荧光假单胞菌的生物防治机理

荧光假单胞菌是一类革兰氏阴性杆状细菌,一般可在King's B培养基中产生水溶性荧光色素.自20世纪70年代以来,人们已分离到大量拮抗植物病害的荧光假单胞菌.这些菌广泛分布在世界各地,可产生多种抗生素,对小麦全蚀病、棉花猝倒病等重要植物病害具有拮抗作用,起着天然生物防治的作用.盆栽试验和田间试验都表明,用这些菌浸种或喷洒叶面后,可保护作物免受病害的侵袭.现就国内外有关这些荧光假单胞菌应用于生物防治的研究作简要的介绍.     

基于16S rDNA序列的4株假单胞菌属细菌的分子鉴定

对分离自养殖水环境的4株假单胞菌属细菌的16S rDNA序列进行PCR扩增并测定其核酸序列,在Gen-Bank中通过BLAST查找其同源序列,应用MegAlign软件中的Jotun Hein、Clustal V、Clustal W 3种方法进行序列差异和同源性分析,分别使用Mega 4.0软件中的邻接法(N-J)、最小进化法(ME)、最大简约法(MP)、非加权组平均法(UPGMA)构建系统发育树。3种序列分析方法结果显示,由Jotun Hein法可知,菌株T3与菌株T6序列相似度最高为98.5%,菌株T4与Pseudomonas sp.N9-1序列相似度最高为99.1%,菌株T5与Pseudomonas sp.N9-1序列相似度最高为99.6%,菌株T6与Pseudomonas putida KF703及菌株T5序列相似度最高为99.1%;由Clustal V法可知,菌株T3与Pseudomonas sp.N9-1序列相似度最高为97.0%,菌株T4与Pseudomonas plecoglossicida S21、Pseudomonas sp.N9-1及菌株T5序列相似度最高为97.7%,菌株T5与Pseudomonas plecoglossicida S21序列相似度最高为98.9%,菌株T6与菌株T5序列相似度最高为97.2%;由Clustal W法可知,菌株T3与Pseudomonas sp.N9-1序列相似度最高均为97.7%,菌株T4与Pseudomonas plecoglossicida S21序列相似度最高为99.3%,菌株T5与Pseudomonas plecoglossicidaS21序列相似度最高为99.6%,菌株T6与Pseudomonas sp.N9-1序列相似度最高为97.9%。4种方法构建的系统发育树基本一致,可初步确立4株菌株的分类地位:菌株T3与Pseudomonas sp.G53亲缘关系最近,菌株T4与序列Pseudomonas sp.N9-1以及Pseudomonas sp.WP6亲缘关系最近,菌株T5与Pseudomonas sp.3-3(2010)亲缘关系最近,菌株T6与Pseudomonas plecoglossicida S21亲缘关系最近。     

罗非鱼荧光假单胞菌的分离鉴定

从发病罗非鱼中分离获得1株革兰氏阴性杆菌,依据细菌形态、培养、生理生化特性初步鉴定为荧光假单胞菌,结合PCR检测、克隆测序及Blast比对分析,进一步确定该分离菌株为荧光假单胞菌。致病性试验结果显示,该分离菌株具有较高的致病性,能引起罗非鱼发病、死亡,其病理变化与荧光假单胞菌引起的鱼类赤皮病完全相似。药敏试验结果显示,该分离菌株对氟哌酸、氧氟沙星、新霉素高度敏感,但对氨苄青霉素、青霉素、阿莫西林等不敏感。     

铁离子对荧光假单胞菌生长及产铁载体的影响

研究不同浓度的铁离子对荧光假单胞菌生长和产铁载体方面的影响,结果显示:适当浓度的铁离子浓度对荧光假单胞菌生长有促进作用;而当铁离子浓度大于lμmol/L时,可以完全抑制荧光假单胞菌铁载体的产生.     

ARDRA方法在荧光假单胞菌分离鉴定中的应用

【目的】探索荧光假单胞菌的分类方法，分离筛选拮抗性较强的荧光假单胞菌。【方法】利用紫外下产生荧光的特性，采用梯度稀释及鞭毛染色的方法，对采自云南、海南、山东和新疆的488份植物根际土壤进行分离筛选，分离菌株进行ARDRA分析，采用室内平板对峙法筛选对植物病原真菌具有较强拮抗作用的菌株，并对其进行生理生化分析和分子鉴定。【结果】分离筛选到102株紫外下产生荧光的杆状单极生鞭毛菌株。ARDRA分析产生荧光假单胞菌类型、恶臭假单胞菌类型以及一个未知的谱带类型。以油菜立枯病菌作为靶标菌，筛选到25株具有拮抗作用的菌株，其中TC222产生的抑菌圈最大，进一步的生测结果表明该菌株对9种重要的植物病原真菌如番茄灰霉病菌等具有很强的拮抗活性。TC222的 16S rDNA核苷酸序列与荧光假单胞菌PfO-1同源性达到99%，其最终鉴定为荧光假单胞菌。【结论】ARDRA方法在分子水平上为荧光假单胞菌的分离鉴定探索了一条新途径；TC222菌株具有拮抗多种植物病原真菌的能力，显示了良好的应用前景。     

人工养殖大鲵病原荧光假单胞菌的分离鉴定

从四川洪雅人工养殖的患病大鲵(Andrias davidianus)肝、肾中分离到一株优势菌(S100814),以腹腔注射、浸泡的方式进行人工感染试验,证实其为养殖大鲵的病原菌.该分离株生理生化特性与荧光假单胞菌一致,该菌为革兰氏阴性短杆菌,在TSA平板上生长呈边缘整齐、半透明的圆形灰白色菌落.接触酶、精氨酸双水解酶、...     

荧光假单胞菌对大豆的防病增产效果初报

两年试验结果表明：荧光假单胞菌蓖液拦种对重茬大豆有明显的防增产效果，两年平均增产为１１．８％，不同年份间增产效果存在差异。不同品种对重茬的反应抗病能力不同，烟此，菌液处理防病增产效果不同。     

荧光假单胞菌在生物防治中的应用

重点关注了荧光假单胞菌的专利技术现状,介绍了荧光假单胞菌的防治谱、使用方式以及通过遗传改造提高其效果的方法,以供参考。     

邻苯二甲酸二甲酯对荧光假单胞菌的损伤研究

为探究邻苯二甲酸二甲酯(Dimethyl phthalate,DMP)对细菌的毒理作用,选择荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)为受试菌株,采用平板计数试验、对数生长数学模型、细菌表面Zeta电位、荧光偏振法、透射电镜和超高效液相色谱法,测定了P.fluorescens的比生长速率、代时、细胞表面电势、细胞膜流动性、细胞损伤程度和DMP在细胞内外分布,研究DMP对P.fluorescens的细胞毒性。结果表明:经0、10、20、40 mg·L~(-1)的DMP暴露后,细菌比生长速率减小,而代时增加;细菌表面Zeta电位从-12.21±0.56mV逐渐降低为-18.13±0.67 mV,同时DMP增加了细菌细胞膜的流动性,导致细胞明显变形、质壁分离严重并伴有内容物的泄露;在细胞内,DMP累积浓度从0.11±0.10 mg·L~(-1)增加到6.78±0.25 mg·L~(-1);在细胞外,DMP累积浓度从8.44±0.37 mg·L~(-1)增加到30.52±0.88 mg·L~(-1)。研究表明,DMP破坏了P.fluorescens的细胞壁和细胞膜,影响了细菌正常生长。     

PCR检测诊断罗非鱼荧光假单胞菌病技术的建立

根据基因库荧光假单胞菌的16S-23S rDNA基因序列设计一对特异性引物,用PCR对4株鱼荧光假单胞菌进行扩增.特异性结果显示该对引物对4株荧光假单胞菌均扩增出与预期大小相一致的428 bp的扩增产物,而对罗非鱼嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、罗非鱼迟缓爱德华氏菌、斑点叉尾鮰钻鱼爱德华氏菌、柱状嗜纤维菌、链球菌、葡萄球菌、河弧菌、大肠杆菌和沙门氏菌等10种病原体的扩增,结果全为阴性.该PCR敏感性结果表明可以检测到1 pg的荧光假单胞菌DNA模板.     

一种野生食用菌的分子及形态学鉴定

该文对采自福建农林大学金山校区竹林内的一株野生大型食用菌的菌丝、子实体等进行形态学鉴定,并结合现代分子生物学方法对其ITS序列进行测定,通过在基因组数据库中进行比对确定其亲缘关系,属于无隔担子菌亚纲(Homobasidiomycetidae)伞菌目(Agaricales)口蘑科(Tricholomataceae)口蘑属(Tricholoma),暂命名为金山巨菇(Tricholoma sp.)。     

食用菌物理保鲜技术研究进展

食用菌兼具营养及药用价值,被全球公认为是良好的营养来源,其产品广受市场关注。食用菌的保鲜技术也在进一步发展之中。本文对食用菌物理保鲜技术进行综述,并进一步提出其发展趋势。     

食用菌液体培养推广的市场研究

食用菌液体培养技术是食用菌的工业化、集约化生产的基础,食用菌液体培养生产食用菌菌种方面极具优势。在食品、生物医药等行业中也有很广泛的应用和发展前景。     

河北省食用菌资源的调查研究（Ⅱ）

本介绍了河北省食用菌资源中担子菌亚门层菌纲部分，分属于6目21科85种。     

食用菌有性发育相关基因的研究进展

从构巢曲霉veA基因的发现出发,以研究时间先后为顺序,总结了近30 a来发现的与食用菌有性发育相关的基因及其作用,其中重点介绍了双孢菇、香菇和冬虫夏草中有性发育相关基因的功能,并对今后食用菌有性发育的研究进行了展望。     

食用菌修复重金属污染土壤研究进展

以食用菌修复土壤重金属为研究内容,对食用菌富集重金属机理、食用菌吸附重金属能力、用于修复重金属污染土壤的食用菌种类及食用菌对重金属污染土壤的修复技术的研究成果进行总结与评估,分析其中存在的问题,探讨未来发展研究方向,以期为土壤重金属综合治理与污染修复提供理论参考依据。同时根据当下农业生产中存在土壤重金属污染的热点问题,提出几项具有可行性的土壤修复应用技术,为食用菌修复土壤重金属提供研究及应用思路。     

食用菌抗重金属机制研究综述

综述了汞、铅、砷、镉、铜等重金属在食用菌栽培中的富集情况,以及对食用菌生长、抗氧化系统影响的研究现状。食用菌对汞、铅、硒等重金属都表现出了不同程度的富集现象,但是随着重金属浓度增大,对食用菌生长抑制作用增大,从而降低了食用菌对重金属的富集能力。食用菌的抗氧化系统是抵抗重金属胁迫的重要机制,但目前关于这方面的研究较少。     

对农业机械技术推广的思考

从农业机械技术推广重要性入手,对推广基层农机技术存在的问题进行了分析,使之能适应建设新农村需要,并就如何推广农业机械技术提出几点建议。