性血清国家参考品应用于生产检验。结果表明,该参考品均一性良好,在有效期内效价稳定,可以作为国家参考用品应用。     

马流产沙门氏菌研究进展

马流产沙门氏菌(Salmonella abortus equi)是以引起母马流产、种马睾丸炎和小马驹败血症及多发性关节炎为主要症状的病原菌。近年来,由于马属动物集约化养殖,该病在我国山东、新疆、内蒙等马属动物养殖地区陆续发生,造成了严重的经济损失。论文通过对马流产沙门氏菌引起的临床症状、致病机制、疫苗研制等方面的研究进展进行论述或回顾,并对其研究趋势进行展望,旨在为更好地开展该菌引起的疾病的预防、控制和净化等提供参考。     

巴林左旗马流产沙门氏菌血清学调查

为了解巴林左旗肉驴流产病因,采用酶联免疫吸附试验—ELISA对从富河镇采集的1953份血清样品进行马流产沙门氏菌抗体检测,样品检测结果显示驴群感染率84%,个体感染率29%,全镇各村均有检出,嘎查村阳性率100%,养殖场阳性率100%,结果预示巴林左旗存在肉驴疑似感染马流产沙门氏菌情况。     

严禁用土霉素预防孕马沙门氏菌性流产

目前,养马的农户为防止妊娠母马沙门氏菌性流产,给孕马口服土霉素进行预防。应用这种方法预防马沙门氏菌性流产,容易造成养马业不可估量的损失。通榆县某国营畜牧场种畜大队饲养员为防止孕马流产,给几十匹孕马口服土霉素,结果引起中毒,造成严重的胃肠炎,有的抢救无效死亡。口服土霉素引起中毒的原因是因为马是草食动物,在消化道有一定数量的菌丛,如大肠杆菌、乳酸菌类、肠道细菌等,这些正常菌丛与宿主的健康有着密切的关系,在宿主防御机能正常时,它对宿主呈现有益的作用;但在宿主防御机能减弱时,就会产生有害作用。给马口服土霉素可造成肠道…     

伊犁州马流产沙门氏菌病流行病学调查

为了解伊犁州马属动物马流产沙门氏菌的流行现状,采集伊犁州昭苏县、尼勒克县、察布查尔锡伯自治县的母马、流产马、驴血清和全血样品共982份,分别用ELISA、荧光PCR方法对马流产沙门氏菌病进行血清抗体和病原学检测。荧光PCR检测结果显示：察布查尔锡伯自治县驴马沙门氏菌病阳性率为29.7%;马流产沙门氏菌病阳性率为2.5%,其中,昭苏县马流产沙门氏菌病阳性率为1%、尼勒克县马流产沙门氏菌病阳性率为4.1%、察布查尔锡伯自治县马流产沙门氏菌病4%;流产马、驴马流产沙门氏菌马流产沙门氏菌病阳性率为92.5%;结果表明：马流产沙门氏菌病在这些养殖场点得到了很好的预防,但是马流产沙门氏菌引起的马流产依然较为普遍,特别是驴的马流产沙门氏菌病感染率较高,需要定期对马流产沙门氏菌病进行监测并加强防控。本调查为伊犁州马属动物马流产沙门氏菌病的防控提供了数据支持。     

马流产沙门氏菌新疆分离株FliC基因的克隆及分子特征分析

为了解马流产沙门氏菌新疆分离株的分子特征及其鞭毛蛋白FliC基因的结构与功能,本试验运用PCR技术扩增了分离鉴定的2株马流产沙门氏菌新疆株FliC基因,克隆测序并对其进行了生物信息学分析。分析结果显示,成功获得了626 bp的FliC基因(GenBank登录号:KJ486797、KJ486798)。对分离的2株马流产沙门氏菌FliC基因的核苷酸序列同源性分析结果显示,FliC基因新疆分离株与GenBank登录的其他沙门氏菌分离株的核苷酸序列同源性为49.6%～100.0%。该结果表明马流产沙门氏菌的FliC基因在该菌进化和流行的过程中是保守的,本研究将为分析该病的分子流行和进一步利用FliC基因防制该菌引起的感染提供试验基础。     

乳胶凝集试验检测牛羊淋巴结中的沙门氏菌

采用沙门氏菌多价血清致敏乳胶并制成乳胶抗体,建立沙门氏菌乳胶凝集试验检测方法(LAT),分别用LAT法和常规分离培养检测法对38份牛淋巴结、101份羊淋巴结进行检测.结果:乳胶凝集试验牛淋巴结阳性21份,羊淋巴结阳性44份;常规分离培养检测法牛淋巴结阳性22份,羊淋巴结阳性48份,两种方法的阳性符合率均超过80%.试验表明乳胶凝集试验操作简便、快速、敏感性高、特异性强且可用于现场检测,是一种适合基层单位检测沙门氏菌的可靠方法.     

乳胶凝集试验检测成品饲料中的沙门氏菌

用沙氏菌多价血清致敏乳胶并制成乳胶抗体,建立沙氏菌乳胶凝集试验检测方法。用所建立的乳胶凝集试验方法和常规分离培养检测法检测75份成品饲料,结果乳胶凝集试验成品饲料阳性16份,常规分离培养检测法成品饲料阳性18份,两种方法的阳性符合率成品饲料为83.3%,结果表明乳胶凝集试验具有操作简便、省时、特异性强且可用于现场检测等优点,是一种适合基层单位用来检测沙门氏菌的可靠方法。     

乳胶凝集试验检测牛、羊淋巴结中的沙门氏菌

用沙门氏菌多价血清致敏乳胶并制成乳胶抗体,建立沙门氏菌乳胶凝集试验检测方法（LAT）。用该方法和常规分离培养检测法检测38份牛淋巴结、101份羊淋巴结,结果乳胶凝集试验牛淋巴结阳性21份,羊淋巴结阳性44份;常规分离培养检测法牛淋巴结阳性22份,羊淋巴结阳性48份,两种方法的阳性符合率牛淋巴结为81.8%,羊淋巴结为81.3%。试验表明乳胶凝集试验操作简便、快速、敏感性高、特异性强且可用于现场检测,是一种适合基层单位用来检测沙门氏菌的可靠方法。     

禽流感病毒H5亚型血凝抑制试验抗原国家参考品的研制

按照国家一级标准物质要求和禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制试验抗原制造及检验规程规定的抗原制备方法,研制了一批禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制抗原国家参考品,用于检测禽流感病毒（H5亚型）制品生物效价和血凝抑制操作过程中的校验。该批抗原经过8家单位对其协作标定后对结果进行统计学分析,确定该批禽流感抗原的血凝效价为1：80。另对所研制的禽流感抗原均一性、稳定性、无菌检验、剩余水分测定、真空度测定等各项指标进行检测,结果均符合禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制试验抗原制造及检验规程和国家一级标准物质要求。说明该禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制抗原可以作为国家参考品。     

虎红平板凝集试验与试管凝集试验检测奶牛布鲁菌病的比较

布鲁菌病主要采用凝集试验来检测,本试验用虎红平板凝集试验和试管凝集试验对江苏海安、江都、无锡和兴化地区的660头奶牛的血清样品进行平行检测,虎红平板凝集试验的阳性检出率为9.7%,试验管凝集试验的阳性检出率为5.5%;与后者相比,虎红平板凝集试验的敏感性为100%,特异性为95.3%,符合率为95.6%。这些数据表明,江苏地区某些奶牛场存在布鲁菌感染,虎红平板凝集试验可以用于布鲁菌病初步检测。     

兔体中和试验用猪瘟病毒阴、阳性血清国家参考品的研制

为制备和标定兔体中和试验用猪瘟病毒阴、阳性血清国家参考品,本试验制备了猪瘟病毒阴性、弱阳性和强阳性血清,通过过滤、分装、冻干、熔封,获得3亚批候选物,并进行了检验、协作标定和定值。结果显示：物理性状、无菌检验、安全检验、支原体检验、真空度测定、均匀性检验和保存有效期试验均合格;剩余水分均小于4％;特异性检验结果均为口蹄疫、伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征、猪细小病毒病、牛病毒性腹泻／粘膜病抗体阴性,并且弱阳性和强阳性血清能中和猪瘟兔化弱毒而阴性血清不能中和;残余猪瘟病毒免疫荧光和套式RT—PCR核酸检测结果均为阴性;经协作标定定值,其兔体中和效价分别为：阴性、1：100.928±0.103、1：102.928±0.103,表明该候选物可以作为国家参考品。     

鸡传染性鼻炎平板染色诊断抗原的制备及应用

应用鸡副嗜血杆菌（HPG）A型（HPG221）和C型（HPG668）鸡传染性鼻炎（IC）的致病性血清型国际标准株,制备了IC平板凝集试验（SPA）染色诊断抗原。该抗原特异性强：不但与鸡新凤（ND）、鸡白痢、鸡支原体等9种鸡血清无交叉反应,而且可以进行鸡传染性鼻（IC）血清型的鉴定;敏感性高;SPA较琼脂免疫扩散试验（AGID）高2个滴度;稳定性好：4℃保存2年,检测效果不变;应用此抗原进行平板凝集反应检测IC抗体,操作简便,检测快速,适于普及。     

羊伪结核棒状杆菌的菌体凝集抑制试验

羊伪结核棒状杆菌(Corynebac-terium pseudotuberculosis)是引起绵羊和山羊干酪性淋巴结炎(Caseous lymphadenitis,简称CLA)的病原菌,能使绵羊、山羊、骆驼、马、牛等多种动物致病,发病特征是受害动物的淋     

乳胶凝集试验快速检测副猪嗜血杆菌

利用原核表达并经过纯化的副猪嗜血杆菌TbpB N端蛋白及人工合成的特异性多肽制备单克隆抗体,经碳化二亚胺(EDC)将纯化后的单克隆抗体IgG与羧化乳胶共价偶联,并对偶联乳胶的IgG含量及偶联时间等条件进行合理选择,建立了快速检测副猪嗜血杆菌的乳胶凝集试验方法.利用LAT方法检测148株副猪嗜血杆菌疑似菌株,参考16 S rRNA-PCR方法的结果,符合率为83.1%,且致敏乳胶不与临床常见菌株发生凝集反应.结果表明,此检测方法具有操作简便、快速、特异性高的特点,便于在基层推广使用,为副猪嗜血杆菌的诊断和有效防治提供了参考和依据.