荷兰牛睾丸的发育和精子发生的建立

<正> 52头荷兰公牛分别于12、16、20、24、28或32周龄去势,以确定:(1)出生季节(4月或10月)对睾丸发育是否有影响,(2)定量检查精子发生的建立。出生季节(春委或秋季)对去势时的睾丸重量或精子发生的建立都无影响(P>0.05)。以年龄为常数,阴囊周径和睾丸重量有关(0.79;P<0.05)。睾丸重量由12周龄的9±1克增加到32周龄的117±10克。精小管在12周龄     

基于转录组学筛选与哺乳动物睾丸发育相关基因及调控网络的研究进展

睾丸正常发育是雄性哺乳动物精子发生及有效繁殖力的先决条件,其发育过程极其精细和复杂,受到许多因素的影响及调控,但遗传调控占主导地位。哺乳动物睾丸的发育首先会受到大量蛋白编码基因的严格调控,非编码RNA(miRNA、lncRNA和piRNA)也在睾丸发育及精子发生过程扮演重要角色。近年来,以mRNA、miRNA、lncRNA、piRNA为主的转录组学在解析哺乳动物睾丸发育以及精子发生分子机制得到充分应用,并且取得了很大进展。本文从睾丸发育相关mRNA、miRNA、lncRNA、piRNA等方面对哺乳动物睾丸发育研究现状进行介绍与阐述,旨在为深入挖掘睾丸发育基因组变化以及畜牧业中动物育种提供重要理论依据。     

羊驼睾丸细胞凋亡及凋亡相关蛋白的定位

本研究旨在观察羊驼睾丸的出生后发育和精子发生过程中的细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl2和Caspase3 的定位.取材新生、12月龄和24月龄羊驼的睾丸,用TUNEL法检测睾丸发育和精子发生过程的细胞凋亡,用免疫组织化学技术检测凋亡相关蛋白Bcl2和Caspase3在羊驼出生后发育和精子发生过程中的定位.结果显示在新生羊驼睾丸未检测到TUNEL阳性细胞,Caspase3和Bcl2表达于间质细胞,提示在新生期凋亡蛋白参与间质细胞凋亡的调节,为曲精小管的发育提供空间;12月龄羊驼睾丸TUNEL阳性细胞定位于曲精小管中央部分,Caspase3 和Bcl2定位于间质细胞和曲精小管中央生殖细胞,提示在青春期(12月龄)羊驼睾丸,细胞凋亡和凋亡相关蛋白参与曲精小管管腔形成的调节;24月龄羊驼睾丸TUNEL阳性细胞定位于精原细胞、精母细胞和精子细胞,Caspase3 和Bcl2定位于间质细胞和各个发育阶段的生精细胞,Caspase3阳性细胞在精原细胞最高,向精母细胞和精子细胞逐渐减少,Bcl2在精原细胞弱阳性表达,在血睾屏障以内的曲精小管近腔室部分呈弥散性强阳性表达,提示在性成熟(24月龄)羊驼睾丸精子发生过程中,细胞凋亡主要发生于精原细胞和早期精母细胞,Bcl2可能抑制精母细胞之后生殖细胞的凋亡.结果提示在羊驼睾丸出生后发育和精子发生过程中存在细胞凋亡现象;凋亡蛋白Caspase3和Bcl2参与羊驼睾丸发育和精子发生过程中细胞凋亡的调节.     

GDNF mRNA在猪睾丸不同发育阶段的表达

为了进一步探索GDNF mRNA的表达与精液品质、精液量甚至精子发生之间的关系,以及GDNF在睾丸发育和精子发生中的作用提供一些新线索,并且可能为治疗男性不育提供新的思路,研究采用半定量RT-PCR法研究了胶质细胞源性神经营养因子(Glial cell line-derived neurotrophicfactor,GDNF)在不同发育阶段的公猪睾丸中的表达。结果表明:仔猪出生后2周,睾丸中即存在GD-NF mRNA的表达;随着年龄的增加,GDNF mRNA水平持续升高,其中第6月龄达到高峰。说明GD-NF mRNA在公猪睾丸的支持细胞中表达,随着年龄的增长,GDNF表达量增加,可能以旁分泌的形式调节精子发生;GDNF可能参与了仔猪睾丸的发育和精子发生的调控,但其具体的作用机制还有待于进一步研究。     

雌激素对睾丸发育及生精功能的影响

雌激素与睾丸的功能密切相关.人和哺乳动物体内雌激素的合成需芳香化酶(Ar)的参与,而雌激素与特异受体(ERα、ERβ)结合后才发挥生物学效应.在睾丸所有发育阶段,芳香化酶和雌激素受体几乎都有表达.在睾丸发育过程中,雌激素的缺乏对胎儿睾丸的发育有利.但对成年动物来说,大剂量的雌激素可以引起睾丸功能紊乱和生精障碍,而体外条件下小剂量的雌激素又能促进精原细胞的分裂、增生和分化,诱导精子发生和精子成熟,减少细胞凋亡.文章主要从睾丸内雌激素的来源、芳香化酶和雌激素受体的分布、雌激素对胎儿和新生儿睾丸发育以及对精子发生的影响这几个方面进行了综述.     

牦牛与犏牛联会复合体蛋白b-FKBP6基因的表达特征分析

<正>联会复合体蛋白FKBP6是哺乳动物精子发生减数分裂联会复合体形成必需的。采用RT-PCR和荧光定量PCR技术对牦牛和犏牛b-FKBP6基因的组织表达特征,以及牦牛与犏牛睾丸组织中b-FKBP6 mRNA表达水平进行了分析。结果显示:b-FKBP6基因在牦牛、犏牛睾丸和卵巢组织中特异表达,且牦牛睾丸组织中b-FKBP6mRNA表达水平极显著高于犏牛(P0.01)。结合犏牛精子发生减数分裂联会复合体形成障碍表型,推测睾丸组织b-FKBP6 mRNA表达     

家兔的生殖生理和人工授精

<正> 一、家兔的生殖生理(一)公兔的性成熟、精子发生和精液特性:公兔性成熟的月龄,与品种、个体、饲养管理水平、气候以及遗传有关。一般在4—4.5月龄时,睾丸内就能产生成熟的精子,己达到性成熟阶段,具有繁殖后代的能力。但由于正处于生长发育阶段,所以其适宜的初配月龄应推迟一些。通常毛兔在8—9月龄、体重3—3.5公斤时开始配种,皮肉兼用兔和肉用兔因生长较快,初配月龄可适当提前到7—8月龄、体重4公斤左右为宜。     

不同品种公羔初情期前睾丸生长及LH水平的差异

本试验测定了18头湖羊公羔及考力代20头公羔90日龄前睾丸生长和血浆LH水平。结果表明,湖羊睾丸的重量、直径在60和90日龄均显著大于考力代(P<0.05)。湖羊血浆LH水平从初生到90日龄均高于考力代。血浆LH水平与睾丸重量、直径均呈正相关。     

白消安对睾丸的毒害作用及机制探讨

白消安(busulfan)对精子发生具有较强毒害作用,可导致雄性不育,是制备精原干细胞(spermatogonial stem cells, SSCs)移植受体的理想药剂。睾丸炎对生精机能也有重要影响,甚至能导致雄性不育。然而,白消安损害血睾屏障(blood-testis barrier, BTB),影响精子发生的机制尚不清楚,尚不知其是否会导致非传染性睾丸炎症,并影响细胞因子分泌,损害生育能力。因此,本文综述了白消安对BTB的破坏作用、对睾丸细胞相关功能蛋白的影响,以及白消安损伤睾丸的缓解方法,以深入揭示白消安对睾丸细胞和BTB功能与结构的毒害作用,为研发高效安全的SSCs移植受体制备技术,以及化疗药物治疗和环境毒素作用下生精机能科学防护与恢复提供科学参考。     

孕期双酚A暴露对雄性子代大鼠生殖损伤的研究

本研究采用组织化学和酶联免疫吸附剂测定(ELISA)方法探讨孕期双酚A暴露对子代大鼠的生殖毒性作用。将15只妊娠0 d的雌性SD大鼠随机分为3组,分别灌胃50μL含0、1、10 mg/kg体重双酚A的橄榄油。分娩出的雄性子代大鼠生长至8周龄,取睾丸、附睾、精囊腺及前列腺称重,并制作组织切片观察组织结构的变化;取睾丸,测定抗氧化能力;取附睾,检测精子品质。结果显示,双酚A显著降低睾丸、附睾、精囊腺及前列腺的重量,抑制器官发育及睾丸精子发生;降低抗氧化酶活性、升高活性氧含量,破坏抗氧化能力;造成精子品质下降。     

藏绵羊PRDX5基因的克隆及其在睾丸中的表达

过氧化物氧化还原酶5 (PRDX5)是一种硫氧还蛋白,参与机体多种生物学过程。为了研究PRDX5基因在藏绵羊(Ovis aries)睾丸发育和精子发生过程中的作用,本研究以不同发育阶段(3月龄、1周岁和3周岁)的藏绵羊为研究对象,克隆了PRDX5基因的CDS区,并对其进行生物信息学分析;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot和免疫组织化学染色法,对PRDX5基因在藏绵羊睾丸不同发育阶段的表达和分布进行了检测。结果显示,PRDX5基因CDS区全长659 bp,可编码219个氨基酸;蛋白质结构预测显示PRDX5以α-螺旋为主,无信号肽;系统进化树显示,藏绵羊PRDX5基因与山羊(Capra hircus)亲缘关系最近;1周岁(性成熟期)和3周岁(成年)藏绵羊睾丸中PRDX5 mRNA相对表达量极显著(P <0.01)高于3月龄(性成熟前),但PRDX5蛋白表达量极显著(P <0.01)低于3月龄,且两者在性成熟后趋于稳定;PRDX5蛋白在藏绵羊睾丸不同发育阶段的支持细胞和间质细胞中均有表达。推测PRDX5基因可能通过调节细胞内ROS的水平影响精子发生...     

哺乳动物精子发生过程中的基因表达

在精子发生过程中,体细胞表达的结构性基因静止,而生精细胞特异的基因被激活[1].研究表明,在每个精子发生的不同阶段,至少生成有5%的具有阶段特异性的多肽(Boitani C.,1980).因此精子发生过程中伴随着许多睾丸特异性基因表达,包括原癌基因(proto-oncogenes)、细胞骨架蛋白基因(actin和tubulin等)、无精子因子基因(azoospermia factor,AZF)、热休克蛋白基因(heat shock protein,HSP)、同工酶基因(磷酸甘油激酶PGK-2,乳酸脱氢酶LDH-C等)等等.     

低蛋白日粮中添加非蛋白氮对湖羊睾丸发育的影响

为了研究低蛋白日粮添加非蛋白氮对湖羊睾丸发育的影响,将70只3～4月龄、体重为(24.3±1.7)kg雄性湖羊分为5组,每组7个重复,每个重复2只羊。分别饲喂含有豆粕或不同水平尿素的日粮:低蛋白对照组(低蛋白饲粮,粗蛋白含量(CP)=11.6%)、高蛋白对照组(豆粕饲粮,CP=17.6%)、1%尿素组(低蛋白饲粮+1%尿素,CP=14.5%)、2%尿素组(低蛋白饲粮+2%尿素,CP=17.3%)、3%尿素组(低蛋白饲粮+3%尿素,CP=20.1%)。试验预饲1周,正试8周,试验结束后,采集血样,应用放射免疫方法检测血清睾酮浓度;采集睾丸测量长径、短径、周径以及重量,苏木素-伊红染色法观察睾丸曲精细管形态。结果显示:不同组之间睾丸的重量和睾丸指数差异均不显著(P0.05),睾丸长径、短径和周径差异亦不显著(P0.05)。显微镜观察结果显示,与对照组相比,添加1%尿素组睾丸曲精细管内径显著减小(P0.05),生精上皮厚度有上升趋势(P=0.082);添加3%的尿素对睾丸生精上皮厚度无显著影响(P0.05)。各组间血清睾酮浓度差异不显著(P0.05)。结果表明:低蛋白日粮添加不同水平非蛋白氮对育成期湖羊睾丸发育无显著影响,但蛋白浓度过低有影响湖羊睾丸精子发生的趋势,添加1%尿素组睾丸生精上皮发育效果最佳,这为非蛋白氮应用于湖羊生产提供了科学依据。     

水貂单睾代偿机能的研究

为研究单睾公水貂生殖腺的代偿机能及其繁殖能力,我们对单睾和正常公貂的睾丸作了解剖与组织学形态比较,并在生产中进行配种繁殖观察。现将结果报告如下:一,形态比较在新疆饲养的公貂,其生殖腺从10月下旬开始发育,这时生精细胞始有分裂增生现象。12月中旬,睾丸平均重量达1.9(0.5—2.8)克。12月下旬在发育较好的睾丸中,曲精细管内的精原细胞分裂增生,形成许多     

水貂的雄性不育

<正> 在水貂的繁殖中,雄性不育是较常见的现象,有些色型的不育公貂可能高达20%以上(Onstad,1967;Sundgvist等,1983).据苏联某貂场统计,低生育力公貂占11.9%,完全无生育力的公貂占6.7%;且低生育力公貂的后代有22%的雄性个体完全没有生育力.一只公貂往往与数只母貂交配,不育公貂会引起与其交配的数只母貂都不受胎或个别受胎但繁殖力极低,因此,不育公貂在水貂生产上所造成的损失是不容忽视的.     

ART3功能及其与精子发生关系的研究进展

ADP核糖基转移酶3(ADP-ribosyl transferases 3,ART3)是ADP核糖基转移酶(ADP-ribosyl transferases, ARTs)家族成员之一,与非阻塞性无精症及癌症高度相关,干扰ART3基因或抑制该基因编码蛋白的表达,会导致精子密度降低、畸形率升高和曲细精管生精细胞脱落。ART3在精子发生过程中不可或缺,因此,深入研究其功能很有必要。目前,ART3在精子发生中的具体作用机制尚不清楚,并且相关研究报道较少。笔者综述了ARTs家族成员蛋白结构及其在精子发生中的作用,ART3蛋白结构预测及其在睾丸组织中的定位,并通过分析其在三阴性乳腺癌和黑色素瘤中的功能和作用,探讨其可能参与的调控通路,以期为揭示ART3在精子发生中的功能及作用机制提供科学参考,为提升动物精液品质、解决雄性不育等问题提供思路。     

动物精子的发生研究进展

精子发生主要在动物睾丸组织的曲细精管中进行,是由多种生殖细胞、体细胞共同参与的生殖进程之一。在精子发生过程中,细胞受到关键分子的影响,阶段性连续发生着独特的关键变化（有丝分裂、减数分裂、细胞变形及成熟精子形成）,贯穿着精原细胞到精子的生命起始全过程。对精子发生过程中睾丸及相关细胞、分子进行研究对于动物繁殖、物种保护以及生产力提高具有重要意义。随着测序技术的发展、多技术手段的广泛联合应用,一些新型技术手段也被应用于动物精子发生的研究当中。本文主要对精子发生关键场所、关键细胞及关键分子的研究进展进行综述,以期为动物繁殖相关科学问题的深入研究提供参考。     

黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织中Boule基因mRNA表达水平

Boule基因是DAZ家族成员之一,在生殖细胞中特异表达是精子发生过程中减数分裂的关键调控因子,其表达缺乏可引起减数分裂阻滞和精子生成障碍,导致雄性不育。为揭示Boule基因mRNA表达水平与犏牛雄性不育关系,本研究利用实时荧光定量PCR法,对黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织中Boule基因mRNA表达进行定量分析。结果表明:Boule基因在黄牛和牦牛睾丸组织中的表达水平相对都比较高,黄牛与牦牛差异不显著(P>0.05);而Boule基因在黄牛和牦牛睾丸组织中的表达水平显著高于犏牛,黄牛、牦牛与犏牛差异显著(P<0.05)。结果提示,Boule基因在犏牛睾丸组织中低表达与犏牛雄性不育相关,可作为研究犏牛雄性不育的重要候选基因。     

支持细胞对精原干细胞增殖、分化调控的研究进展

哺乳动物精子发生是在睾丸支持细胞(Sertoli cells,SCs)调节下完成的,SCs不但为精子发生提供物理支撑和稳定微环境,而且通过分泌多种蛋白对生殖细胞发挥增殖、分化、凋亡、吞噬、免疫豁免等多种调节作用。生理状态下,SCs调控精子发生的确切机制还不是很清楚。因此,本文对SCs与精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)及系列生精细胞特殊的结构关系以及二者间的调控关系进行了综述,以期为推动二者间调控机理的深入研究及提高动物育种繁殖效率提供参考。     

大豆异黄酮对香猪睾丸形态及精子发生标志基因表达的影响

为研究大豆异黄酮(soybean isoflavones,SI)对香猪睾丸形态及精子发生标志基因表达的影响,选择40头健康的28日龄雄性香猪,随机分成4组,每组10个重复,每个重复1头猪。1、2、3和4组分别在基础饲粮中添加0、125、250和500 mg/kg SI,饲喂60 d后从各组分别随机选取5头屠宰,采取睾丸样品,分析睾丸的组织形态及E型钙粘连蛋白1(Cdh1)、联会复合体蛋白3(SCP3)、过渡蛋白1(Tnp1)和波形蛋白(Vim)基因的表达。结果表明:各添加水平的SI均造成了睾丸曲细精管中空泡的形成,减少了管腔中成熟精子的数量;饲粮添加SI极显著降低了睾丸组织Cdh1、SCP3和Tnp1基因的表达量(P<0.01);添加250 mg/kg的SI显著降低了睾丸组织Vim基因的表达量(P<0.05)。由此可知,饲粮添加125、250、500 mg/kg的SI对香猪睾丸形态有明显损伤,抑制了精子发生标志基因的表达;250 mg/kg SI显著抑制猪睾丸支持细胞标志基因表达。