羊奶乳清蛋白水解物的酶解制备

采用Alcalase与Flavourzyme两种酶对羊奶乳清蛋白进行水解,以水解度为指标,对两种酶单独使用及复合使用水解羊奶乳清蛋白的工艺条件进行了研究。试验结果显示:采用Alcalase与Flavourzyme复合水解羊奶乳清蛋白的效果较好,特别是采用先添加Flavourzyme后加入Alcalase进行水解,不仅能提高羊奶乳清蛋白的水解度,使其达到32.81%,而且对改善水解液的口感有较大的作用。     

甘薯热变性蛋白限制性酶解产物的乳化特性研究

采用5种酶(Alcalase 2.4L, As1.398, Neutrase, Pepsin, Trypsin)对甘薯热变性蛋白(SPHP)进行限制性酶解。将各酶解产物离心后分别取上清和沉淀测定和观察其乳化液的乳化颗粒平均粒径(D_4,3)、乳化活性指数(EAI)、乳化稳定性指数(ESI)、乳化液的微观结构和表观黏度。结果显示:酶解产物上清和沉淀中蛋白的溶解度均有增加,但沉淀增加的幅度小于上清。SPHP的D_4,3是71.96μm,而酶解产物上清和沉淀乳化液的D_4,3均减小,且上清的D_4,3小于沉淀的。在5种酶解产物中,Pepsin酶解物上清的D_4,3最小,为14.94μm。SPHP酶解后上清的乳化颗粒大小较为均一,且沉淀的乳化颗粒酶解前后变化不大。SPHP的EAI为11.21m2/g,酶解产物上清和沉淀的EAI均有显著提高(P<0.05),其中Pepsin酶解物上清的EAI最高为70.32m2/g。此外,酶解产物上清和沉淀乳化液的ESI增大。与沉淀相比,5种酶解产物的上清具有较低的表观黏度,且酶解产物上清和沉淀的乳化液均呈剪切变稀的非牛顿流体特性。     

鸡肉蛋白热处理与酶解特性的关系研究

为阐明酶解前热处理对鸡肉蛋白酶解性质的影响,采用差示扫描量热法分析鸡肉蛋白的热性质,研究热处理温度对鸡肉蛋白巯基(SH)、二硫键(S-S)含量以及碱性蛋白酶(Alcalase)、木瓜蛋白酶(Papain)酶解过程中氨基酸、肽释放的影响。结果表明：鸡肉蛋白有4个吸热峰,对应温度为63.7℃、67.6℃、74.3℃和 77.9℃;热处理温度增加,鸡肉蛋白中SH含量逐渐降低,而S-S含量逐渐增加,游离SH与S-S还原折算的SH量之和在80℃前无明显变化,80℃后下降;酶解前热处理不利于鸡肉蛋白酶解过程中游离氨基酸、小分子量肽的释放和可溶性氮的回收,但有利于大分子量肽的生成,因此可根据酶解产物的应用目的选择热处理参数。     

荞麦淀粉的真菌淀粉酶酶解动力学研究

为掌握真菌α-淀粉酶对荞麦淀粉的酶解特性,该文研究了不同底物浓度、酶浓度、pH值及温度对水解反应速率的影响,运用米氏方程对水解动力学过程进行描述和拟合,用Lineweaver-Burk和Wilkinson统计法求解动力学参数。结果表明,真菌α-淀粉酶对荞麦淀粉的水解反应初期遵循一级反应规律,可用米氏方程对水解动力学过程进行描述和拟合,在酶浓度为0.5 U/mL、pH值5.5、温度为55℃时米氏常数K_m为5.470 mg/mL,最大反应速率V_m为1.587 mg/(mL·min)。确立的包括底物浓度、酶浓度、水解温度在内的荞麦淀粉酶水解动力学模型,在303.15～333.15 K的温度范围内适用。     

微生物发酵酶解全脂豆粉同时提取油脂与蛋白的研究

本研究在优化的培养基接种枯草芽孢杆菌发酵培养42h,通过测定此发酵液中含有碱性和中性两种蛋白酶,其酶液通过透析浓缩后,接入膨化豆粉提取油脂和蛋白,通过对酶解条件的优化,实验证实当温度55℃,料液比1：7,起始pH10的条件下水解6h,总油提取率有最大值,达到了93.5%,总蛋白提取率为88.7%,跟纯酶提取相比, 总油提取率高出1个百分点, 总蛋白提取率低了2个百分点,其水解蛋白分子量更小,范围分布更广。     

红娘鱼降血压肽的酶解制备工艺优化及酶解产物的抗氧化活性研究

为有效利用红娘鱼制备降血压肽,以红娘鱼鱼糜为原料提取蛋白,并对其进行酶解制备降血压肽。以血管紧张素转换酶ACE抑制率和水解度为指标,通过响应面分析法对酶解红娘鱼鱼糜蛋白制备降血压肽的工艺条件进行优化,并对最优条件下制备的酶解产物进行分子量和抗氧化活性测定。结果表明,碱性蛋白酶是制备降血压肽的最适蛋白酶,响应面法优化制备降血压肽的最佳酶解条件为pH值9、酶与底物的比值(酶底比)1.4%、温度54℃、时间2 h,此条件下酶解制得的降血压多肽ACE抑制率理论值为88%,实际值为89.3%;经高效液相色谱(HPLC)分析可得酶解产物相对分子量<2 000 Da。通过测定酶解产物样品的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率、羟自由基(·OH)清除率及还原力判定其体外抗氧化活性,结果表明酶解产物具有较强抗氧化活性。本研究结果为红娘鱼的高值化利用提供了数据支持和理论基础。     

分步酶解制备花生短肽的研究

为了高效制备花生短肽,在花生蛋白Alcalase酶水解的研究基础上,进一步采用N120P酶水解花生蛋白并对各种影响因素进行了系统地研究;建立了短肽得率与各种影响因素的回归模型;确定出了N120P继续酶解花生蛋白Alcalase酶解物制备花生短肽的最佳工艺参数为pH值6.0,水解时间65 min,水解温度57℃,酶与底物比2061 U/g,。在此条件作用下,体系中短肽得率为89.01%,比Alcalase 单独酶解提高10.86个百分点;水解度为23.76%,平均肽链长度为4.21。经高效液相色谱测定,大部分水解产物的相对分子质量小于1000。     

超高压下酶解处理对甘薯蛋白乳化特性的影响

为研究在超高压下酶解处理后甘薯蛋白酶解产物乳化特性的变化,选用蛋白酶K(Proreinase.K)、碱性蛋白酶(Alcalase)、中性蛋白酶AS1.398、中性蛋白酶Neutrase和木瓜蛋白酶(Papain)5种酶,在4种压力(100、200、300和400 MPa)及最适酶活温度和pH下处理5种酶与甘薯蛋白的混合液4min后,取上清液并测定其水解度、乳化液的微观结构、乳化活性指数(EAI)、乳化稳定性指数(ESI)。结果表明,与常压下相比,超高压下5种酶解产物的水解度均显著增加,超乳化液颗粒除Alcalse外,其余4种均变得更为细小均一,且4种产物的EAI显著提高,其中Papain在300MPa下处理的酶解产物EAI最佳,为101.59m~2·g~(-1)。而经超高压下酶解处理后5种酶解产物的ESI均比常压下提高,Neutrase在300MPa下处理后的ESI最好,达到75.80min。此外,选用Papain(p H值7,55℃)在300MPa(EAI最佳的条件)下处理6min,酶解产物的EAI和ESI均达到最大值,分别为129.58m2·g-1和21.98min。本研究为甘薯蛋白作为乳化剂在食品工业中的应用提供了基础理论支撑。     

基于抗氧化能力的牛血红蛋白的分步酶解工艺参数优化

为探究牛血加工利用新技术,提高牛血蛋白资源利用率。该研究采用分步酶解法提取牛血红蛋白的抗氧化肽粗提物,从6种蛋白酶中筛选出最适蛋白酶组合,通过单因素试验优化温度、pH值、料液比、酶添加量和酶解时间,并通过响应面设计进一步优化酶添加量和酶解时间,得到牛血红蛋白抗氧化肽粗提物的最佳酶解工艺。结果表明：牛血红蛋白分步酶解的最佳工艺为：料液比40 g/L,一次酶解：风味蛋白酶添加量3 800 U/g、时间130 min、温度50 ℃、pH值7.5;二次酶解：碱性蛋白酶添加量2 900 U/g、时间60 min、温度40 ℃、pH值9.0。此工艺条件下的牛血红蛋白抗氧化肽粗提物的ABTS自由基清除能力为（333.62±6.29）μmol /g,具有优良的抗氧化活性,可作为食源性抗氧化肽的来源。该研究为牛血等副产物的综合加工利用提供了新思路,同时为食源性抗氧化肽的研发提供理论基础。     

酶解鹰嘴豆蛋白制备抗氧化肽工艺优化研究

为优化 Alcalase 蛋白酶酶解鹰嘴豆蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,采用响应面分析法,以还原能力、超氧阴离子捕获率为响应值,研究了酶与底物的比值([E]/[S])、酶解温度和酶解时间对制备抗氧化肽工艺的影响.综合考虑成本和工艺要求等问题,最终确定酶解鹰嘴豆蛋白制备抗氧化肽的工艺条件为:底物浓度2%,pH值8.0,[E]/[S]2.72%,温度52℃,时间31 min.该条件下制备的鹰嘴豆酶解产物还原能力和超氧阴离子捕获率分别为0.667和61.55%,与理论预测值的相对误差在±1%以内,说明利用该文建立的模型在实践中进行预测是可行的.     

蓝园鱼参深度水解过程中蛋白质降解研究(英)

利用风味蛋白酶深度酶解蓝园鱼参蛋白,通过比较酶解液的水解度曲线和蛋白质利用率曲线之间的差异、对TCA不溶性氮的变化趋势以及不同酶解时间的凝胶过滤图谱进行分析,探讨了深度酶解过程中蛋白质的降解。酶解6 h后大部分蛋白质在酶的作用下降解为水溶性多肽,蛋白质利用率达到83.3％;6 h以后蛋白质利用率增长速度降低,这可能是由于可被降解的底物含量降低。此后,风味蛋白酶以水溶性多肽为底物将其进一步降解为小分子肽和氨基酸;21 h时水解度达到59.7％。21 h以后水解度增长速度降低,这可能是由于亮氨酸氨肽酶难于分解氨基末端上带有甘氨酸和酸性氨基酸的肽。21 h以后酶解的主要底物分子量范围在6214到10700的多肽。     

蓝园鲹深度水解过程中蛋白质降解研究

利用风味蛋白酶深度酶解蓝园鲹蛋白，通过比较酶解液的水解度曲线和蛋白质利用率曲线之间的差异、对TCA不溶性氮的变化趋势以及不同酶解时间的凝胶过滤图谱进行分析，探讨了深度酶解过程中蛋白质的降解。酶解6h后大部分蛋白质在酶的作用下降解为水溶性多肽，蛋白质利用率达到83。3％；6h以后蛋白质利用率增长速度降低，这可能是由于可被降解的底物含量降低。此后。风味蛋白酶以水溶性多肽为底物将其进一步降解为小分子肽和氨基酸；21h时水解度达到59．7％。21h以后水解度增长速度降低．这可能是由于亮氨酸氨肽酶难于分解氨基末端上带有甘氨酸和酸性氨基酸的肽。21h以后酶解的主要底物分子量范围在6214到10700的多肽。     

酶法有限水解含油菜籽蛋白的机理及动力学

为探索油菜籽水相酶解法萃取菜籽油的机理,以Alcalase蛋白酶在温度50℃、pH8.0条件下,对以水剂法从菜籽中提取的含油菜籽蛋白进行酶解处理.试验研究结果表明:含油菜籽蛋白乳液的固形物颗粒度对酶解反应速率有明显影响,总的趋势是颗粒度越小,酶促反应速率越大;酶催化水解速率随水解进程呈指数下降,在反应过程中过高的底物浓度会抑制酶的失活.在此基础上由试验数据推导出描述催化水解含油菜籽蛋白的动力学方程,由此通过控制酶与底物浓度之比、反应时间,可以控制水解作用的程度,从而指导和优化菜籽水相酶解法提取菜籽油的工艺.     

大豆蛋白限制性酶解模式与产品胶凝性的相关性

为了改善大豆蛋白的胶凝性,对大豆浓缩蛋白、大豆分离蛋白进行限制性酶解处理,并考察相应产品的蛋白酶酶解模式与胶凝性变化的相关性。该研究以蛋白质的水解度为指标,通过中性蛋白酶、胰蛋白酶的酶解作用,水解大豆浓缩蛋白、大豆分离蛋白至蛋白质水解度(DH)为1%、2%,考察酶性质、蛋白质的DH对产品胶凝性影响,并利用SDS-凝胶电泳进行确认。结果表明:大豆浓缩蛋白经中性蛋白酶、胰蛋白酶的酶解后,产品胶凝性均显著下降;大豆分离蛋白经中性蛋白酶的酶解后,产品胶凝性在DH为1%时增加,但在DH为2%时下降;大豆分离蛋白经胰蛋白酶酶解后,胶凝性显著改善。SDS-凝胶电泳确认,蛋白质的酶水解模式和水解度不同是导致产品胶凝性产生不同变化的原因。     

鲤鱼酶解发酵制饮料的技术研究

该文对鲤鱼酶解发酵制饮料的加工技术进行了研究。结果表明：枯草杆菌蛋白酶酶解鲤鱼蛋白的最佳酶解条件是酶用量(酶与底物浓度比,E/S)0.12 g/kg,温度45℃,pH值8.0,在此条件下酶解鲤鱼4 h,氨基态氮含量由0.0017 g/L增加到0.0414 g/L,增加了23倍;游离氨基酸由19.943 mg/(100 mL)增加到78.001 mg/(100 mL),增加了291%。经保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌发酵后,酶解液风味得到明显改善,并产生了特殊的乳酸发酵香味。鲤鱼高压水煮液体外·OH清除率为0.97％,经枯草杆菌蛋白酶酶解后酶解液体外·OH清除率为80.21％,酶解发酵液体外·OH清除率为78.74％。鲤鱼蛋白经酶解和发酵后体外·OH清除能力都得到明显的提高。鲤鱼饮料的配方组成是：鲤鱼酶解发酵过滤液80 g/kg,麦芽糖30 g/kg,蔗糖45 g/kg,乳化稳定剂3 g/kg,浓缩苹果汁15 g/kg,酸味剂和香精适量。     

南瓜籽粕酶法制备血管紧张素转化酶抑制肽工艺优化

用中性蛋白酶水解南瓜籽粕,制备血管紧张素转换酶（angiotensin-converting enzyme,ACE）抑制肽,是南瓜籽粕蛋白深度开发的途径之一。为了探寻南瓜籽粕酶法制备ACE抑制肽的最佳工艺,该文以ACE抑制率为响应值,用响应面分析法研究酶浓度、底物质量浓度和水解时间等因素对酶解产物的ACE抑制活性的影响,优化制备工艺。结果表明,各因素对制备ACE抑制肽的活性具有极显著影响（P<0.001）。获得中性蛋白酶水解南瓜籽粕制备ACE抑制肽的最佳工艺条件为：酶体积分数为4.8%、底物质量浓度为4.0g/100 mL、水解时间为320 min。在此条件下,南瓜籽粕蛋白酶解产物对ACE的理论抑制率最高可达80.0％,验证值为80.56％±0.23%,预测模型可靠性高,可应用于南瓜籽粕ACE抑制肽的酶法制备。通过优化,提高了南瓜籽粕ACE抑制肽的活性。     

汽爆玉米秸秆酶解时表观酶活及物料理化性质的变化

为推动汽爆玉米秸秆生产丁醇的工业化进程,从工程实际出发,针对汽爆玉米秸秆酶解过程进行研究,考察酶解液糖浓度、纤维素酶表观酶活以及搅拌器搅拌功率的变化,并利用显微镜、电镜、X-ray、以及粒度分布仪对酶解反应过程中物料物理化学性质的改变进行表征。结果表明：随着酶解反应的进行,酶解液糖浓度从初始的0持续增加到56.25 g/L,搅拌功率持续降低,由反应初期的32.3 W降低至反应后期的5.2 W,且都是在1 h内变化最快;纤维素酶表观酶活则表现为先降低后增加,然后再降低的趋势;在酶解过程中固体颗粒粒度呈现降低的趋势,比表面积逐渐增加,结晶度和微晶尺寸也有所降低,颗粒内部空腔增多。该研究为秸秆丁醇工业化提供参考。     

细微玉米粉的低温酶解

为了开发玉米粉低温酶解新工艺,采用双酶法对粒度不同的市售玉米粉(中位粒径273.6 μm)和细微玉米粉(中位粒径17.1 μm)进行液化、糖化处理,调查了30～70℃范围内的液化温度对液化速度和葡萄糖收率的影响。试验结果表明,市售玉米粉在40～70℃的温度范围内,细微玉米粉在30～70℃的温度范围内,液化速率常数与温度的关系可用Arrhenius方程式表示。细微粉碎使液化反应活化能从市售玉米粉的4.63×10⁴ J/mol降低到2.15×10⁴ J/mol。40℃时,细微玉米粉的液化速度大约是市售玉米粉的2.5倍。液化温度对细微玉米粉的葡萄糖收率没有显著影响。细微玉米粉的葡萄糖收率可达95.4%,大大高于市售玉米粉的79.2%。由此可见,通过细微粉碎可以降低玉米粉的液化温度,同时提高液化速度和葡萄糖收率。