仔猪副伤寒活疫苗生产用菌株生长曲线的建立及合成培养基初步应用

建立了仔猪副伤寒活疫苗生产用菌株生长曲线,获取菌株培养参数,从而实现合成培养基初步应用。将猪霍乱沙门氏菌(CVCC79500株)运用试管和三角瓶分别静置和振荡培养30 h,期间取4、8、12、18、24、30 h等6个点进行活菌计数并建立生长曲线,确定37℃静置培养18~24 h,37℃、200 r/min振荡培养8~24 h为培养稳定期。不同接菌量比较结果表明,37℃静置培养24 h,37℃、200 r/min振荡培养12 h均可达到菌体稳定期。在稳定期参数条件下,比较合成培养基与常规普通肉汤培养基对该菌的增殖效果,结果表明,37℃静置培养24 h,试管及三角瓶培养菌数分别为27×108~31×108、33×108~41×108CFU/m L;37℃、200 r/min振荡培养12 h,试管及三角瓶培养菌数分别为58×108~66×108、78×108~88×108CFU/m L。而同条件3批普通肉汤培养菌数均低于合成培养基,且批次间稳定性较合成培养基差。将合成培养基振荡培养12 h的菌液接种小鼠均10/10存活;免疫后攻毒家兔达4/5~5/5保护,与普通肉汤基本一致。合成培养基保存期试验表明,25℃避光保存28 d与当天配制的液体合成培养基,振荡培养菌数基本一致。获取的培养参数适合用于合成培养基的初步评价,研制的合成培养基培养菌数优于普通肉汤,且不影响菌体安全性及免疫原性,室温保存期可达28 d。     

改良培养基生产仔猪副伤寒活疫苗的研究

为提高仔猪副伤寒活疫苗质量,降低生产成本,使用某培养基生产企业生产的仔猪副伤寒干粉培养基,添加0.75%的水解乳蛋白,配制成合成培养基(以下称改良培养基),用于仔猪副伤寒活疫苗(C500株)的生产,同时与自制培养基进行比较。结果表明,改良培养基培养的活菌数平均达到515×108CFU·m L-1,高于自制培养基水平(450×108CFU·m L-1);改良培养基生产的6批活疫苗活菌率达50%以上,分别用兔做安全检验、产品经12个月的保存后计活菌数,均符合《中华人民共和国兽药典》2010年版三部[1]的质量要求。试验表明,改良培养基替代自制培养基用于仔猪副伤寒活疫苗(C500株)的生产是可行的,并能降低生产成本。     

猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗（EO630株）生产用合成培养基的研究

为便于猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗（E0630株）质量控制和降低生产成本,研制了ZJ-1和ZJ-2两种合成培养基,并进行了两种合成培养基与马丁肉汤的比较试验。结果表明,合成培养基ZJ-1培养活菌数高于ZJ-2和马丁肉汤。用合成培养基ZJ-1培养制备3批疫苗,并分别用兔进行安全检验和小鼠效力检验。3批疫苗对兔均2／2健活,对小鼠的保护力分别为9／10、9110、8／10,符合产品质量标准。本试验表明,运用合成培养基替代传统培养基是可行的。     

仔猪副伤寒活疫苗(C500株)生产工艺关键技术研究

仔猪副伤寒活疫苗(C500株)生产过程中,存在培养菌数低,冻干死亡率高等问题,影响产品的产量。本文针对仔猪副伤寒活疫苗(C500株)生产工艺关键技术进行研究,通过筛选接种量、培养基配方与通气量的参数关系;优化发酵培养工艺,采用自动添加40%葡萄糖补充碳源并作为调节p H值的手段;使用分光光度法与冻干工艺结合作为收获标准,从而达到提高培养菌数,降低冻干死亡率。本研究为生产高效、安全、稳定的仔猪副伤寒活疫苗产品提供有力地技术支持。     

仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗C500株生产工艺的优化

为优化仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗生产工艺,对细菌生长曲线、耐热保护剂和冻干曲线进行了研究,建立了发酵体积1%、2%和3%的二级种子接种量下分别发酵12 h~20 h的细菌生长曲线,检测3个配苗比例、4种耐热保护剂和3条冻干曲线下成品疫苗的冻干菌存率、活菌存活率和安全性,确定了接种3%二级种子液发酵培养17 h为最佳发酵培养条件,发酵菌数达到428×108CFU/m L;最佳配苗比例为菌液︰耐热保护剂1∶1(V∶V),优化保护剂B作为最佳耐热保护剂,设定冻干程序3#作为最佳冻干曲线。基于此,仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗抗原含量达到40头份/瓶,冻干菌存率和活菌存活率均达到95%以上,大幅度降低了猪体免疫副反应,极大提升了疫苗的产品品质。     

仔猪副伤寒活疫苗半合成培养基的配方筛选试验

研制了一种适用于仔猪副伤寒活疫苗生产的半合成培养基，解决了培养基质量不稳定的问题。选用几种营养成分配比，制成半合成培养基进行细菌培养并冻干，结果冻前菌数超过普通肉汤培养基，冻干存活率略低于普通肉汤培养基，安全性检验合格，证明该培养基替代现用培养基生产疫苗是可行的。     

猪丹毒疫苗效力检验攻毒冻干培养物的制备与应用研究

为提高猪丹毒疫苗效力检验结果的稳定性、一致性及工作效率,冻干制备了效力检验攻毒用猪丹毒丝菌培养物,对性状、纯粹、真空度、剩余水分、活菌计数、均一性等进行检测,测定在不同温度下短期存放的活菌数,监测在低温下长期保存的活菌数和毒力,并将其应用于猪丹毒活疫苗和灭活疫苗的效力检验。结果显示,该攻毒培养物性状良好,纯粹生长,真空度合格率98.2%,剩余水分小于3.5%,活菌数均值为3.8×10~9 CFU/瓶,瓶间活菌数变异系数(C.V)为10.0%,37℃以下温度存放2.5～3.0 h活菌数稳定,变异系数(C.V)为4.9%,-20℃保存36个月活菌数为3.0×10~9 CFU/瓶,每只小鼠注射6 CFU活菌5/5死亡,应用于猪丹毒灭活疫苗和活疫苗效力检验结果与常规方法一致。结果表明,该猪丹毒丝菌冻干培养物状态良好,活菌数和毒力较为稳定,能够满足猪丹毒疫苗效力检验攻毒使用,且提高了检验结果的一致性、稳定性及工作效率。     

仔猪副伤寒活疫苗生产工艺的改进

仔猪副伤寒活疫苗是由抗原性良好的猪霍乱沙门氏菌强毒株在含有醋酸铊的普通肉汤中传代培养,经传数百代后,筛选出1株毒力弱而免疫原性良好的弱毒菌株,命名为猪霍乱沙门氏杆菌C500弱毒株。     

用豆腐黄浆液制造培养基试制仔猪副伤寒弱毒冻干苗

用豆腐黄浆液制造培养基试制仔猪副伤寒弱毒冻干苗,得到与《规程》标准一致的结果。培养菌数可达到或超过牛肉汤培养菌数;试制的3批苗分别作锥黄素、因子血清、醋酸铊肉汤培养、菌落形态观察及家免检验等,证明试制苗性质不变。     

仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗的研究

为了解决仔猪副伤寒活疫苗在储存和运输中活菌数下降的问题,试验采用不同保护性基质组成冻干保护剂,与仔猪副伤寒沙门菌混合、冻干制成仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗,测定其冻干保护率和耐热保护率,以评价疫苗的质量。结果表明:T1和T2是优选的仔猪副伤寒耐热保护剂,采用T2保护剂中试生产的3批仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗经37℃保存10 d后,疫苗的耐热保护率在80%以上,且均大于3×109cfu/头份,具有良好的热稳定性,田间试验安全、有效。     

浅谈犬的激素失调性皮肤病

犬的皮肤病是一个常见病,虽不会直接危及犬的生命,却可以使犬奇痒、烦躁,影响休息和食欲,降低其抵抗力。若为宠物犬,还会降低它的观赏性和玩赏性,失去宠物犬应有的价值。犬皮肤病的病因有很多,有寄生虫性、真菌性、湿疹性、激素失调性及微量元素或维生素缺乏等。对于病原性和营     

贵州退耕还草 草场建植技术研究

采用L9(34)正交设计,利用草种组合、施肥量、播种方式、豆禾比例进行4因素3水平试验,探讨退耕坡地草地建设方式,试验结果表明:退耕坡地草地的建植首先需要考虑草种的搭配,其次是禾本科和豆科牧草的比例,第三是肥料的使用,第四是播种方式。在贵州中部地区退耕坡地适宜的草地建植方式为:草种为鸭茅+苇状羊茅+白三叶+多年生黑麦草,豆:禾=1:9,肥为N:P2O5:K2O=20:30:20,播种方式为翻耕条播。     

配方羊奶粉对小鼠免疫功能影响的研究

选用雄性BALB/c小鼠,通过腹腔注射环磷酰胺,构建免疫功能低下小鼠模型,评价益生菌+益生元配方羊奶粉和高钙富硒配方羊奶粉对小鼠免疫功能的影响。结果显示,益生菌+益生元配方羊奶粉和高钙富硒配方羊奶粉均可明显增强免疫低下小鼠脾淋巴细胞增殖能力（P<0.05）、自然杀伤细胞（NK）活性（P<0.01）以及碳廓清试验吞噬指数（P<0.01）。表明益生菌+益生元配方羊奶粉和高钙富硒配方羊奶粉对环磷酰胺致免疫力低下模型小鼠具有增强免疫力作用。     

基于VaR的最优金融投资问题

本文运用Va R即在险价值的概念,针对现实生活中的金融投资问题,运用历史数据模型和偏t正态分布模型对公司下一个收益周期的收益情况进行预测,并给出最优的投资金额。运用历史数据方法得出,在投资1000万元的前提下能以95%的置信度保证损失的数额不会超过多少9万元,并且若使一个周期内Va R>=10万元的可能性不大于5%,初始投资额最多应为1111.11万元。运用偏t正态分布模型得出,当投资1000万元时,可以保证亏损值在95%的置信区间内,不超过7.95万元;如果要求在一个周期内的损失超过10万元的可能性不大于5%,那么初始投资额最多应为1257.86万元。     

高原鼠兔对退化草地人工植被稳定性的影响

对高原鼠兔活动在“黑土型”退化草地上建植的人工草地上用堵洞法进行了调查研究,结果表明:当高原鼠兔的有效洞口密度达到60个/hm2时,人工草地优良牧草的地上植物量只有未危害草地的12%,牧草高度、盖度、密度均有大幅度下降;当达到80个/hm2时,优良牧草的地上植物量只有未危害草地的4%,牧草高度、盖度、密度进一步下降,人工草地开始向建植前的“黑土滩”演替。高原鼠兔通过对人工草地种群特征、物种多样性、土壤结构等方面的影响,来制约人工群落的稳定性与可持续发展。     

氯胺酮对犬脑电图影响的研究

以１０ｍｇ／ｋｇ体重的氯胺酮行肌肉注射，实验狗的脑电图５分钟时，波幅显著升高，１０分钟时极显著升高，然后逐渐降低，６０分钟内差异仍显著，犬脑电图特征为同步性高频高幅快节律，临床上出现显著的镇痛作用，然后逐渐恢复正常，但与其它麻醉药的不同之处是频率有出理显著。     

贵州退耕还草草场建植技术研究

采用L(3)正交设计,利用草种组合、施肥量、播种方式、豆禾比例进行4因素3水平试验,探讨退耕坡地草地建设方式,试验结果表明退耕坡地草地的建植首先需要考虑草种的搭配,其次是禾本科和豆科牧草的比例,第三是肥料的使用,第四是播种方式.在贵州中部地区退耕坡地适宜的草地建植方式为草种为鸭茅+苇状羊茅+白三叶+多年生黑麦草,豆∶禾=1∶9,肥为N∶POKO=20∶30∶20,播种方式为翻耕条播.