不同生长调节剂对白刺花叶片愈伤组织诱导质量分析

以白刺花无菌苗叶片为试材,利用双因素正交实验设计,研究了不同生长调节剂对愈伤组织诱导效果的影响,以期筛选最佳的诱导培养基,为白刺花组培研究提供参考基础。结果表明:在MS培养基上,2,4-D与6-BA组合可诱导出较疏松型的愈伤组织,愈伤组织表面有瘤状突起且部分愈伤上有绿色芽点;2,4-D与KT组合也可诱导形成愈伤组织,但愈伤组织的生长及疏松度不及2,4-D与6-BA组合效果明显;NAA与6-BA,NAA与KT组合早期培养时在叶片边缘看到部分愈伤的生长,培养45d后愈伤开始褐化;在基本培养基研究筛选上,MB和B_5均能诱导愈伤组织,愈伤组织颜色稍显淡绿。2,4-D有利于白刺花愈伤组织的诱导,最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D 1.0mg·L~(-1)+6-BA 1.0mg·L~(-1)+蔗糖4%+琼脂0.7%,出愈率75.58%,愈伤组织出愈早,疏松,生长旺盛。     

鸡屎藤愈伤组织诱导及细胞悬浮培养研究

建立鸡屎藤愈伤组织的诱导、增殖继代培养及其细胞悬浮培养的技术体系。研究不同植物激素组合对叶片、茎段和带腋芽茎段愈伤组织诱导的影响;采用正交试验研究不同处理对叶片愈伤组织增殖的影响;采用液体振荡培养法测定叶片愈伤组织细胞悬浮生长曲线。结果表明：叶片最易诱导产生愈伤组织,最佳激素配比为MS＋6-BA1.0mg/L＋NAA0.5mg/L,诱导率可达100%。叶片愈伤组织最佳增殖培养基为MS＋2,4-D0.5mg/L＋NAA0.3mg/L＋6-BA0.5mg/L,pH5.8。由叶片愈伤组织建立的细胞系生长呈＂S＂型曲线,培养24d达到最大生长量,最适继代周期为18～20d。以叶片为外植体经愈伤诱导、增殖培养可建立良好的细胞悬浮系。     

金丝小枣愈伤组织的诱导植株再生以及染色体变异的研究

以金丝小枣当年生枣头为外植体、以改良ＭＳ培养基为基本培养基，附加不同浓度的２，４—Ｄ、 ＩＢＡ诱导愈伤组织产生。 ２，４—Ｄ易诱导出疏松的Ⅱ型愈伤组织，ＩＢＡ则有利于致密的Ⅰ型愈伤组织形成，黑暗条件下诱导愈伤组织比光照条件下更有效。愈伤组织继代繁殖时，２，４—Ｄ的浓度影响了愈伤组织类型和染色体的数目变异。 两种类型愈伤组织再分化能力不同，Ⅱ型几乎没有分化出芽的能力、而Ⅰ型在相对高浓度６ＢＡ存在下分化出不定芽，同时在ＩＢＡ０．２＋６ＢＡ１的ＭＳ上诱导出大量胚状体。 选择了３０个芽丛再生植株元性系进行继代繁殖，０．３ｐｐｍＩＢＡ最有利于生根。这３０个植株无性系中有１个四倍体，２９个为二倍体。     

五味子愈伤组织培养及醇甲含量分析

以五味子叶片和茎段作为外植体进行愈伤组织的诱导,对愈伤组织诱导的影响因素、愈伤组织发育特征以及愈伤组织形成过程中五味子醇甲的积累情况进行研究.结果表明:B5培养基比MS培养基更利于愈伤组织的诱导.根据愈伤组织的发育状态特征可以将其分为4类,其中颜色微黄、质地疏松的C类愈伤组织中所积累的五味子醇甲含量最高.添加1.0 mg/L BA、0.2 mg/L NAA和0.1 mg/L KT的B5培养基上较易诱导出C类愈伤组织,其五味子醇甲含量最高达到4.28 mg/g FW.该研究的初步结果对通过愈伤组织悬浮培养生产五味子素的进一步研究奠定了重要基础.     

甘蔗近缘属斑茅组织培养高频再生体系的建立

以甘蔗近缘属植物斑茅的幼嫩叶片为材料,研究MS、SH、B5三种基本培养基和不同激素（2,4-D、NAA、6-BA）配比对斑茅愈伤组织诱导及继代培养的影响,并筛选出斑茅细胞高频再生体系的最优培养基配方。研究结果表明,斑茅幼嫩叶片愈伤组织诱导培养基以MS＋2,4-D 3.0 mg/L＋6-BA 0.4 mg/L为最适,愈伤组织继代培养基以MS＋2,4-D 3.0 mg/L为最适。在此条件下诱导的愈伤组织质地疏松,具有较强的分化能力。目的是建立斑茅组织培养的高频再生体系,为斑茅材料的细胞悬浮培养、染色体加倍和细胞融合等研究提供一定参考。     

怀地黄愈伤组织诱导及细胞悬浮培养体系的建立

研究了植物生长调节剂和接种方式对怀地黄叶片愈伤组织诱导的影响和细胞悬浮培养体系的建立。结果表明:将叶片正接在MS+2,4-D 1mg/L+6-BA 0.4mg/L培养基上,愈伤组织生长良好,诱导率达100%;在该培养基上多次继代,可形成3种类型的愈伤组织,其中Ⅰ型愈伤组织淡黄色、颗粒透亮、分散性好且疏松易脆,适合进行细胞悬浮培养;在MS+2,4-D 3mg/L+6-BA 0.5mg/L培养基中,悬浮培养细胞生长曲线呈"S"型,培养15d时细胞干重达最大值,为4.94g/L。     

多倍体大蒜胚状体诱导条件研究初报

以大蒜根尖为试材,采用0.05％秋水仙素溶液诱导多倍体,研究了愈伤组织的诱导和培养方法,以及胚状体的诱导方法,以期为大蒜胚状体诱导提供依据.结果表明:在MS+2,4-D 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L培养基上,大蒜根尖可形成疏松型和致密型2种愈伤组织结构;将致密型愈伤组织培养在MS+KT 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基上,将形成胚状体.     

辣椒花药培养影响因素的研究

以6种基因型辣椒的花蕾为材料,比较了不同基因型辣椒花蕾的消毒效果,辣椒基因型及花药接种量对花药培养的影响。研究结果表明,本试验的消毒方法获得了较好的消毒效果,3个基因型材料均未受污染,其他最高的污染率为23.08%;50%的基因型能诱导出胚状体,出胚率1.18%～1.38%,小果型的辣椒不能诱导出胚状体;所有基因型均能诱导出愈伤组织,出愈率17.65%～69.44%;花药接种量对花药愈伤组织诱导有影响,增大接种量,出愈率上升0.77%～13.67%,但对胚状体诱导影响不明显;在愈伤组织的继代培养中,接种量对其生长的影响因基因型不同而不同,所有基因型的愈伤组织在第一次继代培养中均不能分化出胚状体或不定芽。     

金银花疏松愈伤组织诱导及细胞悬浮培养研究

以"巨花一号"金银花为试材,研究了外植体、培养基对金银花疏松愈伤组织的诱导以及初始接种量和蔗糖浓度对金银花悬浮细胞生长的影响。结果表明:幼叶最易诱导愈伤组织,其诱导及增殖的最适培养基为MS+2,4-D 2.0mg/L+KT 0.5mg/L;细胞悬浮培养中愈伤组织最适初始接种量为60g/L,培养基中蔗糖浓度为35g/L时细胞生长最好。     

南瓜疏松愈伤组织诱导的研究

获得生长迅速,疏松的愈伤组织是进行植物细胞悬浮培养的前提.研究以"粟冠"南瓜子叶做外植体,在添加不同浓度的BA和NAA的MS固体培养基上诱导南瓜愈伤组织,比较南瓜愈伤组织的诱导率和长势,其中当外植体在MS 1.0 mg/L6-BA 0.1 mg/L NAA的培养基上培养时,愈伤组织诱导率和长势最好.     

苹果原生质体分离培养及植株再生

以悬浮培养细胞及叶片作为分离原生质体的起始材料 ,对影响苹果原生质体分离和培养的因素进行了系统研究。优化的原生质体培养基为 :改良MT 维生素C 5mg/L BA0 .5～ 1mg/L 2 ,4 D 0 .2mg/L 蔗糖 0 .6 5mol/L 谷氨酰胺 50 0mg/L CH 10 0mg/L ME50 0mg/L ;以葡萄糖代替蔗糖作渗透压调节物质效果好 ,且在培养过程中不需降压 ;适宜的低密度培养 (0 .5× 10 5/mL)可减少褐变。悬浮系原生质体培养 5～ 6d出现第 1次细胞分裂 ,15～ 2 0d形成多细胞团 ,4 0～ 50d形成肉眼可见的小愈伤组织。经培养诱导出不定芽 ,并进一步诱导生根长成完整植株。获得了平邑甜茶、M2 6 、嘎啦 3种基因型的原生质体再生植株。     

镜面草叶片和叶柄愈伤组织诱导

以镜面草( Diels)叶部器官为研究对象,分别以叶片、叶柄作为外植体,研究不同激素种类及其浓度配比对镜面草愈伤组织诱导过程的影响.结果表明,镜面草的叶片和叶柄均可在2,4-D、NAA、6-BA的诱导下产生愈伤组织,但激素单独使用和不同种类不同浓度组合对镜面草愈伤组织的诱导效果不同:2,4-D单独使用且浓度为0.5 mg/L时,愈伤组织诱导率达到95%以上,NAA 1.0 mg/L虽也有相当的效果,但NAA浓度达到0.5 mg/L时,叶片和叶柄均会产生不定根;试验设计细胞分裂素6-BA分别与2,4-D和NAA不同浓度组合处理叶片、叶柄,诱导愈伤组织产生的最佳激素组合为2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L.     

花烛不同愈伤组织解剖结构的观察

 以花烛(Anthurium andraeanum ) ‘Jolanba’8种不同培养时期或不同激素处理的愈伤组织为材料, 通过显微观察研究了花烛离体形态发生途径和8种愈伤组织离体形态差异的解剖学特点。结果表明,花烛离体形态发生途径以间接器官(不定芽) 发生为主, 且发生于愈伤组织近表层; 同时也存在体细胞胚途径, 发生于愈伤组织表面或内部。8种愈伤组织在结节( nodule) 的类型、分生细胞的数量及分布等方面存在差异。分生细胞的数量和分布与芽的分化有较好的相关性, 愈伤组织表层分生细胞分布较多, 分化的芽也较多, 而愈伤组织内部分生细胞分布较少, 分化的芽也较少。噻二唑苯基脲( TDZ) 对分生细胞和体细胞胚有较好的诱导作用。愈伤组织的表面划痕和再次切割有利于再生芽的分化。     

In vitro callus-induction in globe artichoke (Cynara cardunculus L. var. scolymus) as a system for the production of caffeoylquinic acids

Summary

Globe artichoke (Cynara cardunculus L. var. scolymus) provides a rich dietary source of bio-active compounds derived from phenylpropanoid metabolism, notably caffeoylquinic acids (CQAs) and flavonoids. Micropropagation techniques have been established for this species, but in vitro cultures have not yet been extended to generate an efficient system for the induction of callus tissue. In this study, we compared more than 100 combinations of media supplements (e.g., phytohormones, absorbers of polyphenols, and inhibitors of polyphenol oxidase), along with various light regimes, and three different genotypes of globe artichoke to define the optimal conditions for callus induction from leaf explants. This led to the elaboration of an in vitro culture protocol which resulted in a high frequency of callus induction after just 1 week in culture. The procedure used leaf explants from virus-free, meristem culturederived plantlets. Quantitative HPLC analysis revealed that, as in globe artichoke leaves, the predominant phenolic esters present in callus were mono- and di-caffeoylquinic acids (diCQA). The concentration of diCQA was three- to five-fold higher in calli than in leaves. The exposure of calli to UV-C light further enhanced the levels of CQAs. In vitro callus culture combined with UV-C irradiation may thus represent a viable production system for diCQA that is suitable for the synthesis of pharmacologically-active compounds.     

番茄花药愈伤组织诱导中脯氨酸含量变化的研究

通过接种在两种不同激素浓度培养基上的花药进行培养得到的不同愈伤组织,进行游离脯氨酸的测定,结果表明:愈伤组织的游离脯氨酸含量始终高于胚性愈伤组织的含量,说明游离脯氨酸在愈伤组织形成过程中起重要作用.     

菊苣组织培养及植株再生

以普那菊苣叶柄为外植体进行组织培养试验,结果表明:菊苣叶柄在5种培养基上均可诱导出愈伤组织,总出愈率在90%以上,但分化效果因培养基的不同而有较大的差异.诱导愈伤组织及分化的最佳培养基为:MS KT 1.0 mg/L十NAA 0.2 mg/L;生根培养基为:MS IBA 0.2 mg/L.     

薰衣草叶片高频再生体系的建立

 以薰衣草叶片为外植体进行了离体再生研究。结果表明: 叶片愈伤组织诱导最佳的培养基是MS + 2,4-D 0.1 mg/L + 6-BA 0.5 mg/L, 诱导率高达100%; 液体悬浮—固体培养芽分化率达92.5% , 芽数/愈伤组织达6.6; 正交试验筛选出芽增殖最佳培养基为MS +NAA 2.0 mg/L + 6-BA 0.5 mg/L + IAA 1.0 mg/L, 其增殖系数高达8.7; 在芽增殖培养基上可直接生根, 生根率达100%。     

中国李Nubiana胚性愈伤组织诱导及植株再生

以中国李Nubiana试管苗幼嫩叶片为外植体,探讨激素浓度配比、暗培养时间、琼脂浓度等对胚性愈伤组织诱导及TDZ浓度对胚性愈伤组织不定芽再生的影响,建立其愈伤组织诱导及不定芽再生体系。结果表明,外源激素对中国李Nubiana胚性愈伤组织诱导影响显著,TDZ不适合胚性愈伤组织的诱导;暗培养28 d,产生的愈伤组织质地较好,诱导愈伤组织的效果最佳。胚性愈伤组织在WPM+NAA 0.5 mg·L-1+6-BA 2.0 mg·L-1+TDZ 2.0 mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂6.0 g·L-1培养基上光培养可再生出不定芽,其再生率为6.7%。