桑树叶片愈伤组织的诱导及不定芽分化影响因素的研究

通过正交试验,探讨了植物生长调节剂噻二唑苯基脲(Th id iazuron,TDZ)、α-萘乙酸(NAA)、桑品种、叶龄、叶位等5种因素对桑树叶片愈伤组织诱导的影响。筛选出了桑树叶片愈伤组织诱导的最佳条件为:21 d苗龄的陕305组培苗叶片,培养基MS+1.0 mg/L TDZ+0.2 mg/L NAA。在此条件下,陕305愈伤组织诱导率可达93.9%。对得到的陕305叶片愈伤组织进行了不定芽分化诱导,结果表明,最佳分化培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA+2%果糖,愈伤组织不定芽分化率高达100%。     

马蹄金叶片离体培养及植株再生的研究

在不同植物生长调节剂组合、不同培养基条件下，探讨了马蹄金叶片离体培养的方法和影响因素。结果表明，含不同植物生长调节剂组合的培养基对愈伤组织的诱导频率无显著影响，出愈率均达90％-100％；以MS或B5培养基作诱导愈伤组织的基本培养基效果较好；将叶片接种到MS 2mg／L6—BA的诱导培养基中诱导愈伤组织，再用B5 1．5mg／L6-BA 0．5mg／L ZT 0．2mg／Lα—NAA作分化培养基出苗效果最佳，愈伤组织分化频率高达20％。     

桑树组织培养物中1-脱氧野尻霉素的产生规律初探

为探讨桑树合成1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)的代谢途径,采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)分析法,研究了桑树品种大10的组织培养物中1-脱氧野尻霉素的产生规律。结果表明:桑树几种组织培养物中1-DNJ的质量分数在无菌苗叶片中为0.309604%,无菌苗中为0.158516%,再生芽中为0.318756%,再生苗中为0.168672%;桑树绿色愈伤组织、疏松愈伤组织、悬浮培养细胞、悬浮细胞诱导愈伤组织中不含1-DNJ。推测1-DNJ产生于由愈伤组织分化为再生芽的阶段。     

小麦成熟胚离体培养及植株再生技术优化

本实验利用冬小麦品种周麦27成熟胚进行了愈伤组织诱导和植株再生技术的优化,以提高小麦成熟胚离体再生频率,为以成熟胚进行遗传转化奠定基础。探讨了外植体不同接种方法、Dicamba浓度和细胞分裂素种类、转分化时间和愈伤组织干燥处理等因素对小麦成熟胚愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明, 1)小麦成熟胚十字形切割法接种愈伤组织分化率较高,达到66.7%,分别是刮胚法和整胚接种的2.1和4.3倍;2)附加2,4-D 和Dicamba均可以高频率诱导成熟胚愈伤组织的形成,但Dicamba诱导形成的愈伤组织分化率高于2,4-D的达4倍之多,在Dicamba浓度为2.0~4.0 mg/L时愈伤组织诱导和分化效果较好;3)愈伤组织在附加2.0 mg/L 6-BA的分化培养基上分化率最高为45.8%,其次为在不含激素或含KT 2.0 mg/L时分化率分别达到38.5%和37.0%,而在附加TDZ和ZT时分化率较低;4)成熟胚外植体在诱导培养2~3周后进行分化培养,绿苗分化率最高;5)愈伤组织分化前干燥处理6 h愈伤组织分化率略有提高,但与未干燥处理的相比差异不显著,而干燥12 h后分化率却明显降低。     

不同外植体对马蹄金愈伤组织诱导及分化的影响

从不同外植体的生长时间、切取方式和光照条件诸因素探讨了对草坪地被植物马蹄金Dichondra repens愈伤组织诱导及分化的影响作用。结果表明：下胚轴和子叶的生长时间只对愈伤组织诱导的始愈时间和生长势有影响,生长期越短,则始愈时间缩短,愈伤组织生长势强,而对出愈率、愈伤组织状态和愈伤组织分化率无明显作用;光照和黑暗培养只对下胚轴诱导愈伤组织的生长状态有影响而对子叶诱导愈伤组织无作用;外植体的不同切取方式对愈伤组织诱导的始愈时间有影响,经切取后可缩短始愈时间;仅从完整子叶离体培养诱导愈伤组织获得了再生植株,其分化频率为13．9％～18．6％。     

黑麦冬牧70幼穗和未成熟胚愈伤组织诱导及植株再生

将黑麦冬牧70幼穗切段和未成熟胚接种在附加不同激素浓度的改良MS培养基上培养,获得了能多次继代培养的愈伤组织,后者在分化培养基上再生植株.2,4-D和6-BA浓度明显影响愈伤组织质量和诱导率,幼嫩幼穗和较小的未成熟胚愈伤组织诱导率高.幼穗切段在改良MS 1.0 mg/L 2,4-D 200 mg/L谷氨酰胺的培养基上愈伤组织诱导率最高,质量较好;未成熟胚在改良MS 2.0 mg/L 2,4-D 0.1 mg/L 6-BA 200 mg/L谷氨酰胺的培养基上愈伤组织诱导率最高,质量最好.继代培养后的愈伤组织转移到附加200 mg/L谷氨酰胺、1.0 mg/L 2,4-D和0.1 mg/L TDZ的培养基上可分化出大量小芽.该体系可用于黑麦冬牧70遗传转化和细胞工程育种研究.     

顿河红豆草下胚轴培养及其植株再生

对顿河豆草５ｄ龄无菌苗下胚轴愈伤组织诱导及其植株再生条件的研究结果表明,愈伤组织培养基为ＭＳ基础培养基,附加０．２ｍｇ／ｌ２,４－Ｄ、１ｍｇ／ｌＢＡＰ和２ｍｇ／ｌＮＡＡ,ｐＨ５．８;分化培养我激素ＭＳ培养基;生根培养基为１／２ＭＳ或１／２ＬＳ＋０．０５ｍｇ／ｌＮＡＡ＋０．８％琼脂培养基。其愈伤组织绝大多数生长良好,出愈率达９６．８％。体细胞胚化率为２５．３％,具有体细胞胚分化力的基因型占３５％,生     

马蹄金叶片离体培养及植株再生的研究

在不同植物生长调节剂组合、不同培养基条件下,探讨了马蹄金叶片离体培养的方法和影响因素。结果表明,含不同植物生长调节剂组合的培养基对愈伤组织的诱导频率无显著影响,出愈率均达90%～100%;以MS或B5培养基作诱导愈伤组织的基本培养基效果较好;将叶片接种到MS 2mg/L6-BA的诱导培养基中诱导愈伤组织,再用B5 1.5mg/L6-BA 0.5mg/LZT 0.2mg/Lα-NAA作分化培养基出苗效果最佳,愈伤组织分化频率高达20%。     

羊草幼穗离体培养诱导植株再生的研究

采用离体培养方法首次获得羊草体细胞再生植株。其方法要点是:取羊草幼穗为外植体,经0.1%HgCl₂溶液表面消毒后,接种到含2mg/L2,4-D的MS培养基上,置于恒温25℃条件下诱导愈伤组织。在加有1mg/L2,4-DMS培养基上继代2次后,转移到含1.0mg/LKT和0.5mg/LNAA的MS培养基上分化培养得到再生芽。在无激素的基本培养基上获得了生根的试管苗,试管苗移栽到温室后生长正常。研究结果还表明,尽管从羊草叶片、幼穗和成熟胚在同样培养条件下均能诱导出愈伤组织,但只有幼穗愈伤组织能够继续分化出再生植株。羊草试管苗的分化因基因型和外源激素的不同而异。     

桑树根原体分化程度及不同处理对扦插发根的影响

众所周知,扦插育苗是利用桑树的再生机能,将其营养器官的一部分与母体分离,在适宜的环境中发芽生根,成为一株能独立生活的新个体。桑树的扦插繁殖具有取材容易、方法简便、成苗快,且能很好地保持母体优良性状等优点,因而在我国有许多蚕区用扦插法繁育桑苗,加速优良品种的推广。桑树插条发根的原理,主要在于根原体和愈伤组织的形成和分化。根原体起源于形成层细胞的分裂活动,有的桑品种的根原体贯穿叶隙,突起于枝条的表面,有的隐没在叶隙内,有的没有形成根原体。愈伤组织由插条基部切口周围产生,在适宜的条件下这些愈伤组织也可以分化形成新…     

噻二唑苯基脲对桑树愈伤组织诱导的影响

以2个主栽桑树品种为材料,探讨了噻二唑苯基脲(TDZ)等植物生长调节剂对桑树愈伤组织诱导的影响。结果表明,TDZ能够显著促进桑树愈伤组织的产生和生长。叶柄、幼茎愈伤组织诱导最佳培养基为MS+0.5mg/L TDZ+0.2 mg/L NAA;子叶愈伤组织诱导最佳培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+0.2 mg/L NAA。     

马蹄金子叶的愈伤诱导与植株再生研究

以不同植物生长调节剂组合和不同基本培养基,探讨了马蹄金子叶离体培养的方法和影响因素。结果表明,不同植物生长调节剂组合的培养基对愈伤组织的诱导频率有显著影响,出愈率为16%～100%;以MS或B5培养基作诱导愈伤组织的基本培养基效果较好;将子叶接种到MS+1.0mg/L2,4-D+0.2mg/L6-BA的诱导培养基中诱导愈伤组织,再用MS+0.1mg/L2,4-D+2.0mg/L6-BA+3.0mg/LAgNO3作分化培养基出苗效果最佳,愈伤组织分化频率高达20.7%。     

马蹄金子叶的愈伤诱导与植株再生研究

以不同植物生长调节剂组合和不同基本培养基,探讨了马蹄金子叶离体培养的方法和影响因素.结果表明,不同植物生长调节剂组合的培养基对愈伤组织的诱导频率有显著影响,出愈率为16%～100%;以MS或B5培养基作诱导愈伤组织的基本培养基效果较好;将子叶接种到MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA的诱导培养基中诱导愈伤组织,再用MS+0.1 mg/L2,4-D+2.0 mg/L 6-BA+3.0 mg/L AgNO3作分化培养基出苗效果最佳,愈伤组织分化频率高达20.7%.     

冰草属牧草幼穗组织培养再生体系的建立和优化

以冰草幼穗为外植体,对冰草不同品种和不同激素配比下的愈伤组织继代和分化进行了研究.结果表明:采用75％酒精对幼穗叶鞘擦拭消毒后,4个冰草品种幼穗在改良MS+2.0mg/L2,4-D上的愈伤组织诱导率和分化率差异较大,其中,蒙农杂种冰草幼穗的愈伤组织诱导率和分化率最高,分别达97.33％和78％;愈伤组织继代的最佳培养基...     

大针茅成熟胚愈伤组织诱导及分化的探索

为摸索大针茅成熟胚诱导、分化的最佳培养基,以大针茅的成熟胚为外植体,采用不同激素配比的培养基进行筛选.结果表明:在大针茅成熟胚胚性愈伤组织诱导和分化过程中,2,4-D,6-BA等激素的浓度对大针茅成熟胚的组织培养影响较大.大针茅愈伤组织诱导最佳培养基:培养基+2,4-D(2.0mg/L),平均出愈率为91.67%;继代培养基:N6+CH(500mg/L)+2,4-D(2.0mg/L)+6-BA(0.5mg/L),愈伤诱导率为80%;添加0.3mg/L ABA对非胚性愈伤组织转化为胚性愈伤组织有一定帮助,诱导率为23.3%.     

草地早熟禾愈伤组织诱导及植株再生

以成熟种子和胚轴为外植体诱导草地早熟禾愈伤组织，比较草地早熟禾四个品种的愈伤诱导情况和不同6-BA浓度、愈伤年龄等因素对愈伤组织分化能力的影响。结果表明：成熟种子的出愈率与胚性愈伤诱导率均高于胚轴；MS 2，4-D(2mg／L) 6-BA(0.1mg／L)培养基为草地早熟禾Mardona品种较为合适的愈伤培养基，其诱导率为58，3％；MS BA(3mg／L) KT(0．2mg／L)为较为适合的分化培养基。再生率高达70％；随着继代次数的增加，草地早熟禾分化能力能够继续保持。选择致密、易碎、生长迅速的愈伤继代能够保持草地早熟禾的胚性。可以为遗传转化提供长期良好的植物材料。     

菊苣组织培养与植株再生的研究

以菊苣叶片、茎段，花蕾和花瓣为外植体，进行离体培养试验，结果表明，叶片，茎段，花蕾可产生淡黄色的愈伤组织，并可诱导出不定芽，出愈率为100％，叶片和茎段的分化率为100％，诱导愈伤组织及分化的最佳培养基为：MS＋BA 2mg/L IBA0.3mg/L，生根培养基为：1／2MS＋NAA 0．1mg/L，生根率为100％。     

松南结缕草成熟胚愈伤组织的诱导和再生

松南结缕草成熟种子经灭菌和打破休眠后,接种于含有不同浓度2,4-D的MS和N6培养基上进行愈伤组织诱导。结果表明,结缕草种子的休眠主要在于破除种壳。2,4-D浓度在2~5 mg/L对愈伤组织诱导率无明显影响。基本培养基MS和N6诱导效果相近,初生愈伤组织为白色、半透明,质地松软、水浸状。继代培养基中添加一定浓度的甘露醇、麦芽糖和ABA以及延长继代时间有助于愈伤组织的胚性化。基本培养基MS更适于结缕草初生愈伤组织致密胚性化。胚性愈伤组织在MS添加0.1 mg/L 2,4-D培养基上即可分化出大量具有根和茎叶的再生植株。     

百合的组织培养

将百合鳞片的不同部位接种于加油不同激素和不同浓度BA和NAA的6种培养基上,一周后接种的百合鳞片开始变绿,2周后,鳞片的受伤部位出现绿色的愈伤组织,再经2-3周培养,产生愈伤组织的部位逐渐形成小鳞茎,并开始有叶片长出.其中2号培养基MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L的分化率最高.实验结果表明,鳞片的不同部位分化能力也有差异,其中下部分化效果最好;激素6-BA和NAA浓度的配比,与鳞片分化小鳞茎的速度、数量和质量有着重要的关系.     

顿河红豆草下胚轴培养及其植株再生

对顿河红豆草5d龄无菌苗下胚轴愈伤组织诱导及其植株再生条件的研究结果表明,愈伤组织培养基为MS基础培养基,附加0.2mg/l 2,4-D、1mg/l BAP和2mg/l NAA,pH5.8;分化培养基为无激素MS培养基;生根培养基为1/2 MS或1/2 LS+0.05mg/l NAA+0.8%琼脂培养基.其愈伤组织绝大多数生长良好,出愈率达96.8%.体细胞胚分化率为25.3%,具有体细胞胚分化力的基因型(幼苗)占35%,生根率不到10%.