高效冬枣花药愈伤组织培养体系的建立

以冬枣花药为试验材料,研究影响愈伤组织诱导、增殖和分化的因素,优化各因素建立高效的冬枣花药培养体系。结果表明:在愈伤组织诱导过程中,加入0.4~0.6 mol/L的甘露醇4℃处理1~3 d可提高愈伤组织的诱导率。最适的愈伤组织诱导培养基为:MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L TDZ+30 g/L麦芽糖,诱导率可达到69.72%。愈伤组织增殖的最适培养基为MS+0.3 mg/LNAA+1.0 mg/LTDZ+30 g/L麦芽糖;在WPM+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/L TDZ+20 g/L麦芽糖时,分化率最高可达89.00%。     

冬枣花药愈伤组织的诱导及原生质体分离

【研究目的】研究冬枣花药愈伤组织的诱导,悬浮系的建立和培养及愈伤悬浮系原生质体的分离。【方法】以冬枣花药为试材,通过选择愈伤诱导培养基和原生质体分离所用酶的浓度找到最佳诱导和分离条件。【结论】使用1/2MS基本培养基附加TDZ0.2mg/L、NAA0.5 mg/L和 PVP2.0g/L,对诱导冬枣花药愈伤组织有较好效果;愈伤组织增殖采用培养基1/2MS+TDZ0.4 mg/L +NAA0.2 mg/L;悬浮细胞系培养采用1/2MS+TDZ0.4 mg/L +NAA0.2mg/L液体培养基;冬枣花药愈伤组织悬浮系原生质体分离时以0.6M甘露醇+0.1%MES+20~25 g/L纤维素酶,酶解时间为16h时得到的原生质体产量和活力较高。     

棉花SSR-PCR反应体系的优化

为探索适宜棉花的SSR-PCR反应体系,采用L9(34)正交实验设计,研究了棉花SSR-PCR反应体系的主要成分对扩增结果的影响.试验结果表明,棉花SSR-PCR最适反应体系为:在20 μL反应体系中,TaqDNA聚合酶用量为1 U、dNTP浓度0.2 mmol/L、引物浓度0.6 μmol/L、Mg2 浓度1.0 mmol/L和模板DNA50 ng;引物退火温度为55℃～58℃.利用六种棉花材料和10条不同引物验证此反应体系,8%聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示,扩增结果在100～300 bp,反应体系的稳定性和可重复性较好.     

小桐子基因组DNA的提取及ISSR-PCR反应体系的优化

为从小桐子嫩叶中提取高质量的基因组DNA.采用改良CTAB法提取的基因组DNA通过OD260/OD280比值测定,琼脂糖凝胶电泳和ISSR-PCR扩增检测,结果表明改良CTAB法提取的DNA纯度高.可作为ISSR分子标记的模板.同时,采用正交设计的方法,对影响小桐子ISSR-PCR反应体系中的4个因素(引物、Taq DNA Polymerase、10xBuffer(含Mg2 )、dNTPs)在3个水平上进行优化试验.建立了适合小桐子的既稳定又能扩出最多数量谱带的ISSR最优反应体系,即20μl的反应体系中含有30ng模板DNA、0.2mmol/L dNTP、0.3 U Taq酶Polymerase、0.8μmol/L Primer、3.0hanoi/L10×Buffer(含Mg2 ).     

奶牛初乳SIgA的提纯与电泳分析

为了建立提取奶牛初乳中SIgA的方法,本试验取分娩当日的奶牛乳汁,经10000 r/min离心10min,0.2mol/L（PH=6.0）PBS透析,上清液加0.06 mol/L硫酸锌处理后,调PH值为6.8-6.9,加入饱和硫酸铵,取沉淀溶于水,并在0.02mol/L（PH=8.0）PBS中透析至无NH4+,样品浓缩后上DEAE Sepharose (Fast Flow)柱,用0.02mol/L（PH=8.0）至0.3mol/L（PH=8.0）PBS梯度洗脱;收集峰蛋白上葡聚糖凝胶-200层析柱,用0.01mol/L（PH=7.4）PBS洗脱;收集出现蛋白峰的洗脱液,经SDS-PAGE电泳鉴定,为SIgA单体。经初步测定奶牛初乳中SIgA含量为3.47mg/ml。本试验已成功建立提取奶牛初乳中SIgA的方法。     

山丹百合cpDNA-PCR反应体系建立与优化

本试验以采自青海东南部地区的山丹百合为材料,结合单因素与L_(16)(4~5)正交设计对山丹百合cpDNA-PCR反应体系的Mg~(2+)、d NTPs、引物、Taq酶和模板DNA浓度进行优化,建立最优的山丹百合cpDNA-PCR反应体系,为研究山丹百合遗传多样性及其演变提供技术支持。研究表明:在25μL反应体系中,以Mg~(2+)2.0 mmol/L、d NTPs 0.2 mmol/L、引物0.2μmol/L、Taq酶0.25 U、模板DNA 50 ng最佳,退火温度优化后为53.1℃。建立的反应体系在6个山丹百合居群中经验证具有较高的稳定性和重复性,可用于山丹百合遗传多样性和分子谱系地理学方面的研究。     

珍稀植物攀枝花苏铁ISSR扩增条件的优化

在利用ISSR技术对攀枝花苏铁（Cycas panzhihuaensis）种质资源遗传多样性进行研究的实验过程中, 对影响PCR扩增效果的一些因素如DNA的提取、模板DNA质量浓度、Taq酶用量、引物用量、dNTP的用量以及退火温度等指标进行筛选和优化。试验结果表明,20μl的反应体系中采用15~25ng 的模板DNA、2.0~2.5mmol/L的Mg2 + 浓度、0.2mmol/L的dNTPs、0.2μmol/L ISSR 引物、0.2U Tag DNA 聚合酶、48 ℃~55 ℃(退火温度随引物不同而定)的复性温度,以及35个循环数为攀枝花苏铁ISSR—PCR 扩增条件的最佳选择。攀枝花苏铁ISSR—PCR 扩增条件的优化为进行攀枝花苏铁种群间遗传分化的研究奠定了基础。     

濒危藏药桃儿七ISSR-PCR反应体系的建立与优化

为通过ISSR分子标记研究桃儿七遗传多样性,建立并优化桃儿七的ISSR-PCR反应体系。使用正交设计辅以单因素试验,对桃儿七ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素(模板DNA,Mg~(2+),Taq DNA酶,d NTPs及ISSR引物)进行筛选优化,选取甘肃碌曲县西仓神山山顶桃儿七居群样本验证该反应体系。正交试验各因素显著性为引物Taq DNA酶DNA浓度dNTPsMg~(2+),桃儿七ISSR-PCR反应的最佳体系为(25μL):2.5 mmol/L Mg~(2+),0.2 mol/L dNTP,0.4μmol/L引物,0.5 U Taq DNA酶,40 ng DNA,2.5μL 10×Buffer。该体系具有高稳定性,多态性丰富的特点,为野生桃儿七遗传多样性及保护策略研究提供了技术支持。     

蔗糖对鼎湖山紫背天葵组培苗生长和花色素苷积累的影响

为了解决鼎湖山紫背天葵快繁体系中组培苗叶片褪红返绿的问题,以球茎芽丛为试验材料,采用蔗糖浓度筛选法对紫背天葵花色素苷的合成进行研究。结果表明,在基本培养基（MS＋NAA 0.3 mg/L＋IBA 0.2 mg/L＋卡拉胶 7.0 g/L）中,适当上调蔗糖浓度至45~60 g/L,有利于紫背天葵组培苗的健壮生长及花色素苷的积累,其相对含量达0.417 μmol/(g?FW)。但蔗糖浓度≥75 g/L时,则对组培苗的生长起明显的抑制作用。     

响应曲面法优化核桃青皮色素提取工艺的研究

以核桃青皮为原料,以提取的色素在510 nm处的吸光值为考察指标,在单因素试验的基础上,采用Plackett-Burman试验和响应曲面法优化核桃青皮色素的超声辅助-醇提工艺。结果表明,乙醇体积分数、液料比和提取温度是影响核桃青皮色素提取效果的三个主要因素;核桃青皮色素提取的最佳工艺条件为:乙醇体积分数40%,液料比20∶1(m L/g),提取温度70℃,超声功率150 W,提取时间80 min;所得模型预测值与验证试验的实际值相近,色素的平均吸光值为0.64,平均提取率为2.32 mg/g,说明对核桃青皮色素提取工艺的分析结果可靠、精密度高、重现性好,可用于实际工业化生产。     

冬枣保鲜技术研究现状

介绍了冬枣的品质特性及呼吸类型。综述了低温贮藏、气调贮藏、冰温贮藏对延缓冬枣新陈代谢,保持新鲜度,延长贮藏期的研究现状。探讨了降低冬枣冰点的方法并介绍了其保鲜辅助技术措施。     

冬枣贮藏期浆胞病病原分离与鉴定

在天津地区栽培的冬枣上发现冬枣贮藏期浆胞病真菌病害,从病果上分离出2种真菌菌株,回接后,发现病症与自然发病症状完全一致,而且从接种病果上又重新分离到了此病病原真菌,经鉴定和致病性测定,确认为链格孢菌(Alternaria alternata(Fr.)Keissl)和裸孢壳属(Emericella nidulans(Eid.)),其中裸孢壳属(Emericella nidulans(Eid.))在冬枣上还属国内外首次报道.     

冬枣商业性贮藏保鲜技术措施

对冬枣品种的界定、呼吸类型及贮藏期间品质变化等进行了分析,并提出几点相关建议,目的是为延长冬枣商业货架期.     

Research on PDM Technology Oriented Dynamical Data

对冬枣采后主要病害种类、症状及防治方法进行阐述,并介绍了生物防治技术在果蔬贮运病害防治中的应用,展望了该技术在冬枣采后病害防治中的应用前景.     

气调贮藏对冬枣品质的影响

研究了冬枣果实在低温（-1～-2℃）条件下,8个不同体积分数的气体成分（15%O2＋0%CO2、10%O2＋0%CO2、5%O2＋0%CO2、2%O2＋0%CO2、2%O2＋2%CO2、2%O2＋4%CO2、2%O2＋8%CO2、2%O2＋10%CO2）和1个对照（21%O2＋0%CO2）处理对冬枣果实呼吸、果肉相对硬度、组织相对电导率、维生素C含量以及贮藏效果的影响。研究结果表明,适当的低O2可降低冬枣果实的呼吸强度、抑制果肉硬度的下降、减慢组织相对电导率的升高、延缓维生素C的降解、维持冬枣果实良好的贮藏品质 而贮藏环境中的CO2则会促进果实呼吸,导致组织相对电导率升高,促进维生素C的降解,加速了冬枣果实的软化,鲜食价值迅速丧失。2%O2＋0%CO2的气体条件对冬枣贮藏最为有利。     

冬枣采后浆胞病定性研究

对冬枣采后贮藏期间危害最为严重的病害--浆胞病进行了定性研究,通过对其病原菌的分离、培养和回接试验,确定了冬枣浆胞病为混合感染,病原菌种类分别为交链孢霉菌和根菌索菌两种;同时调查不同温度对冬枣浆胞病病原菌生长的影响.     

气调贮藏对鲜枣保鲜效果的影响

应用气调贮藏配气系统,对不同品种鲜枣在不同浓度CO2和O2条件下的保鲜效果进行了研究,调查了脆好果率、脆腐果率、软果率及果皮保绿指数等指标.结果表明,梨枣和骏枣随着CO2浓度的提高明显地促进果实变软与果皮转红;适当降低O2分压,有利于多数品种的贮藏保鲜;高于21%的O2分压对鲜枣贮藏不利;无CO2条件下,多数鲜枣品种能承受1.5%的低O2.并对进一步开展鲜枣采后生理及贮藏研究的内容进行了讨论.     

乙醇提取及重结晶法制备辣椒总碱

为了建立从辣椒中提取并通过重结晶获得高纯度辣椒总碱的方法,以花溪朝天椒干粉为原料,采用单因素试验考察了有机溶剂提取法中乙醇浓度和固液比等对提取率的影响,摸索了后续纯化过程中碱溶解-乙酯萃取辣椒碱的最适pH值和辣椒碱的结晶条件。结果表明：用95%乙醇、1:10(m/V)的固液比、80℃回流2 h,可达到3.7 mg/g（辣椒总碱/辣椒粉）的提取率;在pH 9.0时用乙酸乙酯萃取辣椒碱的NaOH皂化液可获得较高的辣椒碱纯度和回收率;在实验条件下,该萃取物在甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿及石油醚等溶剂中均未结晶,而在乙醚中于-20℃重结晶3次得到纯度为96.4%（HPLC法测定）的辣椒总碱,达到美国药典24版(USP24)中的相关要求。     

西山焦枣中熊果酸超声法提取工艺研究

利用高效液相(HPLC)和IR 对西山焦枣中熊果酸提取物进行定性和定量研究,采用Fenton 体系进行体外抗氧化试验,评价熊果酸的抗氧化性,在超声条件下通过单因素试验考察提取时间、料液比、温度、提取液乙醇浓度、超声功率对提取率的影响,通过正交试验优化对工艺影响较大的影响因素参数,确定最适提取条件。结果表明：料液比1:13,浸提时间25 min,温度65℃,乙醇浓度85%,提取功率为175 W,最终得到产率2.22 mg/g 的熊果酸,与无超声条件相比,缩短了提取时间,节省了能量消耗,提高了抗氧化性能,为广泛利用西山焦枣资源和开发新的冬枣加工品提供依据。     

新疆红枣果醋饮料的开发

以新疆和田骏枣为原料,探讨液态法发酵生产红枣醋及其醋酸饮料的调配。结果表明,采用液态法生产的红枣醋具有红枣特有的香味,酸味柔和,可以作为调配醋酸饮料的原料。通过正交试验确定红枣醋酸饮料优化配方为:100 mL果醋饮料中含红枣原醋12 mL,红枣汁23 mL,甜蜜素用量0.08 g,乙基麦芽酚用量0.02 g。