热应激蛋白70-肽疫苗研究进展

热应激蛋白（heat stress protein，HSP）是在机体受到应激原的刺激后产生的几族蛋白质，具有高度保守性。一般来说，根据HSP的同源性、功能和分子量，主要HSP被分成小分子量HSP家族、HSP70家族、HSP90家族和大分子量HSP家族。其中HSP70家族的HSP70是研究最多的，它具有多种生物学功能，不仅可以增强机体的应激耐受性，而且在机体免疫反应中也起重要作用。     

热应激对肉鸡的影响及热休克蛋白70的研究进展

在现代化畜禽生产中,热应激已成为制约肉鸡生长、代谢、肉品质及生理功能的重要因素之一,给养殖业带来了严重的经济损失。热应激蛋白（heat shock protein,HSPs）是动物在不良因素作用下所产生的一组特异性蛋白质,而HSP70是其家族成员中最保守、最重要的蛋白之一;它具有分子伴侣、热耐性,抗过氧化损伤等特性,能够使机体迅速适应环境变化,在热应激保护中发挥了重要的作用。作者主要阐述了热应激对肉鸡的影响和HSP70的生物学特点及其抗热应激的作用机理,以期为从药物方面探讨HSP70的抗应激功能提供理论依据。     

热应激蛋白对畜禽抗应激机理的研究进展

热应激蛋白(heat shock proteins, HSPs)是机体在应激条件下所产生的一组特异性蛋白质,能使机体迅速适应环境变化。作者简要介绍了HSPs的来源及分类,阐述了HSP70 的基因结构和调控机制,综述了HSPs抗应激功能及在畜禽应激反应中的表达,以期为从分子水平探索HSPs 抗应激机理提供参考。     

热应激蛋白70-肽疫苗与传染性疾病免疫

热应激蛋白（heat stress proteins，HSPs）是机体受到应激原的刺激后产生的几族（如HSP70家族、HSP90家族等）高度保守的蛋白质，对维持细胞生存和内环境的稳定起重要作用。其中HSP70家族的HSP70是研究最多的，因为它在大多数生物中含量最多，在细胞应激后生成最显著。HSP70是机体一种重要的非特异性细胞保护蛋白，具有多种生物学功能，如分子伴侣，抗细胞凋亡，抗氧化作用，此外在免疫反应中也起重要作用。HSP70-肽疫苗是HSP70和抗原多肽结合形成的复合物，它可以直接从肿瘤组织或肿瘤细胞系中提取得到，即HSP70-肽肿瘤疫苗；也可以采用生物工程技术的方法在体外表达HSP70，再与已知的抗原多肽交联得到。其中HSP70-肽肿瘤疫苗是研究最多的，已成为肿瘤研究的一个重要内容，HSP70-肽肿瘤疫苗的可行性在实验动物已得到证实，显示了良好的应用前景。     

热应激蛋白抗应激机理的研究进展

热应激蛋白（HSPs）是机体在应激条件下产生的一类高度保守的蛋白质分子家族,对畜禽抗应激机理有着重要的作用,本文简要介绍了热应激蛋白的分类,以及HSP70、HSP90和小分子质量HSPs家族的基因结构、功能及在热应激条件下的表达,为畜禽生产中的抗应激机理研究提供理论参考。     

动物热应激蛋白研究进展

热应激蛋白(HSPs)是生物细胞受应激作用而合成的一组高度保守的蛋白质.热应激蛋白主要作为分子伴侣参与蛋白质的折叠、转运及组装等过程,并能恢复或加速清除细胞内已变性的蛋白质而稳定细胞结构.     

热应激对反刍动物HSP70表达影响的研究进展

现代养殖业生产中动物体受到的应激种类较多,给畜禽生产带来了较大影响,而热应激的负面影响尤为突出。HSPs是生物体应激反应而产生的一种特殊的蛋白质家族,其中HSP70是HSPs中最重要的一族,也是目前为止研究最为深入的一族。本文主要综述了热应激对反刍动物的危害,HSP70的生理功能以及热应激对反刍动物HSP70表达的影响。     

小热休克蛋白家族的研究进展

1962年Ritossa等发现果蝇唾液腺多线染色体在环境温度升高时，某些特定部位在1min内就出现“蓬松”现象，当温度恢复到正常时，其他部位才会出现类似的蓬松。用^3H尿嘧啶核苷掺入试验这些蓬松部位的基因具有转录活性。1974年Tissieres发现热诱导基因蓬松的活化产物是一组热休克蛋白(heat shock protein，HSP)。这一现象被称为热休     

热休克蛋白70(HSP70)研究进展

由热应激诱导产生的热休克蛋白（HSPs）通过其分子伴侣作用参与蛋白质折叠、转运、细胞保护、抗原呈递,及肿瘤免疫等许多重要体内过程,从而对生物体起着重要的作用,本文就HSP70国内外最新研究进展作一综述。     

Basic characterization of 90 kDa heat shock protein genes HSP90AA1, HSP90AB1, HSP90B1 and TRAP1 expressed in Japanese quail (Coturnix japonica)

In the current study, we describe four novel members of the 90 kDa heat shock protein (HSP90) family expressed in Japanese quail, Coturnix japonica. The coding regions of the genes, CjHSP90AA1, CjHSP90AB1, CjHSP90B1 and CjTRAP1, exhibited more than 94% similarity to their related genes in chicken. The putative proteins encoded by these quail genes contained motifs considered essential for HSP90 gene function. In addition, the predicted proteins were more similar to HSP90AA1, HSP90AB1, HSP90B1 and TRAP1 proteins expressed in vertebrates than they were to other members of the HSP90 family. Exon numbers of CjHSP90AA1 (11), CjHSP90AB1 (12) or CjTRAP1 (18) are the same as the chicken and mammalian orthologs. Furthermore, gene order in the regions surrounding CjHSP90AB1 and CjTRAP1 has been preserved, providing evidence that the genomic regions were orthologous to HSP90‐containing regions in the chicken genome. The promoter regions of the genes also contained conserved motifs identified in related genes of chicken. However, the nucleotide sequences of the 5′‐flanking region of these genes were highly polymorphic. We also found that CjHSP90AA1 exhibited a robust response to heat shock treatment. Taken together, the data suggest that CjHSP90AA1, CjHSP90AB1, CjHSP90B1 and CjTRAP1 encode orthologs of HSP90AA1, HSP90AB1, HSP90B1 and TRAP1, respectively.     

热休克蛋白研究进展

热休克蛋白是从原核生物到真核生物普遍存在的一种高度保守的蛋白质 ,热休克蛋白的研究已成为当今世界生命科学的热点和富有希望的研究领域之一。本文从热休克蛋白的基因调控和功能以及与疾病的关系方面作了详细叙述     

副猪嗜血杆菌热休克蛋白70基因的序列分析及抗原性鉴定

本研究利用简并引物首次从副猪嗜血杆菌基因组DNA中克隆获得全长HSP70基因(登录号:EU69-3116),基因测序结果表明HSP70完整阅读框1 908 bp,根据编码序列推导出相应635个氨基酸.经BLAST分析表明,其氨基酸序列与溶血性曼氏杆菌、杜克雷嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌等同源性最高,达到90%左右.将HSP70部分基因克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,经酶切鉴定正确后转化感受态大肠杆菌BL21,以异丙基硫代-B-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白.SDS-PAGE表明表达的重组蛋白约46 l(u,将表达的蛋白纯化后免疫小鼠,制备抗血清.Western blot结果显示该融合蛋白与副猪嗜血杆菌人工感染猪血清以及原核表达蛋白免疫的小鼠抗血清反应后有明显的特异性条带,证明该重组蛋白具有良好的抗原性,为HSP70功能研究奠定了重要基础.     

热应激对小鼠附植前早期胚胎HSP70的诱导表达

选择超数排卵后怀孕昆明小鼠75只,以注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)后的胚胎发育阶段为标准,分别在合子、2细胞、4细胞、8~16细胞和囊胚期对孕鼠进行了37℃、39℃、41℃和43℃热应激4 h。热应激后取胚,用免疫荧光细胞化学法检验胚胎热休克蛋白70(HSP70)的诱导表达。结果表明,HSP70在4细胞以上胚胎内呈阳性表达,相对高温时其表达量增加,囊胚时最显著。可见,附植前早期胚胎HSP70的热诱导表达与细胞期和温度密切相关。     

热休克蛋白70研究新进展

1962年,Ritassa在果蝇的研究中首次发现,短暂的热休克可以诱导唾液腺染色体出现3个膨突,提示这一区带转录加强,他将这一现象称为“热休克反应“(heat shock response,HSR).1974年,Tissieres发现热休克反应中转录合成的为一组特殊蛋白,而且伴随着这类蛋白的合成,细胞的其他蛋白合成却受到抑制,由于这类蛋白的合成与热休克反应有关,故命名为热休克蛋白(heat shock protein,HSP).除了高热之外,多种应激原如重金属、饥饿、缺氧、缺血等都可以诱导HSP的表达,但人们习惯上仍称为HSP或热应激蛋白(heat stress protein,HSP),有时也称为应激蛋白(stress protein,SP).……     

柔嫩艾美耳球虫热休克蛋白70(Et HSP70)的重组表达及免疫保护效果

本研究初步评价了柔嫩艾美耳球虫热休克蛋白70(EtHSP70)的免疫保护效果。以RT-PCR方法克隆获得E.tenella广东株的Ethsp70基因序列,插入表达载体pMAL-c2X后转化入大肠杆菌Rosetta株,经IPTG诱导,可高效表达分子量为112 ku的可溶性融合蛋白,表达量约占菌体总蛋白的27%。将Ethsp70基因插入真核载体pcDNA6,构建真核表达质粒pcDNA-Ethsp70。用纯化的重组融合蛋白(rEtHSP70)和pcDNA6-Ethsp70质粒分别以100μg/只剂量肌注免疫雏鸡,攻虫后以盲肠病变计分、相对盲肠卵囊产量(ROP)、相对增重率和抗球虫指数(ACI)为评价指标,结果表明2个免疫组相对盲肠卵囊产量分别为39.4%、45.2%,抗球虫指数由89分别提高至免疫组的164和150。提示EtHSP70可能是一种有潜在应用价值的保护性抗原。     

热休克蛋白70的生物学功能及应用的研究进展

热休克蛋白70(HSP 70)是热休克家族中最重要的一员,从细菌到哺乳动物中广泛存在。在正常生理状态下HSP 70表达水平很低,而理化刺激、病理刺激和生理刺激等均能显著诱导其表达。HSP 70具有较强分子伴侣、抗细胞凋亡、抗氧化、免疫调节等功能。本文就HSP 70的结构和分类、主要生物学功能及其在某些疾病治疗方面的应用作一综述。     

急性冷应激对阿勒泰羊HSP60、HSP70和HSP90基因mRNA表达的影响

为研究急性冷应激通过影响热休克蛋白含量的变化对阿勒泰羊抗寒性能、生产性能及抗病性能等的影响,试验设置常温组（15 ℃±2 ℃）与冷应激组（-25 ℃±2 ℃）,每组各5只羊,屠宰后分别采集急性冷应激组（冷应激24 h后）和常温组的心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织。采用实时荧光定量PCR技术对HSP60、HSP70和HSP90 mRNA含量变化进行检测,并对HSP60、HSP70和HSP90基因进行同源性分析。结果显示,HSP70和HSP90基因与已有绵羊序列同源性高于99%,而HSP60基因与已有波斯金牛序列同源性高于99%;冷刺激后HSP60基因在心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织中的表达较常温组均升高,且在肾脏中的表达量差异极显著（P<0.01）;冷刺激后HSP70基因在心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织中的表达较常温组均升高,且在肝脏和肾脏组织中的表达量差异极显著（P<0.01）;冷刺激后HSP90基因在心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织中的表达较常温组均升高,且在肝脏组织中表达量差异显著（P<0.05）,而在脾脏和肾脏组织中的表达量差异极显著（P<0.01）。表明急性冷应激极大程度地刺激了机体的产热机能,通过通路中的产热相关基因的相互调节使其能量代谢发生改变,从而提高细胞生存率,增强机体对环境胁迫的耐受力,能更好地适应环境温度的变化。试验结果为进一步深入研究急性冷应激对阿勒泰羊机体的影响提供一定理论依据。     

CODEHOP克隆鲫鱼HSP90基因及其同源性分析

本研究旨在分析热休克蛋白90(HSP90)基因的保守性,并为寻找新的HSP基因,探索HSP90的应用提供理论数据。利用CODEHOP设计简并引物,采用PCR方法克隆鲫鱼的HSP90序列,并将扩增的序列克隆到pMD18-T载体中构建克隆载体后进行测序,再将测序结果通过BLAST进行同源性比对并构建系统进化树。结果显示,鲫鱼与鲤鱼的同源性为99%;与斑马鱼的同源性为92%。本试验设计出的引物简并度较低,Tm值的修改较为灵活,产物特异性强,为研究鲫鱼的功能基因提供基础保障,并为热休克蛋白在进化上的保守性研究奠定理论基础。     

Cloning and Homology Analysis of HSP90 Gene of Carassius auratus by Consensus Degenerate Hybrid Oligonucleotide Primers

The purpose of this study was to analyze the conservative of heat shock protein 90(HSP90) gene, and provide theoretical data for the new HSP gene by exploring the application of HSP90.Using CODEHOP to design the degenerate primers, cloning Carassius auratus HSP90 sequence by PCR, and then the sequence was cloned into pMD18-T vector to construct clone vector after sequencing.Then sequencing homology were compared by BLAST and phylogenetic tree was constructed.The results showed that the homology was 99% between Carassius auratus and Cyprinus carpio; And the homology was 92% between Carassius auratus and Danio rerio.The degeneracy of primers designed in this study was low, the modification of Tm value was more flexible, and the product had high specificity.The study provided basis guarantee for research of Carassius auratus function genes, and laid the theoretical foundation for the study of heat shock proteins conservative in evolution.