生长育肥猪胃肠道正常厌氧菌群的数量和分区

采用厌氧微生物学方法,对2头育肥猪的胃、小肠、盲肠、结肠和直肠的固相、液相和粘膜中的总厌氧菌、淀粉分解菌,纤维分解菌和蛋白分解菌的数量分布和比例进行了研究,结果表明,上述总厌摒力和3种功能菌群的数量在胃和小肠区段固相内容物中占绝对优势,而在盲肠、结肠和直肠内容物中以液相菌群占绝对优势,在胃和小肠区段,固相,液相内容物中3种功能菌群的数量间无明显差异,但在盲肠、结肠和直肠段,固相、液相内容物中淀粉分解菌和蛋白分解菌为优势菌群,在各区段胃肠道粘膜中,胃和小肠的3种菌群的数量相对较低,盲肠粘膜中主要菌群数量分布为蛋白分解菌＞淀粉分解菌＞纤维分解菌（P＜0．01）;而结肠和直肠粘膜中以淀粉分解菌占绝对优势。     

生长猪胃肠道乳酸菌、双歧杆菌和大肠杆菌的数量和分布规律

本研究采用严格的厌氧微生物培养方法，对5头生长猪进行了测定。结果表明，在生长猪的胃肠道内容物中和粘膜上均有相当数量的乳酸菌、双歧杆菌和大肠杆菌分布，但乳酸菌的数量显著高于其他2种菌（P＜0．01）。3类菌在内容物中的分布为：乳酸菌在猪后肠内容物中的数量分布显著高于胃和小肠（P＜0．01）；双歧杆菌在盲肠内容物中数量最高（P＜0．01）；而盲肠和结构内容物中大肠杆菌的数量分布大于其他部位（P＜0．01）。粘膜的分布为：乳酸菌在结肠，双歧杆菌和大肠杆菌在盲肠粘膜上的数量分布显著高于其他各区段（P＜0．05）。猪胃肠道各区段中，除直肠内容物中双歧杆菌的数量显著高于大肠杆菌外（P＜0．01），其他各区段中2种菌的数量统计差异不显著（P＞0．05）；结肠和直肠粘膜上双歧杆菌的数量显著高于大肠杆菌（P＜0．05）。     

大鲵不同部位的抑菌效果研究

[目的]研究大鲵皮肤、黏液、肉粉和脂肪的抑菌效果。[方法]用80%甲醇水溶液分别浸提大鲵粘液、皮肤及肉粉获取提取物,用乙醚萃取大鲵油。采用滤纸片扩散法,研究大鲵4种提取物对绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌的抑菌作用。[结果]大鲵皮肤浸提物对绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌有较强的抑菌作用,而对大肠杆菌无抑制作用。大鲵黏液、大鲵肉粉、大鲵油对4种菌的抑制作用均不显著。[结论]大鲵的主要抗菌部位为皮肤。     

双歧杆菌对病原菌粘附肉鸡肠粘液的影响

研究两歧双歧杆菌、禽大肠杆菌O78、大肠杆菌ATCC25922、鸡白痢沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌与肉鸡不同肠段粘液糖蛋白的粘附性能，探讨两歧双歧杆菌对四种病原菌的粘附排斥作用。结果表明，在不同的肠道部位，两歧双歧杆菌、鸡白痢沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌与肠粘液糖蛋白的粘附能力不同，而禽大肠杆菌O78、大肠杆菌ATCC25922在各肠段粘液上的粘附性能相近；在相同的肠道部位，所试菌与肠粘液糖蛋白的粘附能力有差异，其中两歧双歧杆菌的粘附作用最强；肠粘液糖蛋白经两歧双歧杆菌处理后，禽大肠杆菌O78、大肠杆菌ATCC25922和鸡白痢沙门氏菌的粘附作用受到抑制，而鼠伤寒沙门氏菌在十二指肠、空肠粘液上的粘附率未见下降。     

浸泡免疫预防草鱼细菌性烂鳃病效果的研究

用酚灭活的柱状嗜纤维菌和从该菌体提取的菌体脂多糖浸泡接种２０～２５ｇ的草鱼鱼种，共浸泡２次间隔一周。通过检测受免鱼体血清、肠和体表粘液中凝集抗体效价、血液中吞噬细胞的吞噬活性和采用活菌攻毒的方法，探讨了浸泡免疫接种疫苗对预防草鱼细菌性烂鳃病的效果。结果表明，受免鱼体与对照鱼相比，血清、肠和体表粘液中凝集抗体效价和血液中吞噬细胞的吞噬活性都有明显上升。经活菌攻毒后，酚灭活柱状嗜纤维菌疫苗免疫组免疫保护率达３０％，而脂多糖疫苗免疫组免疫保护率为５５％。     

鲶鱼体表黏液特性的初步研究

对鲶鱼体表黏液活性成分、抑菌特性进行研究,并对蛋白类物质和多糖类物质含量进行测定,结果表明:(1)使用G-200葡聚糖凝胶层析法对鲶鱼体表黏液活性成分进行分离,无法得到纯化的单一物质,在以后的试验中需要寻找新的分离纯化方法。(2)鲶鱼体表黏液对藤黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌抑菌效果不明显。(3)鲶鱼体表黏液中含有的蛋白类物质含量占黏液干重的40%左右,多糖类物质约占黏液干重的4.2%。     

大鲵皮肤药膏和大鲵黏液药膏烫伤药理试验研究

建立了SD大鼠背部深Ⅱ度烫伤模型,研究大鲵皮肤药膏和大鲵黏液药膏对大鼠皮肤烫伤的治疗作用.结果表明,大鲵皮肤药膏、大鲵黏液药膏能明显缩短烫伤后大鼠创面愈合时间;创面愈合速度较美宝湿润烧伤膏组快,并能使创面面积明显缩小;显微镜下观察真皮内皮肤附件结构完整,未见水肿及炎性细胞浸润.大鲵皮肤药膏、大鲵黏液药膏具有促进实验大鼠烫伤创面愈合的作用.     

黏红酵母对牙鲆肠黏液黏附及肠道定植规律的研究

[目的]研究黏红酵母(Rhodotorula glutinis)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus casei)对牙鲆肠黏液的黏附能力,探讨黏红酵母在牙鲆肠道中的定植规律及对牙鲆抗病能力的影响。[方法]采用体外黏液黏附模型测定上述4株益生菌的黏液黏附能力,平板菌落计数法测定黏红酵母在肠道的数量。[结果]黏红酵母对牙鲆肠黏液黏附能力最强,其次是鼠李糖乳杆菌,纳豆芽孢杆菌黏附能力最弱。投喂含黏红酵母饲料的牙鲆肠道其酵母数量达到了103～104cfu/g内含物。鳗弧菌攻毒后,对照组牙鲆死亡率显著高于黏红酵母组。[结论]黏红酵母在牙鲆肠道具有较好定植潜能并能降低牙鲆因弧菌引起的死亡率,因此具有较好的应用前景。     

大型犬肘头皮下黏液囊炎的诊治体会

[目的]介绍大型犬肘头皮下黏液囊炎的诊治过程。[方法]对发病金毛犬进行初步诊断,确诊为肘头皮下黏液囊炎后对其进行手术切除。[结果]发病金毛犬的肘头皮下出现一处肿胀,其与周围有明显的分界。B超检查发现肿胀内有大面积液性暗区,外有强回声包膜。在波动稍明显的部位进行穿刺,可见有清亮黏液流出。根据初诊结果,确诊为肘头皮下黏液囊炎。手术切除该肘头皮下黏液囊后,金毛犬经精心护理后痊愈。[结论]当病情较轻时,应尽量避免切除肘头皮下粘液囊,建议应破坏黏液囊并减少其黏液的过度分泌。     

奶牛子宫内膜炎病原菌的分离·鉴定及药敏试验

[目的]了解奶牛子宫内膜炎的病原菌感染情况与耐药现状.[方法]随机采集库尔勒地区某牛场患子宫内膜炎奶牛的子宫黏液20份,进行实验室细菌学的分离、生化鉴定及药敏试验.[结果]共分离出89株菌,其中链球菌45株,占50.56％;葡萄球菌24株,占26.97％;大肠杆菌13株,占14.60％;蜡样芽胞杆菌7株,占7.87％.分离出的单一菌株的检出率为80％ （16/20）.引起该地区奶牛子宫内膜炎的主要病原菌是链球菌、葡萄球菌.对链球菌、葡萄球菌、大肠杆菌、蜡样芽胞杆菌这4种菌抑菌效果最好的药物依次分别为奥复星、氟苯尼考、甲氧苄啶、氟苯尼考.[结论]该研究可为指导子宫内膜炎的临床用药和预防提供理论依据与技术支持.     

纳豆芽孢杆菌对健康和鳗弧菌感染牙鲆肠粘液粘附的研究

[目的]研究纳豆芽孢杆菌在对健康和鳗弧菌感染牙鲆肠粘液粘附中的作用。[方法]应用5 mol/L LiCl提取纳豆芽孢杆菌表面蛋白,利用蛋白印迹法鉴定在纳豆芽孢杆菌表面蛋白中分子量及参与粘附的特异蛋白。[结果]对提取的纳豆芽孢杆菌表面蛋白进行SDS-PAGE后,发现仅出现一条明显的主要蛋白条带,分子量为29.58 kDa。经蛋白印迹分析,该蛋白质参与了健康和鳗弧菌感染牙鲆肠粘液的粘附过程;纳豆芽孢杆菌全菌蛋白在健康和鳗弧菌感染牙鲆肠粘液中有一个相同的粘附受体,蛋白分子量为13.91 kDa;健康个体还有一个粘附受体,分子量是29.86 kDa。[结论]纳豆芽孢杆菌的表面蛋白在对牙鲆肠粘液的粘附过程中起着重要作用。     

母牛抗精子抗体与繁殖性能的关系

本试验用Kibrick和F-D试验法分别测定了母牛体内抗精子抗体的效价,结果处女牛普遍低;屡配不孕牛高;而怀孕牛中只有少数偏高。一些不孕牛经两种方法同时测定,其结果相似。对一组不孕牛同时测定了发情时子宫粘液和血液中的抗精子抗体,发现子宫粘膜(液)中同样可产生和存在着类似抗体。5头阳性不孕牛,分别用4头无血缘关系的公牛精液进行试验,其结果相似,没有发现精液的来源不同(公牛的血型)与这些牛的不孕有什么相关。     

病死黑斑原鮡表皮和肠道微生物群落研究

[目的]了解病死黑斑原鮡表皮和肠道微生物群落的变化及其与黑斑原鮡死亡的关系。[方法]利用新一代高通量测序技术,研究病死黑斑原鮡表皮皮肤黏液和肠道内容物微生物群落的变化及其对黑斑原鮡死亡的影响。[结果]黑斑原鮡病变死亡后,肠道中Acinetobacter sp.、Flavobacterium sp.、Vagococcus sp.、Carnobacterium sp.、Bacillus sp.和Malassezia sp.6种优势微生物菌群减少,而Pseudomonas sp.、Tremellales和Agaricomycetes 3种优势微生物菌群增加;黑斑原鮡病变死亡后其表皮皮肤黏液中Pseudomonas sp.、Vagococcus sp.、Providencia sp.、Morganella sp.、Pleosporales、Mucorales、Tremellales和Agaricomycetes 8种优势微生物菌群减少,而Acinetobacter sp.、Proteus sp.、Carnobacterium sp.和Malassezia sp.4种优势微生物菌群增加。[结论]细菌和真菌在黑斑原鮡表皮和肠道中菌群的变化,可能是导致黑斑原鮡病变死亡的主要原因之一。     

A periciliary brush promotes the lung health by separating the mucus layer from airway epithelia

Mucus clearance is the primary defense mechanism that protects airways from inhaled infectious and toxic agents. In the current gel-on-liquid mucus clearance model, a mucus gel is propelled on top of a "watery" periciliary layer surrounding the cilia. However, this model fails to explain the formation of a distinct mucus layer in health or why mucus clearance fails in disease. We propose a gel-on-brush model in which the periciliary layer is occupied by membrane-spanning mucins and mucopolysaccharides densely tethered to the airway surface. This brush prevents mucus penetration into the periciliary space and causes mucus to form a distinct layer. The relative osmotic moduli of the mucus and periciliary brush layers explain both the stability of mucus clearance in health and its failure in airway disease.     

革胡子鲶体表粘液抗菌肽的分离与纯化及抑菌活性研究

[目的]分离纯化革胡子鲶体表粘液抗菌肽,并分析其抑菌活性。[方法]通过硫酸铵沉淀、Sephadex G-50凝胶层析,对高密度养殖的革胡子鲶体表粘液中的抗菌肽进行了初步的分离及纯化,并分析其抑菌活性。[结果]经Sephadex G-50凝胶层析分离得到2个洗脱峰,经检测这2个洗脱峰对迟缓爱德华氏菌抑制作用最强,对嗜水气单胞菌抑制作用次之,对大肠杆菌的抑制作用最弱;对同种菌而言,洗脱峰2的抑菌效果强于洗脱峰1。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,洗脱峰1显示3条蛋白主带,并以9.5kD的蛋白含量最高,而洗脱峰2中所含蛋白的分子量应小于4.1kD。[结论]为探讨高密度养殖条件下革胡子鲶的抗病机理奠定了基础,同时有望为研制和开发新型的水产饲料添加剂和抑菌药物奠定基础。     

耐胃肠道环境及肠道病原菌拮抗的猪源乳酸菌的分离与筛选

从健康猪粪便筛选分离到对肠道致病菌有较强抑制特性的3株乳酸菌,分别鉴定为屎肠球菌(Enterococcus faecium)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)和干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)。体外益生特性研究表明:3株乳酸菌能耐受胃肠道环境,能黏附猪小肠表面粘液,对猪源产肠毒素型大肠杆菌(Escherichia coli O139,E. coli O139)、E. coli C83905、E. coli C83524、E. coli C83529、伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium O4Hi,ST O4 Hi)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)均有较强的抑制特性。对小白鼠肠道大肠杆菌的数量进行研究,结果证明对照组大肠杆菌数量没有明显降低,而添加乳酸菌组大肠杆菌数量明显降低。对小白鼠腹腔注射E. coliC83905,乳酸菌组死亡率明显小于对照组。结果证明3株乳酸菌在猪饲料添加剂方面有较好的应用前景。     

In vivo imaging of membrane-associated glycans in developing zebrafish

Glycans are attractive targets for molecular imaging but have been inaccessible because of their incompatibility with genetically encoded reporters. We demonstrated the noninvasive imaging of glycans in live developing zebrafish, using a chemical reporter strategy. Zebrafish embryos were treated with an unnatural sugar to metabolically label their cell-surface glycans with azides. Subsequently, the embryos were reacted with fluorophore conjugates by means of copper-free click chemistry, enabling the visualization of glycans in vivo at subcellular resolution during development. At 60 hours after fertilization, we observed an increase in de novo glycan biosynthesis in the jaw region, pectoral fins, and olfactory organs. Using a multicolor detection strategy, we performed a spatiotemporal analysis of glycan expression and trafficking and identified patterns that would be undetectable with conventional molecular imaging approaches.     

七彩神仙鱼繁殖间期与繁殖期体表黏液的部分组分分析

为了探究七彩神仙鱼体表黏液在繁殖周期中组分的变化规律,测定七彩神仙鱼体表黏液中皮质醇、免疫球蛋白M、总蛋白、乳酸和葡萄糖的含量变化。结果表明,七彩神仙鱼体表黏液中皮质醇、免疫球蛋白M、总蛋白、乳酸和葡萄糖的含量均受亲鱼性别和繁殖时期显著影响,且繁殖时期与性别之间存在显著交互作用。在幼鱼平游期,5种组分含量在雌雄亲鱼之间存在显著差异。七彩神仙鱼开始"喂奶"后其体表黏液成分发生显著变化,尤其是雄鱼会分泌更多的营养与免疫组分来满足幼鱼需求。     

黄鳝体表粘液中基因组DNA的提取与分析

黄鳝基因组DNA一直采用抽血或剪取肌肉来提取,但是采血或剪取肌肉后黄鳝成活率很低。为了保留亲本,尝试从黄鳝体表粘液中提取DNA,并采用紫外分光光度计对提取到的DNA的纯度和浓度进行了检测。结果表明,用蛋白酶K消化,酚仿抽提后从粘液中得到的DNA的纯度与从肌肉中提取到的相差不大,但是提取到的量较少。为了验证提取的DNA是不是黄鳝基因组DNA,用黄鳝actin引物和18S r RNA基因引物扩增之后检测到了粘液中的较亮的DNA片段。为了进一步确认检测到的是黄鳝的DNA,我们又对得到的DNA进行了扩增,并得到的产物进行了克隆和测序。结果表明,粘液中提取到的DNA是黄鳝的基因组DNA。随后又选择了60尾黄鳝,提取其粘液之后对其成活率进行统计,养殖1个月后黄鳝的成活率都在95%以上。此黄鳝体表粘液提取DNA方法能提取高质量的DNA,可用于用于PCR鉴定。     

胃肠道黏液层中Akkermansia muciniphila的定殖研究及其与宿主的相互作用

动物胃肠道中定植着数量巨大的肠道微生物,影响宿主动物的代谢和发育。肠道微生物在营养物质交换、信息传递和抵抗病原微生物入侵方面均发挥着重要的作用。依据定植部位,可以分成黏液层微生物和肠腔内微生物,Akkermansia muciniphila偏好地定植于肠道黏液层,对机体活动影响广泛。在肠道中,Akkermansia muciniphila可以特异地降解黏蛋白和低聚糖,分别产生短链脂肪酸和丙酸,在为宿主提供能量的同时也促进了自身的定植。而与此同时,机体黏蛋白的降解会促使宿主补偿产生更多的黏蛋白,进而降低宿主蛋白的沉积。Akkermansia muciniphila的定植还可减缓脂肪沉积,延缓糖尿病。在肠道微生态系统中,该菌群并没有严重的致病性,适宜丰度的Akkermansia muciniphila定植可以促进宿主免疫系统的发育,进而促进肠道健康。随着更多科学研究的展开,胃肠道微生物在机体中的重要性得到呈现。作为目前国内外的研究热点,Akkermansia muciniphila在机体肠道内的作用机制尚未完全明确。本文从Akkermansia muciniphila的定植环境、生理特性、对机体营养代谢的影响、与代谢性疾病及机体免疫相互作用等方面进行了综述,Akkermansia muciniphila为很有潜力的生物标记,应用于营养状态、代谢性疾病、免疫甚至癌症的评估和检测。