耐热木聚糖酶水解法制备木寡糖的研究

为探讨耐热木聚糖酶水解自制甘蔗渣木聚糖制备木寡糖的工艺条件和分析水解液的寡糖成分,试验以产耐热木聚糖酶的基因工程菌1020为原料,水解自制的甘蔗渣木聚糖,分别研究水解过程中酶的用量、木聚糖的浓度及酶解温度对酶解反应的影响,并采用高压液相色谱和质谱联用技术对水解液成分进行分析。试验结果表明,2%的木聚糖浓度,水解温度95℃,酶液用量100U/g,酶解3h后DP值可降至2.94,满足生产木寡糖对聚合度的要求;并且水解液的成分主要为木糖、木二糖和木三糖,没能检测到木四糖。耐热木聚糖酶在高温下酶解木聚糖对酶法制备木寡糖具有重要的应用价值。     

木聚糖酶在畜牧业和食品工业中的应用

木聚糖酶是一类可以将木聚糖降解成低聚木糖和木糖的水解酶,主要有三种,内切β-1,4-木聚糖酶(EC3.2.1.8)、外切β-1,4-木聚糖酶(EC3.2.1.92)和β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)。木聚糖酶从动物、植物、微生物中均可获得,以微生物为主。现在已知的能够产生木聚糖酶的微生物包括细菌、曲     

木聚糖酶酶学特性及其催化功能的研究进展

木聚糖酶是可将木聚糖降解成低聚木糖和木糖的水解酶,在饲料有着广阔的应用前景。木聚糖的降解需要多种水解酶的协同作用,其中β-D-1,4内切木聚糖酶是最关键的水解酶。本文综述了木聚糖酶的生化特性及其催化功能的研究进展。     

功能性添加剂木寡糖的制备研究

提供1种以玉米芯为原料,采用高温蒸煮溶出玉米芯木聚糖,再利用内切型木聚糖酶酶解制备木寡糖的方法.所得终产物为以木二糖为主的木寡糖,总糖得率达到17%(按含36%木聚糖玉米芯计),可作为功能性饲料添加剂使用.     

木聚糖酶的制备及应用研究

木聚糖是植物界第二大生物聚合物,由β-D-吡喃型木糖残基经β-1,4-糖苷键相连形成主链,并由阿拉伯糖、乙酰基甘露糖和葡萄糖醛酸等复杂侧链组成.在众多可降解木聚糖的酶中,β-1,4-内切木聚糖酶起主要作用,它能随机断开木聚糖主链上的糖苷键将其水解成木聚寡糖,在食品、饲料和纸浆制造工业中有潜在用途,因此,对木聚糖酶的研究一直受国内外学者的重视.     

木聚糖酶的作用机理及其在饲料中的应用

木聚糖酶是一种可以将木聚糖水解为木二糖、少量木糖和阿拉伯糖的组酶。文章综述了木聚糖酶的作用机理及其在饲料中的应用。     

木聚糖酶生产与应用研究进展

木聚糖是植物细胞壁的主要成分之一，属于非淀粉多糖。作为半纤维素的一种，在自然界中是含量仅次于纤维素的可更新多糖，存在于各种陆生植物的几乎所有部位。它从仅由β－１，４糖苷键连接的多聚糖线形分子到以α－糖甘键形成取代基支链的高度分枝的异质多糖，结构变化的范围很大。通常，木聚糖以异质多糖形式存在并与纤维素结合在一起。木聚糖酶是木聚糖的专一降解酶。属于水解酶类，包括内切木聚糖酶、外切木聚糖酶和木糖苷酶三种。内切木聚糖酶能随机切断木聚糖主链上的木聚糖苷键，生成分子量不同的木寡糖；外切木聚糖酶则从木聚糖非还…     

不同来源木聚糖酶及其组合对木聚糖水解产物组成、细菌增殖与大肠杆菌黏附性的影响

本试验旨在研究不同来源木聚糖酶及其组合对木聚糖的水解效果,并研究不同木聚糖水解产物对细菌增殖及大肠杆菌对肠道上皮细胞黏附性的影响。试验用木聚糖酶A和木聚糖酶B分别来源于毕赤酵母和米曲霉。采用木聚糖酶A、木聚糖酶B、组合酶1(木聚糖酶A∶木聚糖酶B=3∶7)、组合酶2(木聚糖酶A∶木聚糖酶B=1∶1)、组合酶3(木聚糖酶A∶木聚糖酶B=7∶3)分别水解木聚糖,然后测定木聚糖水解产物对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和乳酸杆菌增殖和大肠杆菌对肠道上皮细胞黏附性的影响。结果表明:1)2种木聚糖酶有一定的组合效应,木聚糖酶A、木聚糖酶B、组合酶1、组合酶2、组合酶3组木二糖和木三糖的总含量分别为95.70%、86.79%、93.11%、94.55%和87.55%,其中木聚糖酶A组木二糖含量最高,组合酶2组木三糖含量最高。2)培养20 h时,5种木聚糖水解产物对大肠杆菌的增殖(以菌液吸光度值表示)没有产生显著影响(P0.05);培养20和30 h时,5种木聚糖水解产物显著促进枯草芽孢杆菌的增殖(P0.05);培养13和17 h时,5种木聚糖水解产物显著促进乳酸杆菌的增殖(P0.05)。3)5种木聚糖水解产物均可以显著降低大肠杆菌对肠道上皮细胞的黏附率(P0.05)。由此可见,通过不同来源木聚糖酶及其组合水解木聚糖,可以产生以木二糖和木三糖为主要组分的水解产物,从而起到促进枯草芽孢杆菌和乳酸杆菌增殖、减少大肠杆菌对肠道上皮细胞黏附的作用。     

木聚糖酶在饲料中的应用

木聚糖酶是一种可以将木聚糖水解为木寡糖、木二糖、少量木糖和阿拉伯糖的组酶,通常可以由真菌、细菌、酵母、海藻等分泌产生,可应用于猪、鸡、水产动物饲料中,是安全、环保、高效的绿色催化剂,能生产出高质量、高转化率的饲料。     

功能性添加剂木寡糖的制备研究

提供１种以玉米芯为原料，采用高温蒸煮溶出玉米芯木聚糖，再利用内切型木聚糖酶酶解制备木寡糖的方法。所得终产物为以木二糖为主的木寡糖，总糖得率达到１７％（按含３６％木聚糖玉米芯计），可作为功能性饲料添加剂使用。     

抗冻基因及其在基因工程中的应用研究进展

低温是限制植物分布与生长的重要因素,低温伤害是一种严重的自然灾害,全球每年因此造成农作物的损失高达数千亿美元。本文综述了抗寒基因研究中一些已分离和鉴定出的低温诱导表达基因,对抗冻基因的功能特性和作用机制进行了全面的回顾,总结了抗冻基因工程的研究方向,对典型抗冻基因的表达效果进行了比较分析,并提出此领域尚存在的一些问题及发展前景。     

猪产仔数性状主效基因及其候选基因的研究进展

产仔数性状属于低遗传力数量性状,通过常规选育所获得的进展甚微,许多学者在寻找控制该性状的基因和遗传标记方面做了大量研究,并取得了显著成效。本文综述了猪产仔性状主效基因和候选基因的研究情况及其展望。     

肠炎沙门菌sef14基因缺失株生物学功能

构建了肠炎沙门菌参考株SE50336的SefA主要亚单位编码基因sefA的缺失株SE50336ΔsefA,进一步探究野生株及SEF14菌毛缺失株的生物学功能。以SE50336为模板,利用λ-red同源重组技术构建sefA缺失株,通过绘制生长曲线、生物被膜测定试验、刚果红-考马斯亮蓝无盐培养基菌落表型试验、RT-qPCR(real-time quantitative polymerase chain reaction)、人结肠腺癌上皮细胞(Caco-2)的体外黏附测定来检测和比较2种菌株的生物学特性,并利用野生株和缺失株分别攻毒小鼠,探究SEF14菌毛对肠炎沙门菌致病力的影响。结果显示,野生株及缺失株生长情况无明显差异。与野生株相比,ΔsefA缺失株的生物被膜形成能力有所下降;菌落表型试验中野生株表现出典型的rdar(red, dry and rough)表型,而ΔsefA缺失株表现出saw(smooth and white)表型;RT-qPCR试验中,野生株的生物被膜形成主要关联基因csgA、bcsA、pgaC、fimA的转录量均显著高于ΔsefA缺失株。但缺失株与野生株对于Caco-...     

Canine CD20 gene

The human CD20 antigen, a 35kDa cell surface nonglycosylated hydrophobic phoshpoprotein is expressed consistently on almost all human B-cells, and its monoclonal antibody is used for the therapy on human B-cell lymphoma. In the present study, canine CD20 gene was cloned and sequenced, and the expression of CD20 mRNA was investigated in canine peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), and lymph nodes from healthy dogs, and canine lymphoma cells. Using canine cDNA as a template, full-length of canine CD20 gene was sequenced by 5'-RACE and 3'-RACE methods. The full-length of the cDNA sequence of canine CD20 was 1239bp encoding 297 amino acids. The amino acid sequences of canine CD20 showed 73 and 68% sequence similarities with those of human and mouse, respectively. Canine CD20 was predicted to contain domains of amino acid sequences consisting of two extracellular domains (EM), four transmembrane domains (TM), and three intracellular domains (IC) as in human CD20. Canine CD20 mRNA was detected in PBMCs and lymph node from healthy dogs, and B-cells of canine lymphoma, but not in T-cell lymphoma cells and non-T and non-B-cell lymphoma cells by RT-PCR analysis. From these results, canine CD20 might be targeted for monoclonal antibody therapy against B-cell lymphoma of dogs.     

锌与基因表达

锌是动植物体组成的必需成分,也是动植物体生长发育过程中必需的微量元素。在动物的生长发育过程中,锌参与不同的细胞进程,包括催化作用、基因表达和细胞凋亡和氧化应激的抑制剂犤1犦。例如,锌至少是60～80种酶的组成部分犤2犦,它在酶中主要是提供结构或催化作用。碳酸酐酶的活     

肌肉生成抑制素基因的研究

动物肌肉生成抑制素(Myostatin,MSTN)是Mcpherron等研究小鼠转化生长因子-β(TGF-β)超家族时发现的一种新的生长因子。当时命名为生长分化因子-β(GDF-β),后经研究发现,其对骨骼肌的生长具有负调控作用,因此改名为肌肉生成抑制素[1-3]。该基因编码的蛋白质对骨骼肌有负调控作用,动物缺乏MSTN时出现肌肉增大,骨骼肌肌群分布广,而且不增生脂肪等现象。MSTN主要在胚胎期的骨骼肌中表达,它的缺失使一些动物表现双肌性状[4-7]。1MSTN基因的发现及组织分布Mcpherron等(1997)根据TGF-β超家族的保守区设计一对简并引物,通过PCR扩增…     

马立克氏病病毒致瘤相关基因meq在不同病变组织中的变化

以MSB-1肿瘤细胞建立的马立克氏病为病理模型,利用PCR技术扩增不同病变组织中的meq基因,构建meq基因重组阳性质粒,测定和比较它们的核苷酸和氨基酸序列。结果显示,与L-meq（1 200 bp）和标准株GA的meq（1 020 bp）比较,MSB-1细胞和脾脏肿瘤组织的meq基因（1 197 bp）、羽髓meq基因（1 017 bp）分别相应缺失3个碱基（CCA）;MSB-1细胞和脾脏肿瘤组织的meq基因具有与L-meq相同的180 bp插入序列;氨基酸序列也发生相应变化。结果表明,meq基因在不同病变组织中的核苷酸序列发生了变化,这种变化可能与马立克氏病病毒的致瘤机制有关。     

鹅细小病毒VP3基因与鹅γ干扰素基因在重组禽痘病毒中的共表达

为了构建共表达鹅细小病毒(GPV)VP3基因与鹅IFNγ基因的重组禽痘病毒,本研究将GPV-VP3基因和鹅IFNγ基因克隆到禽痘病毒转移载体中,构建串联基因的禽痘病毒转移载体pSY-GoIFNγ-VP3,采用脂质体法将其转染禽痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞(CEF),经蓝斑法筛选重组病毒,并进行8轮蚀斑纯化,以及PCR鉴定和间接免疫荧光(IFA)分析。结果表明,所获得的重组病毒rFPV-GoIFNγ-VP3能稳定表达外源基因。本研究为进一步开展GPV重组禽痘病毒疫苗的研制奠定了基础。     

传染性造血器官坏死病病毒G基因全长cDNA克隆及重组表达研究

本研究旨在克隆G基因全长并与其他传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)株进行分析,为IHNV的预防检测提供依据。通过提取IHNV-G蛋白RNA并进行扩增,将其克隆到p MD-18T并与p Chlamy-4载体相连,重组到莱茵衣藻中并提取总蛋白,结果可得:扩增片段长度为1 500 bp,经SDS-PAGE电泳得到一条大约为58 k Da的蛋白条带,Westen Blot分析结果显示,重组莱茵衣藻所表达的蛋白可以与6×HIS标签抗体特异性结合;并且以重组表达的G蛋白为抗原,鼠抗IHNV血清为一抗,辣根过氧化物酶标记的驴抗鼠IgG为二抗,再次进行Westen Blot检验,其结果显示,经诱导后的G蛋白能与鼠抗IHNV血清反应,并在58 k Da处出现了一条明显的特异性条带,具有良好的反应原性。表明重组莱茵衣藻表达系统构建成功。     

轮状病毒VP7基因与LTB基因融合表达及其免疫原性

根据GenBank已发表的牛轮状病毒VP7基因核苷酸序列(DQ195152),成功克隆了牛轮状病毒野毒株CHLY VP7基因的3个主要抗原簇并在大肠杆菌中进行了高效表达,然后与LTB(大肠杆菌不耐热性肠毒素)基因融合后再一次成功表达,表达产物经镍离子螯合次氨基三乙酸(Ni-NTA)亲和层析纯化,得到了高纯度的目的蛋白。动物试验表明,该抗原蛋白可在小鼠体内诱导产生一定水平的抗体。