红茂草生物碱TLC检测技术的建立及抑菌活性研究

利用醇提法提取红茂草中生物碱,并对其进行TLC检测,建立红茂草生物碱TLC检测技术;用红茂草浓缩液对3种供试菌进行体外抑菌活性研究,测定其最小抑菌浓度（MIC）。结果以95%乙醇：冰乙酸：水：浓氨水（15：0.5：2.5：0.5）为展开系统,分离效果最好,斑点清晰;对供试菌MIC测定结果分别为：大肠埃希氏杆菌0.18mg/mL、金黄色葡萄球菌0.14mg/mL、粪肠球菌0.26mg/mL。红茂草具有明显的抑菌作用。TLC检测技术可作为红茂草提取物中生物碱质量控制方法,且该法重现性好、准确度高。     

野生药用红茂草挥发油提取及抗氧化活性研究

采用CO₂超临界法萃取红茂草中挥发油,对其进行GC-MS分析,以提取的挥发油为研究对象,确定红茂草挥发油的抗氧化能力大小。研究表明,红茂草挥发油成分复杂,存在一定的抗氧化能力。     

红茂草中精油成分分析及抑菌活性的研究

为红茂草药物的进一步开发和利用,本试验以甘肃平凉地区野生药用植物红茂草为研究对象,采用水蒸气提取、蒸馏萃取(SDE)提取、超临界CO_2萃取等3种方法,分别提取红茂草中的精油成分;以GC-MS对其精油进行化学成分分析,并将超临界CO_2萃取的红茂草精油采用平板菌落计数法对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌进行抑菌活性测定。结果显示,三种提取方法中,水蒸气提取法和蒸馏萃取提取法所得精油为橙黄色,有浑浊,超临界CO_2萃取法所得精油为淡黄色,澄清液体。3种方法所得精油均含有24种共同成分,以超临界CO_2萃取法最优,其提取率为2.1220%,水蒸气提取法最低,提取率为1.7870%;将超临界CO_2萃取的红茂草精油作用于3种供试菌,测定其最小抑菌浓度(MIC)分别为:金黄色葡萄球菌0.2500 g/mL、大肠杆菌0.3000 g/mL,绿脓杆菌0.2600 g/mL,抑菌效果显著。研究结果表明,超临界CO_2萃取是提取红茂草精油的最佳方法,通过超临界CO_2萃取法提取的红茂草精油对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌具有良好的抑菌效果。     

柠檬不同部位精油的成分分析及抑菌活性

采用水蒸气蒸馏法提取北京柠檬叶片、枝干和果皮的精油,并进行GC-MS分析,共鉴定出38种成分,其中叶片23种,枝干21种,果皮29种。3份精油主要挥发油成分均为D-柠檬烯,相对含量分别为52.85%、53.03%和51.23%;共有成分14种,特异性成分分别有4种、3种和14种。通过对3种食源性细菌的抑菌活性的测定,3份柠檬精油均有一定程度的抑菌作用,其中,叶片精油对大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌抑菌效果最佳,且抑菌圈直径最大;果皮精油对伤寒沙门氏菌的抑菌效果最佳,抑菌圈最大。研究结果表明,柠檬不同部位精油活性成分含量差异较大,在对其开发利用时,可考虑各自优势,合理利用柠檬的叶片、枝干和果皮,为柠檬资源合理化和精细化的开发利用提供一定的科学依据。     

红茂草生物碱对小鼠毒性实验研究

考察红茂草药物的安全性,将不同剂量红茂草生物碱提取物肌肉注射BALB/c小鼠,后在不同时间采集小鼠心、肝、脾、肺、肾和注射部位肌肉组织,制作切片,用H.E染色法进行染色后镜检,未发现典型性病理变化。进行小鼠半数致死量测定,其LD50为（16.39±0.04）g/kg、FL为14.51-18.93 g/kg。结果表明,红茂草生物碱具有良好的安全性。     

酸性染料比色法测定红茂草中总生物碱含量

采用酸性染料比色法测定红茂草中总生物碱含量。以异紫定堇碱为标准品,酸性染料比色法的显色条件为：pH值4.0、波长415 nm、溴甲酚绿1.5 mL,得到标准曲线：y=0.032 x-0.033,R2=0.977 0,生物碱检测浓度在21.6-54.0 mg/mL范围内与吸收度线性关系良好,红茂草中总生物碱含量为1.386%。该方法灵敏度高、准确度好、重现性好。     

红茂草总生物碱酸水提取法研究

用酸水提取法提取红茂草总生物碱。先分别进行提取时间、料液比、pH值和温度对红茂草总生物碱提取率影响的单因素实验,在此基础上从每个单因素中选出3个较好水平进行正交试验,从而得出酸水提取红茂草总生物碱的最佳条件。结果表明,温度80℃、提取时间4 h、料液比1∶50、pH值1.5为提取红茂草总生物碱的最佳条件。     

银线草提取物的抑菌活性测定

以研究银线草提取物的不同萃取相对大肠杆菌等6种细菌的抗菌作用为目的 ,将银线草提取分离,每种萃取相进行抑菌实验。结果表明,银线草提取物中抑菌活性最强的为乙酸乙酯相,且对蜡状芽孢杆菌、表皮葡萄球菌和大肠杆菌抑制作用较强。     

凯氏定氮法测定红茂草提取物中的氮含量

试验采用四种不同方法（Ⅰ-乙醇处理,Ⅱ-酸水处理,Ⅲ-样品再用三氯乙酸处理、Ⅳ-酸水乙醇处理,）提取并处理红茂草,再用凯氏定氮法测定其氮含量,并进行了数据分析。结果表明,Ⅱ样品的氮含量显著高于Ⅰ样品的氮含量（P〈0.05）,而其它三者之间差异不显著（P〈0.05）。所提取的红茂草中的蛋白氮含量较低,为0.2281%。     

红茂草中异紫堇啡碱正交提取工艺的建立

采用正交工艺提取红茂草中异紫堇啡碱,在紫外光210 nm处对红茂草生物碱提取液进行检测,以异紫堇啡碱标准品作对照。结果正交提取最佳工艺参数为:乙醇浓度60%、乙醇用量200 mL、超声温度30℃、回流时间2.5 h。表明应用正交工艺对红茂草中异紫堇啡碱的提取比较合理。     

红茂草水提取物腹腔注射对小鼠半数致死量的测定

用寇氏法测定了红茂草水提取物腹腔注射小鼠的半数致死量(LD50)。取70只昆明系小白鼠,雌雄各半,体重(20±2)g,按序贯法测出红茂草水提取物腹腔注射小鼠100%致死率的最小剂量和0%致死率的最大剂量,染毒测定其LD50。结果红茂草水提取物腹腔注射小鼠的LD50为1777.5 mg/kg,95%可信限为1585.7mg/kg~1992.5 mg/kg。     

秃疮花水溶性外用制剂抗病毒试验

为了确定秃疮花水溶性外用制剂的临床应用剂量标准,试验用甘肃省畜牧兽医研究所研制的秃疮花水溶性外用制剂,以Reed-Muench法进行了体外抗病毒试验。试验结果表明秃疮花水溶性外用制剂对GPV的IC50=2-6．5倍个外用制剂试验单位（8．8mg／mL外用制剂干物质）;对CPDV的IC50=2-7．2倍个外用制剂试验单位（5．4mg／mL外用制剂干物质）。这说明秃疮花水溶性外用制剂对GPV和CPDV有一定的抑制功能。     

红茂草生物碱正交提取工艺模式优化及清除自由基作用的研究

为研究红茂草(Dicranostigma leptodum(Maxim.)Fedde)生物碱的正交提取工艺条件及其清除自由基作用。采用单因素水平测定,从10种相关因素中筛选出乙醇体积分数、超声波作用时间、液料比、回流时间、浸提液pH值、浸泡时间共6种主要影响因素,按照L25(56)正交表进行正交试验,用SPSS 17.0软件进行统计分析,优选出最佳正交提取工艺模式;将正交提取浓缩液进行HPLC检测,并测定其对羟自由基(·OH)和氧自由基(O₂^·-)的清除作用。结果表明:红茂草生物碱最佳提取工艺条件为乙醇体积分数65%、超声波作用时间20min、液料比15:1、回流时间2.5h、浸提液pH=8、浸泡时间4h;在最佳提取工艺条件下红茂草提取液中生物碱的含量为9.2794%;红茂草生物碱在25.0和1.8mg·mL^-1时,对·OHH和O₂^·-清除效果显著,其清除率为58.70%和49.26%,IC₅₀为23.50和1.75mg·mL^-1。该工艺方法简便、可靠、提取率高,提取液清除自由基作用显著。     

响应面法优化秃疮花中生物碱提取工艺及抑菌活性研究

以秃疮花为研究对象,在单因素水平测定的基础上,通过响应面法优化其提取工艺,并使用响应面法提取浓缩液进行抑菌活性测定,以大肠埃希氏杆菌为研究对象,进行透射电镜观察。结果显示,秃疮花生物碱最佳提取工艺条件为:液料比15 mL/g、超声时间35 min、回流时间2.5 h、乙醇浓度65%,在此工艺下秃疮花生物碱含量为9.33%;其响应面法提取浓缩液对大肠埃希氏杆菌、白色念珠菌、绿脓杆菌的最小抑菌浓度分别为0.20,0.15和0.35 mg/mL,最低杀菌浓度分别为0.15,0.10和0.30 mg/mL;在透射电镜下观察到对大肠埃希氏杆菌抑制效果显著。表明响应面法对秃疮花生物碱提取工艺的优化比较合理。     

南美蟛蜞菊挥发油的抑菌活性及成分分析

本试验旨在研究南美蟛蜞菊挥发油对畜禽、水产养殖中常见致病细菌的抑菌效果。采用水蒸气蒸馏法提取南美蟛蜞菊挥发油,研究测定了其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、葡萄球菌、沙门氏菌、耶尔森氏菌、鳗弧菌、嗜水气单胞菌的抑制效果,并用GC-MS分析了其化学成分。结果表明,南美蟛蜞菊挥发油对7种供试菌种都具有显著的抑制效果,且随着挥发油浓度的增大,其抑菌活性增强;利用气相－质谱联用法(GC-MS)从南美蟛蜞菊挥发油中鉴定出了48种组分,主要含有庚烷(1,3,3-三甲基-三环(2,2,1,0(2,6))、3-蒈烯、α-水芹烯、氧化石竹烯和丁香烯等。     

植物精油抗菌活性研究进展

植物精油来源于天然,具有抑菌、杀虫、抗氧化等活性,得到了广泛应用。笔者从植物保护、医药卫生、食品保存3个方面综述了近年来国内外植物精油抗菌活性研究进展,以期为开发植物精油提供参考。     

超临界CO2萃取绿茶香精油酸乳的研制

以绿茶中通过超临界CO2萃取出的绿茶香精油和原奶为原料，利用保加利亚杆菌和嗜热链球菌发酵制成绿茶酸乳，口感细腻、爽口，并确定最佳配比。