鱼源小肠结肠炎耶尔森氏菌的耐药性研究

本试验采用聚合酶链反应(PCR)方法检测鱼源小肠结肠炎耶尔森氏菌的四环素类耐药基因(tetA、tetC、tetM)、磺胺类耐药基因(sul1、sul2、sul3)和氨基糖苷类耐药基因(aph(3')-Ⅲa、aac(6')-Ⅰb、ant(3')-Ⅰa、aac(3)-Ⅱa),并采用κ-B法检测该菌对14种抗生素的耐药表型。结果表明,小肠结肠炎耶尔森氏菌8种耐药基因(tetC、tetM、sul1、sul2,aph(3')-Ⅱa、aac(6')-Ⅰb、ant(3')-Ⅰa、aac(3)-Ⅱa)被检测出,而tetA、sul3基因未被检测出。该菌株对复方新诺明、磺胺异恶唑、红霉素、利福平、洁霉素和头孢噻吩6种抗生素耐药,对氟哌酸、氟苯尼考和头孢曲松等8种抗生素敏感。这为治疗小肠结肠炎耶尔森氏菌引起的鱼病积累了资料。     

鱼源小肠结肠炎耶尔森菌5种毒力基因的检测和分析

采用煮沸法和细菌基因组DNA试剂盒两种方法制备鱼源小肠结肠炎耶尔森菌DNA模板,运用聚合酶链反应(PCR)方法检测小肠结肠炎耶尔森菌的5种毒力基因(ail、yadA、virF、ystB和HPI-int),并对HPI-int基因进行测序分析.结果表明,小肠结肠炎耶尔森菌ail、virF和HPI-int 3种毒力基因被检测出,而另外两种毒力基因ystB和yadA未被检测到.HPI-int基因长度为722 bp,GenBank序列号为JX041513,与该数据库中的小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛基因的相似性达到99％,由此推断该菌株具有较强的致病性.这为深入研究小肠结肠炎耶尔森菌的毒力和危害积累了科学资料.     

小肠结肠炎耶尔森氏菌的增菌培养基

小肠结肠炎耶尔森氏菌(Y.ec)在实验动物中分布较广,经粪-口传播,有症状的感染可能干扰动物实验结果,因此,规定清洁级以上标准实验动物必须无此菌。     

小肠结肠炎耶尔森菌对磺胺类和β-内酰胺类抗生素的耐药性研究

为了探讨12株小肠结肠炎耶尔森菌对磺胺类和β-内酰胺类抗生素的耐药性,试验采用标准K-B纸片扩散法检测该菌对磺胺类和β-内酰胺类抗生素的耐药表型,并采用PCR法检测磺胺类耐药基因(sul1、sul2、sul3基因)和β-内酰胺类耐药基因(TEM基因)。结果表明:头孢噻吩、复方新诺明和磺胺异唑治疗效果较差,耐药率分别高达58.3%、66.7%、58.3%,但先锋霉素Ⅴ抑菌效果较好,头孢菌素次之;在菌株中检测出磺胺类耐药基因sul1、sul2和β-内酰胺类耐药基因TEM,其检出率分别为91.7%、100%、75.0%,而sul3基因未检出。     

鸭疫里默氏杆菌氨基糖苷类药物的耐药性分析

为了调查鸭疫里默氏杆菌3种氨基糖苷类耐药基因aac (3)-Ⅱ、aadA、aac (6′)-Ⅱ的携带情况,探讨耐药基因与氨基糖苷类药物表型的相关性,试验选用常用氨基糖苷类抗生素对20株来自扬州、苏州、滁州、泰兴、淮安、南京地区的鸭疫里默氏杆菌进行药敏试验,用PCR法检测耐药基因aac (3)-Ⅱ、aadA、aac(6′)-Ⅱ,结晶紫染色法检测生物被膜形成能力。结果表明:20株鸭疫里默氏杆菌对氨基糖苷类药物中的妥布霉素耐药率最高,其次是多黏菌素B、庆大霉素和诺氟沙星,最后是丁胺卡那和链霉素;耐药基因aac (3)-Ⅱ、aadA与aac(6′)-Ⅱ的检出率均为0;20株鸭疫里默氏杆菌均能形成生物被膜,但OD_(595)值均在0.31～1.00之间,为弱生物被膜。说明鸭疫里默氏杆菌对氨基糖苷类药物具有强耐药性,且应少用妥布霉素等氨基糖苷类药物。     

鱼源温和气单胞菌对氨基糖苷类和四环素类抗生素的耐药性分析

为探究温和气单胞菌对氨基糖苷类和四环素类抗生素的耐药性,试验采用PCR法检测10株来源不同的鱼源温和气单胞菌对氨基糖苷类抗生素的4种耐药基因（aph（3'）-Ⅱa、ant（3″）-Ⅰa、aac（6'）-Ⅰb、aac（3）-Ⅱa）及四环素类抗生素的3种耐药基因（tetA、tetC、tetM）的表达情况,并利用K-B纸片扩散法对6种抗生素进行耐药表型分析。结果显示,10株温和气单胞菌对氨基糖苷类耐药基因aph（3'）-Ⅱa、ant（3″）-Ⅰa、aac（6'）-Ⅰb的检出率分别为20%、30%、20%,未检测出aac（3）-Ⅱa基因;对四环素类的耐药基因tetA、tetC、tetM的检出率分别为70%、20%、60%。K-B纸片扩散法结果显示,10株菌对四环素耐药率最高,对链霉素敏感,对庆大霉素、卡那霉素、多西环素、米诺环素高度敏感。结果表明,本次分离的温和气单胞菌对氨基糖苷类和四环素类抗生素具有一定的耐药性,为深入了解温和气单胞菌的耐药机制提供参考。     

鱼源病原菌对氟喹诺酮类药物的耐药性分析

本试验旨在了解北京地区鱼源病原菌对氟喹诺酮类药物的耐药现状,提供氟喹诺酮类药物在防制鱼类疾病上合理规范使用的依据。从北京地区具有典型症状的病鱼脏器或病灶分离出16株病原菌,采用纸片扩散法检测病原菌对7种氟喹诺酮类药物的耐药表型,运用PCR法分析病原菌的喹诺酮类耐药基因gyrA、qnrA和qnrS的携带情况。结果表明,鱼源病原菌对氟喹诺酮的耐药基因阳性率显著高于耐药表型检出率,可能耐药基因检测比耐药表型检测更能推测病原菌的耐药现状。50%的病原菌至少耐受1种氟喹诺酮类药物,87.5%的病原菌至少携带1种喹诺酮耐药基因,显示北京地区鱼源病原菌对氟喹诺酮类药物已在基因水平呈现出严重的耐药,有必要严格控制此类药物在鱼类养殖上的应用。     

鱼源温和气单胞菌对氨基糖苷类和四环素类抗生素的耐药性分析

为探究温和气单胞菌对氨基糖苷类和四环素类抗生素的耐药性,试验采用PCR法检测10株来源不同的鱼源温和气单胞菌对氨基糖苷类抗生素的4种耐药基因(aph(3′)-Ⅱa、ant(3″)-Ⅰa、aac(6′)-Ⅰb、aac(3)-Ⅱa)及四环素类抗生素的3种耐药基因(tetA、tetC、tetM)的表达情况,并利用K-B纸片扩散法对6种抗生素进行耐药表型分析。结果显示,10株温和气单胞菌对氨基糖苷类耐药基因aph(3′)-Ⅱa、ant(3″)-Ⅰa、aac(6′)-Ⅰb的检出率分别为20%、30%、20%,未检测出aac(3)-Ⅱa基因;对四环素类的耐药基因tetA、tetC、tetM的检出率分别为70%、20%、60%。K-B纸片扩散法结果显示,10株菌对四环素耐药率最高,对链霉素敏感,对庆大霉素、卡那霉素、多西环素、米诺环素高度敏感。结果表明,本次分离的温和气单胞菌对氨基糖苷类和四环素类抗生素具有一定的耐药性,为深入了解温和气单胞菌的耐药机制提供参考。     

猪肠道菌氨基糖苷类药物耐药基因分析

为调查和分析猪肠道菌的氨基糖苷类药物耐药机制,用PCR及序列分析方法检测鉴定2个猪肠道菌中4种16S rRNA甲基化酶耐药基因rmtA、rmtB、rmtC和armA和10种氨基糖苷钝化酶基因,用接合试验研究rmtB基因和10种氨基糖苷钝化酶基因的水平转移机制,用微量稀释法测定携带rmtB基因的分离菌及其接合子对20种抗菌药物的敏感性.结果,从分离的152株猪肠道菌中共检测到49株(32.3%)rmtB阳性菌,其中48株为大肠埃希氏菌,1株为阴沟肠杆菌,未检出其它16S rRNA甲基化酶编码基因.49株rmtB阳性菌中检测到7种氨基糖苷类钝化酶基因,检出率从高到低依次是aac(3)-Ⅱ(87.8%)、aph(3′)-Ⅶ(79.6%)、aph(3′)一Ⅱ(77.6%)、aadAJ(34.7%)、aacc(6′).-Ⅰb(14.3%)、aac(3)-Ⅳ(10.2%)和aph(4)-Ⅰ(8.2%).46株rmtB阳性菌可以通过接合试验将rmtB、aac(3)-Ⅱ、aph(3′)-Ⅶ、aph(3′)-Ⅱ和aadA基因传递给受体菌E.coli C600和E coli 488 Rifr,接合率从3.0×10-6～4.6×10-13不等.所有rmtB阳性菌株及其接合子对卡那霉素、阿米卡星、妥布霉素、西梭米星、萘替米星、庆大霉素6种氨基糖苷类抗生素均高度耐药(MIC≥512 Pg·mL-1).研究结果表明,rmtB基因和氨基糖苷钝化酶基因广泛存在于两猪场,它们共同介导猪源肠道菌对庆大霉素、阿米卡星等氨基糖苷类药物的高度耐药.rmtB基因与aac(3)-Ⅱ·aph(3′)一Ⅶ、aph(3′)-Ⅱ和aadA基因位于同一接合性质粒上,共同传播氨基糖苷类的耐药性.     

仔猪粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的检测

应用常规细菌分离培养鉴定技术对西宁市某猪场断奶仔猪粪便中小肠结肠炎耶尔森菌带菌率进行了调查。结果显示,在60头断奶仔猪粪便中共检出7株小肠结肠炎耶尔森菌,阳性率为11.7%(7/60)。致病性试验表明有3株分离菌对小鼠具有致死效应。     

小肠结肠炎耶尔森氏菌的依钙性

测定60株从腹泻猪的粪便中分离的小肠结肠炎耶尔森氏菌的依钙性,与9株阳性对照菌株和4株阴性对照菌株作对比,结果证明全部试验株为37℃依钙性菌株。提示这些菌株是含有毒力质粒的致病性菌株。     

大熊猫小肠结肠炎耶尔森氏菌感染及治疗

大熊猫小肠结肠炎耶尔森氏菌感染及治疗叶志勇吕文其（中国成都大熊猫繁育研究基地,四川成都６１００８１）刘新华（重庆动物园,６３００５０）姜文球权洙浣金银规（韩国自然农园动物园）李昌雨（韩国汉城兽医大学）大熊猫消化系统疾病是一种发病率高、危害性大的常见病...     

用体外法测定致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌

研究和评价七种测定致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌的体外法。用１００ 株来自不同国家包括致病性和非致病性的各种血清型和生物型菌株进行研究。体外法包括自凝试验、依钙试验、吡嗪酰胺酶试验、水杨苷发酵、七叶苷水解、刚果红菌落试验和毒力质粒。本研究结果表明所有七种体外法对于鉴定致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌都是有用的,并表明我们实验室创立的刚果红菌落试验是一种简易和最有效的方法,能测定小肠结肠炎耶尔森氏菌的毒力以及鉴定单个带质粒的菌落。     

萍乡市小肠结肠炎耶尔森氏菌感染情况的调查

小肠结肠炎耶尔森氏菌(以下简称耶氏菌y.e),是一种人畜共患的病原微生物。为了进一步摸清耶氏菌在我市的危害性,我们在1984年调查的基础上,于1985年1—12月重点开展了耶氏菌的传染源和储存宿主以及传染媒介的调查,总结于后。一、方法和步骤 1.标本的来源:(1)腹泻患者为萍矿职工医院、萍矿中心门诊部门诊和住院患     

家猪小肠结肠炎耶尔森氏菌抗体水平调查

1980年我们从家猪中分离到耶尔森氏菌,首次证明我国有此菌存在。我们对所分离的六株耶尔森氏菌进行了血清学分型,     

长沙市观赏动物小肠结肠炎耶尔森氏菌带菌调查报告

小肠结肠炎耶尔森氏菌(简称耶氏菌)是近年来在国际上被引起重视的人畜共患病病原菌,国内外学者已从人及多种动物中分离到该菌,但国内观赏动物感染报道不多。为此,我们于1986年元月对长沙市动物园中观赏动物进行了耶氏菌检测,现将其结果报告如下。     

貉源致病性肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类药物的耐药性及耐药基因的检测与分析

为了分析貉源致病性肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类抗菌药物的耐药性与耐药基因型之间的相关性,采用KB药敏纸片法和PCR法分别检测57株貉源致病性肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类抗菌药物的耐药性与耐药基因.结果表明,57株克雷伯菌对庆大霉素、链霉素、卡那霉素、阿米卡星、新霉素的耐药率分别为54.4％、49.1％、22.8％、8.8％和1...     

流浪犬源大肠埃希菌对氟喹诺酮类和氨基糖苷类药物的耐药性检测

为选择有效治疗流浪犬大肠杆菌病药物,从成都市双流爱之家动物救助中心采集流浪犬粪便进行细菌分离与鉴定,测定其对6种临床常用氟喹诺酮类(二氟沙星、诺氟沙星、沙拉沙星)和氨基糖苷类(阿米卡星、安普霉素和卡那霉素)抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,分离的267株大肠埃希菌对二氟沙星、诺氟沙星和沙拉沙星耐药率分别为56.2%、46.7%和22.1%;对阿米卡星、安普霉素和卡那霉素的耐药率分别为6.0%、6.7%和30.7%;分离菌株对沙拉沙星和阿米卡星最敏感,可优先选择沙拉沙和阿米卡星进行流浪犬大肠杆菌病防治。     

我国猪小肠结肠炎耶尔森氏菌的首次检出及其鉴定——Ⅱ、六株小肠结肠炎耶尔森氏菌的血清学分型

据文献报道,小肠结肠炎耶尔森氏菌(以下简称肠炎耶氏菌),抗原性复杂,其抗原特性与其它肠杆菌科的抗原成分相似,具有耐热的菌体“O”抗原成分及不耐热的鞭毛“H”抗原成分和对热不稳定的菌体“K”抗原成分。这三种抗原成分中“O”抗原为