应用荧光抗体法诊断猪瘟的研究 Ⅰ 对人工感染猪瘟猪扁桃体冰冻切片荧光抗体法诊断的研究

Solorzand(1962)首先提出用荧光抗体法诊断猪瘟,认为此法不仅敏感,而且特异性亦高。1963年Stair,1964年Aikenct等应用组织切片和压片做了猪瘟荧光抗体法的研究。1963年Mengeling等应用猪肾继代细胞(РК—15)进行了猪瘟荧光抗体的研究。1969年须原贤治等报导了应用扁桃体冰冻切片荧光抗体染包诊断猪瘟的方法。目前,美、日、法、荷等国均已广泛采用荧光抗体法做为常规的猪瘟诊断方法。荧光抗体     

应用荧光抗体法诊断猪瘟的研究 Ⅱ有关扁桃体冰冻切片荧光抗体法在应用上的几个问题

前报已报导了用免疫荧光抗体法对人工感染猪瘟猪扁桃体冰冻切片诊断猪瘟的研究结果,证明这是一种特异的、快速的实验室诊断方法。本报提出了制备荧光抗体用高免血清效价的测定方法、活体扁桃体病料的采样方法、感染猪瘟病毒猪扁桃体免疫荧光的检出时间和猪瘟兔化弱毒疫苗接种后是否产生免疫荧光等研究结果。     

荧光抗体技术在诊断猪瘟病例的应用

八四年四月镇远三个养猪专业户,两个养猪场爆发一起以高热稽留,精神不振,成群集卧,卧地不起,食欲减少或废绝,拉稀,鼻喘,耳、颈和四肢皮肤出现紫红色斑块,剖检各脏器出现不同程度的大小出血点,肠粘膜表面具有黄白色糠麸样薄膜等为主要特征的急性病例。发病猪均为湖南芷江、洞口,贵州石阡等县引进的断奶仔猪。共引进仔猪339头,发病117头,占34.45％、死亡58头,占发病数49.57％。五月十九日笔者前往疫区进行实地调查,该病仍继续发展,死亡逐渐增加。根据临床症状,病理剖检和带回病料的荧光抗体染色检查结果,诊断为猪瘟病毒感染所致。并通过隔离、消毒,紧急接种猪瘟兔化弱毒冻干苗后,疫     

应用荧光抗体法诊断猪瘟的研究 Ⅲ.仔猪肾细胞培养-荧光抗体法诊断猪瘟的研究

用猪扁桃体冰冻切片荧光抗体法诊断人工感染猪瘟及在应用上的几个问题已作过报导。自然感染的猪瘟病例,由于在病的后期往往因细菌性感染,使扁桃体化脓,以致扁桃体隐窝上皮细胞部分或全部破坏;或因扁桃体的采取、处理不当等,都影响检出率。     

猪瘟荧光抗体的制备及其在自然感染病例中的应用

用硫酸铵盐析法从抗猪瘟高免血清中提取免疫球蛋白，应用搅拌标记异硫氰酸荧光素（FITC），葡聚糖凝胶G-25层析除去标记物中游离的荧光素，制备出猪瘟荧光抗体（CSF—FA）。经测定．标记荧光抗体的染色效价为1：4。用此浓度荧光抗体，结合常规诊断检测猪瘟，从33例采自陕西省不同地区自然发病猪的扁桃体中检出猪瘟阳性病例7份，阳性率21．3％（7／33）。结果表明，制备的荧光抗体诊断猪瘟敏感性高、特异性强；陕西省猪瘟自然感染发病率高。     

国外猪瘟的荧光抗体诊断

对于典型的猪瘟病例,一般根据流行病学、临床表现及病理变化即可确诊,但对不典型的、有并发症的和流行早期病变不明显的猪瘟病例,单依靠上述方法即难于做出确诊。因此,许多人都研究试图通过直接检查猪瘟病毒的方法来确诊本病。早期曾应用接种易感猪的     

应用鸡新城疫荧光抗体对鸡新城疫自然病例的诊断

在用自制的鸡新城疫荧光抗体检查鸡新城疫强毒人工感染鸡和鸡胚成纤维细胞,取得满意结果的基础上,进行了检查鸡新城疫自然病例的研究,并以部分自然病例的病料和健康鸡的材料,进行了病毒分离试验,证实该荧光抗体为一种特异性强,检出率高的制品。人工感染传染性喉气管炎和传染性支气管炎病鸡的材料,经鸡新城疫荧光抗体检查均有阴性。另外确定小鸡在接种疫苗后3—26日期间,其脾脏即不再对鸡新城疫荧光抗体诊断产生干扰现象,但肾脏持续时间较长消失亦不规律。我们于1980年研制成功鸡新城疫荧光抗体,对鸡新城疫强毒人工感染鸡病料及接毒的鸡胚成纤维细胞进行检查取得了满意结果。为了证实该荧光抗体能否实际应用于鸡新城疫自然病例的诊断,进行了本研究,结果报告如下。     

猪瘟自然病例荧抗诊断试验

一、材料和方法1.HCFA(荧抗):7903—05、77(小)等批血清制备。2.受检猪场:发生疫情的某几个猪场。3.扁桃体HCFATST(猪瘟荧抗组织切片试验)。4.诊断: (1)为与荧抗诊断比较,由某兽医诊     

应用荧光抗体法检测猪瘟病毒

检测存在于生物材料中的古典猪瘟病毒的手段和方法,曾提出有补体结合反应,沉淀反应,血细胞凝集反应。对病毒和纽卡塞病毒,伪狂犬病毒,捷申病毒,牛腹泻病毒,流感病毒,口蹄疫病毒的干扰现象,还提出了测定病猪胰腺提     

荧光抗体与酶标抗体诊断野外猪瘟的比较

酶标抗体技术是继荧光抗体技术之后发展起来的又一先进的诊断技术。它的快速性,敏感性及特异性均不亚于荧光抗体技术。因此已逐渐广泛地应用于畜牧兽医诊断领域中。1980年以来,国内先后发表了用荧光抗体技术和酶标抗体技术诊断猪瘟的报告,对这两种快速诊断技术都做了大量的工作和充分的肯定。并且在全国各地进行了推广应用。两种诊断试剂目前均     

应用免疫荧光技术诊断猪瘟自然病例的效果观察

应用免疫荧光抗体技术(直接法,以下简称荧抗)诊断猪瘟,具有特异性强、结果可靠,操作简便,1～2小时即可得出检验结果等许多优点。对六个市地自然病例53头份死亡猪进行荧抗诊断,其结果与病理解剖变化符合率为97.3％;随机抽样经兔体交互免     

应用仔猪肾细胞培养荧光抗体法诊断猪瘟的研究(摘要)

我们曾经进行了应用猪扁桃体冰冻组织切片荧光抗体法诊断猪瘟的研究,证明在人工感染猪瘟强毒后72～96小时检查到阳性反应,对急性猪瘟的早期诊断可以达到快速、特异的诊断目的。但是自然感染病例在病的后期往往由于细菌的继发感染,扁桃体化脓导致扁桃体隐窝上皮细胞部分或全部破坏,或扁桃体的采取、处理不当等都可影响检出率。基于上述原因,又开展了应用细胞培养免疫荧光抗体法诊     

荧光抗体技术对猪瘟病快速诊断的研究

前言荧光抗体技术是建筑在现代免疫学基础上的一项新技术,具有快速、灵敏和准确的特点,是近年来在医学及兽医学上对各种疾病的研究和诊断方面应用较广泛的一门技术。也是促进兽医科学发展上影响较大的一项新技术。四十年代荧光抗体的出现,对医学、兽医学的实验室工作提供了很大的便利,这种     

应用荧光抗体法诊断猪痢疾

目前认为,猪痢疾密螺旋体 Treponema hyo-dysenteriae 是猪痢疾的病原体,检出和鉴定该微生物是本病诊断的主要方法。为此,我们试用了免疫荧光法。采用兔的高免血清制备出营光标记抗体。高免     

用荧光定量RT-PCR方法检测猪瘟病毒

为了建立能特异检测不同基因型猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV),同时又能区分其他瘟病毒的基因检测方法,本实验针对CSFV基因组5′端非编码区设计并合成了简并引物和TaqMan探针,在优化反应条件的基础上,成功地建立了特异检测CSFV的荧光定量RT-PCR检测方法。再以已知滴度的CSFV石门株血毒总RNA反转录产物建立标准品,该标准品可以用于定量临床样品中的CSFV滴度,所建立的荧光定量PCR方法可以灵敏地检测出10~(-0.82)个TCID_(50)病毒含量。最后用建立的方法对108份临床样品进行检测并同时进行病毒分离,荧光定量PCR方法检测出73份阳性样品且与病毒分离的符合率为100%,而常规RT-PCR只检测出54份阳性样品,表明本荧光定量RT-PCR法在检测猪瘟病料上具有潜在的应用价值。     

用反应干扰法检测猪瘟病毒及其抗体

研究出一种检测猪瘟病毒（ＨＣＶ）及其抗体的新方法，首次证实了ＨＣＶ对某些ＨＣＶ株产生的干扰素（ＩＦＮ）有抑制作用。感染ＨＣＶ的猪肾细胞培养物不产生ＩＦＮ，即使加入ＩＦＮ诱生剂也不产生ＩＦＮ，而感染ＨＣＶ的细胞对ＩＦＮ的敏感性不受影响。基于上述结果，建立了一种反向干扰法。此法通过水泡性口炎病毒（ＶＳＶ）产生的ＣＰＥ来检测ＨＣＶ的感染滴度，即在猪肾细胞培养物中，用ＨＣＶ ＧＰＥ＾－株对ＶＳＶ的干扰而产     

荧光抗体染色法检测猪瘟的研究

利用荧光抗体技术检测病猪内脏器官可能存在的猪瘟病毒，对猪瘟的早期诊断具有十分重要意义，猪瘟的常规诊断需要4～5天，而该项技术可在半天之内作出判断，既快速又客观、准确，在规模化猪场临床上可得到很多广泛应用。     

猪瘟荧光抗体的制备及应用

用硫酸铵盐析法从抗猪瘟血清中提取免疫球蛋白，应用搅拌法标记荧光素，硫酸铵盐析、Sephadex G-25层析和肝粉吸收三法结合去除标记物之游离荧光素，制备猪瘟荧光抗体。经测定，标记的荧光抗体工作稀释度为1：16～1：32。用标记的荧光抗体诊断猪瘟，从39份可疑病料中检出阳性病例12份。