转基因动物乳腺反应器与生物制药

主要介绍乳腺生物反应器的概念、原理、建立及在生产生物医药上的应用和研究进展。     

转基因动物乳腺反应器与生物制药

生物医药将成为21世纪的主导行业,并将改变我们的医疗结构.转基因动物乳腺反应器作为新型的动物制药厂,具有很多优势,可以生产许多具有临床价值的珍贵药物,它可以解决规模化生产,成本低,经济周期短,具有十分诱人的前景,一个新兴的转基因动物药业已开始崛起.     

转基因动物乳腺生物反应器研究进展

文章综述了转基因动物乳腺生物反应器的原理、应用、优点、存在问题及国内外研究进展,并对其发展方向进行了小结及展望。     

转基因动物乳腺生物反应器研究进展

转基因动物乳腺生物反应器是利用动物乳腺特异性启动子调控元件指导外源基因在乳腺中特异性表达 ,并从转基因动物乳汁中获取重组蛋白。近年来 ,生物学和分子生物学研究领域的成就促进了该技术的蓬勃发展 ,并在生产药用蛋白领域展现出广阔前景。本文简要概述了转基因动物乳腺生物反应器的基本概念、原理、特点及应用 ,并重点阐述其研究现状及前景 ,从而探讨其存在的问题     

新型的动物生物制药厂——转基因动物乳腺反应器

1　生物医药产业的过去和现在生物医药产业的发展经历了三个不同的历史阶段 ,即天然药物阶段 ;化学合成药物阶段 ;基因工程药物阶段。基因药物的发展也经历了三个阶段。其一是细菌基因工程阶段 ,即用大肠杆菌等原核生物来表达目的基因蛋白 ,目前上市的基因工程药物绝大多数都采     

转基因动物生物反应器

概述了转基因动物生物反应器的原理、方法及研究进展，同时对其存在的问题和发展前景作了简要的探讨。     

转基因动物乳腺生物反应器研究概况

1992年,英国爱丁堡大学的一个研究组宣布他们已生产出6头转基因绵羊。这些绵羊可以在奶中生产抗胰蛋白酶,产量最低的是1g／L,产量高的可达35g／L。这一重大突破预示着一个以动物乳腺为主要生产手段（即乳房反应器系统）的巨大产业将要兴起,将为人类带来巨大的经济和社会效益。     

动物乳腺生物反应器的原理及研究进展

1　基本概念1 .1　转基因动物 (ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃａｎｉｍａｌ)　转基因动物是指通过实验室的某些方法 ,将人为构建的外源目的基因导入动物的生殖细胞或早期胚胎 (原核或受精卵 ) ,使其稳定地整合到动物基因组中 ,并能遗传给后代的动物。最早的转基因动物是鸡 (Ｍｕｎｒｏ,1 968) ,其后是利用注射法和病毒感染法转基因鼠 (Ｊａｅｎｉｓｈ ,1 976)。1 .2　动物生物反应器 (ａｎｉｍａｌｂｉｏｒｅａｃｔｅｒ)　一般把目的基因在血液循环系统或乳腺中表达的转基因动物叫动物生物反应器。利用它来生产人类所需的生物活性物质或药用珍稀蛋白…     

转基因动物乳腺作为生物反应器生产药用蛋白质：影响表达水平因素分析

转基因动物乳腺作为生物反应器生产药用蛋白质──影响表达水平因素分析孙宪如，卢一凡（吉林农业大学动物科学系，长春１３０１１８）转基因动物最初以改变家畜的生产性状而受到重视。近年来，以转基因动物乳腺作为生物反应器来大规模生产有治疗价值的重组蛋白质，引起人...     

转基因动物生物反应器

在转基因技术与转基因动物基础上，概述了转基因动物生物反应器的研究与应用现状及前景，同时探讨了动物生物反应器所存在的问题。指出：转基因投入生产以前，必须查明其表型改变生态平衡的影响。     

人Bcl-2乳腺定位表达转基因小鼠的建立

以 p CAT、p WB和 p WC为原始质粒 ,构建 WAP启动子调控的 Bcl- 2乳腺组织特异性表达载体 p WBS。载体用Bgl +Sal +Pvu 酶切 ,回收 3.0 kb的基因片段 WAP- Bcl- 2 - SV40 Poly A,通过显微注射方法导入 C5 7BL / 6 J×DBA/ 2 JF1代小鼠受精卵的雄原核内。共注射 10 0 0枚卵 ,将存活的约 6 0 0枚卵分别移植至 2 9只假孕母鼠输卵管内 ,获得仔鼠 5 5只。PCR检测 ,阳性鼠 12只。Southern blot检测 ,阳性鼠 4只 ,其中公、母鼠各 2只 ,在饲养过程中 ,2只公鼠均意外死亡。Western blot证实 ,1只母鼠 Bcl- 2表达阳性 ,其 F1代的 40只小鼠中 ,有 18只呈 PCR阳性 ,其中母鼠8只 ,在 5个月的反复怀孕过程中 ,未观察到乳房有任何肿瘤或肿块的出现 ,证实 Bcl- 2单独在转基因鼠乳腺中表达不会引起转基因鼠乳腺癌的发生。     

基因打靶与体细胞克隆技术制备乳腺生物反应器的研究进展

在动物乳腺生物反应器研究中,传统方法不可避免地造成基因表达调控元件的人工拼接和外源基因在动物基因组中随机整合所带来的“位置效应”,致使转基因动物外源基因的表达水平不高且差异较大。而基因打靶在外源基因定点整合、消除位点效应方面具有明显优势。体细胞核移植技术可以提前在细胞水平对转基因动物进行筛选,不但可以节省时间,更降低了制备乳腺生物反应器的成本。作者简述了基因打靶与体细胞核移植技术结合制备乳腺生物反应器的优越性、存在问题、解决办法及其应用前景和展望。     

人红细胞生成素转基因小鼠乳腺生物反应器的建立

将 ２．４ ｋｂ 的人红细胞生成素（ｈ Ｅ Ｐ Ｏ）基因组基因（ｇ Ｄ Ｎ Ａ）ｍ ｉｎｉｇｅｎｅ 克隆于 ０．９７７ ｋｂ 大鼠乳清酸蛋白（ Ｗ Ａ Ｐ）５′调控序列下游和 ０．８５ ｋｂ Ｗ Ａ Ｐ３′侧翼序列上游,构建了 ｈ Ｅ Ｐ Ｏ 乳腺定位表达载体 ｐ Ｗ Ａ Ｐ Ｅ Ｐ Ｏ Ｗ Ａ Ｐ３′ Ｕ Ｔ Ｒ（ｐ Ｗ Ｅ３′）。载体经 Ｓａｃ Ｉ Ｉ酶切、回收并纯化后作为目的基因,通过显微注射方法导入小鼠受精卵的雄原核,共注射 ５００ 枚卵,移植 ３００ 枚卵至 ２９ 只假孕母鼠输卵管内,获得仔鼠 ５５ 只。采取鼠尾,提取基因组。经 Ｐ Ｃ Ｒ 检测,阳性鼠 ２２ 只; Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ 检测,阳性鼠 １６ 只,其中 ９ 只母鼠,７ 只公鼠。将 １６ 只首建者小鼠分别与非转基因鼠交配,共获得 Ｆ１ 代仔鼠 １５７ 只。应用 Ｐ Ｃ Ｒ 方法对 Ｆ１ 代小鼠进行检测,结果首建者１ 号母鼠所生的 ６ 只仔鼠中有 ３ 只为阳性。与此同时,于 ９ 只雌性首建者分娩后第 １０ 天采奶,应用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 方法对乳汁中的 Ｅ Ｐ Ｏ 进行检测,结果 ６ 只母鼠获得表达,表达量为 ０．１２～１．５９ μｇ／ Ｌ。     

乳腺分泌物中体细胞的研究进展

不同物种的乳腺分泌物中含有的细胞成分被称为体细胞,其中包括淋巴细胞、白细胞、巨噬细胞和上皮细胞。物种、乳腺感染情况、不同生理阶段和饲养管理条件等因素均会影响乳中的体细胞数量和细胞类型。近年来,乳中体细胞得到了人们的关注和深入研究,显示出广阔的应用前景。人们利用从初乳和常乳中得到的乳腺上皮细胞已经成功进行了乳腺细胞的原代培养和建立了乳腺细胞系,为乳生成、被动免疫转移和乳腺癌的研究提供了良好平台。体细胞中提取的RNA代表了乳腺组织的基因表达,因此为研究乳腺组织的基因表达提供了方便、良好的来源。     

奶水牛乳腺组织学研究报告

[目的]探究水牛泌乳性与乳腺组织的关系。[方法]采用组织切片及显微照相研究摩拉水牛和摩×尼×本三元杂水牛泌乳期的乳腺组织。[结果]泌乳期水牛乳腺结缔组织和脂肪组织较少,腺泡较多。泌乳水牛乳腺组织占62.8%,结缔组织占7.6%,脂肪组织占19.6%。摩拉水牛乳腺小叶区域的乳腺泡数量范围为80～150个/mm2,直径范围为50～100μm。摩×尼×本三元杂水牛泌乳后期乳腺小叶区域的腺泡数量范围为50～100个/mm2,直径范围为50～150μm。[结论]乳腺腺泡数及大小是影响水牛泌乳量的重要内在因素。     

半胱胺对奶山羊乳腺发育的影响

为了研究半胱胺对奶山羊乳腺发育的影响,选6只空怀奶山羊进行自身前后对照试验和8只妊娠奶山羊进行同胎次配对试验.结果表明,空怀奶山羊对照期乳腺的腺泡很少发育,几乎看不到乳导管,试验期乳腺有明显导管生长和少量腺泡发育;妊娠奶山羊对照组乳腺随着妊娠的进行有少量腺泡发育,腺导管有明显的生长,试验组乳腺有大量的腺泡发育,腺导管生长更明显,且有分泌物出现.试验期血浆中与乳腺发育相关的激素水平明显升高.以上结果提示半胱胺在一定程度上促进了奶山羊乳腺发育.     

奶牛乳腺的防御机制与乳腺炎病理学

乳头管的结构和内衬的角质蛋白是乳腺抵御微生物侵入的物理性屏障,角蛋白中的低级脂肪酸、阳离子蛋白质对侵入的病原微生物具有抗性;环境性致病菌是引起机体免疫应答的主要因子,巨噬细胞、单核细胞、中性粒细胞和淋巴细胞之间的相互协调组成了自然的免疫系统,它们通过分泌细胞因子、抗体和吞噬作用等活动来灭杀、清除侵入机体的病原体;乳中的可溶性因子具有免疫调节作用,对细菌的结构具有破坏性;妊娠期及围产期奶牛由于内分泌的变化而导致免疫抑制,结果造成临床型和亚临床型乳腺炎的发病率相对较高;牛奶体细胞计数对亚临床型乳腺炎的监控具有参考性。     

乳腺生物反应器的研究和产业化进展

随着转基因技术的发展,利用乳腺生物反应器生产珍贵药用蛋白已成为一种极具潜力的生物技术,它为商业化前景广阔的药用蛋白提供了高产量、低成本的生产方式,开创了基因工程制药的新途径。目前,应用乳腺生物反应器已表达百余种药用蛋白,其中近30种进入临床试验不同阶段,用于治疗抗凝血酶缺乏症的抗凝血酶Ⅲ（ATryn^R）已上市,乳腺生物反应器生产重组蛋白显示出广阔的产业化前景。作者概述了乳腺生物反应器的原理、优点、国内外研究进展和产业化进程,讨论了其目前存在问题和应对策略。