中草药泰山磐石散加减方对小鼠肠道微生物菌群的影响

为了解中草药泰山磐石散加减方对小鼠肠道微生物菌群的影响,本试验选取45只SPF级昆明小鼠,分为对照A组、试验B组和试验C组。试验B组和C组小鼠分别用0.86 g/mL的中草药泰山磐石散方灌胃0.3和0.4 mL,对照A组灌胃蒸馏水0.4 mL,每天灌胃2次,间隔8 h,连续7 d。第8天采集对照组和试验组小鼠直肠部位粪便样品,从每份样品中提取微生物基因组总DNA,采用Illumina HiSeq测序技术检测样品微生物群落多样性。结果显示,中草药泰山磐石散对小鼠粪便中微生物α多样性指数(Chao1和Shannon)呈波动性变化,试验B和C组与对照A组的Chao1指数差异极显著(P0.01);通过检测小鼠对照组与试验组粪便中的微生物,在门水平上,有9大优势菌门,其中与对照A组相比,试验组肠道微生物Proteobacteria、Verrucomicrobia丰度显著降低(P0.05);而Saccharibacteria、Tenericutes丰度显著或极显著增加(P0.05;P0.01);在科水平上,有19大优势菌科,其中与对照组相比,试验组肠道微生物Lactobacillaceae、Desulfovibrionaceae、Coriobacteriaceae、Porphyromonadaceae、Family_XIII和Bifidobacteriaceae丰度显著降低(P0.05);在属水平上,有18大优势菌属,其中与对照A组相比,试验B、C组肠道微生物Lactobacillus、Desulfovibrio和Enterorhabdus丰度显著降低(P0.05),而试验C组的肠道微生物Alloprevotella、Bacteroides、Lachnospiraceae_UCG-006和Faecalibaculum丰度显著增加(P0.05)。本试验中草药泰山磐石散加减方能够有选择性的促进小鼠肠道内Bacteroidetes的生长,从而抑制Proteobacteria有害菌的生长,增强糖和脂肪代谢,最终通过改善肠道微生物多样性的结构,使整个肠道微生物多样性达到一个新的平衡。     

香芹酚和百里香酚对断奶仔猪结肠微生物的影响研究

试验旨在研究日粮添加香芹酚和百里香酚对断奶仔猪结肠微生物群落结构和代谢通路的影响。选取28日龄、体重8.5 kg±1.0 kg断奶仔猪64头,随机分为4组,每组16个重复,每个重复1头猪。A组（对照组）饲喂基础日粮＋抗生素,B组饲喂基础日粮＋20 g/t香芹酚,C组饲喂基础日粮＋20 g/t百里香酚,D组饲喂基础日粮＋20 g/t香芹酚-百里香酚混合物（质量比2：1）。试验期30 d。基于Illumina HiSeq测序平台,利用双末端测序（Paired-End）的方法进行测序。通过对OTUs聚类,进行物种注释及丰度分析;进一步进行α多样性、β多样性分析及显著物种差异分析和功能基因预测分析。结果显示：①各试验组结肠微生物多样性均显著高于对照组（P<0.05）;②D组结肠中厚壁菌门（Firmicutes）相对丰度极显著高于对照组（P<0.01）,显著高于B和C组（P<0.05）,拟杆菌门（Bacteroidetes）相对丰度显著高于对照组和C组（P<0.05）,Epsilonbacteraeota、螺旋体门（Spirochaetes）、变形菌门（Proteobacteria）相对丰度极显著低于对照组（P<0.01）。D组结肠中弯曲杆菌属（Campylobacter）相对丰度极显著低于对照组（P<0.01）,D组理研菌科RC9肠道群（Rikenellaceae_RC9_gut_group）相对丰度显著高于B组（P<0.05）,D组罗斯氏菌属（Roseburia）相对丰度极显著高于对照组（P<0.01）,D组螺杆菌属（Helicobacter）相对丰度极显著低于对照组（P<0.01）;③D组结肠微生物脂质代谢水平极显著高于对照组（P<0.01）,结肠微生物碳水化合物代谢、其他次生代谢物的生物合成和其他氨基酸代谢水平显著高于对照组（P<0.05）,结肠微生物能量代谢水平极显著低于对照组（P<0.01）。综上,在本试验条件下,断奶仔猪日粮中添加20 g/t的香芹酚-百里香酚混合物,改善了断奶仔猪结肠微生物群落结构,结肠中有益菌的相对丰度提高,有害菌的相对丰度降低,促进了结肠微生物的代谢功能。     

复合维生素B对生长期山羊后段肠道菌群组成及肠黏膜的影响

本试验旨在研究日粮中添加复合维生素B对生长期山羊消化道微生物组成和肠黏膜结构的影响。试验选取10只4月龄波杂雌山羊（12.60±1.28） kg，随机分为对照组（control，CON）和复合维生素B处理组（vitamin B，VB），CON组饲喂基础日粮（n=5），VB组在基础日粮中添加复合维生素B（n=5），预饲期2周，试验期11周，试验期间自由饮水。试验结束后屠宰采样，16S rRNA测序分析盲肠和结肠内容物微生物组成，检测肠道上皮组织形态结构和相关基因与蛋白的表达。通过菌群分类学分析发现，与CON相比，VB组山羊盲肠和结肠内容物菌群的α多样性指数无显著变化（P>0.05）；在门水平上，盲肠和结肠内容物菌群中厚壁菌门（Firmicutes）和拟杆菌门（Bacteroidetes）为优势菌门，VB组盲肠拟杆菌门丰度有升高趋势（0.05<P<0.1），而螺旋菌门（Spirochaetes）丰度有降低趋势（0.05<P<0.1）；在目水平上，VB组盲肠Solirubrobacterales和Streptomycetales目菌群丰度显著下降（P<0.05）；在科水平上，VB组盲肠Christensenellaceae、Streptomycetaceae、Solirubrobacteraceae及结肠Christensenellaceae科菌群丰度显著下降（P<0.05）；在属水平上，VB组盲肠Lachnoclostridium属菌群丰度显著升高（P<0.05），盲肠Bacillus、Nocardioides及结肠unidentified_Christensenellaceae和unidentified_Gammaproteobacteria属菌群丰度显著下降（P<0.05）。与CON相比，VB组山羊空肠绒毛高度（P<0.01）、隐窝深度（P<0.05）和绒毛高度/隐窝深度（V/C，P<0.05）均显著增加；回肠隐窝深度显著降低（P<0.05），绒毛高度和V/C无显著变化（P>0.05）。实时荧光定量PCR结果显示，与CON相比，VB 组山羊盲肠上皮紧密连接和细胞增殖相关基因的表达均无显著变化（P>0.05）；而结肠黏膜上皮Occludin（P<0.05）、EGFR（P<0.01）、MIK67（P<0.05）和CCND（P<0.05）基因表达均显著上调；且VB组ZO-1蛋白表达显著上调（P<0.05）。综上表明，日粮中添加复合维生素B对生长期山羊肠道菌群多样性无显著影响，但可提高肠道中有益菌的丰度且降低有害菌的丰度，从而促进肠道绒毛的生长及紧密连接蛋白的表达，对山羊肠道健康和生长具有积极作用。     

核桃青皮水提物对肉鸡肠道微生物菌群结构的影响

试验旨在研究核桃青皮水提物对肉鸡肠道微生物菌群丰度和多样性的影响,初步揭示核桃青皮水提物对肉鸡肠道微生物菌群结构的影响。选取240只1日龄本地土杂鸡,随机分为2组,1个对照组和1个试验组,每个组设4个重复,每个重复30只。试验组于28日龄开始在饮水中添加核桃青皮水提物,6周后,每个重复采集10份肉鸡肛门棉拭子,利用Illumina Miseq测序平台对微生物16S rDNA V3-V4区扩增产物进行双端测序,分析微生物群落结构多样性。高通量测序结果显示,所有样本共含有个17菌门和48个菌属;多样性指数分析结果表明,饲喂核桃青皮水提物的肉鸡肠道菌群丰富度增加。从门水平分析,厚壁菌门（Firmicutes）丰度升高了2.21%（P > 0.05）,变形杆菌门（Proteobacteria）丰度降低了2.22%（P > 0.05）;从属水平上分析,大肠杆菌属（Escherichia）丰度降低了5.35%（P < 0.05）,肠球菌属（Enterococcus）丰度升高了9.63%（P < 0.05）。本研究结果表明,饲喂核桃青皮水提物后肉鸡肠道菌群多样性显著增加（P < 0.05）,据此推测,核桃青皮水提物能有效调节肉鸡肠道菌群并有益于肠道健康。     

育肥猪粪便菌群结构及其与生长速度的相关性分析

【目的】 研究育肥猪的生长速度与粪便微生物之间的作用关系，寻找与猪生长速度相关的微生物菌群。【方法】 选取50头出生重相近的仔猪，在相同饲养环境中进行饲养管理，生病猪及时转出试验组，125日龄时按体重由高到低排序，把体重最高和最低的4头猪分别分为体重高（51.30 kg±2.57 kg，HW）、低（36.90 kg±2.50 kg，LW）组，通过16S rRNA测序，对125日龄生长育肥猪的粪便微生物区系多样性、群落组成及与生长速度的关联性进行分析。【结果】 Alpha多样性分析显示，两组间均无显著差异（P>0.05）。主成分分析结果显示，HW和LW组中能够明显区分菌群结构。粪便微生物结构组成分析表明，HW和LW组的优势菌门均为厚壁菌门、拟杆菌门和螺旋体门，优势菌属为密螺旋体属、乳杆菌属、链球菌属和未被培养菌属Muribaculaceae菌。LW组中拟杆菌门丰度极显著高于HW组（P<0.01），纤维杆菌门丰度显著高于HW组（P<0.05），而髌骨细菌门丰度显著低于HW组（P<0.05）。对粪便微生物结构组成进行差异分析发现，HW组检测到16个特有菌门，LW组检测到1个特有菌门和24个特有菌属。将肠道菌群与生长速度进行相关性分析，共发现10个菌门，18个属与体重（BW）和平均日增重（ADG）呈正相关，7个菌门和12个属与BW和ADG呈负相关。【结论】 相同日龄不同生长速度的猪粪便微生物的区系结构存在显著差异，差异菌群可能对猪的生长速度起到了一定的调控作用，本研究结果为研发益生菌和提高猪生长速度提供了参考依据。     

两种无抗制剂对育肥猪生长性能及肠道健康的影响

本试验通过在生长育肥猪饲粮中添加两种不同的无抗制剂,探究其对育肥猪生长及肠道健康的影响。选取体重为（85.95±3.48） kg的LDY三元杂交猪60头,分为对照组、试验1、2组,每组5个重复,每个重复4头猪（阉公猪和母猪各半）。对照组饲喂基础饲粮,试验1组在基础饲粮中添加0.5%的红曲合生元酵母硒锗复合制剂,试验2组在基础饲粮中添加0.5%的复方中药提取物。结果表明：①3组间生长性能各项指标均差异不显著（P>0.05）。②与对照组相比,试验1组空肠的绒毛高度（VH）、绒毛高度/隐窝深度（V/C）以及回肠的绒毛高度均显著增加（P<0.05）,试验2组空肠和回肠的绒毛高度均显著增加（P<0.05）;试验1组空肠和回肠的绒毛高度显著高于试验2组（P<0.05）。③与对照组相比,试验1和2组盲肠菌群香浓指数均显著升高（P<0.05）、辛普森指数均显著降低（P<0.05）;试验1组的香浓指数显著高于试验2组（P<0.05）。④在门水平上,与对照组相比,试验1组盲肠菌群变形菌门和放线菌门丰度均显著升高（P<0.05）,厚壁菌门丰度显著降低（P<0.05）;试验2组厚壁菌门和变形菌门丰度显著升高（P<0.05）,拟杆菌门丰度显著降低（P<0.05）;试验1组放线菌门丰度显著高于试验2组（P<0.05）,厚壁菌门丰度显著低于试验2组（P<0.05）。在属水平上,与对照组相比,试验1组链球菌属丰度显著升高（P<0.05）,苏黎世杆菌属、uncultured_bacterium_f_Muribaculaceae和乳杆菌属丰度显著降低（P<0.05）;试验2组瘤胃菌属和链球菌属丰度显著升高（P<0.05）,苏黎世杆菌属、梭菌属_13、乳杆菌属丰度显著降低（P<0.05）;试验1组梭菌属_13和链球菌属丰度显著高于试验2组（P<0.05）,试验1组uncultured_bacterium_f_Muribaculaceae、瘤胃菌属显著低于试验2组（P<0.05）。⑤试验1组Occludin、Zo-1、Claudin-1表达量显著高于对照组（P<0.05）,Occludin、Claudin-1表达量显著高于试验2组（P<0.05）。以上结果表明,红曲合生元酵母硒锗复合制剂和复方中药提取物对育肥猪肠道健康均有改善作用,但红曲合生元酵母硒锗复合制剂组饲喂效果优于复方中药提取物组。     

硫酸化酵母葡聚糖对鸡球虫病的防治效果

旨在探讨硫酸化酵母葡聚糖（sGSC）对人工感染鸡柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）病的防治效果。采用笼饲法，将200只鸡随机分为A组（4 mg·kg^-1）、B组（16 mg·kg^-1）、C组（64 mg·kg^-1）、D组（感染对照组）和E组（健康对照组）。感染球虫前3 d开始，给A、B、C组鸡每天按体重饮水喂上述各浓度的sGSC，给D、E组的鸡喂纯水（RO水），持续至试验结束。试验过程中观察各组鸡的临床症状、血便情况并记录，收集感染后5～6 d的粪便，检测每克粪便中的卵囊数，感染后第7天剖杀所有鸡，计算脏器指数；并通过Illumina测序平台研究鸡盲肠内微生物群落多样性。结果显示：1）与D组比较，各给糖组鸡的盲肠肿胀明显减轻，肠内容物和出血明显减少，与E组鸡体重相比，A、D组体重明显降低（P<0.05），但B组和C组鸡的体重升高至接近E组水平，体重与E组鸡无显著差异（P>0.05）；B组和C组鸡排出的卵囊数与D组相比，出现了明显的减少，但无统计学差异（P>0.05）；A组鸡的胸腺指数明显增加（P<0.05），肝指数也出现显著改善（P<0.05）；2）对盲肠内菌群分析发现，sGSC能提高盲肠内韦荣氏菌科（Veillonellaceae）和乳酸杆菌科（Lactobacillaceae）的相对丰度，降低肠球菌科（Enterococcaceae）的相对丰度。sGSC能减轻柔嫩艾美尔球虫感染对鸡造成的危害，且随着sGSC剂量的增加，效果越明显。综上表明，sGSC具有一定的抗球虫效果，并且对感染球虫鸡肠道内的菌群具有有益的调节作用。     

复合微生态制剂对断奶仔猪生长性能、免疫机能及盲肠菌群结构的影响

【目的】 探讨复合微生态制剂在断奶仔猪饲料中的添加比例及其替代抗生素后对仔猪的影响。【方法】 选取80头日龄（28 d±2 d）、体重（9.31 kg±0.52 kg）接近,健康状况良好的三元杂交断奶仔猪（杜×长×大）,随机分为5组,每组4个重复,每个重复4头仔猪（公母各半）。对照组饲喂基础饲粮;低、中、高剂量复合微生态制剂组（LOW、MED和HIG）分别在基础饲粮中添加0.1%、0.2%、0.3%复合微生态制剂（活菌数分别为1×10¹¹、2×10¹¹、3×10¹¹ CFU/kg）;抗生素组（ANT）在基础饲粮中添加75 mg/kg金霉素。试验期为28 d。记录试验仔猪初始体重、终末体重、腹泻及采食情况。试验第28天采集仔猪前腔静脉血,测定血清生化指标和免疫指标;采集盲肠内容物,利用16S rRNA测序技术分析肠道菌群变化。【结果】 与对照组相比,①MED组的平均日增重（ADG）和平均日采食量（ADFI）均显著上升（P<0.05）,且与ANT组没有显著差异（P>0.05）;MED和HIG组的料重比（F/G）均显著降低（P<0.05）,且与ANT组没有显著差异（P>0.05）;LOW和MED组的腹泻率均显著降低（P<0.05）且与ANT组没有显著差异（P>0.05）。②MED和HIG组仔猪胸腺指数及MED组脾脏指数均显著上升（P<0.05）。MED组胸腺指数和脾脏指数均显著高于ANT组（P<0.05）。③LOW、MED和HIG组血清高密度脂蛋白（HDL）含量显著上升（P<0.05）,MED和ANT组的白蛋白（ALB）含量显著上升（P<0.05）,LOW、MED和ANT组的天门冬氨基酸转移酶（AST）活性均显著降低（P<0.05）。④LOW和MED组血清免疫球蛋白G （IgG）含量显著升高（P<0.05）;MED和ANT组血清免疫球蛋白A （IgA）和免疫球蛋白M （IgM）含量均显著升高（P<0.05）,且与ANT组没有显著差异（P>0.05）。⑤LOW、MED和ANT组仔猪盲肠菌群厚壁菌门（Firmicutes）相对丰度显著升高（P<0.05）,LOW和ANT组普雷沃氏菌属_1（Prevotella_1）相对丰度显著下降（P<0.05）;HIG和ANT组变形菌门（Proteobacteria）相对丰度显著下降（P<0.05）;LOW、MED、HIG和ANT组理研菌科（Rikenellaceae）和弯曲杆菌属（Campylobacter）相对丰度显著下降（P<0.05）,而乳杆菌科（Lactobacillaceae）、乳杆菌属（Lactobacillus）相对丰度显著上升（P<0.05）;HIG组拟普雷沃菌属（Alloprevotella）相对丰度显著上升（P<0.05）;MED、HIG和ANT组毛螺菌属（Lachnospira）相对丰度显著下降（P<0.05）;LOW、HIG和ANT组粪杆菌属（Faecalibacterium）相对丰度显著上升（P<0.05）。相较于对照组和抗生素组,LOW和HIG组假单胞菌科（Pseudomonadaceae）相对丰度显著下降（P<0.05）,LOW组瘤胃菌科（Ruminococcaceae）相对丰度显著上升（P<0.05）。【结论】 饲粮中添加复合微生态制剂能够改善断奶仔猪的生长性能和免疫机能,改善盲肠微生物的菌群丰度,降低肠道致病菌的丰度,降低腹泻率,其中添加0.2%复合微生态制剂（活菌数为2×10¹¹ CFU/kg）的效果较好,能达到与添加抗生素相似的饲喂效果。     

基于网络药理学联合16S rDNA高通量测序技术分析丹参对感染大肠杆菌小鼠肠道菌群的影响

本研究旨在通过网络药理学联合16S rDNA高通量测序技术分析丹参对感染大肠杆菌小鼠肠道菌群的影响。利用传统中药系统药理学数据库和分析平台（TCMSP）筛选丹参有效成分及靶点基因。使用基因数据库（Genecards）获得E.coli靶点基因。两者靶点基因取交集,通过STRING平台进行蛋白质相互作用分析,构建PPI网络,并运用Cytoscape 3.8.2软件构建“丹参活性成分-潜在作用靶点”网络。利用DAVID在线工具进行基因本体论（GO）功能富集分析,Metascape数据库进行京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。试验选用110只雄性昆明小鼠,随机分为对照组、大肠杆菌组和低、中、高剂量丹参大肠杆菌感染组,每组22只。连续灌胃丹参液28 d后,用E.coli O₁₀₁进行腹腔注射,对照组注射无菌生理盐水,观察24 h后,收集各组粪便。应用16S rDNA高通量测序技术对各组小鼠肠道菌群进行分析。结果显示：1）网络药理学丹参有效成分36个,作用靶点669个,Genecards数据库搜索E.coli靶点8 902个,对两者取交集去除孤立点获得丹参治疗E.coli潜在靶点51个;GO、KEGG分析,获得关键靶点18个、关键通路47条,其中生物过程（BP）、分子功能（MF）和细胞成分（CC）各为174、76、45条;2）通过Illumina Miseq测序共获得950 855条有效序列,2 537个操作分类单元（OTUs）;3） Alpha多样性分析结果表明,不同剂量丹参组肠道菌群多样性与对照组具有显著差异,大肠杆菌组肠道菌群多样性显著低于对照组（P<0.05）;4）相比于大肠杆菌感染组,在门水平上,低、中、高剂量丹参大肠杆菌感染组Bacteroidetes （拟杆菌门）丰度极显著增高（P<0.01）,Firmicutes （厚壁菌门）丰度显著增高（P<0.05）,Proteobacteria （变形菌门）极显著降低（P<0.01）,在属水平上Bacteroides（拟杆菌属）丰度极显著增高（P<0.01）;5）基于LEfSe分析,对照组、大肠杆菌感染组、丹参高剂量大肠杆菌感染组共发现14种显著差异菌群;6） PICRUSt功能预测分析发现,丹参对大肠杆菌感染小鼠肠道菌群调节功能主要富集的途径是氨基酸、碳水化合物运输与代谢,翻译、核糖体结构和生物转化,细胞壁/膜/生物合成等方面。综上,基于网络药理学联合16S rDNA高通量测序技术全面揭示了丹参多成分、多靶点、多途径调节相关菌群生物丰富度,对大肠杆菌感染小鼠的肠道菌群紊乱有缓解作用,为临床应用丹参治疗大肠杆菌感染提供理论依据。     

丁酸梭菌对肉鸡肠道短链脂肪酸含量和菌群多样性的影响

【目的】 探究丁酸梭菌在肉鸡消化道内的定植能力以及丁酸梭菌对肉鸡肠道短链脂肪酸含量和菌群多样性的影响。【方法】 选择90只健康状况良好的1日龄爱拔益加肉鸡,随机均分为空白组和丁酸梭菌组,每组3个重复,每个重复15只鸡。空白组灌喂生理盐水,丁酸梭菌组灌服荧光标记的丁酸梭菌,3 h及16日龄进行解剖并采集回肠上皮细胞观察荧光情况。随后另外选择30只健康状况良好的1日龄雏鸡,随机分为对照组和试验组,试验组1~6 d饲喂含丁酸梭菌的饲粮,之后饲喂基础饲粮,对照组全程饲喂基础饲粮,试验期21 d。在16和21日龄时,分别采集回肠和盲肠中段内容物,测定乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、己酸和总短链脂肪酸含量,并进行微生物种类、物种丰度比例、菌属以及蛋白功能丰度等差异分析。【结果】 3 h及16日龄丁酸梭菌组回肠上皮细胞周围均呈现出荧光现象,表明丁酸梭菌能够定植于消化道上皮细胞。短链脂肪酸含量测定结果显示,与对照组相比,在肉鸡回肠内容物中,试验组16日龄乙酸、丙酸、异丁酸、异戊酸和戊酸含量均极显著增加（P<0.01）;21日龄丙酸、异戊酸和戊酸含量均极显著增加（P<0.01）,乙酸、异丁酸和总短链脂肪酸含量均显著增加（P<0.05）;在盲肠内容物中,试验组16日龄肉鸡丁酸和戊酸含量均极显著增加（P<0.01）,异戊酸和己酸含量显著增加（P<0.05）;21日龄丁酸和异戊酸均极显著增加（P<0.01）,乙酸、异丁酸、己酸和总短链脂肪酸均显著增加（P<0.05）。门水平上微生物种类分析发现,16日龄样本中厚壁菌门为优势菌群,丰度最高;21日龄样本中微生物种类增多,其中变形菌门、厚壁菌门和拟杆菌门为优势菌群,丰度较高,16和21日龄试验组的优势菌群均高于对照组。物种丰度比例分析结果显示,与对照组相比,16日龄试验组厌氧菌属的物种丰度比例显著增加（P<0.05）,而去氟球菌属、丛毛单胞菌属、肠杆菌属等7种菌属的物种丰度比例显著降低（P<0.05）;21日龄试验组铁杆菌属、毛球菌属等6种菌属的物种丰度比例显著增加（P<0.05）,变形菌属、浮霉菌属、装甲菌门GP5的物种丰度属显著降低（P<0.05）。菌属差异分析结果显示,16日龄试验组起重要作用的微生物是布劳特氏菌属,对照组起重要作用的微生物是梭状芽孢杆菌属和未分类毛螺旋菌属;21日龄试验组起重要作用的微生物是未分类拟杆菌、毛球菌属、乳酸杆菌目、乳球菌属等,对照组起重要作用的微生物是诺兰克酸杆菌GP4、丛毛单胞菌科等。菌群蛋白功能丰度分析结果显示,16日龄试验组甲基受体趋化性蛋白、谷胱甘肽S-转移酶、氨基酸转移酶亚基A的丰度均高于对照组,21日龄试验组ECF亚家族RNA聚合酶δ-70因子、丙氨酸的丰度均高于对照组。【结论】 丁酸梭菌可以在肉鸡回肠上皮细胞中定植;丁酸梭菌可增加肠道内容物中短链脂肪酸含量、微生物种类及有益菌属,提高物种丰度及功能蛋白丰度,从而促进肠道功能发挥。     

中草药复方防治雏鸡沙门氏菌病的研究

为了探明中草药复方对雏鸡感染肠炎沙门氏菌（S. Enteritidis）的防治效果,本研究选取黄连、鹿蹄草、白头翁等23味中草药组成的复方中草药制剂进行体外和体内抑菌试验。体外抑菌试验中草药复方的抑菌直径为17.4 mm,说明沙门氏菌对其高度敏感。体内抑菌试验中,将中草药复方以低（0.1%）、中（0.3%）、高（0.5%）3个剂量进行治疗试验,结果表明,肠炎沙门氏菌感染后,与对照组相比,3个试验组均极显著提高了试验鸡的成活率（P<0.01）,显著降低了试验鸡的料重比（F/G）（P<0.05）,中、高剂量组的平均日增重（ADG）显著高于对照组（P<0.05）,中剂量组的平均日采食量（ADFI）显著低于对照组（P<0.05）。3个试验组试验鸡的脾脏指数、白细胞数量（WBC）、血小板计数（PLT）、免疫球蛋白A（IgA）、IgG、IgM、补体C4含量均显著低于对照组（P<0.05）,而胸腺指数、法氏囊指数、红细胞数量（RBC）、血红蛋白浓度（HGB）、红细胞压积（HCT）均显著高于对照组（P<0.05）。实时荧光定量PCR结果显示,抗菌肽基因（CATH1、CATH2、CATH3）在脾脏、胸腺和法氏囊中的表达量均不同程度地高于对照组。综合试验结果,日粮中添加中草药复方可以降低雏鸡感染肠炎沙门氏菌后的死亡率,提高雏鸡的免疫能力和抗菌能力,改善生长性能,其中,中剂量组（0.3%）的防治效果最佳。     

诱导发情对绒山羊非繁殖季节产羔和血清指标的影响

为研究中草药集中催情和孕马血清促性腺激素（PMSG）外源诱导对非繁殖季节内蒙古绒山羊产羔和血清指标的影响,选取体重相近的内蒙古绒山羊272只,分为中草药试验Ⅰ组（112只）、激素试验Ⅱ组（100只）和对照组（60只）,试验Ⅰ组饲喂中草药,每次50 g/只,发情前7 d开始饲喂,每2 d饲喂1次,共3次;试验Ⅱ组海绵栓+PMSG 250 IU/只;对照组正常饲养。在试验结束后第2天早饲前各组选择5只羊颈静脉采血,测定并分析血清中生理生化指标及生殖激素含量的变化。结果显示,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组绒山羊的发情率、产羔率和双羔率极显著高于对照组（P<0.01）,试验Ⅱ组的产羔率和双羔率极显著高于试验Ⅰ组（P<0.01）,发情率显著高于试验Ⅰ组（P<0.05）。试验Ⅱ组绒山羊血清总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素氮（UREA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）含量显著高于试验Ⅰ组和对照组（P<0.05）,试验Ⅰ组绒山羊丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性显著高于试验Ⅱ组和对照组（P<0.05）;试验Ⅱ组血清促卵泡素（FSH）、雌二醇（E₂）和促黄体素（LH）含量显著高于对照组（P<0.05）,孕酮（P₄）、睾酮（T）在三组之间差异均不显著（P>0.05）,试验Ⅰ组生殖激素指标与对照组差异均不显著（P>0.05）。对激素和抗氧化酶的相关性分析显示,试验Ⅰ组绒山羊血清P₄含量与GSH-Px含量呈显著负相关（P<0.05）,其相关系数为-0.594,试验Ⅱ组绒山羊血清LH含量与GSH-Px含量呈极显著正相关（P<0.01）,其相关系数为0.757。本研究结果表明,中草药和激素处理均可极显著促进内蒙古绒山羊在非繁殖季节集中发情,并提高产羔率。激素处理可提高非繁殖季节内蒙古绒山羊对蛋白质的消化利用程度和抗氧化功能,中草药处理可提高血清SOD活性;分析认为GSH-Px与P₄之间存在显著颉颃作用,GSH-Px与LH之间存在极显著协同作用。     

中草药对断奶仔猪生长性能影响的Meta分析

利用Meta分析方法对已发表的中草药在断奶仔猪阶段应用试验研究进行评价,为断奶仔猪保健治疗提供参考。通过计算机检索CNKI、Wanfang Data、Science Direct、Web of Science、VIP数据库,全面收集中草药在断奶仔猪阶段添加的对照试验。采用Cochrane协作网推荐的Review Manager 5.3软件对各效应指标进行Meta分析。共纳入27篇文献,1 870头仔猪,试验组935头,对照组935头,试验组均采用中药治疗,对照组采用金霉素、硫酸黏杆菌素、硫酸黏杆菌素+杆菌肽锌等抗生素治疗。结果显示：中药组对日增重的影响优于整体抗生素组[SMD=1.22,95% CI（0.69~1.75）,P<0.01],但与金霉素组统计学无差异（P>0.05）;中药组日采食量优于整体抗生素组[SMD=0.77,95% CI（0.34~1.20）,P<0.01],但与金霉素组作用相当（P=0.05）;中药组和抗生素组的料重比差异不显著[SMD=-0.35,95% CI（-0.78~0.09）,P=0.12>0.05],但显著优于硫酸黏杆菌素和金霉素亚组（P<0.01）;中药组的腹泻率极显著低于抗生素组{SMD=-1.77,95% CI[-2.52~（-1.01）],P<0.01},但与硫酸黏杆菌素+杆菌肽锌组相比,效果相当（P>0.05）。仔猪断奶阶段添加中草药,在日增重、日采食量、腹泻率指标上优于抗生素组,即中药在断奶仔猪阶段研究具有重要潜力。     

三味清热类中药水提物对肉仔鸡肠道菌群和黏膜屏障功能的影响

为了研究单味中药对肠道菌群和肠黏膜损伤的调节和修复作用,选用金银花、连翘和紫花地丁三味清热类中药对大肠杆菌所致肉仔鸡肠道菌群失调和黏膜屏障功能障碍进行治疗,为单味中药在提高肠道细菌的有益菌群和保护肠黏膜屏障提供可靠的理论依据。选取100只1日龄雄性肉仔鸡,分成5组,每组20只,空白组正常饲喂,模型组和中药组于15~17 d腹腔注射大肠杆菌O₇₈（1.0×10⁶ CFU/mL）,1 mL/只。中药组在第18天开始饮用中药,连续7 d,各中药组动物给药量为生药量1 g/kg。在给药后第7和14天,每组取6只鸡心脏釆血,采用ELISA法按照试剂盒说明进行D-乳酸（D-LA）、二胺氧化酶（DAO）和内毒素（ET）的检测。采集空肠肠段和盲肠。采用实时荧光定量PCR检测空肠紧密连接蛋白（（闭合小环蛋白-1（ZO-1）、闭锁蛋白（Occludin）和闭合蛋白-1（Claudin-1））的mRNA的相对表达量。盲肠送检测公司检测中药对盲肠菌群多样性的影响。试验结果表明,金银花、紫花地丁和连翘均可以降低给药后第7和14天肉仔鸡血清（DAO活性）、D-LA和ET含量。在给药后第7天,金银花组ZO-1和Occludin的mRNA相对表达量显著升高（P<0.05）;连翘组Claudin-1和Occludin的mRNA相对表达量显著升高（P<0.05）;在给药后第14天,金银花组ZO-1的mRNA相对表达量显著升高（P<0.05）,紫花地丁组ZO-1和Claudin-1的mRNA相对表达量显著升高（P<0.05）,连翘组ZO-1、Claudin-1的mRNA相对表达量显著升高（P<0.05）。金银花、紫花地丁和连翘均可提高给药后第7天厚壁菌门占比（P<0.05）,金银花、紫花地丁可提高给药后第14天拟杆菌门占比（P<0.05）,金银花、紫花地丁抑制给药后第7和14天变形菌门的增殖,紫花地丁和连翘抑制给药后第7天放线菌门的生长（P<0.05）,连翘、金银花可以显著提高给药后7和14 d乳酸杆菌占比,紫花地丁可以显著提高给药后7 d乳酸杆菌占比（P<0.05）,紫花地丁显著提高给药后第14天未分类毛螺旋菌种相关菌属的占比。综上,金银花、紫花地丁和连翘均可以降低肉仔鸡血清DAO活性、D-LA和ET含量,减少毒素入侵。金银花可以提高ZO-1、Occludin的mRNA相对表达量,连翘可提高ZO-1、Claudin-1和Occludin的mRNA相对表达量,保护肠道黏膜;紫花地丁可提高ZO-1、Claudin-1的mRNA相对表达量。金银花、紫花地丁和连翘均可使肠道OTU数目增多,在不同程度上促进有益菌群繁殖,抑制致病菌群生长,具有调节肠道菌群结构的作用。     

中药复方对大肠杆菌感染雏鸭的防治效果研究

本研究对由地锦草、石榴皮等组成的中药复方对大肠杆菌感染雏鸭的临床治疗效果进行了研究，旨在为临床大肠杆菌感染提供新的治疗手段。试验选取50只健康1日龄雏鸭，随机分为5组，每组10只。试验组分别为空白对照组、模型组、阿莫西林组、中药复方高剂量组（DS_H）和低剂量组（DS_L）。给药组在3日龄开始给药，连续给药至试验结束，共10 d。除空白对照组外，在雏鸭6日龄时用大肠杆菌腹腔注射进行攻毒，0.5 mL/只。比较各试验组雏鸭的病死率；对病死鸭和各组存活鸭进行解剖，观察肝脏和小肠的病理剖检及HE染色切片；检测血常规及血清生化各项指标，评价中药复方对感染大肠杆菌雏鸭的治疗效果。结果显示，DS_H、DS_L和阿莫西林均能够有效降低感染雏鸭的死亡率；与模型组相比，阿莫西林和DS_H、DS_L组均可减少肝脏、小肠等器官的损伤。与空白对照组相比，模型组的谷草转氨酶（AST）和谷丙转氨酶（ALT）显著升高（P<0.05），碱性磷酸酶（ALP）、乳酸脱氢酶（LDH）和尿素（UREA）极显著升高（P<0.01），且模型组和给药组血液中白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、血小板（PLT）等指标变化显著（P<0.05）。与模型组相比，给药组ALP显著或极显著降低（P<0.05；P<0.01），血液中WBC、RBC、HGB、PLT等指标极显著升高（P<0.01），说明给药组机体损伤程度低于模型组。以上结果表明，中药复方可以减轻因大肠杆菌所引起的机体损伤，且作用效果与阿莫西林相近。     

Study on the Prevention and Control Effect of Chinese Herbal Compound on E.coli Infected Ducklings

In this study,the clinical therapeutic effect of Chinese herbal compound composed of Euphorbia humifusa Willd.and Punica granatum L.on ducklings infected with Escherichia coli (E.coli) was studied in order to provide a new therapeutic method for clinical treatment of E.coli.Fifty healthy one-day-old ducklings were selected and randomly divided into five groups,ten ducklings in each group.The experimental groups were blank control group,model group,amoxicillin group,Chinese medicine compound high-dose group(DS_H) and low-dose group(DS_L).The administration group started administration at 3 days of age,continued administration for 3 days,and continued administration until the end of the experiment,10 days total.Except for control group,when the ducklings were 6 days old,E. coli was intraperitoneally injected for challenge,0.5 mL/head.The mortality of the experimental groups was compared.The dead ducks and the surviving ducks were dissected,the pathological section of liver and small intestine and HE staining sections were observed.The blood routine indexes and serum biochemical analysis were detected to evaluate the therapeutic effect of traditional Chinese medicine compound on E.coli infected ducklings.The results showed that the high and low doses of the traditional Chinese medicine compound and the amoxicillin could effectively reduce the mortality of infected ducklings.Compared with model group,amoxicillin and traditional Chinese medicine high and low dose groups could reduce liver,small intestine and other organs damage.Compared with control group,aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) in model group increased significantly (P<0.05),and alkaline phosphatase (ALP),lactate dehydrogenase (LDH),UREA also showed extremely significant upward trend (P<0.01),and the WBC,RBC,HGB,PLT and other indicators changed extremely significantly(P<0.05).Compared with model group,the alkaline phosphatase(ALP)value was significantly or extremely decreased in the administration group(P<0.05;P<0.01),and the blood WBC,RBC,HGB and PLT indexes were extremely significantly increased (P<0.01).The results indicated that the degree of body damage in the administration group was lower than that in the model group.     

The Effects of Lactobacillus salivarius TCSL1 on Growth Performance,Hematology, Serum Biochemical Indexes and Intestinal Health in Puppies

The aim of this study was to evaluate the effects of Lactobacillus salivarius TCSL1 on the growth performance,hematology and serum biochemical indexes and intestinal health of puppies,which was to lay a foundation for the research and development of probiotics for puppies.24 healthy six-week-old Chinese garden dogs were randomly divided into 4 groups,6 dogs were in each group.The experimental groups were fed with low (5×10⁶ CFU/mL),medium (5×10⁸ CFU/mL) and high dose (5×10¹⁰ CFU/mL) Lactobacillus salivarius TCSL1 orally for 28 days,respectively.At the same time,the control group took saline orally for 28 days.During the experiment,the behavior,diet and diarrhea were observed and recorded regularly.After 28 d,dogs were weighed respectively to calculate the gained weight.Blood samples were collected to detect hematology,serum biochemistry,intestinal barrier and inflammatory cytokines.Feces were collected to detect the content of secretory immunoglobulin sIgA and the number of main intestinal bacteria.The results showed that compared with the control group,all the experimental groups could promote the weight growth of puppies,reduced the diarrhea rate,and had a positive correlation with the oral dose.The number of lymphocyte,erythrocyte,immunoglobulin and alkaline phosphatase content increased,while alanine transaminase and creatinine decreased,but there were significant differences between the groups (P<0.05).With the increase of oral Lactobacillus salivarius dose,the content of intestinal barrier indicator factors such as diamine oxidase (DAO),D-lactate and lipopolysaccharide (LPS) in the serum of the experimental groups showed a significant decrease (P<0.05).The contents of TNF-α and IL-6 in serum of the experimental groups decreased significantly (P<0.05),while the contents of TGF-β1 and IL-10 increased significantly (P<0.05).The content of secretory of immunoglobulin sIgA in the feces of the experimental groups increased significantly (P<0.05),the number of coliform and Enterococcus in the feces of the experimental groups decreased significantly (P<0.05),the number of Lactobacillus and Bifidobacterium increased significantly (P<0.05).The above results showed that the oral Lactobacillus salivarius TCSL1 could improve the growth performance of puppies,enhanced the intestinal health and reduced the frequency of diarrhea.5×10¹⁰ CFU/mL per day of the oral Lactobacillus salivarius TCSL1 had the best effect.     

中草药制剂对獭兔免疫功能及血清生化指标的影响

本试验旨在研究中草药制剂对獭兔免疫功能及血清生化指标的影响。采用单因素分组设计,选用120只30日龄健康、体重相近的獭兔(公、母各半),随机分为6组,每组4个重复,每个重复5只。对照组饲喂基础日粮;抗生素组(Ⅰ组)在基础日粮中添加4 mg/kg地克珠利;中草药组(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组)分别在基础日粮中添加0.5%、1.0%、1.5%和2.0%的中草药制剂。预试期7 d,正试期50 d。结果表明:①与对照组相比,日粮中添加中草药制剂提高了獭兔胸腺指数、脾脏指数及血清中免疫球蛋白G(IgG)含量,但各组间脾脏指数差异不显著(P>0.05)。②与对照组相比,日粮中添加中草药制剂提高了獭兔血清中总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、生长激素(GH)、胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ)、甲状腺素(T4)含量,其中1.5%中草药制剂组中各指标分别显著提高了4.40%、7.46%、12.76%、23.53%和6.24%(P<0.05),但对血清球蛋白(GLB)、三碘甲状腺原氨酸(T3)含量影响均不显著(P>0.05)。综上所述,中草药制剂对獭兔具有血液免疫调节作用,改善了免疫器官的发育及机体的免疫机能,建议獭兔日粮中中草药制剂的添加量以1.5%为宜。     

高通量测序研究慢性肾衰竭对宠物犬肠道菌群多样性的影响及基因功能预测分析

旨在通过高通量测序研究慢性肾衰竭（chronic renal failure,CRF）对宠物犬肠道菌群多样性的影响,并预测分析菌群的基因功能。本研究选取30只2岁健康犬,随机等分为慢性肾衰竭模型组（CRF,肾动脉结扎法制备）、假手术对照组（Sham）和健康对照组（HCG）,常规饲养,试验周期56 d。试验过程中,定期检测血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）和尿蛋白/肌酐比（UP/C）,无菌采集新鲜粪便进行细菌16S rDNA测序,分析慢性肾衰竭对犬肠道菌群结构、多样性与功能的影响,并以CRF组差异菌群为自变量进行主成分Logistic回归分析,构建菌群标志物综合指数（FMI）用于慢性肾衰竭预测。结果显示：1）从试验后第28天开始,CRF组Scr、BUN和UP/C分别显著高于自身试验前、HCG组和Sham组（P<0.05）。2） CRF组不同时间点肠道菌群有显著差异,第56天时的Chao 1指数、Shannon指数均降低,拟杆菌门（Bacteroidetes）、变形杆菌门（Proteobacteria）和放线菌门（Actinobacteria）的相对丰度增加,厚壁菌门（Firmicutes）数量减少,与0 d和28 d比较差异显著（P<0.05）,与同时间点HCB组及Sham组比较差异显著（P<0.05）。3）组间菌群LEfSe分析发现,CRF组富集了20个物种,主要包括假单胞菌属（Pseudomonas）、埃希氏菌属（Escherichia）和变形杆菌属（Proteus）等,这些物种与肠道其他菌属间多呈负相关关系;差异物种基因主要富集在氨基酸代谢、糖生物合成和代谢以及碳水化合物代谢等代谢途径。用这些差异物种构建的FMI,其ROC曲线AUC为0.788,可作为犬CRF的肠道微生物标志物。以上结果表明,慢性肾衰竭可以使犬肠道菌群多样性降低、菌群结构失调以及菌群功能改变,且CRF患犬肠道中富集的菌群可作为该病的肠道微生物标志物,以FMI预测效果最好。     

唾液乳酸杆菌TCSL1对幼犬生长性能、血液学与血清生化指标及肠道健康的影响

本研究旨在评价唾液乳酸杆菌TCSL1对犬生长性能、血液学与血清生化指标及肠道健康的影响,为研发犬用益生菌制剂奠定基础。选取24只6周龄左右的健康中华田园犬,随机分为4组,每组6只。试验组按低（5×10⁶ CFU/mL）、中（5×10⁸ CFU/mL）、高（5×10¹⁰ CFU/mL）剂量分别口服唾液乳酸杆菌TCSL1,对照组口服生理盐水,进行为期28 d的喂养试验。试验期间,定期观察并记录犬的行为、饮食和腹泻情况,28 d后分别称重,计算犬体重增长量。采集血液样品检测血液学、血清生化、肠道屏障与炎性细胞因子指标;采集粪便检测分泌型球蛋白sIgA含量和肠道主要细菌数量。结果表明,①与对照组相比,试验组均能促进犬体重的增长,降低腹泻率,与口服剂量呈正相关。淋巴细胞数、红细胞数、免疫球蛋白和碱性磷酸酶含量等均有升高趋势,丙氨酸氨基转氨酶和尿素氮等含量呈降低趋势,组间差异显著（P<0.05）;②随口服唾液乳酸杆菌剂量的增加,试验组血清中的二胺氧化酶（DAO）、D-乳酸（D-lactic acid）和脂多糖（LPS）等肠道屏障指示因子含量显著下降（P<0.05）;③试验组血清促炎细胞因子TNF-α和IL-6含量显著降低（P<0.05）,抗炎细胞因子TGF-β1和IL-10含量则显著升高（P<0.05）;④试验组粪便中的分泌型免疫球蛋白sIgA含量显著增加（P<0.05）,大肠杆菌和肠球菌数量显著下降（P<0.05）,乳酸杆菌和双歧杆菌的数量显著增加（P<0.05）。以上结果表明,口服唾液乳酸杆菌TCSL1可改善幼犬生长性能、增强肠道健康,降低腹泻率,以每天5×10¹⁰ CFU/mL剂量口服效果最佳。