广西一点红真菌性病害病原鉴定续报

在已报道的一点红真菌性病害病原菌鉴定的基础上,对最新研究和鉴定的真菌性病害病原菌鉴定进行续报,它们分别是枝枯病、菌核病和炭疽病。枝枯病的病原为洋扁豆大褐斑病菌[Diaporthe phaseolorum(Cke.et Ell.)Sacc.],菌核病的病原为核盘菌[Sclerotinia sclerotiorum(Lib.)de Bary],炭疽病的病原为围小丛壳菌(Glomerella cingulata),其无性态为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)。     

辣椒溶杆菌NF87-2防治瓜类蔬菜蔓枯病的研究

由黑腐球壳菌Didymella bryoniae引起的瓜类蔬菜蔓枯病是一种重要真菌土传病害,造成瓜类蔬菜生产上重大的经济损失.本研究以蔓枯病菌DB-20为靶标菌,采用平板对峙培养法,测定了拮抗细菌及其代谢产物对蔓枯病菌菌丝生长和孢子萌发的的室内抑制作用,拮抗细菌和蔓枯病菌同时接种后,测定西瓜种子的发芽率和出苗率,采用盆...     

岗梅枝枯病病原鉴定

为明确引起岗梅Ilex asprella枝枯病的病原,对从广东梅州采集的岗梅枝枯病病部分离的致病菌株Gangmei 2进行了形态学观察,并运用MEGA-X构建了病原菌株rDNA内转录间隔区(internal transcribed spacer, ITS)的系统发育树。结果显示:病原菌的形态学特征与拟盘多毛孢属Pestalotiopsis真菌相似,在系统发育树中该菌株与小孢拟盘多毛孢菌Pestalotiopsis microspora在同一分支上。因此,初步将岗梅枝枯病病原菌鉴定为小孢拟盘多毛孢菌P.microspora。     

茶皱叶病的研究

 茶皱叶病在我省各茶场均有发生,近年来我们采回典型的皱叶病病叶进行电镜观察。经病原鉴定,确定为类细菌(Bacteria Like Organism)。其大小为96.0—312.0nm,壁厚度平均为20.5nm左右。青霉素对茶皱叶病有明显抑制作用。通过菟丝子(Cuscuta campestris Yunck)作媒介,茶皱叶病病原菌能引起长春花(Vin-ca rosea L.)发病。     

茶褐枯病病原菌(Colletotrichum camelliae)生物学特性研究

为构建茶褐枯病病原菌(Colletotrichum camelliae)药剂筛选模型以及研究药剂的作用机理,本文对贵州省余庆县茶褐枯病病原菌(C.camelliae)进行病原生物学特性的研究。结果表明,菌株GZYQ-2016-01可在PDA、OA和MEA培养基上生长,其在PDA上的生长速率显著快于MEA与OA,在MEA和OA上无显著性差异。同时,菌株也可在PDB液体培养基中生长,其快速生长期为24~144h。产孢试验表明,菌株适宜在PDA培养基上产孢。碳素营养和氮素营养均影响菌丝的生长及色素形成,28℃是菌株适宜生长温度,菌株能较好地适应弱酸性条件。菌株在25℃条件下对茶树叶片的致病力显著强于20℃和30℃。     

黄瓜细菌性白枯病病菌检测试纸条的研制

应用胶体金免疫层析技术研制了黄瓜细菌性白枯病病菌[Pseudomonas viridiflava (Burkholder 1930) Dowson1939]检测试纸条.采用柠檬酸三钠法还原氯金酸制备胶体金,标记黄瓜细菌性白枯病病菌多克隆抗体,将金标抗体喷涂在结合垫上,将黄瓜细菌性白枯病病菌抗体和羊抗兔二抗包被在硝酸纤维素膜上作检测线和质控线,组装制成黄瓜细菌性白枯病病菌检测试纸条.用试纸条检测黄瓜细菌性白枯病病菌的结果表明,制备的试纸条特异性好,与其他常见植物病原细菌等无交叉反应,对黄瓜叶片中黄瓜细菌性白枯病病菌的最低检测限为106 cfu/mL,能在5～15 min内快速检测出黄瓜细菌性白枯病病菌,适合田间现场快速检测黄瓜细菌性白枯病病菌.     

江西省国外松枯梢病调查及病原鉴定

连续3年在江西省境内,对松枯梢病的分市、危害及病原菌进行了广泛的调查及病原鉴定。结果证明松枯梢病遍布我省6个地区、10个市及30余个县的火炬松林、湿地松林,从苗木到幼树仍至大树均可发病．发展迅速,危害较严重．已有成片死亡、马尾松发病很轻。该病害病原苗是Diplodiapinea（Desm）Kickx。     

蓝莓枝枯病拮抗细菌HMQAU140045的鉴定和抑真菌活性

以蓝莓毛色二胞枝枯病菌假可可毛色二胞Lasiodiplodia pseudotheobromae为靶标菌,通过稀释平板法从山东青岛的蓝莓种植园根际土壤中分离出20株细菌,采用对峙平板法和菌丝生长速率法筛选得到一株对靶标菌具有明显抑制效果的拮抗菌株HMQAU140045,采用凹玻片法和菌丝生长速率法测定该菌株发酵滤液对靶标菌孢子萌发和菌丝生长的影响。结果表明,稀释50倍的发酵滤液的抑制率可达100%。离体枝条试验结果表明,发酵液不同组分对蓝莓毛色二胞枝枯病的防治效果均可达90%以上。菌丝生长速率法测定结果表明,该菌株抑真菌谱广,对包括4种蓝莓枝枯病菌在内的15种植物病原真菌具有良好的拮抗作用。通过形态观察、生理生化特性以及gyrB的序列分析,确定该菌株为解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens。试验结果表明,解淀粉芽孢杆菌菌株HMQAU140045具有较好的抑真菌活性。     

龟甲冬青枝枯病及其病原菌鉴定

于2002-2005年连续3年观察了杭州龟甲冬青枝枯病的症状,该病害先在嫩枝枝条发病,病斑初为水渍状斑点,后扩大成暗褐色的不规则形病斑。从发病部位分离培养出病原菌,根据其分生孢子的形态、大小和核糖体DNA内转录间隔区的序列,鉴定为褐纹拟茎点霉［Phomopsis vexans (Sacc.et Syd.) Harter］。本文对该病害症状和病原形态特征进行了描述。     

雷竹内生真菌分离及其功能性菌株筛选与鉴定

[目的]从雷竹根部分离其内生真菌并对其纤维素降解、植物病原菌抑制、铅的耐受能力等功能进行初步探究.[方法]采用组织块培养法分离内生真菌,刚果红平板培养基筛选纤维素降解菌,平板对峙法筛选植物病原拮抗菌.[结果]从雷竹根部共分离到35株内生真菌,其中具有纤维素降解功能的有7株;对油茶炭疽病原有抑制作用的有5株,对毛竹枯梢病原有抑制作用的有2株,对猕猴桃果腐病原有抑制作用的有2株;对铅具有强耐受性的有11株.利用形态特征和分子生物学方法对两株具有良好潜在应用价值的内生真菌LZ031、LZ033进行鉴定,分别为腐皮镰刀菌(Fusarium solani)和芦竹节菱孢(Arthrinium arundinis).[结论]雷竹根部具有丰富的内生真菌资源,且内生真菌功能多样,具有潜在的应用价值.     

哈蜜瓜种子带细菌性果斑病菌检测技术的研究

哈蜜瓜细菌性果斑病是世界性的检疫对象之一,主要以种子带菌进行远距离传播,本文通过温室育苗、室内分离和PCR(聚合酶链式反应)技术对哈蜜瓜种子带菌情况和主要带菌部位进行了检验,结果表明:3种方法都可以对种子带菌情况进行检测,分离检测和PCR检测还可以确定种子的带菌部位,PCR技术具有特异性强、灵敏度高、检测时间短等特点.另外检测结果也表明种子带菌以种皮为主,种仁的带菌量较少.     

甘肃省西瓜细菌性果斑病的诊断

对从甘肃采集到的疑似西瓜果斑病的病瓜及种子中分离获得的菌株,通过形态学特征、革兰氏染色、致病性测定以及利用美国Agdia公司的专化型免疫凝聚试剂条测定和16S rDNA分子生物学方法进行了诊断鉴定,结果表明,该菌株符合燕麦噬酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp. citrulli)的特性,因此,确定甘肃省已发生西瓜果斑病,结果为甘肃省有效控制此病提供了依据。     

中华常春藤细菌性叶斑病病原菌的鉴定

 2015年春季在昆明市区绿化带种植的中华常春藤上发现一种由细菌侵染而引起的病害,称为中华常春藤细菌性叶斑病。通过发病症状、菌落形态观察、致病性测定、Biolog分析,16S rDNA序列和核糖体DNA内转录间隔区(internal trans-cribed spacer, ITS )序列分析比较,对昆明地区的常春藤叶斑病病原菌及其系统进化关系进行研究。分离病原菌接种中华常春藤叶片完成科赫法则验证,发病初期在叶片表面形成带有黄色叶晕的不规则褐色斑点,后期叶片边缘形成倒V字型坏死并起皱。将菌株CCT1和CCT6测序结果与现有的黄单胞菌菌株的16S rDNA序列和核糖体DNA的ITS序列构建进化树,结果均显示病原菌与野油菜黄单胞菌的序列相似度最大,属于同一支。研究确定该病原菌为野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)。这是中国首次报道由X. campestris 引起的中华常春藤叶斑病。     

甘蔗赤条病菌巢式PCR检测

甘蔗赤条病是由燕麦食酸菌燕麦亚种(Acidovorax avenae subsp.avenae,Aaa)引起的一种世界性甘蔗细菌病害。为建立Aaa快速、灵敏的检测技术,根据该病菌16S~23S核糖体基因及其转录间隔区ITS分别设计2对特异性引物,建立Aaa巢式PCR检测方法。结果表明,建立的巢式PCR方法对Aaa标准菌株、水稻食酸菌A.oryzae具有特异性,可扩增出454 bp目的条带,对近缘种德氏食酸菌A.delafieldii及其它科属的红色雷夫松氏菌Leifsonia rubra和甘蔗宿根矮化病菌L.xyli subsp.xyli未扩增出任何条带。以感染Aaa的甘蔗叶片总DNA、含ITS靶标片段的质粒DNA标准品及Aaa标准菌液为模板,巢式PCR灵敏度最低检测限分别为10 fg/μL、10拷贝/μL和36 CFU/mL,是常规PCR灵敏度的1 000倍。应用巢式PCR和常规PCR对14份有赤条病症状的田间甘蔗叶片样品进行平行检测,阳性检出率分别为100.0%和28.6%,表明巢式PCR比常规PCR检测方法具有更高的灵敏度。本研究建立的巢式PCR方法适合于田间甘蔗赤条病害的分子检测与鉴定。     

Isolation and genetic characterization of Acidovorax avenae from red stripe infected sugarcane in Northwestern Argentina

Red stripe is a bacterial disease of sugarcane causing important economic losses in Argentina that affects 30 % of the milling stems and consequently the juice quality. In this study, sugarcane leaves exhibiting red stripe symptoms were sampled in the 2008–09 growing season from 13 different sugarcane producing areas of Tucumán and Salta (northwest of Argentina). To achieve the identification and characterization of the causal agent of red stripe, bacterial isolation was performed. Species-specific PCR using Oaf1/Oar1 primers allowed the amplification of a fragment of 550 bp from approximately 50 % of the isolates; 16S rDNA sequences analysis displayed a similarity greater than 99 % with Acidovorax avenae subsp. avenae. By means of RAPD-PCR the presence of at least four different biotypes among the analyzed isolates was detected. Results of pathogenicity test allowed us to confirm A. avenae subsp. avenae as the pathogenic agent for red stripe. This study constitutes the first report on the identification and molecular characterization of this plant pathogen from the Argentina sugarcane production areas. The genetic diversity observed among A. avenae is an important factor to be considered to improve an accurate diagnosis and/or the selection of sugarcane tolerant clones.     

甘肃小麦禾谷孢囊线虫rDNA-ITS和28S rDNA-D2/D3区序列特征及ITS-RFLP分析

禾谷孢囊线虫是危害禾谷类作物的重要病原,严重威胁我国小麦主产区的小麦产量和品质。利用通用引物对甘肃、河南、安徽禾谷孢囊线虫群体28SrDNA-D2/D3区和rDNA-ITS区进行PCR扩增和序列测定,利用UPG-MA方法分析了甘肃省7个种群、河南1个种群、安徽1个种群的禾谷孢囊线虫群体D2/D3区和ITS区的系统发育关系;用9种限制性内切酶对7个甘肃禾谷孢囊线虫群体的rDNA-ITS区进行了RFLP分析。结果表明:中国甘肃的禾谷孢囊线虫rDNA-D2/D3区片段长度约为780bp,rDNA-ITS片段长度约为1040bp。7个甘肃禾谷孢囊线虫群体、1个河南安阳群体、1个安徽蚌埠群体的D2/D3区和新西兰的H.aucklandica群体亲缘关系很近;其ITS区同澳大利亚的H.australis、北京通州的H.avenae(AY148382)的亲缘关系很接近。RFLP分析表明,9种限制性内切酶酶切禾谷孢囊线虫群体的rDNA-ITS共产生了22个酶切片段,不同酶切的RFLP分布型在7个种群间没有差异。甘肃省禾谷孢囊线虫群体的rDNA-ITS区具有高度的保守性,与中国的C型群体相近,但不同于欧洲的A型群体和印度的B型群体。这是首次报道甘肃CCN种群分子特征。     

应用蛋白宏阵列快速检测西瓜细菌性果斑病菌

蛋白阵列(Protein array)也叫蛋白芯片,是生物芯片(Biochip)的一种,主要利用抗原/抗体可特异性结合原理制备而成。按阵列样点大小,蛋白阵列又可分为微阵列(Microarray)和宏阵列(Mac-roarray)两类。微阵列集成度极高,可进行高通量     

利用GICA-PCR快速检测瓜类果斑病菌

瓜类果斑病菌(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)是瓜类作物上重要的病原细菌,为我国进境植物检疫性有害生物。胶体金免疫层析试纸条方便快捷,应用广泛。该方法使用不当会出现假阳性问题,仅适用于病原菌的初筛检测。本研究将Aac胶体金免疫层析方法(GICA)与PCR技术相结合,建立了GICA-PCR检测方法。检测结果表明,该方法在蛋白与核酸2个层面上从发病西瓜叶片上检测到瓜类果斑病菌,有效解决了试纸条检测的假阳性问题,提高了瓜类果斑病菌检测的准确性,值得推广应用。     

广西南宁甘蔗赤条病调查及分子检测

2020年在广西南宁市金光农场发现'桂糖58'和'柳城05-136'疑似感染甘蔗赤条病,为明确其病原,本研究对不同甘蔗品种进行了发病率调查,并采集病样进行了PCR检测分析.田间调查结果表明:不同品种自然发病率不同,'桂糖58'发病率为29％～52.33％,发病严重田块平均发病率为49.67％,发病中等田块平均发病率为3...     

甜瓜细菌性果斑病菌致病性突变体筛选与hrcR基因的克隆

 细菌性果斑病(Bacterial Fruit Blotch,BFB)是西瓜和甜瓜的重要病害。本实验从发病甜瓜果实上分离得到致病菌株MH21,经鉴定为燕麦食酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp. citrulli)。利用转座子Mini-Tn5构建MH21菌株的突变体库,Southern印迹杂交结果显示Mini-Tn5在菌株MH21染色体上可随机、单拷贝插入。通过浸种处理甜瓜种子进行突变体的致病性检查,筛选得到1株致病性完全丧失的突变体M543。对M543中转座子插入基因的克隆和测序表明其突变基因为燕麦食酸菌Ⅲ型分泌系统(TTSS)中的保守基因hrcR。推测菌株MH21中hrcR基因编码的蛋白定位于细菌内膜,是分泌通道主要成分之一。hrcR基因互补菌株的致病性检查结果显示其致病力恢复到野生型的84%。研究同时发现hrcR基因突变后MH21菌株丧失了在烟草上诱导过敏性坏死反应的能力。本研究从遗传学角度说明TTSS是西甜瓜果斑病菌致病性的重要因子。