猪精液冷冻技术的研究

从稀释液、解冻液、解冻速率方面研究了猪精液冷冻保存的效果。结果表明：在八种稀释液中,用Ⅰ号稀释液制作的冷冻精液解冻后精子活率（33±1．2）％优于其它组（P〈0．05）;Ⅴ号解冻液解冻后精子活率（34±2．4）％极显著高于Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ号解冻液（P〈0．01）,Ⅴ号解冻液解冻后精子存活时间506．6±40．4h,极显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号解冻液（P〈0．01）;以27．5℃／s的速率解冻,解冻后精子各项指标均为最高值。     

在绵羊冷冻精液解冻液中添加复合VB提高冻精解冻后品质的研究

按照L9(34)正交表进行实验设计,将复合维生素B、亚硒酸钠维生素E、谷胱甘肽及抗坏血酸在绵羊冻精解冻液中进行单独或组合添加.6号(50.70%±4.32%)和7号解冻液的解冻后活率(55.35%±2.20%)除与4号解冻液(45.29%±4.11%)差异不明显外,均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于其它解冻液.结果表明在解冻液中添加复合维生素B可明显提高冻精的解冻后活率.推荐在绵羊冷冻精液的解冻过程中使用.     

绵羊冻精稀释液加复合维生素B提高冻精解冻后的品质

将山梨醇、氯前列烯醇、复合维生素B在绵羊冷冻精液稀释液中进行添加、筛选。解冻后活率结果显示1号稀释液(41.17±4.72)%和4号稀释液(37.76±3.15)%极显著地高于对照组稀释液(22.80±4.49)%(P<0.01)。表明在绵羊冻精稀释液中添加复合维生素B可有效提高冻精解冻后活率并保护精子形态结构的完整性。 绵羊冻精稀释液加复合维生素B提高冻精解冻后的品质@哈福$甘肃农业大学动物科学技术学院!730070     

依葡柠解冻液对种公牛精子寿命及完整顶体率的影响

采用复方依葡柠解冻液 (EDTA 葡萄糖 柠檬酸钠 ,试验组 )与常用的单方柠檬酸钠解冻液 (2 .9%柠檬酸钠 ,对照组 )对肉用种公牛颗粒冻精进行解冻对照试验。结果显示 ,解冻后精子的复苏率 ,试验组与对照组相差不大 (P >0 .0 5 ) ;常温 (18～ 2 0℃ )和低温 (5～ 7℃ )下再贮存 ,精子的存活时间和生存指数 ,试验组高于对照组 ,且差异显著 (P<0 .0 5 ) ;解冻后在 (38± 2 )℃水浴中孵育 3h检查精子的完整顶体率 ,试验组极显著高于对照组 (P<0 .0 1)。适用于水牛的良好解冻液依葡柠 ,用做牛 (肉用牛 )的冻精解冻得到了理想效果     

稀释方法、孵育温度和时间对冷冻—解冻后猪精液质量的影响

试验以精子冻后活率、质膜完整率和顶体完整率三项指标评价了一步稀释法(Ⅰ组)和两步稀释法(Ⅱ组),以及不同保存温度和时间对解冻、稀释后的猪精液质量的影响。结果表明,采用两步稀释法对解冻后的猪细管冻精进行稀释,精子活率、质膜完整率和顶体完整率分别达到82.6%、89.4%和90.3%,极显著高于一步稀释法(P0.01)。用两步法稀释后的精液36℃保存5 min、10 min和15 min时精子活率分别为81.2%、80.8%和80.9%(P0.05),40 min时为50.1%;精子质膜完整率和顶体完整率未见显著下降(P0.05);17℃保存15 h时精子活率、质膜完整率和顶体完整率分别为81.1%、88.9%和91.4%(P0.05);60 h时分别为50.4%、61.4%和61.6%,均极显著低于初始的各项指标(P0.01)。     

不同解冻方法对猪冷冻精液品质的影响

为优化猪冷冻精液解冻方法、提高精液利用效率,试验采用两种不同的解冻方法解冻0.5 mL猪细管冷冻精液,一种在38℃水浴直接解冻30 s(1组),另一种在50℃水浴解冻16 s后再放到30℃水浴中静置40 s(2组)。对解冻后的精液分别进行精子活力、生存时间、顶体完整率的测定和顶体形态观察。结果表明：2组解冻精液的精子活力、顶体完整率极显著高于1组(P<0.01),但两组的生存时间差异不显著(P>0.05);精子顶体形态学观察发现,两组冻精的精子顶体膨胀、缺损情况都较严重。说明与38℃慢速解冻冷冻精液相比,50℃快速解冻的猪细管冷冻精液的精子活力好而且顶体完整率高。     

中卫山羊细管冻精制作与种质资源保存初步研究

为了中卫山羊种质资源的保护、利用,试验采用细管冷冻技术对宁夏地方品种中卫山羊进行了冻精制作和保存,比较了稀释液、冷冻保护剂类型和浓度、稀释倍数及不同稀释法等对中卫山羊精液冷冻保存品质的影响。结果表明:解冻后的精液品质,3号稀释液精子活率高于1号、2号稀释液,差异极显著(P0.01);相同浓度的甘油和二乙醇,解冻后的精子活率甘油高于二乙醇,差异极显著(P0.01),当甘油浓度为5%时,解冻后精子活率显著(P0.05)高于3%和6%;2倍稀释解冻后精子活率最高,5倍稀释解冻后精子活率最低,但不同稀释倍数解冻后精子活率差异不显著(P0.05)。     

猪0.5 mL细管冻精不同解冻方法精子质量的研究

利用计算机辅助精子分析系统(CASA)结合顶体完整率(NAR)的检查,研究了长白猪0.5 m L细管冻精4种解冻程序后精液的质量,综合评价不同解冻方法。结果表明:1)精子冷冻-解冻后在曲线速度(VCL)、直线速度(VSL)、平均路径速度(VAP)、直线性(LIN)、前向性(STR)、鞭打频率(BCF)以及A+B类精子比例的检测性状上降低,差异极显著(P0.01);精子头侧摆幅度(ALH)也显著减小(P0.05),活率(Motile rate)变化差异不显著(P0.05);2)四组解冻程序中,38℃20 s解冻组的活率(Motile rate,MR)、VSL、VCL、STR、A+B精子比例指标均极显著(P0.01)优于42℃20 s、50℃15 s、62℃5 s解冻组,VAP、LIN与NAR差异不显著(P0.05);3)Topsis综合评价的结果表明38℃20 s组在孵育2 h、4 h、6 h之后检测性状优于其他解冻组。由此推论,虽然解冻后精子在运动参数发生较大变化,但是38℃20 s的解冻效果优于其他解冻条件。     

解冻温度和保存时间对牛细管冻精精子活率的影响

本试验采用4组解冻温度,每组解冻温度设计了2个不同的解冻时间,观察不同解冻温度、解冻时间及解冻后常温保存时间对牛细管冷冻精液精子活率的影响。结果显示,4组解冻温度以80℃（3s）精子活率最高,为48．77％,20组（2（80s）精子活率最低,为30．02％,两者差异极显著（P〈0．01）。各组精液解冻后保存1h检查精子活率明显高于解冻时镜检活率（P〈0．05）,80℃解冻后间隔5h精子活率仍达到30％。     

-80℃超低温冰箱冷冻保存猪精液的初步研究

本试验从细管规格、基础稀释液成分(柠檬酸和甘氨酸)、甘油浓度和解冻方法对猪精液在-80℃超低温冰箱中冷冻保存冻后精子存活率的影响进行了研究。结果表明:(1)0.25 m L和0.5 m L细管之间没有明显差异(P0.05),其冻后存活率均达到0.57左右。(2)冷冻液中甘油浓度为3%时,冻后猪精子存活率最高,达0.50±0.035;基础液中柠檬酸的含量为1.3%时,精子的冻后存活率极显著高于1.7%时(P0.01);基础液中甘氨酸的含量为7.5 mg/m L时,则不能影响精子的冻后存活率(P0.05)。(3)解冻方法为61℃5 s时,精子冻后存活率最高,达0.61±0.055。     

巴马香猪精液冷冻保存研究

利用甘油和二甲基亚砜（DMSO）作为冷冻保护剂,以精子存活率为评价指标,研究了冷冻保护剂对香猪精液冷冻保存效果的影响。试验分工、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4个试验组和1个对照组。以解冻后的精子活力、活率为判断标准,比较了4种冷冻保护液对香猪精液冷冻保存的影响。结果表明,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组精子活率显著高于Ⅲ组（含5％甘油）（P〈0．05）;试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组之间差异不显著（P〉0．05）;Ⅰ组精子活率最高,达到53．10％。     

在4℃降温平衡过程中0.2g/L咖啡因与精子共孵育时间对猪颗粒冻精质量的影响

实验旨在探讨在猪精液于4℃平衡2 h过程中0.2 g/L咖啡因与精液共孵育2 h、1 h和0.5 h,对颗粒冻精解冻后精子活率、活力、质膜完整性和顶体完整性以及解冻后精子体外存活时间等指标的影响,以期进一步提高猪颗粒冻精质量。实验结果表明,在精液冷冻之前,咖啡因不同平衡时间组的精子活率和活力都呈现出升高趋势,但与对照组差异不显著;咖啡因与精液共孵育2 h、1 h和0.5 h组的精子顶体完整率和质膜完整率显著低于对照组,前3组之间差异均不显著。而颗粒冻精解冻后,咖啡因与精液共孵育2 h、1 h和0.5 h组精子活率和活力均显著高于对照组,其中共孵育1 h组显著高于其他3组(P0.05),共孵育2 h组和0.5 h组间差异不显著(P0.05);共孵育2 h组精子顶体完整率和质膜完整率显著低于对照组和共孵育0.5 h、1 h组(P0.05),但后3组之间差异不显著;共孵育2 h组精子存活时间显著低于对照组、共孵育1 h和0.5 h组(P0.05),其中共孵育1 h组精子存活时间最长,达7 d以上。总之,在精液4℃降温平衡过程中咖啡因与精液共孵育1 h对冷冻后精子质量最有利,解冻后精子活率和活力显著高于其他各组,且解冻后精子体外存活时间最长。     

犬精液冷冻液的优化试验

通过对不同配方的稀释液、添加不同剂量的维生素B12、维生素C和复合维生素B对解冻后精子存活影响的试验,结果表明,配方Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种稀释液制作的冻精解冻后精子活率均大于30.00%,Ⅰ液最高,其冷冻精液解冻后活率可达43.35%±0.85%,但Ⅰ液和Ⅱ液差异不显著(P>0.05),Ⅲ液最低,差异显著(P<0.05);顶体完整率和畸形率Ⅰ液最优,差异显著(P<0.05);Ⅱ液与Ⅲ液差异不显著(P>0.05);在Ⅰ稀释液中添加维生素B12对解冻后精子的活率、精子顶体完整率影响不大,但平均值都高于对照组,并且随着维生素B12量的增加,精子畸形率有继续降低趋势;添加复合维生素B 4mL/100mL,维生素C 4mL/100mL对犬精子均有保护作用。     

版纳微型猪近交系精子冷冻保存研究

在版纳微型猪近交系（BMI）公猪精液冷冻保存稀释液中添加不同浓度甘油,并对不同解冻液配方和解冻方法进行研究,对比解冻后的精子活力、质膜完整率和顶体完整率,优化BMI公猪精液冷冻保存方法。结果表明,解冻后,甘油浓度为2%和3%组的精子活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于1%、4%和5%组（P<0.05）;Ⅰ号解冻液解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率均显著高于Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ号解冻液（P<0.05）;在活力、质膜完整率和顶体完整率方面,40℃ 6 s和50℃ 6 s这两种程序的解冻效果都显著优于38℃ 30 s（P<0.05）。由此可见,2%或3%的甘油作为抗冻保护剂、Ⅰ号解冻液解冻、40℃ 6 s或50℃ 6 s水浴解冻是较为理想的BMI公猪精液冷冻保存方法。     

绒山羊精液冷冻保存技术的研究

为了使绒山羊精液得到长期保存,充分发挥和提高优良种公羊的利用率,本实验对绒山羊精液冷冻保存技术进行了研究,比较了4种自行研制的保存稀释液的冷冻效果。结果表明:采用Ⅰ液(葡萄糖-卵黄-柠檬酸钠)冷冻保存绒山羊精液,解冻后精子活率(0.508±0.010)极显著高于Ⅱ液(葡萄糖-卵黄-乳糖-柠檬酸钠)(0.275±0.008)、Ⅲ液(葡萄糖-卵黄-蔗糖-柠檬酸钠)(0.354±0.012)和IV液(葡萄糖-卵黄-蔗糖-乳糖-柠檬酸钠)(0.319±0.006)(P<0.01);Ⅲ液极显著高于Ⅱ液(P<0.01)和显著高于Ⅳ液(P<0.05)。解冻后Ⅰ液的精子顶体完整率(59.4%±0.5%)极显著高于Ⅱ液(47.1%±0.8%)、Ⅲ液(52.4%±0.6%)和IV液(51.3%±0.5%)(P<0.01)。精液解冻后在室温(23±2)℃下避光培养,Ⅰ液中精子活率在5h内能够保持0.30以上,Ⅱ、Ⅲ液和Ⅳ液精子活率维持在0.3不到2h。     

奶牛性控冷冻精液品质和转染外源DNA的特点

本研究分析了奶牛性控冻精与普通冻精解冻后精液品质和转染外源DNA的特点。奶牛性控冻精与普通冻精解冻后,分别检测精液品质和精子超微结构,并与地高辛标记的线性化pEGFP-N1质粒共育转染,用免疫组化的方法检测精子转染外源DNA的效率。结果表明:性控冻精与普通冻精相比,有效精子数少(P0.01),精子活力、顶体完整率差(P0.05);2组精子超微结构都出现一定程度的顶体破裂、脱落等形态变化;2组精子都具有自动结合和转运外源DNA的能力,性控冻精转染率极显著高于普通冻精(P0.01),分别为(11.34%±2.41%)和(7.30%±2.14%)。     

多浪羊细管冷冻精液制作技术的研究

为保存和利用优秀地方品种多浪羊的遗传资源,试验在多浪羊原产地进行了细管冻精制作试验.用采集的多浪羊种公羊精液,比较5种冻精保存液配方的细管冻精冷冻效果,测定解冻后精子活力.结果表明:4.83%乳糖保存液解冻后精液的活率平均为36% ,优于其它4种保存液,且差异极显著(P<0.01),解冻后精子的畸形率也均低于其它4种稀释液,差异极显著(P<0.01).表明4.83%的乳糖保存液配方是理想的绵羊细管冻精稀释液.     

不同稀释液配方对牛冻精品质的影响

选用3种稀释液配方分别对6头种公牛精液进行稀释、封装、冷冻,并检查种公牛冻精解冻后的精子活力、畸形率、顶体完整率、冻后废弃率、存活时间及镜检感光度.结果表明：3种不同稀释液配方对种公牛精液冻后活力影响差异均显著（P＜0.05）,Ⅰ稀释液生产冻精的畸形率极显著高于Ⅱ稀释液和Ⅲ稀释液（P＜0.01）,3种稀释液冻精精子顶体完整率之间差异均极显著（P＜0.01）,Ⅲ稀释液与Ⅰ稀释液和Ⅱ稀释液间对牛精液所生产冻精的冻后废弃率影响均差异显著（P＜0.05）,Ⅰ稀释液与Ⅱ稀释液和Ⅲ稀释液间对牛精液所生产冻精的存活时间影响差异也显著（P＜0.05）,Ⅲ稀释液生产的冻精精子感光度优于Ⅰ稀释液和Ⅱ稀释液,其余各项指标差异均不显著（P＞0.05）.因此,可用自配Ⅱ稀释液替代进口专用Ⅲ稀释液.     

波尔山羊冻精解冻方法效果的分析

本文针对影响冻精配种受胎率的各种因素 ,总结分析了几年来在波尔山羊冻精配种中 ,采用不同解冻方法解冻冻精对精子活力、存活时间、顶体完整率、死活染色率以及受胎率几方面的影响 ,结果表明 ,80℃高温干解冻最理想 ,活力 0 3～ 0 4 ,存活时间 1 2～ 1 8h ;80℃高温干解冻优于 4 0℃低温湿解冻(P <0 0 5) ;干解冻效果与温度呈正相关关系 ,以 80℃为最好 ,湿解冻与温度呈负相关关系 ,以 4 0℃为最好 ;精子存活时间与受胎率呈正相关关系 ;一次性解冻一粒冻精活力最好 ,两项指标均超过一次解冻多粒冻精 (P <0 0 5) ,一次干、湿解冻 2、3、4粒冻精 ,各项指标间差异不显著 (P >0 0 5) ,且活力、存活时间、顶体完整率、活精子染色率等指标均达到冻精配种要求 (活力 0 3) ,实际配种情期受胎率达 50 %以上。因此 ,在实际生产中 ,可采用高温 ( 80℃ )干解冻和低温 ( 40℃ )湿解冻两种方法 ,一次性解冻 1～ 4粒冻精 ,既能保证受胎率 ,又可节省精液和时间 ,提高工作效率     

不同解冻程序对荣昌猪冷冻精液解冻效果的影响

为优化猪冷冻精液解冻程序,本研究使用3种解冻液(M、J和C)对荣昌猪冷冻精液进行解冻,检测冷冻精液在不同解冻温度(32、37、42、47、52℃)和不同解冻时间(10 s或20 s)解冻后的精子活率、精子活力、快速前进运动精子数和慢速前进运动精子数,并使用因子分析法评估不同解冻液最佳解冻程序.结果显示:解冻液M在保存指...