一起猪瘟与高致病性猪蓝耳病混合感染的实验室诊断

为对发生在某种猪场的一起疫情进行确诊,采集病死猪的病料进行实验室检查.结果:猪瘟荧光抗体检出率为50%(2/4),蓝耳病RT-PCR检出率为100%(4/4).试验结果表明,本次疫病是由猪瘟和高致病性猪蓝耳病混合感染所致.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒直接免疫荧光检测方法的建立

为了建立一种快速、准确的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)直接免疫荧光检测方法,对前期制备的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒核蛋白单克隆抗体进行亲和层析法纯化,经异硫氰酸荧光素标记;通过对荧光染色的固定试剂、固定时间、染色时间和荧光抗体工作浓度的测定,确定荧光抗体染色法在PRRSV感染细胞和病料中的最佳工作条件。利用荧光抗体染色法对本实验室收集的62份病料进行检测,同时以RT-PCR进行验证,确定荧光染色法的检测符合率。结果显示,FITC标记的荧光抗体检测细胞培养物最佳工作条件:80%丙酮4℃固定20 min,荧光抗体按1:400稀释,感作时间为1 h;检测组织病料最佳工作条件:病料组织进行涂片后,用80%丙酮4℃固定30 min,荧光抗体按1:200稀释,感作时间为2 h;病料组织荧光检测与RT-PCR的检测一致率为74.2%。本研究建立的快速、准确的猪繁殖与呼吸综合征病毒直接免疫荧光检测方法为今后该疾病诊断奠定了基础。     

血液凝集实验和血液凝集抑制实验

1病料的采集 先用消毒液将采集病料场所周围的环境用3%来苏儿进行消毒,按剖检术式将病畜剖检,在打开采集部位之前将酒精灯点燃作无菌防护,将病畜的肝脏用镊子夹起,用手术刀或手术剪将其采集放入无菌容器内保存或送检,将尸体按规定处理。病料的采集和运输过程中要保持相对无菌状态。将要采集病料的尸体不能死亡时间过长,一般不超过12小时。如实验室较远需要运输,可加入保护剂如30%甘油生理盐水。要标明病料来源及采集时间、部位及临床症状和剖检变化。     

用异源抗体免疫荧光技术检测禽脑脊髓炎病毒和抗体

用禽脑脊髓炎病毒免疫的鼠阳性血清作为诊断抗体,对21份待检禽血清和10份病料进行检测,其结果如下:抗体阻断荧光试验(ABET)检测21份血清中,阳性血清11份,阴性血清10份,中和试验测得,阳性血清11份(NI＞1.17),阴性血清10份;琼扩试验测得阳性血清5份。间接免疫荧光试验测得10份病料中有7份阳性,2份可疑,1份阴性,用这些可疑病料脑内接种1日龄雏鸡,成功     

猪瘟三种快速诊断方法的比较

本试验运用电镜负染、荧光抗体染色、间接－ELISA三种方法对新疆南疆地区收集的7份猪瘟RT－PCR阳性病料进行了检测，发现：电镜负染法检出阳性病料2份，荧光抗体染色法检出阳性病料6份、间接－ELISA法检出阳性病料6份。结果表明荧光抗体染色、间接－ELISA都有很好的敏感性和特异性，其中间接－ELISA法可作为基层对猪瘟进行快速诊断的首选方法。     

一例疑似猪圆环病毒病的诊断

本文就一例疑似猪圆环病毒病进行了病理学和PCR诊断. 1材料与方法 1.1病料采集 病料来自江苏盐城郊区某农户的散养猪,剖检取病变的淋巴结、肺和脾脏等组织,置于-80℃冰柜中保存备用.     

应用鸡新城疫荧光抗体对鸡新城疫自然病例的诊断

在用自制的鸡新城疫荧光抗体检查鸡新城疫强毒人工感染鸡和鸡胚成纤维细胞,取得满意结果的基础上,进行了检查鸡新城疫自然病例的研究,并以部分自然病例的病料和健康鸡的材料,进行了病毒分离试验,证实该荧光抗体为一种特异性强,检出率高的制品。人工感染传染性喉气管炎和传染性支气管炎病鸡的材料,经鸡新城疫荧光抗体检查均有阴性。另外确定小鸡在接种疫苗后3—26日期间,其脾脏即不再对鸡新城疫荧光抗体诊断产生干扰现象,但肾脏持续时间较长消失亦不规律。我们于1980年研制成功鸡新城疫荧光抗体,对鸡新城疫强毒人工感染鸡病料及接毒的鸡胚成纤维细胞进行检查取得了满意结果。为了证实该荧光抗体能否实际应用于鸡新城疫自然病例的诊断,进行了本研究,结果报告如下。     

鸡传染性贫血病毒与传染性法氏囊病病毒混合感染的初步研究

为了查明安徽滁州温氏公司矮脚黄D品种发生疑似传染性法氏囊病的病因,临床调查后采集相应病料,实验室研磨处理后备用。首先对病料进行鸡传染性贫血病毒(CAV)和传染性法氏囊病病毒(IBDV)的PCR检测。第1次病例复制,病料攻毒SPF鸡观察病变,并采集病料和血清进行相关抗原和抗体的检测;第2次病例复制,采集SPF鸡病料进行氯仿和热处理,使病料中仅保留CAV后再攻毒SPF鸡观察病变,并采集病料和血清进行相关抗原和抗体的检测。结果:4份病料有3份CAV PCR阳性,1份IBDV F1代尿囊液PCR阳性。第1次病例复制出现和临床相似的IBDV典型病变,第2次病例复制出现CAV典型病变。因此表明本次疫情为CAV与IBDV混合感染引起。     

猪瘟继发感染猪链球菌病的诊断

上杭某规模化猪场出现产房仔猪和保育仔猪发病,发病率高达50％。通过对送检的6头活体病猪剖检,采集病猪的病料组织进行实验室的PCR诊断及细菌分离,确诊该病例为猪瘟继发猪链球菌病。同时检测该猪场20份母猪血清和发病仔猪的猪瘟抗体和伪狂犬野毒抗体,结果母猪和仔猪的伪征犬野毒抗体都阴性,但母猪的猪瘟抗体合格率只有70％,仔猪只...     

用IFA和PCR对部分省区肉鸡白血病的调查

从山东省内不同地区和宁夏、河南等省随机采集肉鸡和肉种鸡的病料 ,采用间接荧光抗体实验和 PCR方法进行 J亚群禽白血病的流行病学调查 ,结果从 92份商品代肉鸡病料和 1 5份父母代种鸡病料中先后鉴定出 8株 J-AL V,其中 3株来自商品代肉鸡 ,5株来自父母代肉种鸡 ,感染 AL V-J的肉鸡品系有 AA、科宝和爱维因 ,表明我国肉鸡群中 AL V-J的感染十分严重。     

牛病毒病的实验室诊断

来自牛的临床病畜群的样品作牛病毒存在五年以上时间的试验.样品可来自三个方面:(1)牛的死后剖检实验.(2)兽医临床处理的活牛和(3)兽医师在野外采集的活牛和死牛的样品.这些样品使用的试验技术是在敏感的牛肾细胞系中进行荧光抗体组织培养技术和荧光抗体组织切片术.所用的样品是取自活牛的眼、鼻、粪便拭子及尸检牛的气管、脾、肺、肠和脑.在试验的1362份中有349份阳性病例(26％).其中225份(64％)是牛病毒性腹泻(BVD)阳性,86份(25％)是传染性牛鼻气管炎(BVD)阳性,32份(9％)是付流感3(PI_3)病毒阳性,16份(5％)是其它病毒阳性.来自三方面的病料其每种情况的阳性分布情况是:214/986(22％)来自死后动物,89/238(37％)来自兽医临床和46/138(33％)来自邮寄病料.     

猪伪狂犬病的诊断

本文通过荧光抗体组织切片、细胞接种、兔子致病性等方法对临床怀疑为猪伪狂犬病的病猪进行了实验室诊断。结果如下:病猪脾脏和淋巴结制备的冰冻切片经PRV荧光抗体染色后,在荧光显微镜下见到特异性荧光;病料经处理后接种Vero细胞可致细胞圆缩和形成合胞体,具有疱疹病毒的培养特征;将病料上清和细胞培养毒分别皮下接种家兔均可引起奇痒、麻痹死亡,呈现典型的伪狂犬病临床特征,同时病死兔脏器的PRV免疫荧光试验也为阳性。根据上述结果证实了该病为猪伪狂犬病。     

湖北地区肉鸡中后期大肠杆菌征候群病因初探

为调查湖北武汉、汉川、监利及咸宁地区19群中后期发生大肠杆菌征候群肉鸡的病因,临床调查后采集相应病料及血清,实验室研磨离心处理后备用。首先对病料进行相关病原的PCR检测;对采集的血清进行血清学检查。然后进行病例复制,病料攻毒1dSPF鸡观察病变,并采集SPF鸡病料和血清再进行相关抗原和抗体的检测。结果19份病料有10份出现CAVPCR阳性,3份REVPCR阳性,2份NDPCR阳性,3份IBDPCR阳性;304份血清系列病原ELISA抗体检测结果中CAV抗体阳性率和滴度水平均最高,其他检测项目未见规律性;SPF鸡病例复制出现CAV典型病变。研究表明湖北地区肉鸡中后期大肠杆菌感染与CAV的感染密切相关。     

鸭瘟病毒的分离和鉴定

1999年 8月广西玉林的养鸭大户送来一批一周龄左右的死亡雏鸭 ,称其养的 2 0 0 0多只雏鸭死亡过半 ,药物治疗不能控制病情。经临床剖检病变很象小鸭肝炎 ,我们采集了几份死鸭肝病料进行分离鉴定 ,现将结果报告如下。1　试验材料和方法1 .1　材料鸭瘟病毒阳性血清、Ⅰ型鸭肝炎病毒阳性血清由中国农业大学苏敬良博士惠赠。鸭胚与2日龄雏鸭购自本市健康鸭场孵化场。1 .2　病料处理对病鸭的肝脏先进行细菌分离 ,镜检。然后按常规方法作成 1 :5乳剂 ,离心取上清液 ,检验无菌后 ,-2 0℃保存备用。1 .3　病毒分离将处理好的病料经尿囊腔接种 1 1日…     

动物疫病检验病料的采集、保存与送检方法

随着农业部对动物疫病的诊断技术的统一,现将动物疫病实验室检验采样、保存及运送环节做以简要叙述,以供参考。1病料采集所遵循的一般原则1.1凡发现患畜急性死亡的,如怀疑是炭疽,则不能解剖,应采患畜的血液,万不得已时可做脾脏触片检查,只有在确定不是炭疽时方可进行剖检。1.2采取病料的种类,根据不同的疾病或检验目的,采集其相应的脏器、内容物、分泌物、排泄物或其他材料。1.3进行流行病学调查、抗体检测、动物群体健康评估或环境卫生检测时,样品的数量应满足统计学的要求。1.4专嗜性传染病或侵害某种器官为主的传染病,则采取该病侵害的主…     

从死产仔猪和弱仔猪体中分到肾脏钩端螺旋体

本试验从美国lowa州的一个有产死胎和弱仔猪历史的猪群中，分到肾脏钩端螺旋体布拉特斯莱瓦（Bratislava)血清型。收集了三窝死产仔猪和弱仔猪的胎衣、肾脏和肺脏作钩端螺旋体细菌学培养检查和荧光抗体病原检查，同时收集死产仔猪和弱仔猪的血清，用凝集试验作抗钩端螺旋体抗体检查。结果，在所采集的血清中，检测到抗肾脏钩端螺旋体布拉特斯来瓦血清型的抗体，从胎衣、死产仔猪和弱仔猪脏器中分离到此种病。在荧光抗体试验所检查的一部分病料中，也发现了钩端螺旋体。     

1例猪腹泻的鉴别诊断

山东省某猪场猪群中发生以腹泻为主要特征的疾病,对发病猪场进行实地走访,观察病猪群的发病症状。取病猪和死亡时间不超过6 h的病猪剖检,观察其病理变化,并采集病猪脏器、排泄物等病料进行细菌学(分离培养、生化试验)和病毒学(实时荧光RT-PCR)检测。结果鉴定该猪场发生的疫情是由猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒引起的腹泻,并继发大肠杆菌混合感染。     

湖南省某规模场育肥猪多种病原混合感染的诊断及防控

湖南省某规模猪场的保育猪在转至育肥舍10 d后(约80日龄)陆续出现发病死亡情况。为确诊病情,查找病因,采集不同年龄段的猪血清进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、圆环病毒2型(PCV2)抗体检测,同时对4头发病猪进行剖检观察,并采集病料进行CSFV、PRRSV、PCV2病原检测以及细菌分离、药敏分析。结果显示:疫病发生前后的生猪CSFV抗体均不理想,无高抗体水平个体出现,但病原检测为阴性;生猪PRRSV、PCV2抗体整体上均经历了母源抗体下降、发病时抗体又上升的阶段,且病原检测均有阳性样本存在;在病料中分离到葡萄球菌、链球菌、副猪嗜血杆菌。由此推断,该次生猪发病原因可能为PRRSV、PCV2以及多种细菌的混合感染。结合病因推测,制定了防治方案,并有效控制了病情,也验证了此次发病的原因推断。本起疫情的诊断和防治为猪场多病原混合感染防控提供了参考,也提示规模猪场需要开展疫病的综合防控。     

两个非自然年度猪病病原检测分析报告

正1病料来源与检测方法1.1病料来源从2016年7月至2018年6月两个非自然年度,共在江西省大、中、小不同规模的猪场409户次,收集病料1 304头份。这些病料绝大部分是笔者所在团队的执业兽医师应邀前往上述猪场出诊,选择发病典型的猪只现场剖检采集。到达现场后,先详细询问病史,后进入猪舍观察病猪的临床症状,最后选择该次发病有代表性的病猪1至数头剖检,记录剖检变化,拍摄病变器官图片。所取病料1头     

一起鸡新城疫的诊断及强弱毒株鉴别的研究

某鸡场鸡群中出现以神经症状、产蛋下降、畸形蛋增多和呼吸困难、腹泻等为主要特征的疾病,对发病鸡场进行实地走访并采集发病鸡病料。根据临床症状,病理剖检及实验室细菌学、血清学、病毒学检测,鉴定该鸡场发生新城疫疫情,并继发鸡群大肠杆菌感染;通过实时荧光RT-PCR检测,对该病毒进行强弱毒株的鉴别,显示该鸡场发生的新城疫是由新城疫中强毒株引起的。