黑曲霉Uγ-2胞外菊粉酶的分离纯化

黑曲霉(Aspergillus niger)Uγ-2 菊粉酶经超滤浓缩,硫酸铵分级盐析,DEAE-纤维素离子交换层析,SephadexG-100凝胶过滤,提纯得到单一组分,经电泳鉴定达到电泳纯。测定比活力为220 5 U mg,提纯倍数为7 71。     

中药蒲黄纤溶蛋白的分离纯化及部分性质

用DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析从中草药蒲黄中分离纯化一种纤维蛋白溶解酶,用纤维蛋白板检测分离后组分的纤溶蛋白活性,天然电泳检测分离效果,分离后得到了比活力为25.29的单一组分,SDS电泳确定该组分的表观分子量为31 000 D,同时比较了不同蛋白酶抑制剂对该组分的抑制作用。结果表明:该组分的纤维蛋白水解酶活性被PMSF、亮抑肽素、抑肽酶、大豆胰蛋白酶抑制剂以及苯甲脒强烈抑制,表明该粗提物中的蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶家族。     

Bacillus subtilis Z-3菌株纤溶酶的分离纯化研究

为获取微生物源溶栓药物,从土壤中获得产纤溶酶活性较高的1株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Z-3。从Z-3菌株的发酵液中提取纤溶酶,利用DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和聚丙烯酰凝胶电泳等方法,对纤溶酶进行分离纯化。分离纯化得到1个单一组分(BSFE-1),SDS-PAGE电泳检测为单一条带,BSFE-1表观分子量为48 kDa,等电点为10.5,属丝氨酸蛋白酶类,纤维蛋白平板法检测纤溶酶活性BSFE-1的比活力为4 494.099 U/mg,BSFE-1在4~50℃和pH 4~11之间活性较稳定。     

山药蛋白酶解液的分离纯化

以山药(Dioscorea opposite Thumb.)为原料,选取碱性蛋白酶酶解山药蛋白粗提物制备山药蛋白酶解液。分别采用纤维素DE-52阴离子交换层析和Sephadex G-50凝胶层析,对酶解制备的山药蛋白酶解液进行分离纯化。结果表明:经过纤维素DE-52阴离子交换层析,得到4个吸收峰,收集每个峰组分,其单位质量的还原能力分别为峰2(P2)>峰1(P1)>峰3(P3)>峰4(P4)。采用Sephadex G-50凝胶分别用蒸馏水和Tris-HCl缓冲液对P1和P2组分继续分离纯化,均能得到2个吸收峰(组分)。     

尿激酶的制作方法

一、产品概述尿激酶是从新鲜人尿里提取的一种溶血栓药物。它能激活纤溶酶原转化为有活性的纤溶酶,纤溶酶能使不溶性的纤维蛋白转变为可溶性的肽,从而使血栓溶解。因此,临床上多用于治疗血栓形成、血栓栓塞等症。     

豆豉纤溶酶研究进展

豆豉纤溶酶是从中国传统风味食品豆豉中分离得到的一种纤维蛋白酶,具有良好的溶解血栓作用。综述了豆豉纤溶酶产生菌的菌种,豆豉纤溶酶的理化性质、溶栓作用以及分子生物学研究现状。由于豆豉纤溶酶与传统的溶栓剂相比,具有活性高,安全无毒,分子量小,可以通过消化直接吸收等优点,因此具有广阔的应用前景。     

黑曲霉D226乳糖酶分离纯化研究

为从黑曲霉D2-26发酵液中得到单一的乳糖酶组分,以便研究其酶学性质。试验通过采用过滤、超滤、硫酸铵分级盐析、Sephadex G-25脱盐、DEAE-纤维素-32离子强度梯度层析、Sephadex G-100凝胶过滤、DEAE-纤维素-32 pH梯度层析等方法从发酵液中分离纯化乳糖酶,纯化酶液经PAGE电泳鉴定得到单一蛋白条带。为此建立了一套简单易行的黑曲霉D2-26乳糖酶分离纯化方法。     

天然林产香料的生产技术(上)

天然食用香味料是指能赋予食品香味的一类天然物质,一般认为天然香料是指从天然香料经物理(包括压榨、蒸馏、萃取、浓缩、层析)或发酵方法(酶催化包括酶解、微生物发酵和植物组织培养等生物技术方法)得到的香味料。     

担子菌纤维素酶的分离与纯化

本实验以高产纤维素酶担子菌LKY01发酵液出发分离获得纤维素酶。将担子菌七天发酵液收集后,经30%-80%硫酸铵分级沉淀、0.45mm滤膜过滤、10kd截留超滤管超滤除盐浓缩,得浓缩酶液。将浓缩酶液上DEAE-SepharoseFastFlow阴离子交换柱,进行梯度线性洗脱。合并酶活最高主峰洗脱液,浓缩后上Superdex75凝胶层析柱,得到的两个酶活蛋白组分,FPA酶和CMC酶。经测酶活及电泳实验分析,所得FPA酶和CMC酶分子量分别为36.2和34.6,纯化倍数分别为26.86倍和24.42倍。     

担子菌纤维素酶的分离与纯化

本实验以高产纤维素酶担子菌LKY01发酵液出发分离获得纤维素酶.将担子菌七天发酵液收集后,经30%～80%硫酸铵分级沉淀、0.45哪滤膜过滤、10kd截留超滤管超滤除盐浓缩,得浓缩酶液.将浓缩酶液上DEAE-SepharoseFast Flow阴离子交换柱,进行梯度线性洗脱.合并酶活最高主峰洗脱液,浓缩后上superdex 75凝胶层析柱,得到的两个酶活蛋白组分,FPA酶和CMC酶.经测酶活及电泳实验分析,所得FPA酶和CMC酶分子量分别为36.2和34.6,纯化倍数分别为26.86倍和24.42倍.     

“芝芪菌质”发酵配方的筛选及主要有效成分的含量测定

[目的]对芝芪菌质的不同发酵配方进行筛选,并且对芝芪菌质中总皂苷和粗多糖含量进行测定,从而为制定质量标准做前期准备。[方法]芝芪菌质的水提醇沉的浓缩液用正丁醇萃取出总皂苷;滤渣用于测定粗多糖;依照05版药典规定用紫外分光光度法测定芝芪菌质中总皂苷和粗多糖的含量。[结果]采用紫外分光光度法测定芝芪菌质中总皂苷和粗多糖的平均含量,分别为0.243 3%和1.161 6%。[结论]含2.5%黄芪药材的芝芪菌质效果更优。     

干柱层析法制备油茶总皂苷对照品初探

[目的]研究干柱层析法制备油茶皂苷对照品的方法。[方法]原料用60%乙醇超声提取,浓缩至无醇味,石油醚脱酯后用正丁醇按3:1体积比加入萃取。取正丁醇层并真空浓缩至干,干法上样于100目～200目硅胶柱色谱分离,用乙酸乙酯-甲醇-正丁醇-水(2:1:4:7)的上相展层;根据Rf值取出相应的条带并用甲醇淋洗收集蒸干,薄层及理化性质检测。[结果]该方法所制样品由薄层色谱为一点,纯度较高。[结论]该方法简便、实用且制备量大,可作为油茶总皂苷对照品。     

蒽酮-硫酸法测定芝芪菌质中的多糖含量

[目的]用蒽酮-硫酸法测定芝芪菌质中的多糖含量。[方法]研究确定蒽酮-硫酸法测定芝芪菌质中多糖含量的最佳检测条件,测定3批芝芪菌质的多糖含量。[结果]当加入6 ml、0.05%的硫酸蒽酮溶液,在水浴中加热20 min,冷却20 min时芝芪菌质中多糖含量测定条件最优。[结论]3批芝芪菌质多糖的平均含量为0.991 3%。     

高纯度茄尼醇的分离及测定

探讨以烟叶浸膏为原料,经醇碱溶液皂化,采用乙醇水溶液和石油醚混合溶液萃取皂化物中的茄尼醇,再以甲醇分离茄尼醇,并经层析柱纯化,制备高纯度茄尼醇;以反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定样品中茄尼醇含量,流动相为乙腈∶异丙醇=7∶3,检测波长为210 nm,流速为1.0 m l/m in,柱温为室温,测定结果是样品中茄尼醇含量达98.51%,平均加样回收率为98.35%,标准偏差为1.75%。     

竞争反应与配离子稳定性

讨论竞争反应平衡常数,并用其判断配离子在能与中心离子或配位体发生反应的溶液中的稳定性.     

日本凹顶藻的活性物质对姬松茸病原菌的抑制作用研究

通过对日本凹顶藻以不同溶剂的粗提、乙醇提取物的极性分离、不同极性的薄层层析和多糖的提取,进行抗菌试验的研究,发现95%乙醇和V甲醇:甲苯为3∶1的提取的活性物质具有较强的抗姬松茸的病原细菌活性,乙酸乙酯相对病原细菌的抑菌强于乙醇的粗提物,而水相基本无抑菌效果,乙酸乙酯相的两个带(Rf0.57、Rf0.63)浓度为0.1g/ml具有较强抗姬松茸病原细菌的活性,对假单孢杆菌抑菌圈达到19.3mm,水相层析带的抑菌活性较弱,多糖的粗提物配成0.25g/g的水溶液对姬松茸病原真菌有较好的抑菌效果对黑曲霉、桔青霉和绿色木霉的抑菌圈分别达到10.8mm、7.9mm、5.3mm。     

Stability and absorption spectrum of malononitrile

1) Spectra in the ultraviolet and visible regions have been obtained on samples of malononitrile under different conditions. The samples were manufactured by several companies in America and Sweden. 2) The spectral analysis has demonstrated that the compound used by Hydén and Hartelius is not the same as that employed by American investigators. If, however, an aqueous solution of the American product is allowed to stand at room temperature for a long enough time, it develops the same spectral characteristics as the Swedish solution. 3) Future studies will concern themselves with attempts to identify, the active substance and to examine its effect on neuronal nucleoproteins.     

环境胁迫下邻羟基苯甲酸对杉木幼苗电导率的影响

通过水培方法,用PEG模拟水分胁迫及1/2 Hoagland培养液、缺钙和缺磷模拟营养胁迫,研究环境因子胁迫下的杉木自毒物质邻羟基苯甲酸对1年生杉木幼苗的毒害作用。结果表明,无论是营养胁迫还是水分胁迫,杉木幼苗的电导率均增加,表明在水分和营养胁迫下邻羟基苯甲酸加深了对杉木幼苗的毒害作用。     

组培文竹生根试验研究

以文竹组织培养的新茎为材料,进行了文竹最佳生根方式试验。结果表明：用生根粉处理后进行扦插水培生根效果最好,其生根率达90％以上,较试管培养高14％,较基质扦插高48％;育苗周期较试管培养和基质扦插缩短约18d;移植成活率较试管培养和基质扦插分别提高35％和82％。     

生防菌株CAB-1抑菌物质产生的条件及其稳定性研究

[目的]探索生防菌株CAB-1的最优培养条件及其产生的抑菌物质稳定性。[方法]以黄瓜灰霉菌为靶标,分别采用改进牛津杯法和含药平板法测定抑菌物质活性,并对菌株CAB-1产生抑菌物质的发酵条件及抑菌物质特性进行了研究。[结果]菌株CAB-1产生抑菌物质的最适培养基为4号培养基,最佳发酵温度为31℃,最佳发酵时间为48h。菌株CAB-1所产的抑菌物质在60℃及其以下具有热稳定性;超声波（100W）处理20min对抑菌物质的活性没有影响,处理30min以上抑菌物质的活性显著下降;紫外线照射20、30、40min对抑菌物质的活性没有显著影响,照射50min后其活性显著降低;pH值为6、10、11时,抑菌物质的活性最高。[结论]该研究为利用生防菌株CAB-1开发新型微生物杀菌剂提供了依据。