肾素血管紧张素系统(RAS)两条轴相互负向调节与大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)肝损伤的关系研究

探讨了肾素血管紧张素系统(renin angiotensin system,RAS)两条轴对大鼠非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)肝脏损伤的相互负向调节作用。30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和用药组。除正常对照组外,其余2组饲喂高脂饲料,用药组另外给伐他汀50 mg/kg·d。3周后,宰杀大鼠,测定血清中甘油三酯(TG)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的含量;测定肝组织匀浆羟自由基(·OH)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)酶活性;ELISA法测定组织匀浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素1-7(Ang1-7)及白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;Western blot分析肝组织血管紧张素转化酶(ACE)、血管紧张素转化酶2(ACE2)、血管紧张素Ⅱ受体1亚型(AT1R)、Mas受体(MasR)蛋白水平。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠血清TG、AST和ALT含量以及·OH和NOS活性均显著升高(P<0.05), T-AOC、SOD活性显著降低(P<0.05);IL-1β和TNF-α含量极显著升高(P<0.01);ACE、ACE2的蛋白表达水平与ACE/ACE2的比值均显著升高(P<0.05),AngⅡ、Ang1-7含量与AT1R表达升高(P<0.05),MasR表达有升高趋势(P>0.05)。结论:高脂饲料连续饲喂3周可诱导大鼠发生NAFLD,肝脏局部RAS两条轴均处于激活状态,ACE介导AngⅡ-AT1R经典轴促进肝损伤,而ACE2介导Ang1-7-MasR轴抵抗肝损伤;ACE2负性调节RAS作用,对大鼠NAFLD时肝脏氧化应激及炎性损伤有一定保护作用。     

血管紧张素转化酶2(ACE2)在保育猪肠道增生性炎症中的作用

选取49日龄慢性腹泻保育猪为试验对象,测定其血液中葡萄糖(GLU)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、甘油三酯(TG)等生化指标;制作病理组织切片,观察胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠等组织病理变化;检测保育猪十二指肠、回肠组织中ACE2、Mas受体mRNA的表达及AngⅡ、Ang1-7的含量;比较分析十二指肠、回肠组织中炎症相关因子TNF-α、IL-1β、IL-10 mRNA的表达变化。结果显示,腹泻猪血液中GLB、AST含量显著上调(P0.05),GLU、TG和ALP显著下调(P0.05);病理学观察发现,腹泻猪胃组织上皮损伤脱落;十二指肠肠粘膜脱落、肠腺细胞大量增生、肠隐窝增厚;空肠肠绒毛坏死,黏膜上皮细胞坏死脱落,肠腺上皮细胞增生;回肠、结肠肠腺细胞均明显增生;腹泻组与对照组猪相比,十二指肠中RAS系统相关成员ACE2、Mas受体mRNA表达显著下调(P0.05),Ang1-7含量显著下降(P0.05),但AngⅡ的含量显著升高(P0.05),并且其炎症相关因子TNF-α、IL-1βmRNA表达也显著上调(P0.05,P0.01),IL-10无显著变化。结果表明,腹泻猪表现明显增生性炎症,在此情况下,高水平的AngⅡ的促炎作用处于优势,ACE2及其介导的ACE2-Ang1-7-MAS受体轴的抗炎作用处于劣势。     

大鼠非酒精性单纯性脂肪肝中肾素血管紧张素系统两条通路的相互作用研究

本试验探讨了肾素血管紧张素系统(RAS)中ACE/AngⅡ/AT1R和ACE2/Ang1-7/MasR两条通路在大鼠非酒精性单纯性脂肪肝(NAFL)中肝损伤的相互拮抗作用。将30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和用药组。除正常对照组外,其余2组饲喂高脂饲料,用药组另外给洛伐他汀50 mg·(kg·d)~(-1),6周后采集大鼠血液并安乐死,取肝组织。测定各组大鼠血清中TG、ALT、AST的含量;测定肝组织中·OH、TNOS、SOD、T-AOC酶活性;ELISA法测定组织匀浆中AngⅡ、Ang1-7及炎症因子的含量;蛋白印迹分析肝组织ACE、ACE2、AT1R、MasR蛋白水平;HE染色观察肝组织病理学变化。结果显示:模型组肝指数显著升高(P0.05),血清TG、AST和ALT含量极显著升高(P0.01),肝细胞表现脂肪变性,肝组织中氧化应激、炎症因子释放显著增强;ACE、AT1R蛋白表达及AngⅡ、Ang1-7含量显著升高(P0.05或P0.01),ACE2与MasR的蛋白表达明显降低(P0.05),ACE/ACE2比值极显著升高(P0.01),用药组改善氧化应激及炎症损伤,并通过下调ACE/AngⅡ/AT1R通路改善肝组织损伤。高脂饲喂6周可诱导大鼠发生单纯性脂肪肝,肝局部RAS系统两条通路均处于激活状态,ACE/AngⅡ/AT1通路异常激活,导致肝组织氧化应激、炎症反应,而ACE2/Ang1-7/MasR通路具有与前者相反的作用。试验结果提示:肝产生的内源性ACE2在外源性刺激物诱导肝损伤时,可能通过介导Ang1-7/MasR通路的激活在非酒精性单纯性脂肪肝的预防中发挥重要作用。     

血管紧张素转化酶2对Ang Ⅱ诱导的牛乳腺上皮细胞炎症损伤的缓解作用

以不同浓度血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导牛乳腺上皮细胞(MAC-T)炎症损伤,探讨血管紧张素转化酶2(ACE 2)的变化及与AngⅡ的相互作用。研究包括:ELISA检测细胞上清中细胞炎性因子的分泌或释放;Western blot检测细胞ACE 2和ACE的蛋白表达变化,并进行相关性分析;添加ACE 2活性蛋白对AngⅡ诱导损伤的保护作用。结果显示:1)AngⅡ处理MAC-T,细胞上清中促炎因子TNF-α、IL-6、IL-8含量显著(P0.05)或极显著(P0.01)增加,抗炎因子IL-10含量显著降低(P0.05);2)不同浓度AngⅡ处理细胞后,ACE 2蛋白表达均有降低,10~(-6) mol·L~(-1) AngⅡ处理后显著降低(P0.05);ACE蛋白表达结果相反;ACE 2与AngⅡ浓度之间存在显著负相关;3)添加外源性ACE 2活性蛋白,细胞上清中TNF-α、IL-6和IL-8浓度均有一定程度的下降,IL-10浓度升高。本研究表明ACE 2/ACE轴的失衡是AngⅡ诱导细胞炎性损伤的主要原因。高水平AngⅡ可激活炎症因子促进炎症反应,是促进炎症反应的主要介质,ACE 2可以通过降解AngⅡ,抑制其对炎症反应的上调效应。     

决明子水煎液对CCl4所致急性肝损伤大鼠血液生化指标的影响

目的:研究决明子水煎液对CCl4所致急性肝损伤大鼠血清各项生化指标的影响及对肝损伤的保护作用。方法:32只体重180～240 g的SD大鼠,随机分为正常对照组、模型对照组、决明子Ⅰ组和决明子Ⅱ组,每组8只。正常对照组和模型对照组大鼠饮用蒸馏水,决明子Ⅰ组和决明子Ⅱ组分别饮用浓度为40 g/L和80 g/L决明子水煎液,连用2周后,模型对照组、决明子Ⅰ组和决明子Ⅱ组腹腔注射CCl4(2.0 mL/kg体重),正常对照组注射等体积生理盐水,24 h后采血低速离心,取血清分别测AST、ALT、ALP、镁、磷、钾、钠、钙、胆固醇、葡萄糖、总蛋白等血液生化指标。结果:决明子水煎液(40 g/L)能极显著降低CCl4所致急性肝损伤大鼠血清中ALT、AST、血清总蛋白含量的升高(P<0.01);极显著升高CCl4所致急性肝损伤大鼠血清中胆固醇、葡萄糖、ALP和镁含量的降低(P<0.01);同时还能显著升高CCl4所致急性肝损伤大鼠血钠含量的降低(P<0.05)。结论:决明子水煎液对CCl4所致大鼠的急性肝损伤有一定保护作用,增强机体对应激的耐受力,从决明子组对各血清指标的作用来看,决明子Ⅰ组的保肝作用更优于决明子Ⅱ组。     

ACE 2在奶牛乳腺中的表达定位及其抗炎性损伤作用的研究

本研究旨在通过体内外试验,明确ACE 2在奶牛乳腺中的表达定位,并对其在高精料饲喂致内源性奶牛乳房炎中的抗损伤作用进行初步探讨。体外试验分别选用牛乳腺组织样品和牛乳腺上皮细胞(Mac-T细胞),RTPCR和Western blotting法检测ACE 2在奶牛乳腺组织中的mRNA和蛋白表达;免疫荧光法测定ACE 2蛋白在Mac-T细胞中的定位。体内试验,选用6头健康泌乳期荷斯坦奶牛,随机分为对照组和高精料饲喂组,饲喂20周后,活体采集乳腺组织及乳。测定乳中LPS含量、体细胞数及相关炎性指标;制作乳腺组织学切片;分析乳腺组织中ACE、AT1、ACE2、MasR mRNA表达水平,ELISA法检测Ang II、Ang1-7含量。体外试验结果表明,奶牛乳腺中ACE2在基因和蛋白水平上均有表达,细胞学定位在细胞的胞浆和胞膜。体内试验结果显示,高精料长期饲喂,奶牛乳中体细胞数和LPS含量均明显升高(P0.01);乳中NAGase和AKP酶活力均显著高于正常对照组(P0.05),MPO活力两组之间无明显差异;乳腺组织学表现出一定炎性损伤变化;其中Ang1-7含量显著增高(P0.05),Ang II的含量显著降低(P0.05);ACE、AT 1、ACE 2、MasR mRNA表达量均显著上升((P0.05)),ACE2/ACE mRNA比值高于对照组。本研究首次证实奶牛乳腺组织中有ACE 2的存在。在高精料长期饲喂造成奶牛乳房炎性损伤时,乳腺组织中RAS处于激活状态,ACE/ACE2比例失衡,以ACE 2-Ang1-7-MasR轴的活力处于优势状态,即ACE 2的抗损伤作用占优势。ACE 2可能通过降解AngII,产生Ang1-7发挥抗损伤作用,对乳腺组织炎性损伤具有一定的保护作用。     

德氏乳杆菌对育肥猪血脂指标、胆固醇代谢和脂肪沉积相关酶活性及基因mRNA表达的影响

本试验旨在研究饲粮中添加德氏乳杆菌制剂对育肥猪血脂指标、肝脏胆固醇代谢和脂肪沉积相关酶活性、组织胆固醇代谢和脂肪沉积相关基因mRNA表达和皮下脂肪组织形态的影响。试验选用120头平均体重为(65.34±3.64)kg的健康"杜×(长×大)"育肥猪,随机分为2组,每组6个重复(栏),每个重复10头(公母各占1/2)。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂在基础饲粮中添加0.10%德氏乳杆菌制剂的饲粮,预试期7d,试验期42d。结果显示:1)与对照组相比,试验组育肥猪的血清甘油三酯(TG)(P=0.08)和总胆固醇(TC)(P=0.06)含量均有降低趋势,血清总胆汁酸(TBA)含量显著降低(P0.05)。2)与对照组相比,试验组育肥猪的肝脏羟甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)活性有降低趋势(P=0.07),胆固醇7α-羟化酶活性(CYP7A1)显著增加(P0.05),脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)活性极显著降低(P0.01)。3)与对照组相比,试验组育肥猪的回肠胆汁酸结合蛋白(IBABP)的mRNA相对表达量有降低趋势(P=0.07),皮下脂肪过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的mRNA相对表达量显著增加(P0.05);皮下脂肪细胞直径有降低趋势(P=0.09)。结果提示,德氏乳杆菌可通过干扰育肥猪回肠对胆汁酸的吸收来调控肝脏胆固醇和脂肪代谢。     

试验性脂肪肝出血综合征鸡氧化应激水平和内皮功能变化

将320只14日龄青脚麻鸡随机分为对照组、高脂模型组、雌激素模型组和高脂结合雌激素模型组,每组设4个重复,每个重复20只,共处理28 d.造模14、28 d,测定肝脏氧化应激、血清肝功能和内皮功能相关参数,并进行肝脏病理组织学观察.结果显示,模型组鸡肝脂含量增加、肝细胞脂肪变性,肝脏血管损伤,出现典型的鸡脂肪肝出血综合征(FLHS)病变；与对照组相比,各模型组肝脏MDA含量升高(P＜0.05),SOD和GSH-Px活性降低,血浆AngⅡ含量增加,血清NO含量降低；相关性分析显示,肝脏脂肪变性程度与肝脏MDA含量正相关(P＜0.01),与肝脏SOD和GSH Px活性呈负相关(P＜0.01)；肝脏MDA含量与肝出血分数和血浆AngⅡ含量皆有极显著的相关性(P＜0.01)；肝脏SOD和GSH-Px活性与肝出血分数呈负相关(P＜0.01或P＜0.05),与血清NO含量的变化均呈正相关(P＜0.05)；血浆AngⅡ含量与肝出血分数呈正相关(P＜0.05).结果表明,FLHS发生和发展过程中氧化应激参与了内皮功能紊乱的形成,血管损伤可能与氧化应激和内皮功能失调有关.     

长柱金丝桃提取物对四氯化碳和酒精诱导小鼠肝损伤的保护作用研究

为了研究长柱金丝桃提取物对四氯化碳(CCl4)和酒精诱导小鼠肝损伤的保护作用,试验采用白酒灌胃的方式建立小鼠急性酒精性肝损伤模型,腹腔注射CCl4建立小鼠急性肝损伤模型,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性、肝脏指数。结果表明:长柱金丝桃乙酸乙酯部位组能极显著抑制CCl4肝损伤小鼠血清ALT、AST活性的升高(P0.01),长柱金丝桃正丁醇部位组能显著抑制CCl4肝损伤小鼠血清ALT、AST活性的升高(P0.05),且两组均能显著降低肝脏指数(P0.05);长柱金丝桃乙酸乙酯部位组能抑制酒精性肝损伤小鼠血清ALT、AST活性的升高(P0.05),且能降低肝脏指数(P0.05)。说明长柱金丝桃提取物对CCl4和酒精引起的小鼠急性肝损伤具有保护作用。     

DHEA诱导雌性大鼠PCOS模型早期性器官及其相关激素变化的研究

本研究旨在探讨大鼠卵巢囊肿形成过程中,大鼠性腺等器官增重、性激素水平以及卵巢组织抗苗勒管激素AMH mRNA变化关系。选取性未成熟的雌性SD大鼠80只(21d),随机分为两组:试验组和对照组各40只。试验组大鼠颈部皮下注射0.2mL·d-1芝麻油+DHEA(每100g体重注射6mg DHEA);对照组注射等量注射用油,预试期2d,正试期20d。分别在试验开始第5、10、15和20天称取大鼠的体重、卵巢、子宫、肝、肾和脾的重量,计算脏器指数,采集血液备用。结果显示,第15和20天试验组大鼠的体重高于对照组(P0.01);试验组大鼠子宫重量显著高于对照组(P0.01),第5和10天卵巢重量显著高于对照组(P0.01);试验组血清AMH和雄激素(T)均显著高于对照组(P0.01或P0.05),第15和20天血清P以及第20天血清LH和E2试验组均显著高于对照组(P0.01或P0.05);试验组卵巢AMH mRNA表达量高于对照组,第5和10天表达量差异显著(P0.05)。结果提示,试验组大鼠性器官在性发育早期得到优先发育;抗苗勒管激素异常分泌可能是大鼠PCOS发病机理和发展的标志;卵巢AMH mRNA表达与血清AMH分泌变化规律并不完全一致,可能为深入研究多囊卵巢综合征的发生机制提供依据。     

α-生育酚琥珀酸酯对肉鸡抗氧化功能与肌肉品质的影响

旨在研究并比较DL-α-生育酚醋酸酯(DL-α-TOA)及不同水平D-α-生育酚琥珀酸酯(D-α-TOS)日粮对肉鸡的生长、抗氧化功能与肉品质的影响。选用1日龄Arbor Acres(AA)肉鸡320只,随机分为4个处理,分别在基础日粮中添加30 mg.kg-1DL-α-TOA(对照组)及D-α-TOS 10 mg.kg-1(α-TOS1组)、30 mg.kg-1(α-TOS2组)和50 mg.kg-1(α-TOS3组),试验期42 d。结果表明:对照组及各α-TOS组间肉鸡的生长均无显著差异(P0.05);相关性分析结果表明,肉鸡日粮中D-α-TOS的添加水平与血清(R2=0.983 1,P0.01)和肝脏(R2=0.933 6,P0.05)中α-生育酚(α-TOH)的含量呈显著正相关,与血清(R2=-0.948 7,P0.05)和肝脏(R2=-0.990 1,P=0.051 8)丙二醛(MDA)呈负相关;与对照组和α-TOS1组相比,日粮中添加30~50 mg.kg-1α-TOS能够使血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)和肝脏的T-SOD活性及T-AOC均有不同程度地提高(P0.05或P0.01),同时肝脏活性氧(ROS)水平也显著降低(P0.05);在肉品方面,日粮中添加30~50 mg.kg-1α-TOS显著降低了肉鸡胸腿肌的滴水损失(48 h)和剪切力,及腿肌的烹饪损失,但对pH45 min、pH24 h、24 h滴水损失和肉色无显著影响(P0.05)。结果提示,日粮中添加30~50 mg.kg-1D-α-TOS能够在一定程度上提高肉鸡机体的抗氧化功能,提高了肌肉的系水力和嫩度,其原因主要是α-TOS的添加导致α-TOH在血清和肝脏中含量的提高,及肝脏MDA和ROS水平的降低。     

母源性脱氢表雄酮对子代艾维因肉鸡脂肪代谢及肌肉品质的影响

本文以AA肉鸡为试验对象,研究母源性添加脱氢表雄酮(DHEA)对子代艾维因肉鸡脂肪代谢和肌肉品质的影响。将34周龄AA肉种鸡随机分为对照组(Con)、添加25 mg.kg-1DHEA的低剂量组(L)和50 mg.kg-1DHEA的高剂量组(H),2周后从各组收集种蛋进行孵化,随机选取180只出壳后的子代鸡,根据其母代饲料中添加DHEA的情况相应的分为对照组、低剂量组、高剂量组。饲喂至21 d宰杀,采集血清、肝脏、腹脂、左侧胸肌和腿肌样本进行分析。试验结果表明,与对照组相比母源性添加DHEA对子代肉鸡日采食量、日增体质量均无显著差异(P0.05),但母源性添加DHEA却可极显著地降低其料肉比(P0.01)。对子代公鸡而言,与对照组相比母源性添加高剂量的DHEA可显著地升高血清BG(P0.01)、NEFA(P0.05)和HDL-C(P0.05)的含量,极显著地降低肝脏组织中TG的含量(P0.01),但对血清TC、TG含量均无显著影响(P0.05);不同剂量的DHEA对其血清中T3、T4、GLU和Leptin的含量均无显著的影响(P0.05),但低剂量的DHEA却可显著地升高T3/T4值(P0.05)。对子代母鸡而言,与对照组相比母源性添加低剂量的DHEA可极显著地升高血清BG的含量(P0.01);高剂量的DHEA可极显著地升高血清TC、TG、NEFA和GLU的含量(P0.01),低剂量的DHEA可显著地升高HDL-C的含量(P0.05)和T4含量(P0.01),但却降低T3/T4值(P0.05)。母源性添加DHEA可显著地升高子代公鸡的胸肌率和腿肌率(P0.05),但对子代母鸡的胸肌率和腿肌率无显著影响(P0.05);同时母源性添加不同剂量的DHEA均可显著地降低腿肌肌纤维直径(P0.01),极显著地升高腿肌肌纤维密度(P0.01);高剂量的DHEA可极显著地降低胸肌肌纤维直径(P0.01),低剂量的DHEA可显著地降低胸肌肌纤维直径(P0.05),但不同剂量的DHEA均可极显著地升高胸肌肌纤维密度(P0.01)。结论提示,母源性添加DHEA可降低子代肉鸡脂肪的沉积和改善其肌肉品质。     

连翘提取物对对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤的保护作用

试验旨在探究连翘提取物（FSE）预防性干预对对乙酰氨基酚（acetaminophen,APAP）诱导小鼠肝损伤的保护作用及其潜在作用机制。采用半仿生-生物酶法提取连翘有效成分,使用APAP构建小鼠肝损伤模型。随机将60只雌性昆明小鼠分入正常对照（NC）组、APAP肝损伤模型（LD）组、连翘提取物（FSE）对照组、连翘提取物高剂量（HFSE＋LD）组、连翘提取物中剂量（MFSE＋LD）组和连翘提取物低剂量（LFSE＋LD）组,每组10只。HFSE＋LD组、MFSE＋LD组、LFSE＋LD组分别按每天200、100、50 μg/g灌胃给予连翘提取物,NC组和LD组分别灌胃等量生理盐水,每天2次,连续给药6 d。预防性给药3 d后,腹腔注射APAP,每天1次。末次给药12 h后,试验小鼠眼球采血并快速取出肝脏,检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性,以评价肝损伤程度;检测肝脏匀浆液中还原型谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和过氧化氢（H₂O₂）水平,以评价肝脏氧化应激程度;制作肝脏病理切片,经苏木精伊红（HE）染色后观察肝脏病理变化;采用探针药物法测定肝脏线粒体细胞色素P4502E1（CYP2E1）活性;采用实时荧光定量PCR检测肝脏线粒体CYP2E1 mRNA表达水平;采用Western blotting法检测肝脏CYP2E1蛋白表达情况。结果表明：与NC组相比,LD组小鼠血清中ALT、AST活性均显著增加（P<0.05）;肝脏SOD活性、GSH含量均显著降低（P<0.05）,MDA、H₂O₂含量,CYP2E1 mRNA及蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）,成功构建小鼠肝损伤模型。200、100和50 μg/g的连翘提取物可显著降低肝损伤小鼠血清ALT和AST活性（P<0.05）,显著提高肝脏中SOD活性（P<0.05）;200、100 μg/g连翘提取物可显著提高肝脏中GSH水平（P<0.05）,显著降低肝脏中MDA、H₂O₂水平及CYP2E1的mRNA和蛋白表达量（P<0.05）。以上结果表明,连翘提取物可减轻APAP诱导的小鼠肝损伤程度且呈剂量依赖性,其潜在作用机制可能与所含活性物质的抗氧化作用以及对CYP2E1酶活性和表达的抑制有关。     

大口黑鲈对饲料中丁基羟基茴香醚的耐受性评价

本试验旨在通过生长性能、血浆生化指标、组织抗氧化指标及肝脏、肠道组织学变化,评价大口黑鲈对饲料中丁基羟基茴香醚(BHA)的耐受性。以初始体重为(6.20±0.01)g的大口黑鲈为靶动物,在基础饲料中依次添加0(D0组,作为对照组)、150(D150组)、300(D300组)和1 500 mg/kg(D1500组)的BHA,其中300和1 500 mg/kg分别是最高推荐剂量(150 mg/kg)的2和10倍,进行为期10周的饲喂试验。每组6个重复,每个重复30尾鱼。结果表明:4组中以D150组的生长性能最好,其余各组的终末均重、特定生长率、增重率和摄食量无显著差异(P0.05)。各组肥满度、脏体比和肝体比无显著差异(P0.05)。对照组血浆中总胆固醇、甘油三酯含量及碱性磷酸酶活性显著高于其余各组(P0.05)。D150和D300组血浆中高密度脂蛋白胆固醇/总胆固醇显著高于对照和D1500组(P0.05)。D1500组血浆中谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性显著低于对照组(P0.05),与D150、D300组无显著差异(P0.05)。D150和D300组肝脏中超氧化物歧化酶活性显著低于对照组(P0.05),与D1500组无显著差异(P0.05)。饲料中添加1 500 mg/kg BHA可以显著提高肝脏中总抗氧化能力(P0.05);饲料中添加150、300、1 500 mg/kg BHA均显著降低了血浆、心脏和肝脏中丙二醛的含量(P0.05)。对照、D150和D1500组大口黑鲈的肝脏、肠道都有不同程度的损伤,但D150和D1500组的损伤相对较少。上述结果表明,饲料中添加150 mg/kg BHA对大口黑鲈具有一定的脂肪代谢促进作用和抗氧化保护功能,且对大口黑鲈是安全的,安全系数为10倍。     

骆驼乳清蛋白对热应激所致大鼠肝氧化损伤的保护作用

本试验旨在研究骆驼乳清蛋白（CWP）对热应激（HS）大鼠肝损伤、氧化应激及肝功能的保护作用。选取6周龄SD大鼠36只,适应性饲养2周后随机分为6组：正常对照组饲喂基础日粮;CWP对照组添加400 mg·kg^-1的CWP;HS组除饲喂基础日粮外,每天进行2 h HS处理,连续8 d;3个CWP干预组分别于每次HS前灌服100、200和400 mg·kg^-1的CWP。试验结束后,取大鼠肝组织,HE染色观察肝组织病理学变化,同时检测肝功能生物标志物、氧化应激标志物水平及抗氧化酶活性。结果表明：CWP降低了HS大鼠血清谷草转氨酶（AST）和谷丙转氨酶（ALT）活性,400 mg·kg^-1的CWP干预效果最好（P<0.01）;400 mg·kg^-1CWP干预组有效降低了HS诱导的大鼠肝组织病理学改变; CWP降低了大鼠肝活性氧（ROS）及丙二醛（MDA）水平,增加了超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及谷胱甘肽（GSH）水平,400 mg·kg^-1的CWP干预效果最好（P<0.01）。结果提示,CWP干预能够以剂量依赖性方式降低大鼠肝氧化应激,增加抗氧化系统防御能力,从而缓解HS所致大鼠肝损伤。     

Proper Heat Shock Pretreatment Reduces Acute Liver Injury Induced by Carbon Tetrachloride and Accelerates Liver Repair in Mice

Whether proper heat shock preconditioning can reduce liver injury and accelerate liver repair after acute liver injury is worth study. So mice received heat shock preconditioning at 40°C for 10 minutes (min), 20 min or 30 min and recovered at room temperature for 8 hours (h) under normal feeding conditions. Then acute liver injury was induced in the heat shock-pretreated mice and unheated control mice by intraperitoneal (i.p.) injection of carbon tetrachloride (CCl₄). Hematoxylin and eosin (H&E) staining, serum aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) levels and the expression levels of heat shock protein 70 (HSP70), cytochrome P450 1A2 (CYP1A2) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) were detected in the unheated control mice and heat shock-pretreated mice after CCl₄ administration. Our results showed that heat shock preconditioning at 40°C for 20 min remarkably improved the mice’s survival rate (P<0.05), lowered the levels of serum AST and ALT (P<0.05), induced HSP70 (P<0.01), CYP1A2 (P<0.01) and PCNA (P<0.05) expression, effectively reduced liver injury (P<0.05) and accelerated the liver repair (P<0.05) compared with heat shock preconditioning at 40°C for 10 min or 30 min in the mice after acute liver injury induced by CCl₄ when compared with the control mice. Our results may be helpful in further investigation of heat shock pretreatment as a potential clinical approach to target liver injury     

长期高铜暴露通过影响线粒体自噬和细胞焦亡诱导大鼠肝组织损伤

旨在探索高铜对大鼠肝组织损伤的作用机制。试验选取120只SD大鼠随机分为对照组、高铜I组、高铜II组、高铜III组和高铜IV组,分别连续每天按体重灌胃0、20、40、80、160 mg·kg^-1铜63 d,采集肝组织。使用ICP-MS测定肝组织铜含量,病理切片观察肝组织病理变化,透射电镜观察线粒体形态和线粒体自噬小体,RT-qPCR和Western blot检测肝组织NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18、Pink1、Parkin、LCB3、p62的mRNA和蛋白表达水平。结果显示,随着灌胃铜水平的增加,蓄积在肝组织中的铜含量呈剂量依赖性增加,且长期高水平铜暴露会造成明显的肝组织结构破坏;随着铜暴露水平的增加,线粒体自噬和细胞焦亡水平呈先上升后下降趋势;与对照组相比,高铜Ⅱ组、Ⅲ组中PINK1和LC3II/LC3I的mRNA和蛋白表达水平显著上升(P＜0.05),高铜Ⅱ组中p62的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),高铜Ⅲ组NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β的mRNA和蛋白表达水平显著上升(P＜0.05),高铜IV组表现为下调。高铜长期暴露可通过影响线粒体自噬和细胞焦亡诱导大鼠肝组织损伤。     

高氟对雏鸡肝细胞周期和凋亡影响的研究

选用300只1日龄Avian肉鸡健雏,随机分为4组,分别饲以对照日粮(F 23 mg·kg~(-1))和高氟口粮(F 400 mg·kg~(-1)>,Ⅰ组;F 800 mg·kg~(-1),Ⅱ组;F 1 200 mg·kg~(-1),Ⅲ组)42 d,第14、28、42天每组随机抽取5只,利用流式细胞术研究高氟对雏鸡肝细胞周期和凋亡的影响.结果显示:高氟Ⅱ组和Ⅲ组肝脏质最显著低于对照组(P<0.05),脏器指数显著高于对照组(P<0.05).流式细胞仪测定,14 日龄时高氟Ⅱ组和高氟Ⅲ组肝细胞G_0/G_1期极显著升高(P<0.01),S期、G_2+M期和增殖指数(PI)与对照组相比不同程度地降低;28和42日龄时高氟Ⅱ组和高氟Ⅲ组肝细胞G_0/G_1极显著降低(P<0.01),S期和PI值显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),G_2+M期无显著变化.14、28和42日龄时,高氟Ⅱ和Ⅲ组肝细胞同时凋亡率均极显著高于对照组(P<0.01).日粮含氟800及1 200 mg·kg~(-1)时可引起肝细胞增殖能力增强,凋亡细胞显著增多.     

二脒那秦内源性激活血管紧张素转化酶2对细胞脂质沉积的抑制效应及其机制

旨在通过诱导3T3-L1前脂肪细胞转分化为3T3-L1脂肪细胞，探讨二脒那秦（DIZE）内源性激活血管紧张素转化酶2（ACE 2）对细胞脂质沉积的抑制效应及机制。对3T3-L1前脂肪细胞转分化，将分化成功的3T3-L1脂肪细胞分为对照组、DIZE组（12.5、25 μmol·L^-1处理），siACE2组和siACE2+DIZE组（siACE2干扰后+25 μmol·L^-1 DIZE），作用48 h，取上清和细胞进行试验：1）测定细胞上清中三酰甘油和葡萄糖含量；2）油红O染色细胞，并进行定量分析；3） Western blot检测细胞内ACE2和脂肪酸合成关键酶或因子FAS、ACC和SREBP-1c及葡萄糖转运蛋白GLUT4与氧化分解关键酶CS的蛋白表达水平。结果显示：1）成功诱导得到了3T3-L1脂肪细胞，前脂肪细胞诱导至第14天，有95%以上细胞内出现脂滴；2）确定了DIZE作用浓度为12.5和25 μmol·L^-1，处理时间为48 h，并用该药物浓度及时间处理3T3-L1脂肪细胞，细胞上清中三酰甘油含量显著降低（P<0.05），葡萄糖含量显著升高（P<0.05）；25 μmol·L^-1 DIZE处理组细胞脂滴减少，siACE2组无显著变化，siACE2+DIZE组脂滴蓄积介于对照组和DIZE组之间； 25 μmol·L^-1 DIZE组ACE2蛋白水平显著高于对照组（P<0.05）；siACE2组显著下调（P<0.05），siACE2+DIZE组较siACE2组无明显变化；3）与对照组相比25 μmol·L^-1 DIZE组细胞中FAS、ACC和SREBP-1c蛋白表达下调，siACE2组和siACE2+DIZE组则表达均上调；4）与对照组相比，25 μmol·L^-1 DIZE组GLUT4和CS蛋白表达水平显著上调（P<0.05），siACE2组和siACE2+DIZE组则均显著下调（P<0.05）。综上所述，DIZE处理通过介导脂肪细胞ACE2的内源性激活改善了脂肪细胞的脂肪沉积。其机理：一方面抑制脂质合成；另一方面促进葡萄糖摄取和氧化代谢，两方面协同减少了脂肪沉积。结果提示，ACE2或DIZE可作为防控脂肪沉积发生和发展的潜在靶点或药物。