地菍总黄酮的急性毒性及降糖活性研究

本研究旨在探讨地菍总黄酮的急性毒性及对糖尿病小鼠的降血糖活性。试验以单次最大给药剂量(5.6 mg/g体重)和最大给药体积(40μL/g体重)的地菍总黄酮混悬液对正常小鼠进行灌胃。24 h内给药2次后连续观察14 d,记录小鼠的存活情况及一般状态,给药14 d后采集小鼠血清并检测谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性及肌酐(Cre)、尿素氮(BUN)含量,计算小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏的质量系数。采用一次性腹腔注射0.160 mg/g体重链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病小鼠模型,验证地菍总黄酮对糖尿病小鼠的保护作用。试验设空白组、模型组、二甲双胍组(0.6 mg/g体重)、地菍总黄酮高剂量、中剂量及低剂量组(1.2、0.8、0.53 mg/g体重),连续给药21 d后,测定各组小鼠空腹血糖(FBG)、体重、采食量、饮水量及24 h尿蛋白含量。地菍总黄酮急性毒性试验结果显示,地菍总黄酮灌胃给药的日最大给药量为11.2 mg/g体重;给药后14 d,与正常组相比,给药组小鼠体重、各脏器质量系数、血清中AST、ALT活性及Cre、BUN含量无显著差异(P0.05)。在验证地菍总黄酮降血糖活性试验中,与模型组相比,地菍总黄酮给药组小鼠FBG、饮水量、采食量显著或极显著降低(P0.05;P0.01)。上述结果证实地菍总黄酮安全性高,未引起试验小鼠明显的急性毒性反应,并可有效降低糖尿病小鼠血糖含量,缓解小鼠糖尿病症状。     

地菍总黄酮对胰岛素抵抗小鼠的干预作用及机制研究

本研究旨在探讨地菍总黄酮（TFMD）对胰岛素抵抗（IR）小鼠的干预作用及其机制。试验以灌胃高脂乳剂建立胰岛素抵抗小鼠模型,同时灌胃给予地菍总黄酮混悬液（高剂量（600 mg/kg）、中剂量（300 mg/kg）及低剂量（150 mg/kg））进行治疗,治疗周期为30 d。试验结束后测定小鼠血清中空腹血清胰岛素（FINS）、空腹血糖（FBG）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、胰岛素敏感指数（ISI）、血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）及高密度脂蛋白（HDL）水平;利用实时荧光定量PCR法检测各组小鼠肝脏中胰岛素受体（InsR）、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ（PPAR-γ）及骨骼肌中葡萄糖转运体4（GLUT4）的mRNA表达水平;利用免疫组化技术检测各组小鼠肝脏中InsR、PPAR-γ和骨骼肌中GLUT4的蛋白表达水平。结果显示,与模型组相比,地菍总黄酮能降低IR小鼠的体重,降低血清FBG、FINS及HOMA-IR水平,升高ISI水平（P<0.01,P<0.05）;降低血清TG、TC及LDL含量,升高HDL含量（P<0.01,P<0.05）;同时提高IR小鼠肝脏中InsR、PPAR-γ及骨骼肌中GLUT4的mRNA表达量,提高小鼠肝脏InsR、PPAR-γ及骨骼肌中GLUT4的蛋白表达水平（P<0.01,P<0.05）。以上试验结果证实,地菍总黄酮能有效缓解小鼠试验性胰岛素抵抗症状,该活性与调节糖脂代谢、增强胰岛素敏感性有关。     

地菍总黄酮对高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝大鼠脂代谢的影响

【目的】探讨地菍总黄酮对高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型大鼠脂代谢的影响。【方法】将60只SPF级雄性大鼠随机分成空白组、模型组、奥利司他组以及地菍总黄酮高、中、低剂量组,每组10只。空白组大鼠饲喂基础饲粮,其余各组饲喂高脂饲粮,奥利他司组给予60 mg/kg奥利他司,地菍总黄酮高、中、低剂量组分别给予750、500、330 mg/kg地菍总黄酮,每天以0.1 mL/10 g灌胃体积给予相应的药物,连续给药42 d,空白组、模型组给予等体积蒸馏水。记录各组大鼠的一般状况,给药结束后检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性及脂联素(ADP)、瘦素(LEP)水平,并统计胰岛素敏感指数(ISI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);检测肝脏组织中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量;油红O染色观察肝脏病理变化;用实时荧光定量PCR和Western blotting方法分别检测各组大鼠肝脏中过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)、脂联素受体2(AdipoR2)、p38的mRNA和蛋白表达量。【结果】与空白组相比,模...     

沙冬青种子总黄酮提取纯化与急性毒性及抗氧化活性研究

本研究旨在探讨沙冬青种子总黄酮的提取纯化、急性毒性和抗氧化活性等特性。采用超声辅助提取法提取纯化沙冬青种子总黄酮,用AlCl_3-CH_4O显色法进行沙冬青种子总黄酮含量测定;对纯化后沙冬青种子总黄酮进行急性毒性试验;采用体外Fenton体系产生羟基自由基(·OH)和邻苯三酚自氧化法产生超氧自由基(O^-_2),检测沙冬青种子总黄酮对·OH和O^-_2的清除作用;测定沙冬青种子总黄酮对衰老小鼠血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。结果显示,沙冬青种子总黄酮含量测定方法的精密度(RSD=0.78%)、重复性(RSD=0.52%)、稳定性(RSD=0.65%)、回收率(99.140%)均在误差范围内,提取纯化后沙冬青种子总黄酮含量达86.780%。沙冬青种子总黄酮属于无毒化合物,并对·OH和O^-_2具有良好的清除能力,在总黄酮作用剂量为1 250μg/mL时,对·OH和O^-_2的清除率分别达96.45%和50.39%。与衰老模型组小鼠相比,沙冬青种子总黄酮可极显著提高小鼠血清SOD活力(P<0.01),其中,在150 mg/(kg·d)总黄酮剂量组,小鼠血清SOD活力高达102.42 U/mL。此外,与衰老模型组小鼠相比,沙冬青种子总黄酮可极显著降低小鼠血清中MDA含量(P<0.01),以150 mg/(kg·d)总黄酮剂量组降低效果最明显。上述结果提示,沙冬青种子总黄酮具有良好的自由基清除能力和抗氧化活性,从而有效改善和提高机体免疫力。     

黄芪总黄酮对小鼠的急性毒性和致突变性研究

用小鼠最大耐受量法、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验等方法,研究黄芪总黄酮对小鼠的急性毒性和致突变性作用。结果显示,黄芪总黄酮的小鼠急性经口最大耐受剂量(MTD)大于15g/kg,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验结果均为阴性。结果表明,黄芪总黄酮属无毒物,对小鼠体细胞、雄性生殖细胞均无致突变性。     

甜荞总黄酮的体外抗氧化活性研究

为了探讨甜养总黄酮提取物体外抗氧化作用,通过DPPH法、改良Smimof法和邻苯三酚自氧化法分别测定甜荞总黄酮化合物清除DPPH·自由基、羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(·O_2~-)的效果。结果表明,在试验的浓度范围内,甜养总黄酮提取物能有效清除DPPH·自由基及超氧阴离子自由基,且随着提取物浓度的升高,其自由基清除能力也显著提高。表明甜荞总黄酮提取物具有较强的体外抗氧化活性。     

地菍粗多糖对高脂饮食诱导肥胖小鼠脂代谢的影响

[目的] 研究地菍粗多糖对高脂饮食诱导肥胖小鼠脂代谢的影响。[方法] 将小鼠随机分为6组：空白组、模型组、阳性组（0.025 mg/g奥利司他）及高、中、低剂量地菍粗多糖（1.2、0.6和0.3 mg/g）处理组,每组12只。空白组小鼠喂食普通维持饲料,其余各组小鼠喂食高脂饲料,空白组、模型组给予生理盐水,阳性组给予0.025 mg/g奥利司他,高、中、低剂量地菍粗多糖组分别给予1.2、0.6和0.3 mg/g地菍粗多糖,每天灌胃1次,连续给药30 d。给药结束,称量小鼠体重、附睾及肾脏周围脂肪和肝脏组织的重量;HE染色法观察脂肪和肝脏病理变化;生化法检测血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）含量及肝脏TC、TG含量;实时荧光定量PCR法测定肝脏中乙酰辅酶A羧化酶1（ACC1）基因相对表达量。[结果] 与模型组相比,高、中剂量地菍粗多糖组小鼠体重、Lee's指数、摄食量、肝脏及附睾和肾脏周围脂肪的重量均显著降低（P<0.05）,低剂量地菍粗多糖组小鼠体重、脂肪重量均无显著变化（P>0.05）,阳性组小鼠摄食量、肝脏重量均无显著变化（P>0.05）;阳性组、高剂量地菍粗多糖组小鼠的脂肪指数均显著降低（P<0.05）;阳性组、高剂量地菍粗多糖组小鼠血清TC、TG、LDL-C及肝脏TC、TG含量均显著降低（P<0.05）,血清HDL-C含量差异不显著（P>0.05）;中剂量地菍粗多糖组小鼠血清TC、TG及肝脏TC含量均显著降低（P<0.05）。阳性组及高、中、低剂量地菍粗多糖组小鼠脂肪细胞均不同程度变小,肝细胞内脂滴小空泡明显减少,且ACC1基因的相对表达量均显著下调（P<0.05）,分别降低了20%、42%、15%和11%。[结论] 地菍粗多糖可通过调节高脂饮食诱导肥胖小鼠的脂代谢水平,从而干预肥胖的发生。     

葡萄叶总黄酮的提取及体外抑菌活性研究

为测定葡萄叶总黄酮体外抑菌活性,采用索氏提取器回流法提取葡萄叶总黄酮;采用K-B琼脂扩散法分别用大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌、枯草芽胞杆菌做抑菌试验;以抑菌效果最明显的金黄色葡萄球菌为指示菌,以总黄酮的提取率及抑菌圈直径为指标,单因素试验筛选葡萄叶总黄酮最佳提取工艺,乙醇浓度750mL/L、料液比1∶40、提取温度70℃、提取时间3.5h,在此提取条件下测得葡萄叶中总黄酮的平均提取率为7.16%;葡萄叶中总黄酮对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌具有较强的抑菌作用,其中对金黄色葡萄球菌抑菌活性最大,而对枯草芽胞杆菌的抑菌作用不太明显。     

乳乃康的急性毒性和抗炎活性研究

为了检验乳乃康混悬液的急性毒性和抗炎活性,试验采用小鼠耳廓肿胀法观察乳乃康混悬液的抗炎效果,采用灌胃和腹腔注射给药的方式进行急性毒性试验。结果表明:乳乃康混悬液对二甲苯所致的小鼠急性耳廓肿胀具有良好的抑制作用,是一种安全的复方制剂,短期给药安全性很高。     

国产黄霉素对畜禽常见病原菌体外抑菌活性及小白鼠急性毒性试验研究

采用杯碟法、试管2倍稀释法及简化寇氏法分别对国产黄霉素进行了畜禽常见病原菌体外抑菌活性和小白鼠急性毒性试验研究。体外抑菌活性试验结果表明,黄霉素对4株不同动物源性的金黄色葡萄球菌均有非常敏感的抑菌作用,抑菌活性明显比喹乙醇强;对猪丹毒杆菌、李氏杆菌、无乳链球菌、停乳链球菌的抑菌活性与喹乙醇相当或各有千秋;但对部分革兰氏阴性菌的抑菌活性明显比喹乙醇弱。小白鼠急性毒性试验结果表明,黄霉素对小白鼠的口服LD50为9310mg/kg,LD50的95%可信限为8953～9678mg/kg,毒性很小,作为抗生素饲料添加剂使用是安全的。     

Study on the Intervention Effect and Mechanism on Insulin Resistant Mice of Total Flavone from Melastoma dodecandrum Lour.

This experiment was conducted to explore the intervention effect and mechanism on insulin resistance (IR) mice of total flavonoids from Melastoma dodecandrum Lour.(TFMD).The model of IR mice was established by intragastric administration of high-fat emulsion,while 600,300 and 150 mg/kg TFMD were administered once daily for 30 days.After the end of the experiment the mices' fasting blood glucose (FBG),fasting serum insulin (FINS),serum total cholesterol(TC),triglyceride (TG),high density lipoprotein(HDL) were determined.The mRNA expression level of liver insulin receptor(InsR),fat peroxisome proliferator-activated receptor-γ(PPAR-γ),and glucose transporter 4 gene (GLUT4) in skeletal muscle were detected by Real-time quantative PCR,and the protein levels were detected by immunohistoche mical method.The results showed that TDMF could reduce the body weight of IR mice,decrease the level of serum FBG,FINS and HOMA-IR,increase the level of ISI,decrease the content of serum TG,TC and LDL,and increase the content of HDL(P<0.01,P<0.05);And the mRNA expression of INSR,PPAR-γ in liver and GLUT4 in skeletal muscle of IR mice were increased(P<0.01,P<0.05),and the protein expression level of InsR,PPAR-γ in liver and GLUT4 in skeletal muscle of IR mice were increased(P<0.01,P<0.05).The results confirmed that the TFMD could relieve experimental insulin resistance in mice,and the activity was related to the regulation of glucose and lipid metabolism and the enhancement of insulin sensitivity.     

不同施肥处理对地菍早期冠层扩展速度的影响

采取正交施肥试验设计研究不同施肥处理对地菍(Melastoma dodecandrum)植株生长早期冠层扩展速度的影响。结果表明,不同施肥量及其配比对地菍单株冠层覆盖面积的扩展速度具有显著影响,而对单株叶面积指数影响不显著;在中等肥力的熟化红土上,种子繁殖的植株在幼苗移栽返青后的3个月内N、P2O5、K2O的最佳配合施用量为5.412、3.513和2.451 g/株,80 d内冠层覆盖面积扩展了5.66~5.91倍。     

Subacute Toxicity Test of the Total Flavonoids of Limonium aureum (L.)Hill.

To evaluate the safety of the total flavonoids of Limonium aureum (L.) Hill.and lay an experimental basis to study the pharmacological effects and clinical safety in the future,80 Wistarrats with same age and body weight were randomly divided into two groups (group Ⅰ,Ⅱ),and every group was divided into the high dose group (HG),medium dose group (MG),low dose group (LG) and control group (CG),respectively,of which the mice were given to the total flavonoids of Limonium aureum (L.) Hill.by gavage at the doses of 15,10 and 5 g/kg while the mice of CG were not given any medicine.The blood sample were collected and experimental indexes were measured at 10 (group Ⅰ) and 21 d (group Ⅱ).The results showed that comparing with CG,the weight gain of rats in MG and LG of group Ⅰhad no significant difference (P>0.05),and that of HG were significantly decreased (P<0.05);The weight gain of rats in LG of group Ⅱ had no significant difference (P>0.05),and that of MG and HG were significantly decreased (P<0.05);Organ indexes of experimental groups had no significant difference with CG (P>0.05);With increasing concentration of the total flavonoids of Limonium aureum (L.) Hill.,there was pathological damage to major organs and white lumps in lung and red bleeder existed in liver of rats in HG when given total flavonoids of Limonium aureum (L.) Hill.for 21 d.The results indicated that total flavonoids of Limonium aureum (L.) Hill.was low toxicity and could be safely used for animals with minding the dose was not too high.     

黄花补血草总黄酮亚急性毒性试验

试验旨在评价黄花补血草总黄酮的安全性,为今后系统研究其药理作用和作为临床安全用药提供试验依据。选取80只1日龄、体重接近的大白鼠,随机分为2大组（Ⅰ、Ⅱ组）,其中每大组分成黄花补血草总黄酮高、中、低剂量组和空白对照组,药物组按照15、10、5 g/kg的剂量灌胃给药,对照组不给药,在给药10（Ⅰ组）、21 d（Ⅱ组）后采血测定试验指标。结果显示,Ⅰ组中、低剂量组的大白鼠体增重与对照组相比差异不显著（P>0.05）,而高剂量组体增重显著低于对照组（P<0.05）。Ⅱ组低剂量组的大白鼠体增重与对照组相比差异不显著（P>0.05）,而中、高剂量组体增重显著低于对照组（P<0.05）;试验组大白鼠的各脏器系数与对照组差异不显著（P>0.05）;在病理解剖过程中发现,随着剂量组浓度的增大,黄花补血草总黄酮对主要器官有一定的病理性损伤,21 d中、高剂量组的肺部组织出现白色肿块,肝脏出现红色出血点。结果表明,黄花补血草总黄酮毒性低,可以安全用于动物,但其剂量不宜过高。     

紫花地丁总黄酮体外抗炎活性研究

试验研究了紫花地丁总黄酮（TFV）对脂多糖（LPS）诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞活力、细胞中炎症介质含量以及相关基因表达的影响,以期探讨其体外抗炎活性的作用。试验采用MTT法筛选出TFV对小鼠RAW264.7巨噬细胞活力具有促进作用的最佳添加浓度;用酶联免疫吸附法（ELISA）检测了TFV对LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞释放到细胞培养液中NO、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）、白介素6（IL-6）含量的影响;运用实时荧光定量PCR法检测了TFV对LPS诱导的炎性小鼠RAW264.7巨噬细胞TNF-α、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和环氧合酶2（COX-2）相对表达水平的影响;研究并分析了TFV的体外抗炎活性。试验结果表明,TFV在5~50 μg/mL浓度范围内能提高小鼠RAW264.7巨噬细胞的活力（P<0.05）;与LPS模型组比较,TFV能显著降低LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞产生NO、TNF-α、IL-6、IL-1β的含量,并能显著降低LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞内TNF-α、COX-2等炎症因子的mRNA表达量（P<0.05）。综上,TFV能显著下调LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞IL-1β、IL-6、TNF-α等细胞因子的释放量和下调TNF-α、COX-2 mRNA的表达量,说明抑制促炎性细胞因子基因的表达可能是实现其抗炎作用的原因之一。     

裂叶荨麻根总黄酮提取工艺优化及抗氧化活性评价

通过单因素及正交试验考察裂叶荨麻根总黄酮的最佳提取工艺,采用分光光度法测定根提取物石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相和水相的总黄酮含量,以DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率和总还原力为指标评价裂叶荨麻根各萃取相的抗氧化活性。结果表明,裂叶荨麻根中总黄酮最佳提取工艺为料液比1∶15,乙醇浓度700mL/L,提取温度60℃,提取时间2h,提取物中总黄酮含量为50.53mg/g;各萃取相总黄酮含量为乙酸乙酯相(70.62 mg/g)>正丁醇相(45.48 mg/g)>水相(18.76 mg/g)>石油醚相(10.23mg/g),抗氧化活性为乙酸乙酯相>正丁醇相>水相>石油醚相,各萃取相抗氧化活性与总黄酮含量呈正相关。说明裂叶荨麻根具有抗氧化活性,乙酸乙酯相及正丁醇相的抗氧化活性作用较好,为将裂叶荨麻开发为抗氧化食品及药品提供了理论依据。     

饲用黄丝藻粉的急性毒性和亚慢性毒性试验

试验旨在通过研究黄丝藻粉对大鼠的急性毒性和亚慢性毒性试验,初步评价其饲用安全性。5 000 mg/kg体重黄丝藻粉灌胃给予Wistar大鼠进行急性毒性试验;黄丝藻粉按0、1 250、2 500、5 000 mg/kg 添加于饲料中饲喂大鼠,进行90 d亚慢性毒性试验。每周称量大鼠体重与饲料消耗,分别于喂养 45、90 d 时剖检,进行血常规和血液生化指标检测,计算脏器系数,并对主要脏器进行组织病理学检查。结果表明,5 000 mg/kg体重黄丝藻粉给予大鼠均未出现死亡,LD₅₀>5 000 mg/kg体重,根据WHO对化学物质的毒性评级,黄丝藻粉属于实际无毒物质。亚慢性毒性试验中,高、中、低剂量黄丝藻粉饲喂大鼠90 d后平均饲料消耗、体增重、脏器系数与对照组相比均无显著差异（P>0.05）。各处理组血常规指标、低剂量组血液生化指标与正常对照组相比均无显著差异（P>0.05）;高、中剂量组除血液总胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）显著低于对照组（P<0.05）外,其他血液生化指标均无显著差异（P>0.05）;高、中剂量组总胆固醇和甘油三酯均在大鼠正常生化指标范围内;解剖及主要脏器HE染色检查均未发现明显变化。试验结果表明,黄丝藻粉属于实际无毒物质;5 000 mg/kg添加剂量喂养大鼠90 d,未观察到明显的有害作用,有望在动物饲料中添加应用。