CIA抗体的间接ELISA检测方法

本试验建立了包被已知抗原,检测未知抗体的间接ＣＩＡ－ＥＬＩＳＡ方法,包被抗原为ＭＤＣＣＭＳＢ１,Ｃｕｘ－株上清,与血清样品作用。加酶联兔抗鸡ＩｇＧ后,与底物５－氨基水杨酸显色,并制定了合理的判定标准,此方法特异性好,操作简便,适于大批鸡抗体水平检查,并为免疫监测可靠技术手段。     

分泌抗赭曲霉素A单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用赭曲霉素Ａ（ＯＡ）－ＢＳＡ合成抗原免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，取免疫鼠脾细胞与ｓｐ２／０细胞融合，通过克隆和ＥＬＩＳＡ法筛选，建立三株泌抗ＯＡ单克隆抗体杂交瘤细胞株（３Ｃ１２，１Ｄ１２和２Ｇ７）。用间接ＥＬＩＳＡ法测定，细胞上清液抗体效价为１２８＾×（３Ｃ１２）和６４＾×（１Ｄ１２和２Ｇ７）腹水抗体效价为１０＾－７（３Ｃ１２，１Ｄ１２）和１０＾－６（２Ｇ７）。三株单抗（ＭｃＡｂ）均属ＩｇＧ类，分泌抗体     

应用间接免疫荧光法检测鸡传染性贫血病病毒抗体的研究

用鸡传染性贫血病病毒（ＣＩＡＶ）ＭＳＢＩ－ＴＫ５８０３毒株感染的ＭＤＣＣ－ＭＳＢ；细胞涂片为抗原，建立了检测ＣＩＡＶ抗体的间接免疫荧光法（ＩＩＦＡ）。应用该ＩＩＦＡ方法对人工感染的ＳＰＦ鸡进行了检测１５只１日龄ＳＰＦ鸡在接种后第７、１４天时均呈阴性反应；２１天时２只鸡呈弱阳性反应，２８天时均呈弱阳性反应，２１天时２只鸡呈弱阳性反应，２８天时均呈弱阳性反应，３５天时呈明显阳性反应；１４只４０日龄ＳＰ     

用于检测猪血清中猪生殖—呼吸道综合征病毒抗体的一种…

为了提高检测猪生殖－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）感染猪抗体的血清中和试验（ＳＮ）的敏感性，对不同条件进行了评价和改进，通过在病毒稀释液中添加２０％新鲜猪血清及使用派生于ＭＡ－１０４细胞系的一种受纳细胞克隆（ＭＡＲＣ－１４５），可自始至终获得较高的ＳＮ抗体效价，用于评估ＳＮ试验的待检血清来自两组３周龄，经鼻内感染ＰＲＲＳＶ（ＭＮ－１ｂ株）的猪。用此改良法，在接种后９～１１天首次检出ＳＮ抗体，且于接     

带母源抗体的青年鸡皮下接种传染性法氏囊病活疫苗的效果

在１日龄和３周龄鸡的脾粘着（ＣＳＡ）细胞中，检测到了被正常鸡血清（ＮＣＳ）中和过的传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）的感染性，有３周龄鸡的（ＣＳＡ）细胞中，检测到了被母源抗体（ＭＮ－Ａｂ）中和过的ＩＢＤＶ的感染性。此外，发现１日龄鸡制备的ＣＳＡ细胞含有补体受体（ＣＲ），１周龄鸡制备的ＣＳＡ细胞既含有ＣＲ又有Ｆｃ受体（ＦｃＲ）。然而，即使ＣＳＡ细胞上的ＦｃＲ被热凝集ＮＣＳ（５６℃，６０分钟）阻断的情况下，     

Ab—ELISA和Ag—ELISA诊断骆驼伊氏锥虫感染的比较

采用四种方法：即①单克隆抗体检抗原的酶联免疫吸附试验（Ａｇ－ＥＬＩＳＡ）②检测抗体的在酶联免疫吸附试验（Ａｂ－ＥＬＩＳＡ）③表膜检查（ＢＣＥ）④小白鼠接种（ＭＩ），检查了肯尼亚１８３头骆驼锥虫的循环抗原，ＢＣＥ查出尼亚１８３头骆驼锥早的循环抗原，ＢＣＥ查出３７头阳性２０％），ＭＩ６０头阳性（３３％），Ａｇ－ＥＬＩＳＡ６３头阳性（４９％），Ａｂ－ＥＬＩＳＡ检出出的２４头中，Ａｇ－ＥＬＩＳＡ检出１８头     

抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体中和株的建立

将纯化的鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）组织毒免疫的ＢＡＬＢ／ｃ鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，用ＥＬＩＳＡ，病毒中和试验检测分泌抗体，获得了６株稳定分泌抗ＩＢＤＶ单隆抗体的杂交瘤细胞，命名为ＮＩＢ－１，ＮＩＢ－２，ＮＩＢ－３，ＮＩＢ－４，ＮＩＢ－５，ＮＩＢ－６；６株ＭＣＡｂ均具ＥＬＩＳＡ特性和免疫沉淀特性，亚类鉴定表明，前４株属于ＩｇＧ２ａ，后２株属于ＩｇＧ１。杂交瘤细胞冻存６个月后复苏，均     

单克隆抗体介导抗原捕获酶联免疫吸附试验鉴定传染性支气…

作者建立了一种抗原捕获酶联免疫吸附试验（Ｃ－ＥＬＩＳＡ）。用对各血清型Ｓ１糖蛋白有特异性的单克隆抗体（ＭＡｂ），对阿肯色（ＡｒＫ）、康涅狄格（Ｃｏｎｎ）、马萨诸塞（Ｍａｓｓ）等血清型的传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）进行了检测和鉴定。当Ｓ１特异性单克隆抗体、抗原、鸡血清的血清型相同时，试验（采用双抗体夹心法）结果最为理想。而用群特异性（Ｍ糖蛋白特异性）ＭＡｂ捕获抗原。抗原和异源鸡血清之间有不同程度的交     

有丝分裂原对离体boPBMC增殖和分泌Ig的作用

应用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，ＥＬＩＳＡ和ＦＡＣＳ研究了离体奶牛外周血单核细胞（ｂｐＰＢＭＣ）对有丝分裂原的免疫应答。ＰＷＭ和ＣｏｎＡ能不同程度地诱导ｂｏＰＢＭＣ增殖和分泌Ｉｇ；而ＳＥＢ只能使ｂｏＰＢＭＣ高度增殖而不分泌Ｉｇ（Ｐ〉０．０５）。ＰＷＭ诱导的ｂｏＰＢＭＣ经１２ｄ培养，其中ＣＤ４＋／ＣＤ８＋细胞的比率为２．９：１；而ＳＥＢ诱导的细胞为０．３：１。离体ｂｏＰＢＭＣ主要分泌ＩｇＭ和ＩｇＧ１，只有     

Ab─ELISA和Ag─ELISA诊断骆驼伊氏锥虫感染的比较

采用四种方法：即①单克隆抗体检测抗原的酶联免疫吸附试验（Ａｇ－ＥＬＩＳＡ）②检测抗体的酶联免疫吸附试验（Ａｂ－ＥＵＳＡ）③表膜检查（ＢＣＥ）④小白鼠接种（ＭＩ），检查了肯尼亚１８３头骆驼锥虫的循环抗原，ＢＣＥ查出３７头阳性２０％），ＭＩ６０头阳性（３３％），Ａｇ－ＥＬＩＳＡ６３头阳性（３４％），Ａｂ－ＥＬＩＳＡ检出９０头阳性（４９％）。其中ＢＣＥ未能检出的２４头中，Ａｇ－ＥＬＩＳＡ检出１８头（７５％）。所有阳性头数中，Ａｇ－ＥＬＩＳＡ检出９３％，Ａｂ－ＥＬＩＳＡ９５％。根据５５头的结果，阳性与阴性之间Ａｇ－ＥＬＩＳＡＯＤ值差异极显著（Ｐ＜０．０００１），Ａｂ－ＥＬＩＳＡＯＤ值差异不显著。因此，用Ａｇ－ＥＬＩＳＡ或结合ＢＣＥ诊断伊氏锥虫感染比用ＡＢ－ＥＬＩＳＡ更理想。     

禽多杀性巴氏杆菌单克隆抗体的制备及其基本性状研究

将多杀性巴氏杆菌（Ｐ．ｍ．）Ｃ４８－１株（Ｈｅｄｄｌｅｓｔｏｎ１型；Ｃａｒｔｅｒ分型５：Ａ）灭活后全菌免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞与ＳＰ／０骨髓瘤细胞在ＰＥＧ１０００作用下融合。用全菌包被的间接ＥＬＩＳＡ方法检测抗体，获得了２３株能稳定分泌抗Ｐ．ｍ．１型单克隆抗体的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞培养２个月和冻存３个月后复苏培养，均能稳定分泌特异性单克隆抗体。２３株腹水ＥＬＩＳＡ效价分别从１０－３—１０－１１，无免疫沉淀性，也无凝集性。Ｉｇ类型鉴定表明，３株属于ＩｇＭ，２０株属于ＩｇＧ。间接ＥＬＩＳＡ检测结果表明：２３株单抗只与Ｐ．ｍ．１型起反应，而不与Ｐ．ｍ．３、４、１６型起反应，也不与禽类易感的鸡白痢沙门氏菌、大肠杆菌、葡萄球菌、李氏杆菌起反应，具有型的特异性。用ＩＣ８Ｈ９腹水建立的夹心ＥＬＩＳＡ方法检定Ｐ．ｍ．１型菌株，其敏感性高，特异性强，也更为方便。     

大蒜油中大蒜素等含硫化合物的气相色谱-质谱法测定

三硫醚化合物ＣＨ２＝ＣＨ－ＣＨ２－Ｓ－Ｓ－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ＝ＣＨ２（二丙烯基三硫醚，俗称大蒜素或大蒜新素）、ＣＨ３－Ｓ－Ｓ－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ＝ＣＨ２（甲基丙烯基三硫醚）和ＣＨ３－Ｓ－Ｓ－Ｓ－ＣＨ３（二甲基三硫醚），除了对各种病菌具有很强的杀灭和抑制作用外，还可以提高饲料适口性，增加采食量，提高饲料报酬。本研究利用气相色谱－质谱（ＧＣ－ＭＳ）联用仪对大蒜油中的大蒜素等部分组分进行了测定，方法简便快速、准确可靠。１　方法　１．１　仪器与试剂　ＧＣ－ＭＳ　ＱＰ－５０００气相色谱－质谱联用仪（日本岛津公…     

应用二花脸与大约克猪建立参考家系进行连锁分析的研究

应用１头德国大约克公猪及３头二花脸母猪通过回交法（父女交配）建立了参考家系，采集了１５４头个体的血样，对１２号染色体 微卫星位点（ＳＷ９５７、ＳＷ１５５３、ＳＷ１３５０、ＳＷ８７４）检测了每个个体的基因型，应用ＣＲＩＭＡＰ程序进行了连锁分析得出了３个位点在猪１２号梁色体上的最佳排序为：ＳＷ１５５３－ＳＷ１３５０－ＳＷ８７４。其中在ＵＳＤＡ－ＭＡＲＣ家系中由于未检测到重组而不能排序的两个位点（ＳＷ１     

结膜相关淋巴组织和哈氏腺免疫协同关系的研究Ⅰ．结膜相关淋巴组织缺失对哈氏腺点眼免疫应答的影响

采用ＥＬＩＳＡ、免疫组织化学方法、手术切除结膜相关淋巴组织（Ｃｏｎｊｕｎｃｔｉｖａ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ Ｌｙｍｐｈｏｉｄ Ｔｉｓｓｕｅ，ＣＡＬＴ）法对结膜相关淋巴组织和哈氏腺（Ｈａｒｄｅｒｉａｎ Ｇｌａｎｄ，ＨＧ）在点眼免疫应答过程中的相互协同关系进行了研究。研究发现，采用外科手术于１日龄切除结 膜相关淋巴组织后切除组点眼免疫后泪液中ＮＤＶ－特异性ＩｇＡ、ＩｇＭ型抗体滴度及哈氏腺中ＩｇＡ、ＩｇＭ     

马杜霉素在鸡组织中残留检测方法的研究：Ⅱ.免疫亲合色谱—酶？…

本文首次报道ＩＡＣ－ＥＬＩＳＡ方法测定鸡组织中马杜霉素的残留。制备针对马杜素的特异性抗体ＩｇＧ和高容量ＩＡＣ柱（Ｉ柱动态柱容量为７１６０ｍｇ．ｍｌ＾－１ｇｅｌ,Ⅱ柱为３７５０ｎｇ．ｍｌ＾－１ｇｅｌ）。组织样品用甲醇提取,经ＩＡＣ柱分离纯化,ＥＬＩＳＡ检测,即ＩＡＣ－ＥＬＩＳＡ方法。本试验揭示,能组织样本提取纯化稀释液为介质制备扔标准曲线,其Ｉ５０值和斜率与以ＰＢＳＴ－１０％甲醇为介质的标准曲线相符     

青海细毛羊生化遗传多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和火焰光度法对５０９只青海细毛羊细血液和乳汁中ＨＢ，ＥＰ－１，ＥＰ－２，ＫＥ，ＴＦ，ＡＭＹ１，ＡＭＹ２，ＥＳ，ＡＬＰ，ＲＢＣ－ＬＤＨ，Ｈｐα－ＬＡ和β－ＬＧ总共１３个位点的多态性进行了研究。结果为：（１）在青海细毛羊的ＨＢ，ＫＥ，ＴＦ，ＡＭＹ２，ＥＳ，ＡＬＰ，ＲＢＣ－ＬＤＨ１，Ｈｐ，β－ＬＧ总共９个位点上发现多态性，多态性位点的比例为６９．２３％；（２）每个位点实有的平均等位     

两种β2受体激动剂快速免疫检测方法

分别以偶氮方法和碳化二亚胺方法将β２受体激动剂克伦特罗和塞曼特罗连接到载体蛋白上,并以连接物免疫家兔,分别制备兔抗ＣＬ和ＣＩＭ抗血清,经间接ＥＬＩＳＡ和间接抑制ＥＬＩＳＡ检测抗血清效价和特异性,并在此基础上建立了ＣＬ和ＣＩＭ快速免疫检测方法。２种抗血清工作浓度分别为１：１００００和１：５０００。ＣＬ和ＣＩＭ免疫检测范围分别为１．９ｎｇ－１５．６μｇ和０．４７７ｎｇ－１．８５μｇ。２种β２受体激动剂     

囊虫病循环抗原酶联免疫试剂检测盒的研制

以部分纯化囊虫抗原免疫 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ｃ 小鼠,取其脾细胞与 Ｓ Ｐ２／０ 细胞融合制备抗囊虫循环抗原（ Ｃ Ａ） Ｍｃ Ａｂ ,共获得 ８ 株分泌抗囊虫 Ｃ Ａ Ｍ ｃ Ａｂ 细胞株。经鉴定,筛选出组合后能获得最佳检测效果的 Ｃ Ａ Ｍ ｃ Ａｂ细胞株 Ｍ ｃ Ａｂ １ Ｃ７（包被）和 Ｈ Ｒ Ｐ１ Ｂ５ 作为检测用的 Ｍ ｃ Ａｂ,用其建立了检测囊虫 Ｃ Ａ 的双抗体夹心 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ方法,并研制了囊虫病 Ｃ Ａ 检测试剂盒。试剂盒用于检测囊虫病 Ｃ Ａ,敏感、特异、快速、简便,囊虫病血清 Ｃ Ａ的检出率为 ９１．４３％ ,脑脊液 Ｃ Ａ 的检出率为 ９４．４４％ 。     

检测EDS76病毒抗体Dot—ELISA方法建立的及应用

建立了检测ＥＤＳ７６病毒抗体Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法。待检血清最适稀释度为１∶１０,ＥＤＳ７６病毒ＤＥＦ细胞培养物最佳工作浓度为１∶５,ＨＲＰ－ＭｃＡｂ工作浓度为１∶４００。所建方法与常见几种鸡的传染病血清无交叉反应,１２０份临床样本中检出６６份阳性。     

应用H—Y单克隆抗体鉴定小鼠和家兔胚胎性别

以Ｃ５７ＢＬ／６雄性小鼠的脾细胞免疫同雌性小鼠，选择免疫应答反应较好的雌性小鼠４只，取其脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合的杂交瘤细胞经过３次克隆，筛选出了２株能够分泌Ｈ－Ｙ抗体的杂交瘤细胞系ＨＹＡ１和ＨＹＡ２，其分泌的相应抗体分别名为ＨＹａ１和ＨＹａ２。琼脂双扩散试验表明，ＨＹａ１和ＨＹａ２分别属于ＩｇＭ和ＩｇＧ亚类。胚间接免疫荧炮分析及胚胎细胞毒试验表明，ＨＹａ１和ＨＹａ２分别属于ＩｇＭ和Ｉ