副干酪乳杆菌LC-01对便秘小鼠的通便作用

副干酪乳杆菌LC-01是一株具有较强抗氧化活性和免疫活性的益生菌菌株,为评价该菌株的润肠通便作用,实验通过将Balb/c雄性小鼠随机分为空白组、模型组、LCS对照组和3个副干酪乳杆菌LC-01给药组.空白组和模型组经口灌胃0.1mL/(kg·d)(以体质量计)质量分数10％的脱脂乳.选取代田乳酸菌LCS及干酪乳杆菌菌株LC-14作为对照菌株.代田乳酸菌LCS对照组灌胃1×108CFU/mL的菌悬液0.1mL/(kg·d),LC-14对照组和LC-01给药组分别相应给予低、中、高剂量(1×106、1×108、1×1010CFU/mL)的活菌液0.1mL/(kg·d).使用复方地芬诺酯建立小鼠便秘模型,副干酪乳杆菌LC-01给药7d后,便秘小鼠首次排便时间缩短,排便粒数和质量明显增加,粪便水分含量提高:连续15d灌胃副干酪乳杆菌LC-01,便秘小鼠小肠墨汁推进率也得到显著增加.结果表明,副干酪乳杆菌LC-01具有良好的润肠通便功能.     

副干酪乳杆菌L9直投式深冷发酵剂制备工艺研究

副干酪乳杆菌L9是一株功能性益生菌菌株。本研究利用液氮深冷技术制备副干酪乳杆菌L9(Lactobacillus paracasei L9)直投式发酵剂,并比较了液氮深冷与冷冻干燥工艺制备的发酵剂,菌株存活率及活性的差异。结果表明,液氮深冷组的菌体存活率可达93.7%±4.2%,显著高于冷冻干燥法组(77.5%±5.3%)(P0.05);液氮深冷组发酵产酸能力与未经冷冻处理的对照组没有显著区别,但显著高于冷冻干燥组;液氮深冷组的β-半乳糖苷酶及LDH活性下降也显著低于冷冻干燥处理组;储藏试验证明,深冷工艺制备的副干酪乳杆菌L9直投式发酵剂可以在3个月储存过程中保持稳定的产酸活性。     

副干酪乳杆菌ET-22连续传代1000代的稳定性研究

本研究以自主优良益生菌副干酪乳杆菌ET-22为研究对象,研究以MRS培养基进行长期连续传代过程中其表型特征和遗传信息的稳定性,跟踪检测该菌株连续传代1000代期间细胞形态、菌落形态、生长性能、发酵活力和基因序列变异情况。结果显示,副干酪乳杆菌ET-22在连续传代1000代期间细胞和菌落形态没有发生变化,活菌数、浊度和菌株活力呈上下小幅度波动,变化不显著;基因组重测序分析显示,0～600代内无变异位点,800和1000代分别监测到2个和4个SNP位点,未达到菌株变异水平。研究结果表明副干酪乳杆菌ET-22在连续传代1000代期间表型特征和遗传信息维持稳定。     

HPLC和SOS显色反应检测不同微生物脱除4-NQO基因毒性能力

应用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)和SOS显色反应测定36株益生菌脱除4-硝基喹啉-1-氧化物(4-NQO)基因毒性的能力,同时用HPLC对它们的图谱进行比较分析。研究发现,基因毒性清除率高的菌株有1株植物乳杆菌、5株双歧杆菌、干酪乳杆菌代田株、3株芽孢杆菌、2株酵母菌、7株唾液乳杆菌和一株保加利亚乳杆菌。同属于一个菌属的各个菌株基因毒性清除率之间差异不显著。图谱分析发现,只有唾液乳杆菌才产生P1,即益生菌脱除4-NQO基因毒性具有菌株特异性。研究还发现益生菌转化4-NQO为4-HAQO的能力是决定益生菌脱除4-NQO基因毒性能力大小的关键。     

不同乳杆菌对蔗梢青贮有氧稳定性及品质的影响

试验旨在研究植物乳杆菌、布氏乳杆菌和内源性副干酪乳杆菌对蔗梢青贮有氧稳定性及品质的影响。选取ROC 22蔗梢为试验材料，分别设置副干酪乳杆菌、植物乳杆菌及布氏乳杆菌添加水平为0.05%、0.10%、0.20%进行青贮，稀释活化后的菌剂按为5 mL添加量喷施，阴性对照组（CK组）喷施5 mL无菌生理盐水进行青贮。常温裹膜青贮30 d。结果表明，经过添加菌剂蔗梢青贮的稳定性和品质均高于对照组，添加副干酪乳杆菌蔗梢青贮的有氧稳定性最高，难消化的木质素和半纤维含量明显降低，乳酸菌活菌数和产有机酸含量提升，霉菌得到有效抑制。研究表明，添加乳酸菌菌剂可以提高蔗梢青贮的有氧稳定性，改善青贮的霉变情况，且副干酪乳杆菌0.20%发酵组的蔗梢青贮的发酵有氧稳定性与青贮品质较好。     

副干酪乳杆菌L9安全性评价

本研究对益生菌菌株副干酪乳杆菌L9(Lactobacillus paracasei L9)进行了体外及体内的安全性评价。利用体外试验评价了L9的抗生素抗敏感性及生物胺的生成能力;体内试验评价了L9的经口毒性、正常状况下的易位风险及腹腔注射模拟的极端情况下的易位风险。结果表明,菌株L9不存在种属特有耐性以外的抗生素耐受性,不存在抗生素转移的风险;在脱羧酶培养基中培养未发现生物胺的产生;以108、109、1010 cfu/鼠灌胃28d,小鼠未发生不良反应,未发生向血液、肝脏、脾脏和肾脏的易位;109cfu/鼠腹腔注射发生易位现象,但未发生菌血症并且易位不会造成疾病或导致死亡,同时易位状况随时间有所缓解,表现为较高的易位安全性。试验结果证实副干酪乳杆菌L9具有较高安全性,可以直接应用于工业化生产。     

副干酪乳杆菌YLZB对小鼠免疫的调节作用

为研究副干酪乳杆菌YLZB对小鼠免疫的调节作用,本试验以Balb/C小鼠为动物模型,灌胃不同剂量的副干酪乳杆菌YLZB 30d,测定小鼠脾淋巴细胞增殖能力、巨噬细胞吞噬能力、NK细胞杀伤能力和血清IgG含量,评价该菌株的免疫调节作用。结果显示,与对照组相比,副干酪乳杆菌YLZB可显著增加小鼠淋巴细胞增殖率、巨噬细胞吞噬能力、NK细胞杀伤能力和血清IgG含量,并呈剂量依赖性。可以得出,副干酪乳杆菌YLZB具有调节小鼠免疫力的作用。     

响应面-主成分分析法优化副干酪乳杆菌发酵培养基

为提高副干酪乳杆菌发酵液中的乳酸菌数、γ-氨基丁酸(GABA)产量和乳酸产量,本试验采用单因素法、响应面法和主成分分析法对其发酵培养基成分进行了筛选和优化。结果表明：副干酪乳杆菌发酵培养基的最佳配方为：葡萄糖30 g/L,酵母粉50 g/L,L-谷氨酸钠15 g/L,硫酸锰0.18 g/L,乙酸钠5 g/L,磷酸氢二钾2 g/L,柠檬酸氢二铵2 g/L,吐温-80 1 mL/L。该条件下,副干酪乳杆菌发酵液中的乳酸菌数为5.34×10⁹CFU/mL,GABA产量为576μg/mL,乳酸产量为12.32 mg/mL,得到的规范化综合得分为0.9016,与理论规范化综合得分0.9247接近,表明响应面结合主成分分析法对副干酪乳杆菌发酵培养基的优化具有良好的效果。     

牦牛肠源乳杆菌的分离与鉴定

为了探讨牦牛肠道乳杆菌的菌群组成,试验用MRS培养基对牦牛肠道黏膜样品进行乳杆菌分离、纯化,并采用菌落形态观察、革兰染色、菌体形态观察和生化反应进行菌株鉴定。结果表明:牦牛肠道乳杆菌的菌群主要由嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、短乳杆菌、弯曲乳杆菌和干酪乳杆菌组成。     

复合益生菌对肉鸡肠道微生物区系的影响

【目的】 探究干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌、乳双歧杆菌组成的复合益生菌对黄麻肉鸡生产性能及肠道微生物区系的影响, 为复合益生菌在肉鸡生产中的应用提供理论基础。【方法】 将200只1日龄雄性黄麻肉鸡随机分为2组, 每组5个重复, 每个重复20只。复合菌制剂(干酪乳杆菌∶嗜酸乳杆菌∶乳双歧杆菌=1∶1∶2)按1%比例补充于益生菌组肉鸡的饮用水中, 以正常饮水的肉鸡为对照。在42 d时以重复为单位测定肉鸡的生长性能指标, 并进行肠道菌群高通量测序分析。【结果】 与对照组相比, 益生菌组肉鸡的平均日增重显著增加(P<0.05), 平均日采食量、屠宰率和全净膛率增加, 料重比降低, 但差异不显著(P>0.05);益生菌组肠道菌群的OTU总数及回肠的Sob、Chao、Pd、Shannon、Shannoneven指数均降低, Simpson指数升高, 差异均不显著(P>0.05);厚壁菌门在肉鸡肠道中丰度最高, 具主体地位。较对照组而言, 益生菌组回肠中未见梭菌属, 厚壁菌门和乳球菌属的丰度均显著或极显著增加(P < 0.05; P < 0.01), 放线菌门和葡葡萄球菌属的丰度均显著或极显著降低(P < 0.05; P < 0.01), 盲肠中毛螺菌科的丰度显著增加(P<0.05)。【结论】 复合益生菌可通过增加肉鸡回肠乳杆菌属丰度、降低病原菌丰度来改善肠道菌群的组成、功能和多样性; 同时通过增加盲肠毛螺菌科丰度来提高肠道发酵降解非淀粉多糖的能力, 进而提高饲料利用效率, 促进肉鸡生长。     

乳杆菌FGM9菌株对小鼠毒性作用研究

评价乳杆菌FGM9菌株对昆明种小鼠的一般毒性作用。将80只小鼠随机分为8组,设两个阴性对照,分别灌胃和腹腔注射实验菌株,灌胃剂量分别为4.5×109、4.5×107和4.5×105CFU/mL,注射剂量分别为5.2×109、5.2×107和5.2×105CFU/mL,连续7 d记录小鼠的一般体征、中毒及死亡情况。结果各组小鼠均无死亡,未见任何毒性反应,健康体征均为Ⅰ级,各实验组体重变化与对照组相比无显著差异;各组小鼠未见任何异常病变,脏器系数与对照组相比亦无显著差异(P0.05),血液学指标正常。表明乳杆菌FGM9菌株对小鼠无不良影响。     

1株动物双歧杆菌的分离鉴定及其对小鼠溃疡性结肠炎的调理作用

为了探讨双歧杆菌对小鼠溃疡性结肠炎的作用,本试验从新鲜的婴儿粪便中分离筛选出具有典型双歧杆菌形态的菌株,用16S RNA通用引物和细菌生化试验进行菌种鉴定,并对该菌株进行了生产性能测定。通过建立硫酸葡聚糖钠盐(dextransulfatesodium, DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎模型,评估该菌株对小鼠溃疡性结肠炎的作用。结果显示,新鲜婴儿粪便中分离的菌株经16S RNA保守序列和细菌生化试验鉴定为动物双歧杆菌(被命名为NFTY9),该菌株能够显著降低由DSS引起的小鼠腹泻和便血现象,改善肠道肠黏膜损伤,降低肠道炎性因子TNF-α和IL-6含量。结果表明,动物双歧杆菌NFTY9具有显著改善小鼠溃疡性结肠炎的作用,为进一步开发应用提供了理论依据。     

秦岭大熊猫肠道益生菌的分离鉴定

为研究大熊猫肠道益生菌,从陕西省珍稀野生动物抢救饲养中心无菌采集健康大熊猫新鲜粪便数份,通过微生物学方法分离大熊猫肠道益生菌并进行鉴定。结果从粪便中分离到3株革兰阳性杆菌和2株革兰阳性球菌,经生物学特性、生化试验鉴定,3株革兰阳性杆菌分别为蜡样芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌和凝结芽胞杆菌,2株革兰阳性球菌分别为酵母菌和粪链球菌。用5株分离菌分别给小鼠腹腔注射0.2mL或灌胃0.5mL,家兔先腹腔注射2mL再灌胃5mL,隔离饲养72h,小鼠和家兔均未发病,表明分离菌均为益生菌,可用于大熊猫益生菌制剂的后续研究。     

干酪乳杆菌YG-01株的益生特性及抑菌活性研究

【目的】评价从奶酪中分离出的干酪乳杆菌YG-01的益生性及抑菌活性,为该菌株在食品动物生产中的应用提供理论参考。【方法】本研究分别检测干酪乳杆菌YG-01株的药物敏感性、肠道定植能力、消化道环境耐受特性、肠道菌群调节作用、抑制肠道致病菌活性及促生长作用。【结果】药敏试验结果显示,干酪乳杆菌YG-01对米诺环素、红霉素、克拉霉素、克林霉素、青霉素等常见抗生素极敏感;利用探针(carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester, cFDA-SE)标记的干酪乳杆菌YG-01灌喂试验兔,口服后第1天,干酪乳杆菌YG-01在兔空肠、回肠和结肠的检出率分别为70.9%、59.3%和66.0%,口服后第11天时仍保持较高定植水平(>35%);干酪乳杆菌YG-01的活菌数在模拟胃液(pH为2.5、3.5、4.5)、模拟肠液、胆酸盐浓度<2 g/L及在9%NaCl溶液中均高于1×10⁵ CFU/mL;体外抑菌试验结果显示,干酪乳杆菌YG-01能显著抑制大肠埃希菌O157、小肠结肠炎耶尔森菌、沙门菌、志贺菌、副溶血弧菌等肠道致...     

双歧杆菌A6对健康青年人群肠道菌群的影响

益生菌的重要功能之一是对肠道菌群的调节。动物双歧杆菌乳亚种A6(Bifidobacteirum animalis subsp.lactis A6)菌株已被证实具有良好的生理功能,为进一步评价该菌株对青年人群肠道菌群的影响,本研究募集52名18~26岁的健康青年志愿者,将其随机等分为两组,开展人群口服试验:两组先服用1周安慰剂;组A继续服用安慰剂4周,组B服用A6样品(添加有A6活菌牛奶,活菌浓度约为1010CFU/50m L)4周;停服2周;组A服用A6样品4周,组B服用安慰剂4周。服用剂量为每天50m L。在每一阶段末期采集一次粪便样品(共5次),以种属特异性引物定量PCR检测其中的肠道菌群数量。肠道菌群数量的检测结果表明,与基线期和对照期相比,连续口服A6 4周后,肠道中潜在致病性大肠杆菌的数量显著下降(P0.01),有益菌乳酸菌、双歧杆菌的数量则出现上升(P0.01)。试验表明,LC-01样品对健康青年人群肠道菌群具有调节作用,有利于肠道健康的维持与改善。     

不同分离方法对鸡肠道双歧杆菌分离筛选的影响

本文研究了从健康鸡的肠道中分离双歧杆菌的分离方法。比较了不同日龄、鸡肠道的不同部位以及分离方法对双歧杆菌分离的影响。为动物微生态制剂的研制提供了合适的益生菌菌株。     

乳双歧杆菌U9高密度发酵培养基的优化研究

乳双歧杆菌U9是一株具有优良功能和产业化应用前景的益生菌。为了更好地实现该菌株产业化应用,对该菌株高密度发酵培养基进行了优化。以乳双歧杆菌U9的活菌浓度为评价指标,以改良MRS培养基(添加L-半胱氨酸)为基础培养基,利用正交试验,对增殖培养基中氮源、促生长因子以及无机盐的添加量进行了优化,确定最佳活菌浓度时的培养基配方为:蛋白胨7.5 g/L,酵母粉10 0 g/L,牛肉膏7 5 g/L,西红柿汁30 g/L,葡萄糖20.0 g/L,无水乙酸钠5.0 g/L,七水合硫酸镁0.6 g/L,一水合硫酸锰0.1 g/L,柠檬酸氢二铵2.0 g/L,磷酸二氢钾2.0 g/L,吐温-80 1.0 g/L,L-半胱氨酸盐酸盐0 5 g/L。对优化后的培养基进行50 L发酵罐小试试验。试验结果表明,乳双歧杆菌U9在10 h左右达到稳定期,菌体浓度可达4 2×10~9CFU/mL,与基础培养基培养结果(1.1×10~9CFU/mL)相比,菌体浓度显著提高,具有实际应用价值。     

广西猪源益生菌的分离鉴定与生物学特性研究

为了解广西地区猪粪便与微生态发酵饲料中益生菌的存在情况及合理开发和利用猪源益生菌,本试验共采集了15份猪粪便样品和5份益生菌发酵饲料并对其进行益生菌的分离,研究益生菌的形态学特性、生理生化特性及16S rRNA分子序列,进行生长曲线、耐胆盐试验、温度敏感试验、模拟胃肠道耐受试验、耐药性试验、体外抑菌试验、小鼠安全性试验、体内/外抑菌试验,对分离菌株进行生物学特性的研究分析。结果显示,本试验共分离鉴定出6种、29株益生菌,分别为1株屎肠球菌（C2）、2株乳酸肠球菌（C1、C3）、3株植物乳杆菌（R20、R30、R37）、4株干酪乳杆菌（R41~R44）、7株枯草芽孢杆菌（K1~K7）和12株蜡样芽孢杆菌（Y1~Y12）。从中筛选出6株具有生长性能好、耐胆盐、耐高温、对胃肠道耐受、体外抑菌能力强的益生菌：乳酸肠球菌C1、屎肠球菌C2、植物乳杆菌R20、干酪乳杆菌R41、枯草芽孢杆菌K1和蜡样芽孢杆菌Y3。将筛选出的具有优良特性的菌株进行小鼠安全性试验,结果表明,在10⁹ CFU/mL浓度下灌胃6株益生菌对小鼠是安全无毒害的。与此同时,C2、R20、R41、Y3能极显著提高小鼠日增重（P<0.01）,K1能显著提高小鼠日增重（P<0.05）。体内抑菌试验结果表明,C2、R20、K1能降低沙门氏菌G21感染的小鼠的死亡率,有一定程度的体内抑菌作用。各项试验结果表明,R20和K1可作为猪源益生菌的选择菌株。     

广西猪源益生菌的分离鉴定与生物学特性研究

为了解广西地区猪粪便与微生态发酵饲料中益生菌的存在情况及合理开发和利用猪源益生菌,本试验共采集了15份猪粪便样品和5份益生菌发酵饲料并对其进行益生菌的分离,研究益生菌的形态学特性、生理生化特性及16S rRNA分子序列,进行生长曲线、耐胆盐试验、温度敏感试验、模拟胃肠道耐受试验、耐药性试验、体外抑菌试验、小鼠安全性试验、体内/外抑菌试验,对分离菌株进行生物学特性的研究分析。结果显示,本试验共分离鉴定出6种、29株益生菌,分别为1株屎肠球菌(C2)、2株乳酸肠球菌(C1、C3)、3株植物乳杆菌(R20、R30、R37)、4株干酪乳杆菌(R41～R44)、7株枯草芽孢杆菌(K1～K7)和12株蜡样芽孢杆菌(Y1～Y12)。从中筛选出6株具有生长性能好、耐胆盐、耐高温、对胃肠道耐受、体外抑菌能力强的益生菌:乳酸肠球菌C1、屎肠球菌C2、植物乳杆菌R20、干酪乳杆菌R41、枯草芽孢杆菌K1和蜡样芽孢杆菌Y3。将筛选出的具有优良特性的菌株进行小鼠安全性试验,结果表明,在10~9 CFU/mL浓度下灌胃6株益生菌对小鼠是安全无毒害的。与此同时,C2、R20、R41、Y3能极显著提高小鼠日增重(P0.01),K1能显著提高小鼠日增重(P0.05)。体内抑菌试验结果表明,C2、R20、K1能降低沙门氏菌G21感染的小鼠的死亡率,有一定程度的体内抑菌作用。各项试验结果表明,R20和K1可作为猪源益生菌的选择菌株。     

表达ETEC F41的干酪乳杆菌免疫小鼠后的黏膜免疫应答

将SPF级Balb/c小鼠随机分为免疫组和对照组,免疫组小鼠以pLA-F41/L.casei重组干酪乳杆菌滴鼻免疫,对照组用pLA/L.casei干酪乳杆菌滴鼻免疫,应用间接ELISA测定血清中特异性IgG抗体水平和鼻咽部冲洗液、肠道冲洗液、阴道冲洗液及粪便中ETEC F41特异性SIgA抗体水平.分离并计数NALT、NC及PP、IEL淋巴细胞数目,利用免疫细胞化学法检测CD4+、CD8+T细胞亚群水平,观察重组干酪乳杆菌滴鼻免疫小鼠诱导的鼻相关淋巴组织(NALT)和肠相关淋巴组织(GALT)黏膜部位的免疫应答.结果表明重组干酪乳杆菌滴鼻免疫小鼠可有效诱导NALT和GALT黏膜部位免疫应答.