苍耳提取液与植物内生真菌抗菌活性研究(英文)

[Objective] The study was aimed to provide theoretical foundation for developing a new fungicide with high activity,low toxicity and low residua.[Method] Based on the plant growth rate and inhibition zone methods,the antifungal activity of extracts of every organ of Xanthium sibiricum,the fermentation liquid of endophytic fungi MC4-23,and the extract of mycelium were tested with six kinds of pathogenic fungi and three kinds of pathogenic bacteria respectively.[Result] The extract of every organ of Xanthium sibiricum,the fermentation liquid of endophyic fungi MC4-23,and the extract of mycelium all had antifungal activities.The acetone extracts of Xanthium sibiricum had stronger antifungal activities than the ethanol extracts of Xanthium sibiricum.The extracts of leaf have the strongest antifungal activities against fungi and bacteria.The inhibition rates of the six pathogenic fungi were all above 47.8%,and the inhibition diameters of the three pathogenic bacteria were all above 0.5 centimeter.The fermentation liquid of endophytic fungi also had strong activities against the fungi and bacteria.The inhibition rates of the six pathogenic fungi were all above 68.1%.The extracts of root of Xanthium sibiricum and the mycelium of endophytic fungi were all had antifungal activities.[Conclusion] Xanthium sibiricum and endophyic fungi MC4-23 had great value of development and utilization.     

苍耳提取液与植物内生真菌抗菌活性研究

[目的]为研制高效、低毒、低残留的新型杀菌剂提供理论依据。[方法]采用生长速率法和抑菌圈法,分别以水稻纹枯病菌等6种植物病原真菌和大肠杆菌等3种病原细菌为供试菌种,对苍耳各器官(根、茎、叶、果)提取液、植物内生真菌MG4-23的发酵液及菌丝体提取液进行抑菌活性测定。[结果]苍耳各器官提取液、植物内生真菌发酵液及菌丝体提取液均有抑菌作用。苍耳的丙酮提取液抑菌活性要好于乙醇提取液。苍耳中抑菌活性最高的器官是叶,对6种供试病原真菌的抑制率均在47.8%以上,对3种病原细菌的抑制直径均在0.5 cm以上。植物内生真菌发酵液的抑菌活性也很明显,对6种供试病原真菌的抑制率均在68.1%以上,对3种病原细菌也具有抑制性。苍耳根和植物内生真菌菌丝体提取液的抑菌活性也较明显。[结论]苍耳和植物内生真菌MG4-23均具有较大的开发利用价值。     

药用植物乌头内生真菌抗菌活性研究

对从乌头（Aconitum Carmichaeli Debx.）植物中分离获得的内生真菌进行抗菌活性筛选,其中59株内生真菌（占总菌数的35.98%）有抗菌活性,高活性菌株（抑菌圈直径＆gt;15mm）有42株（占抗菌活性菌株的71.19%）,抗菌谱广的菌株有3株,它们分别是曲霉（Asp-ergillus）、毛壳菌属（Chaetomium）和毛霉（Mucor）,表明乌头植物内生真菌中广泛分布着有抗菌活性的菌株。     

苦楝内生真菌抗菌活性的研究

对苦楝植株中的内生真菌进行了研究。从苦楝中共分得70株内生真菌,对其进行分类鉴定,除3种因不产孢未鉴定外,其它的分属于5目、7科、11属,18种。对分离出的21种菌株进行液体培养,并对其发酵产物进行抗菌活性测定。发现在供试质量浓度为50 mg/mL时,MA1,MA4,MA8和MA9 4个菌株的发酵液和菌丝体粗提物对小麦赤霉病菌、番茄灰霉病菌、辣椒疫霉病菌、苹果炭疽病菌、棉花枯萎病菌具有不同程度的抑制菌丝生长活性作用,其菌丝体粗提物对番茄灰霉菌、棉花枯萎菌有明显的抑制孢子萌发作用。     

半红树林植物黄槿内生真菌多样性及其抗菌活性研究

黄槿植物的叶、树皮和花是中药黄槿的入药部位,具有抗菌、抗炎、抗肿瘤的药用价值。药用植物内生真菌与宿主植物在基因层面存在信息传递,会产生与宿主植物相同或相似的代谢产物,因此黄槿内生真菌次生代谢产物可能成为新型天然活性产物。从不同地点采集的半红树林植物黄槿中分离纯化出64株内生真菌并鉴定,通过固体发酵得到其次生代谢产物,采用牛津杯法检测内生真菌的粗提物对5种常见致病细菌的抑菌活性,后根据分离部位的不同构建系统发育树,并筛选确定3株具有强抑菌活性的菌株,用于后续次生代谢产物中化学成分的研究。     

意大利苍耳提取物抗植物病原真菌活性研究

[目的]研究意大利苍耳提取物抗植物病原真菌活性,为植物资源的利用及植物源农药的开发提供研究基础。[方法]以意大利苍耳(Xanthium italicum Moretti)全草为原料,经90%乙醇超声辅助提取后,分别用不同溶剂进行萃取得到石油醚相、氯仿相和乙酸乙酯相。采用菌丝生长速率法研究各相对灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、茄交链孢(Alternaria solani)、尖孢镰刀菌(Fusarium Oxysporum)、链格孢(Alternaria alternata)等植物病菌的抑菌活性。[结果]3种萃取相对4种植物病原真菌均具有显著抑制且呈浓度依赖性,其中氯仿萃取相对4种植物病原真菌抑制效果最好,当浓度为800μg/mL时抑制率均达50%以上。对灰葡萄、孢链格孢、尖孢镰刀菌和茄交链孢的EC₅₀分别为788.36、566.93、496.48、339.39μg/mL。[结论]意大利苍耳萃取相中,氯仿相对供试真菌抑制作用显著,活性成分主要集中在中低极性部位。该研究为从意大利苍耳次生代谢物中发掘活性先导化合物和植物源农药的创制提供了理论依据。     

金钱松内生真菌抗植物病原真菌活性的研究

首次对金钱松内生真菌进行了分离,并以稻瘟霉(Pyriculariaoryza)P-2b活性筛选体系为筛选模型,以水稻纹枯病菌(Corticium sasakii)AS3.2872、亚麻刺盘孢(Colletotrichum lini)AS3.4486、禾谷镰孢(Fusarium graminearum)AS3.4598和棉灰星盘多毛孢菌(Pestalotia gossypii Hori)等4种常见植物病原真菌为指示菌,研究了金钱松内生真菌抗植物病原真菌活性菌株的抗菌能力。结果表明,金钱松内存在着大量具有抗稻瘟霉P-2b活性的内生真菌,JJ18,JJ28,JJ314和JJ323等4株活性菌株对指示菌表现出强烈的广谱抗菌能力,其中JJ314,JJ323可诱导稻瘟霉P-2b菌丝呈现明显的念珠状变形现象,表明这2株活性菌株代谢产物中可能含有低毒性抗真菌成分。金钱松内生真菌是潜在的杀菌生物农药资源。     

檀香紫檀内生真菌多样性与抗菌活性分析

【目的】分析药源植物檀香紫檀内生真菌多样性及其代谢产物抗菌活性,为寻找新型抗菌活性物质提供参考。【方法】从广东药科大学中药园采集3株健康檀香紫檀的根、茎、叶组织样品,采用组织分离法分离其内生真菌;结合形态学和分子生物学方法对檀香紫檀内生真菌进行分类和鉴定;分别采用纸片扩散法和菌丝生长速率法研究代表性内生真菌发酵液对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）CMCC26003、大肠埃希菌（Escherichia coli）CMCC44102、痢疾杆菌（Shigella dysenteriae）CMCC51252、伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）CMCC50115、白色念珠菌（C.albicans）ATCC10231和黑曲霉（Aspergillus niger）CMCC98003的抗菌活性。【结果】从450块檀香紫檀组织中共分离到337株内生真菌,其中来自叶172株、茎66株、根99株,隶属15个属。叶部内生真菌的相对分离率和定殖率最高,均为79.63%;叶部、根部和茎部的内生真菌多样性指数分别为1.02、0.93和0.64,三者间差异显著（P< 0.05）。木霉属（Trichoderma sp.）为根部优势属,相对分离率为28.28%;青霉属（Penicillium sp.）为茎部和叶部的优势属,相对分离率分别为46.97%和52.91%。45株代表性内生真菌发酵液抗菌活性测定结果显示,有16株内生真菌（35.56%）对金黄色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌、大肠埃希菌和痢疾杆菌具有抑菌活性;36株（80.00%）对白色念珠菌和黑曲霉具有抑菌活性;有15株（33.33%）对6种测试细菌和真菌均具抑制活性,其中菌株L9（Colletotrichum sp.）代谢产物的抗菌活性最好,对黑曲霉抑制活性达67.35%,对其余5种测试菌的抑菌圈直径均大于10 mm。【结论】檀香紫檀内生真菌类群分布具有一定的器官组织特异性,物种多样性较丰富,且蕴含有较高比例的抗细菌和抗真菌活性菌株,可为新型抗菌活性物质的筛选与开发提供菌株资源。     

芦荟植物内生真菌抗真菌活性的研究

对从芦荟中分离出的88株内生真菌进行抗真菌活性物质筛选结果表明:35株芦荟内生真菌对1种或多种皮肤致病真菌,例如毛样枝孢(Cladosporiumtrichoides)、紧蜜单孢枝霉(Hormodendrumcompactum)、皮炎单孢枝霉(Hormodendrumdermatitidis)等具有抑制生长作用,占供试菌株的37.8%。来自中华芦荟、元江芦荟、库拉索芦荟分离获得内生真菌的抗真菌活性菌株比例分别为50%、45%和31.5%。提示芦荟内生真菌种群可为人类寻找新的抗病原微生物活性物质提供基础条件。     

芦荟植物内生真菌抗真菌活性的研究

对从芦荟中分离出的88株内生真菌进行抗真菌活性物质筛选结果表明:35株芦荟内生真茵对1种或多种皮肤致病真菌,例如毛样枝孢(Cladosporium trichoides)、紧蜜单孢枝霉(Hormodendrum compactum)、皮炎单孢枝霉(Hormodendrumdermatitidis)等具有抑制生长作用,占供试菌株的37.8%.来自中华芦荟、元江芦荟、库拉索芦荟分离获得内生真菌的抗真茵活性茵株比例分别为50%、45%和31.5%.提示芦荟内生真菌种群可为人类寻找新的抗病原微生物活性物质提供基础条件.     

Preliminary Studies on Antifungal Activity of Xanthium sibiricum and the Endophytic Fungi

[Objective] The study was aimed to provide theoretical foundation for developing a new fungicide with high activity,low toxicity and low residua.[Method] Based on the plant growth rate and inhibition zone methods,the antifungal activity of extracts of every organ of Xanthium sibiricum,the fermentation liquid of endophytic fungi MC4-23,and the extract of mycelium were tested with six kinds of pathogenic fungi and three kinds of pathogenic bacteria respectively.[Result] The extract of every organ of Xanthium sibiricum,the fermentation liquid of endophyic fungi MC4-23,and the extract of mycelium all had antifungal activities.The acetone extracts of Xanthium sibiricum had stronger antifungal activities than the ethanol extracts of Xanthium sibiricum.The extracts of leaf have the strongest antifungal activities against fungi and bacteria.The inhibition rates of the six pathogenic fungi were all above 47.8%,and the inhibition diameters of the three pathogenic bacteria were all above 0.5 centimeter.The fermentation liquid of endophytic fungi also had strong activities against the fungi and bacteria.The inhibition rates of the six pathogenic fungi were all above 68.1%.The extracts of root of Xanthium sibiricum and the mycelium of endophytic fungi were all had antifungal activities.[Conclusion] Xanthium sibiricum and endophyic fungi MC4-23 had great value of development and utilization.     

油菜内生真菌的分离及其抑菌活性的研究

[目的]探讨油菜内生真菌的抑菌活性。[方法]从油菜的不同组织内分离内生真菌,研究它们对植物病原真菌的抑制作用,并对活性菌株进行了初步鉴定。[结果]从油菜的根、茎、叶中共分离出12株内生真菌,其中2株(WG5和WJ2)对病原真菌均有不同程度的抑制作用,尤其对油菜菌核病菌和小麦黄斑叶枯病菌的抑制率最高,而且其发酵滤液经高温处理后活性不丧失,对病原真菌仍有较强的抑制作用,具有一定的生防潜能。[结论]油菜内生真菌可以产生具有抑菌活性的次生代谢产物,为新型活性物质的筛选提供新的途径。     

苍耳子提取物作为生物农药的潜力研究

考察了苍耳子的水提取物及乙醇提取物在抗真菌、除草、杀虫方面的作用,研究结果表明:在抗真菌实验中,苍耳子乙醇提取物终浓度为20 mg/L时选择性地对小麦颖枯菌和小麦赤霉菌有抑制作用,抑制率分别为70%和100%;在杀虫实验中,苍耳子乙醇提取物具有选择性杀虫作用,在终浓度为60μg/cm²时对棉铃虫毒杀率达100%;在除草实验中,在终浓度为60μg/cm2时,苍耳子水提取物选择性地对小白菜有100%的抑制作用。     

高寒草地植物内生真菌的分离及其抑菌活性初探

[目的]对4种高寒草地植物的内生真菌多样性进行研究,并对抑菌活性菌株进行筛选。[方法]采用组织分离法对玛曲草原上的线叶嵩、披碱草、异穗苔草和醉马草进行内生真菌的分离,并以棉花立枯丝核菌（R-1）、小麦根腐长孺孢（B-1）、终极腐霉（P-1）和黄瓜枯萎病菌（F-1）作为试验菌对分离的内生真菌进行了抑菌活性筛选。[结果]从上述4种植物中共分离到45株不同的内生真菌菌株,其中38株对至少一种病原菌有抑制作用。其中有2株内生真菌对棉花立枯丝核菌有较强的抑制作用;13株对小麦根腐长孺孢有较强的抑制作用;对黄瓜枯萎病菌抑制作用较普遍,但不明显;仅1株对终极腐霉有较强抑制作用,其余均不明显。[结论]该研究获得了具有抗菌活性的内生真菌。     

禾谷丝核菌拮抗真菌的鉴定及抗菌活性研究

利用从小麦茎叶组织中分离的内生真菌,进行平板对峙试验,从中筛选出2株对禾谷丝核菌有明显抑制效果的菌株(RF5和RF6)。采用改良的真菌基因组DNA提取方法,提取内生真菌RF5和RF6的基因组DNA,运用ITS序列通用引物(ITS4、ITS5)进行扩增,分别得到约600 bp的特异条带。对PCR产物进行测序,根据序列比对分析结果,将拮抗真菌RF5和RF6分别鉴定为:肉座菌(Hypoc-reales sp.)和杂色曲霉(Aspergillus versicolor)。进一步研究这2株拮抗真菌的抗菌活性大小,结果显示,2株真菌对病原菌都能产生明显的抑菌圈,抑菌圈直径分别为23 mm和19 mm;其液体发酵产物对病原菌的生长也有显著抑制作用,抑制率分别为63.3%和60.8%。     

无花果内生真菌的研究Ⅰ.抗植物病原真菌活性的筛选

以白菜黑斑病菌（Alternaria brassicae）、番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea）、辣椒疫霉病菌（Phytophthora capsici）、苹果腐烂病菌（Valsa mali）、西瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum f．sp．niveum）、烟草赤星病菌（Alternaria alternata）为指示菌种，对从无花果（Ficuscarice）中分离获得到的64株内生真菌进行抗真菌活性试验，结果表明18株内生真菌具有抗菌活性，占总内生真菌的28．1％，将具有抗菌活性的菌株进行分类鉴定，分属于2目、4科、8属。     

苍耳愈伤组织诱导及继代培养研究

以苍耳叶片、叶柄及茎段为外植体,在MS附加不同种类和浓度激素配比的培养基上,对苍耳愈伤组织进行诱导培养,并对生长迅速、性状好的愈伤组织进行了研究.结果表明:不同激素配比和不同培养方式对愈伤组织诱导率、生长量和性状有明显的影响.在光照培养下,当MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5~1 mg/L时愈伤组织诱导率高且生长好.     

核桃内生菌研究Ⅰ 核桃内生菌的分离及代谢产物活性研究

从核桃(Juglans regia L.)的根、茎、叶、果中分离得到27株内生真菌,对27株核桃内生真菌进行化感作用和抑菌活性研究的结果表明,27株核桃内生真菌对5种供试菌都有抑制作用的有21株;对小麦幼芽及幼根的抑制率均在50%及以上的有9株,且除S20Y、S57X外,其余25株对小麦幼根的抑制作用都大于对幼芽的抑制作用.核桃内生真菌具有与宿主基本相同的生物活性,可以作为寻找安全、高效的生物源活性物质的筛选资源.