弓形虫病诊断方法研究进展

本文介绍了几种弓形虫诊断方法,包括染色试验、间接血凝试验、改良凝集试验、间接免疫荧光抗体染色试验、酶联免疫吸附试验、免疫胶体金技术和干扰素释放反应。在使用活的、有毒力的速殖子情况下,染色试验(DT)仍然是特异性、敏感性和重复性良好的弓形虫病检测手段;间接血凝试验(IHA)特异性不高,但由于其具有简便快速的特点,经常应用于流行病学调查;改良凝集试验(MAT)也可以用于流行病学调查,且因其特异和敏感性高,目前仍然是检测弓形虫病的金标准;亲和力ELISA省时省力,对于鉴定弓形虫急慢性感染有较高的应用价值;免疫胶体金技术(GICT)适用于弓形虫病早期检测和诊断,适合在基层推广应用;干扰素释放反应(IGRA)目前主要应用于人的弓形虫检验,在动物的检测中有待进一步发展。     

免疫学技术在弓形虫检测方面的研究概况

弓形虫病是世界分布最广泛的一种人兽共患病,此病在温暖潮湿的地区感染率极高,所以建立高效敏感的检测方法是非常必要的。目前,国内检测弓形虫病的技术有多种,其中以免疫学技术为主。虽然病原学检测方法的敏感性高,特异性强,但其成本高,对人体会产生严重的副作用,所以并不适宜推广。近年来,通过对弓形虫表面抗原的大量研究,检测弓形虫病的免疫学技术也有了显著提高。从敏感性差、操作复杂到现在的特异性强、快速简便,从单一抗原的检测到现在的多表面抗原的检测,无疑为检测弓形虫带来了新的思路。论文主要对检测弓形虫的ELISA、改良凝集试验以及化学发光免疫分析的最新进展进行了综述。     

2014年上海城区家养犬猫刚地弓形虫血清学抗体情况调查

为监测自2002年起弓形虫病防控技术实施以来上海市区犬猫弓形虫病的感染情况,本研究应用弓形虫酶联免疫吸附试验(ELISA),对2014年本市4个城区免疫点收治的共291条犬和91只猫的血清样品进行了抗体检测。ELISA检测结果显示,2014年犬、猫弓形虫抗体阳性率分别为5.50%和5.49%,不同季节间差异显著(P0.05),春季最高,为16.48%。本次调查表明上海市区仍然存在犬猫弓形虫感染,但弓形虫病防控技术的实施对降低其感染起到一定作用。笔者对16例弓形虫抗体阳性家养犬病例和5例弓形虫抗体阳性家养猫病例进行了回访调查,结果发现,该21例动物主人的弓形虫检测结果均为阴性。     

ELISA和IHA检测弓形虫抗体的比较试验研究

目的:分析ELISA方法和IHA方法检测弓形虫病的可靠性。方法:本文应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接血凝试验(IHA)两种方法,平行检测来自龙岩市某个猪场的32份猪血清中的抗弓形虫特异性抗体。结果:ELISA和IHA对猪弓形虫抗体阳性检出率分别为62.5%(20/32)、53.13%(17/32),这两种方法的阳性检出符合率较高,为71.88%(23/32)。其中,ELISA方法的敏感性(93.33%)、检测效率(81.25%)以及Youden指数(63.92%)都在IHA方法之上,但ELISA方法的特异性(12/17,70.59%)略低于I-HA方法(13/17,76.47%)。结论:ELISA和IHA两种方法均可用于猪弓形虫病的诊断和血清学调查,但ELISA方法更适用于猪弓形虫病的血清学调查。     

猪弓形虫病最新检测方法研究概况

弓形虫病是一种人兽共患寄生虫病。本文综述了猪弓形虫病的最新实验室检测方法研究情况,如病原学检测方法、血清学检测方法(包括凝集试验和ELISA)和分子生物学检测方法(包括PCR、荧光定量PCR、PCR-RFLP、原位PCR、免疫-PCR、环介导等温扩增法和核度探针技术)等,阐述了不同检测方法的检测效果和优缺点,以期为猪弓形虫病的检测与防控提供参考。     

弓形虫病免疫学诊断方法研究进展

弓形虫病是一种分布广泛、危害严重的人兽共患病,不但在公共卫生上有很重要的意义,而且对畜牧业也造成巨大经济损失.为了寻找敏感、特异、快速的弓形虫病诊断方法,国内外学者在弓形虫病诊断方面进行了大量研究.目前,弓形虫病调查、诊断的方法有病原学方法、免疫学方法、分子生物学方法,但免疫学方法仍是进行弓形虫感染调查、弓形虫病诊断的常用方法.检测抗弓形虫抗体或循环抗原的免疫学诊断方法主要有染色试验(DT)、凝集试验(AT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫胶体金技术等.文章就该病的免疫学诊断方法的研究进展加以概述.     

应用斑点酶联免疫吸附试验快速检测猪弓形虫抗体

将斑点酶联免疫吸附试验(Dot—ELISA)用于检测猪弓形虫抗体,并与常规ELISA和IHA法进行了比较。结果,对102份滴度下降的猪阳性血清检测,弓形虫抗体阳性检出率,Dot—ELISA为66.67％(68/102),常规ELISA为48.04％(49/102),IHA为27.45％(28/102);对675头商品猪血清检测,弓形虫抗体阳性检出率,Dot—ELISA为48.15％(325/675),常规ELISA为41.93％(283/675),IHA为33.80％(228/675);与3种寄生虫(猪囊虫、猪旋毛虫、住肉孢子虫)阳性血清无交叉反应;对123份弓形虫抗体阳性和158份阴性猪血清进行3次重复性试验,结果完全一致。结果证明,该法敏感性高,特异性强,操作简便快速(于接到病料后2h报告结果),便于在基层推广使用。     

几种检测猪弓形虫病ELISA诊断试剂盒的对比

以人工感染弓形虫的猪阳性血清及感染前的阴性血清为样品,比较3个国产(A、B、C)和2个国外(D、E)ELISA试剂盒检测猪弓形虫病的敏感性。用这5种ELISA试剂盒,检测人工感染弓形虫的猪阳性血清42份及感染前的阴性血清45份,并参考PCR扩增结果,比较这5种ELISA试剂盒检测猪弓形虫病的敏感性。5种试剂盒中,1种国产试剂盒的检测结果与PCR结果完全一致,其余4种试剂盒的检测结果都与PCR检测结果差别较大。结果表明,国产试剂盒A的检测效果最佳,国外试剂盒与部分国内试剂盒的检测结果相当,临床选用试剂盒时,可选择检测效果最佳的试剂盒A,不必盲目选择国外试剂盒。     

用BA-ELISA法诊断猪囊虫病研究

用方阵滴定确定的BA－ELISA法对宰后检验确认后为猪囊虫病的阳笥血清26份，阴性血清808份进行检测，其阳性符合率为100％，阴性附合率为99．9％，进行重复性试验，重复率为100％，经与旋毛虫，弓形虫、细颈囊尾蚴和猪蛔虫等病的阳性血清试验均无交叉反应，BA－ELISA法的敏感性高于常规ELISA法。     

实验动物弓形虫免疫胶体金快速检测方法的建立及试纸制备

将样品垫、包被了弓形虫排泄分泌抗原和胶体金结合物的结合垫,包被了弓形虫排泄分泌抗原和抗弓形虫抗体的硝酸纤维素膜、吸水垫依次首尾互相衔接粘贴在白色塑料板上,组装成免疫胶体金快速检测试纸条,并以此建立检测实验动物弓形虫抗体快速检测的方法。该法与传统的ELISA检测结果一致率为85%,而且快速、灵敏,适于基层实验动物弓形虫病...     

农三师猪弓形虫病血清学调查与分析

弓形虫病是龚第弓形虫引起的一种人和多种动物共患寄生虫病。本实验通过酶联免疫吸附(ELISA)试验对采自农三师辖区8个团场的不同养殖规模猪场的900份猪血清进行弓形虫病的抗体检测,结果表明猪弓形虫病在我师呈散发性流行。样品阳性率平均为36.33%,各辖区之间的抗体阳性率有一定差异,最高为49.16%,最低为21.33%。初步掌握我师猪弓形虫病的感染状况,为基层的防治工作提供技术指导。     

淮安市猪弓形虫病血清学调查

弓形虫病是刚地弓形虫引起的一种人和多种动物共患寄生虫病。本调查通过酶联免疫吸附（ELISA）试验对采自淮安15个规模猪场的300份猪血清进行弓形虫病的抗体检测,结果表明被检样本猪弓形虫病抗体阳性率平均为26．67％,各规模猪场之间的抗体阳性率有一定差异,最高为45％,最低为10％,被检猪场均有弓形虫病感染。     

囊虫病免疫诊断检测方法的研究进展

由于科学技术的发展,囊虫病免疫诊断检测方法有了很大的进展,主要有1.免疫学检测方法,包括酶联免疫吸附法(ELISA)、斑点酶联免疫吸附法(Dot-ELISA)、生物素-亲和素酶联免疫吸附法(BAS-ELISA)、单克隆抗体酶联免疫吸附试验(McAb-ELISA)、酶联免疫印渍技术(ELIB);2.基因检测技术,包括DIG标记DNA探针、细胞因子基因检测方法、基因重组技术;3.免疫试剂盒的应用,包括循环抗原酶联免疫试剂盒、猪囊虫短程抗体IgG4快速ELISA检测试剂盒等。     

犬弓形虫抗体间接ELISA检测方法的建立

试验以利用重组弓形虫SAG1基因转染蜥蜴利什曼原虫所表达获得的目的蛋白作为包被抗原,建立了一种快速、特异、可检测犬弓形虫抗体的间接ELISA方法。确定了抗原最佳包被浓度为6.75 μg/mL,血清最佳稀释度为1∶100,对已知阳性血清检测的下限可达1∶6400,批间和批内重复性试验的变异系数均小于10%,包被抗原的酶标板在4、-20 ℃环境中可保存8个月以上。建立的间接ELISA方法应用于犬弓形虫抗体的检测具有较好的敏感性及特异性。     

羊弓形虫病间接ELISA诊断方法的建立

为比较5种弓形虫抗原的诊断效果,建立实用的羊弓形虫病诊断方法,本研究制备了弓形虫速殖子全虫抗原和4个重组蛋白(GRA1、MIC3、MAG、BAG1),正交试验比较其免疫反应性,从中筛选出相对优势抗原并建立羊弓形虫病间接ELISA(iELISA)诊断方法,用于检测弓形虫特异的IgG抗体.研究结果表明:除BAG1外上述4种...     

应用生物素-亲和素系统检测感染兔弓形虫抗体的实验研究

鉴于弓形虫病感染的多样化,病原诊断又较困难,血清学检测逐渐成为常规辅助诊断方法之一.七十年代末国内外相继建立了检测血清中抗弓形虫抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA).近年来,生物素-亲和素系统(BAS)已用于多种抗原抗体系统但未见检测弓形虫抗体的报道.本文应用亲和素和生物素标记的过氧化物酶复合物(ABC)为标记物的ABC-ELISA方法检测感染兔弓形虫抗体的实验研究并与常规ELISA法进行对比观察,现将初步试验结果报告如后.     

鹤壁市肉羊弓形虫病血清学调查与分析

弓形虫病是一类重要的人畜共患寄生虫病,可导致宿主出现神经症状和繁殖障碍等疾病,同时对养殖户和消费者健康造成巨大的威胁。为了掌握河南省鹤壁市肉羊弓形虫病流行情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对鹤壁市不同地区33个羊场随机采集的728份肉羊血清样品进行了弓形虫抗体检测。结果表明:13个羊场含有弓形虫病阳性羊只,场阳性率39.39%,共83份血清样品检测为阳性,总阳性率11.40%;舍饲羊群弓形虫病阳性率较放牧羊群低,分别为9.88%和15.09%;不同发育阶段羊群弓形虫病阳性率有较大差异,其中以成年母羊偏高,为16.21%,仔(幼)羊群最低,为4.61%。说明鹤壁市肉羊弓形虫病流行情况较为严峻,相关防控措施需要实施。     

胶体金技术在弓形虫病诊断中的应用

利用胶体金标记技术诊断弓形虫病的方法有免疫金银染色法(IGSS)、快速斑点免疫金渗滤法(DIGFA)和胶体金免疫层析法(GICA)。其中胶体金标记免疫层析技术作为一种新型的免疫学快速诊断和检测技术,不仅具有敏感、特异、便捷等特点,而且适合基层和现场使用,成为当今快速检测病原体及临床快速诊断疾病的主要技术手段,在生物医学各研究领域特别是在医学检验中得到了日益广泛的应用。论文对免疫胶体金技术在弓形虫病诊断中的应用和发展进行了综述。     

牛新孢子虫病诊断方法的研究进展

<正>我国是养牛大国,牛新孢子虫对牛养殖业的危害极大,目前国家不少科研院所展开了对牛新孢子虫病的研究,特别是诊断方法的研究和流行病学调查为我国牛新孢子虫病的控制预防奠定了理论和技术基础。本文主要介绍牛新孢子虫病诊断的研究进展。1酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验(ELISA)是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。比较常用的是ELISA双抗体夹     

猪弓形虫病特异PCR诊断方法的建立

以核糖体DNA第一内转录间隔区(ITS1)序列作为弓形虫种特异的遗传标记．建立了猪弓形虫病特异PCR诊断方法。应用人工感染的方法建立了猪弓形虫病动物模型．摸索出猪弓形虫病PCR检测的最佳条件。敏感性和特异性试验结果显示，该PCR方法最低能检测到10个弓形虫速殖子的DNA，且与相关的8种原虫和线虫均无交叉反应，证明该PCR方法具有高度的敏感性和特异性。动物感染试验结果证明．在试验猪出现明显临床症状时(感染后第5d)．对取材的8个组织样品用该PCR方法检测，有6个组织样品为阳性，其中检出率最高的组织为肺门淋巴结。