基于微通道电化学传感器的牛奶体细胞定量检测方法研究

本文以随机采集的新鲜牛奶作为研究对象，测取牛奶细胞电容、温度和细胞大小百分比3参数，建立预测体细胞含量的神经网络模型，模型对N、T、1、2级奶样的预测正确率分别为：73．56％、65．78％、89．03％、94．32％。结果表明，微通道电化学传感器检测牛奶电容的变化与细胞含量相关程度较高，检测精度随着体细胞含量的增加而提高。     

基于微通道传感器与神经网络的牛奶体细胞数定量检测方法研究

为研究特定在线检测温度下,牛奶体细胞数与电导率和电容值双电参数之间的关系,本试验以随机采集的新鲜牛奶为研究对象,使用培养的K562细胞配置不同细胞含量的奶样,并将其注入微通道传感器中,再使用GAMRY 600电化学工作站测取不同细胞含量奶样的电导率和电容值,最后建立以电导率和电容值为模型输入,体细胞数为输出的神经网络模型。结果表明:两种型号的微通道传感器在该检测模型下对N(阴性)、T(可疑)级奶样的检出率只有86.67%和86.67%、46.67%和60%;而对1(隐性)、2(较严重)、3(严重)级奶样的检出率均为100%。说明在该模型下,微通道传感器的检测限可达到40万个/ml,模型输出值与实际值呈极显著线性关系。     

牛奶中体细胞数的表述方式

从某头牛(或其乳房的某乳区)、某牛群(或某储奶罐中),采集生鲜牛奶有代表性的样品,藉助于显微镜观测计数、流动细胞荧光计数仪或视频显微仪检测等手段,算得每毫升牛奶中所含的体细胞数,称为(乳)体细胞(计)数(somatic cell count,SCC)。大量的检测实践表明,未受感染的乳腺组织产     

乳中体细胞数在牛奶生产中的监控作用

1　牛乳中体细胞数牛乳中的体细胞 (SomaticCellCount,SCC) ,是指每毫升奶中的细胞总数 (挤奶前的第一把奶 ) ,多数是白细胞 (即巨噬细胞、嗜中性白细胞和淋巴细胞 ) ,其中约占牛体细胞数的 98%～ 99% ,其他 1 %～ 2 %的体细胞是乳腺组织脱落的上皮细胞 ,其数量反映了牛奶产量、质量及牛只的健康状况。在正常情况下 ,牛奶体细胞数不可能为零 ,牛奶中体细胞数一般在 2 0万～ 30万个 /mL。当乳房外伤或发生疾病产生炎症时 ,机体将大量的白细胞分泌进入乳房以清除感染 ,体细胞数一般都超过 5 0万个 /mL(Ruegg ,1 997)。因此 ,牛奶中体细胞…     

一个高体细胞数牧场奶牛隐性乳腺炎病原菌的调查

对安徽某规模牧场随机采集的314份奶样进行细菌分离鉴定、牛奶体细胞计数(SCC),并对分离比例较高的凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)进行亚种鉴定及药敏试验。结果显示120个低体细胞数奶样(SCC25×104/mL)的细菌检出率只有8.3%,分离细菌为CNS;而194个高体细胞数奶样(SCC≥25×104/mL)细菌检出率高达72.2%,分离出的细菌主要为金黄色葡萄球菌、CNS、大肠杆菌、停乳链球菌等。其中CNS感染比例最高、为28.8%,主要包括松鼠葡萄球菌、表皮葡萄球菌、人型葡萄球菌等。乳腺内细菌感染可引起患病乳区SCC显著升高(P0.05),松鼠葡萄球菌和表皮葡萄球菌感染也可引起SCC显著升高(P0.05),不同亚种的CNS对临床常用抗菌药物青霉素、庆大霉素、红霉素有较高的耐药率,分别为71.2%、53.8%和82.7%。     

与牛奶中体细胞数变化相关因素的试验

为了掌握牛奶中体细胞数量与相关因素之间的关系,试验随机选取齐齐哈尔市某规模化奶牛场375份乳样,探讨奶中体细胞数与奶量、不同胎次、不同泌乳期、感染乳区、奶损失之间的变化规律及与牛奶主要成分的相关性。结果表明,体细胞数越多,产奶量下降越明显;胎次增加,牛奶中体细胞数呈上升趋势;产后时间的延长,体细胞数也会增多;体细胞数与乳脂率、乳糖率和乳蛋白率之间没有显示相关性;乳区的感染越严重,牛奶中体细胞数越高,同时产奶量的损失越大。研究对奶牛状况作出评价,以便做好预防,为指导奶牛生产提供建议和参考依据。     

利福昔明乳房注入剂(干乳期)对奶牛的安全性研究

研究利福昔明乳房注入剂(干乳期)对健康奶牛的正常体温、日产奶量、奶中体细胞数和乳房内菌群的影响。选择健康泌乳期奶牛12头,给药前1 d和给药前0 d,统计记录各试验奶牛的直肠温度、日产奶量,检测每个乳区采集奶样的体细胞数,并对给药前0 d的奶样进行病原菌分离检测。每头入选奶牛的四个乳区分别单次灌注利福昔明乳房注入剂,在给药后的第1、3、5、7、10天分别记录每头奶牛的日产奶量;在给药后的第12小时、3、5、7、10天分别采集奶样进行体细胞检测,同时检查直肠温度;在给药后的第10天对采集的奶样进行病原菌检测。比较奶牛用药前后直肠温度、日产奶量、奶中体细胞数和病原菌的变化。试验期间对给药奶牛进行连续观察,记录奶牛是否出现红、肿、热、痛等临床症状。结果表明。给药前1 d、给药当天和最后一次给药后的第1、3、5、7、10天,试验奶牛的日产奶量平均值分别为30.5、30.3、29.8、30.3、30.0、30.9和31.0 kg,相互之间无显著性差异(P>0.05);给药前后各时间点采集的奶中体细胞数大都维持在30~50万/mL;给药前后各时间点测得的奶牛直肠温度无显著性差异(P>0.05);病原菌检测结果显示,在给药前0 d分离到7株大肠杆菌、6株链球菌和9株葡萄球菌,给药后第10天采集的奶样中未检测到大肠杆菌和葡萄球菌,仅检测到1株链球菌。与给药前相比,奶中的病原菌数量有所减少,无新增感染。利福昔明乳房注入剂(干乳期)对奶牛正常体温、产奶量、奶中体细胞数无不良影响,该制剂对于奶牛是安全的。     

IgG FcRn介导奶牛乳房炎无乳链球菌保护性抗原Sip亚单位疫苗的研究

为研究无乳链球菌Fc-Sip亚单位疫苗的免疫效果,并验证IgGFcRn在奶牛乳腺发生局部免疫过程中的重要作用。本研究采用大肠杆菌原核表达系统,表达了由IgGFcRn介导无乳链球菌保护性表面抗原蛋白(Sip)的融合蛋白Fc-Sip,并与佐剂混合制成Fc-Sip亚单位疫苗。选取干奶前15 d的奶牛进行加州乳房炎检测法(CMT)检测,选取120头CMT(++)以上的奶牛进行分组免疫。通过免疫前后的细菌分离试验、牛奶体细胞数测定、免疫牛血清抗体间接ELISA检测来评价该亚单位疫苗的免疫效果。结果显示,免疫前乳样细菌分菌率为86.6%,无乳链球菌检出率为46.6%;免疫后乳样分菌率降至40%,无乳链球菌检出率降至13.3%,表明Fc-Sip亚单位疫苗不但可以治疗无乳链球菌性奶牛乳房炎,还可以抑制其它奶牛乳房炎致病菌的侵入。首次免疫后60 d,免疫组80%奶牛血清抗体滴度达到1∶2 048～1∶4 096,对照组奶牛抗体滴度一直保持在1∶512。首次免疫后90 d,使用利拉伐牛奶体细胞计数仪测定实验奶牛乳样中的体细胞数,免疫组奶牛乳样体细胞数范围在0.17×10~5个/mL～3.91×10~5个/mL,对照组奶牛乳样体细胞数的范围在4.05×10~5个/mL～7.27×10~5个/mL。免疫组奶牛血清抗体滴度的升高及免疫后牛奶中体细胞数的减少,表明该亚单位疫苗促进了奶牛体液免疫反应和局部免疫反应的发生,也证明该亚单位疫苗具有降低牛奶体细胞数的作用。本研究为奶牛乳房炎无乳链球菌疫苗的研制奠定了基础。     

浅探牛乳中体细胞数的变化规律及其对乳成分的影响

本研究旨在通过DHI检测获得的体细胞数据,探讨全年中经产奶牛乳中体细胞数的变化规律.同时利用DHI中主要乳成分的数据,结合体细胞数进行相关分析,阐述体细胞数对牛奶主要成分及含量的影响,为原料奶产品质量的评估提供参考依据.对扬州某实验农牧场经产荷斯坦奶牛进行12个月(2009年4月～2010年3月)的采样,共得到2 82...     

自家疫苗防治奶牛隐性乳房炎效果的研究

将武汉某牧场的38头隐性乳房炎患牛随机分为两组,第一组进行自家疫苗免疫试验,第二组使用药物治疗。每月采集奶样送至湖北省DHI检测室,探究自家疫苗对降低隐性乳房炎患牛乳体细胞数的效果。结果表明,自家苗免疫组牛奶体细胞数下降幅度极显著高于药物治疗组。     

母羊奶中的体细胞数

使用电子颗粒计数器检测母羊奶中的体细胞数。1408份来源于正常乳房的奶样,98.2％的样品体细胞数低于1.0×10~6个细胞/毫升;而254份来源于接种细菌的乳房奶样,样品体细胞数均高于1.0×10~6个细胞/毫升。因此,如果奶样来源于临床健康的母羊乳腺,而奶中的体细胞数超过1.0×10~6个细胞/毫升,则意味着该母羊存在着亚临床乳房炎。     

牛奶体细胞分型指数在奶牛健康管理上的应用

本试验旨在通过研究牛奶中体细胞总数和体细胞分型指数之间的关系,为奶牛健康管理尤其是乳房炎的早期诊断和治疗提供一种新的解决方法和思路。选择3 478头荷斯坦牛进行样品采集,检测体细胞总数、体细胞分型指数、乳成分,根据体细胞总数和临床诊断意义,将体细胞数高于5万个/mL的1 798个样品分为5组,然后分析体细胞数与体细胞分型指数间的关系。试验结果显示,随着牛奶中体细胞总数的不断增加,体细胞分型指数也不断增加,两组数据呈现出明显的正相关关系,相关系数r=0.9252。因此推断,当奶样中的体细胞分型指数大于57.24%(低值)时,奶牛场发生乳房炎的概率较大,临床上需要重点关注相应牛只。     

集约化奶牛场四季牛奶磷采集分析的试验

通过对集约化奶牛场四季泌乳牛奶样采集分析,从而计算出四季牛奶的磷含量,并对各季节5组奶样磷含量进行比较分析。结果显示,四季每头奶牛奶样磷含量及5头奶牛磷平均磷含量差异均不显著,集约化奶牛场牛奶中磷全年平均含量0.09%,四季泌乳牛奶样磷含量差异不显著。     

功能性饲料苦豆渣对泌乳奶牛乳营养成分及乳体细胞数的影响研究

通过评价日粮中添加苦豆渣对泌乳期奶牛乳中营养物质含量及乳体细胞数的影响,为将苦豆子开发为奶牛功能性饲料提供科学依据。选取泌乳期奶牛20头,随机分为试验组(n=10)和对照组(n=10),对照组按照牧场饲养规程进行饲喂,试验组在对照组日喂精料的基础上添加8%的苦豆渣,预试期10 d,正式试验32 d。分别于正试期第1、6、14、25、32天采集试验组及对照组奶牛乳样,利用常规方法检测乳中蛋白质、脂肪、乳糖、干物质含量及乳体细胞数。结果表明,与未添加苦豆渣的对照组相比,试验组奶牛乳中的蛋白质、脂肪、乳糖和干物质含量分别提高了0.07%、0.47%、0.30%、0.60%,同时,在饲料中添加苦豆渣,可使奶牛乳体细胞数在整个试验期内减少约45万个/mL。研究结果为苦豆渣功能性饲料的开发提供了科学依据。     

国内外牛奶中体细胞数研究进展

目的:综述近几年国内外文献奶牛牛奶中体细胞数研究进展。方法:以体细胞数为关键词,运用中国知网(CNKI)和美国国家生物技术信息中心(NCBI)Pub Med数据库检索相关文献。结果:体细胞是奶牛牛奶中有益的天然成分,对奶牛乳房炎具有免疫防御功能。体细胞数受多种因素的影响,其中抗生素残留会引起高水平的体细胞数。应用中兽医药控制牛奶中的体细胞数、防治奶牛乳房炎可能更符合有机奶或无抗奶的要求。     

呼和浩特近郊奶牛乳样体细胞分与乳成分相关性分析

本试验旨在研究呼和浩特近郊两个奶牛场荷斯坦奶牛体细胞数(somatic cell count,SCC)变化规律及体细胞分(somatic cell score,SCS)与乳成分的相关性。试验按常规方法采集奶样,并借助Bentley FTS/FCM 400 Combi奶牛生产性能测定仪测定奶样,然后对所得数据用SPSS 17.0软件进行统计分析。结果显示,奶牛各胎次中SCC在第1胎时最低(P<0.01),在第7胎时最高(P<0.01);随着泌乳天数的增加奶样SCC亦明显增加;奶样SCC<100×10³/mL到SCC>1000×10³/mL的过度中,奶牛日产奶量和奶样乳糖含量明显降低(P<0.01),分别降低了6.07 kg(22.97%)和0.40%(8.06%),而奶样乳脂率和乳蛋白率显著升高(P<0.01),分别增加了0.32%(8.31%)和0.26%(8.05%)。秋、冬季奶样乳脂率要明显高于春、夏季奶样乳脂率(P<0.01),秋季奶样乳蛋白率最高,春季奶样乳蛋白率最低;春季奶样乳糖含量最高,秋、冬季奶样乳糖含量相对较低;冬季奶样SCC最高,而秋季奶样SCC则最低。SCS与日产奶量(-0.172)和乳糖含量(-0.283)之间存在极显著负相关(P<0.01),SCS与乳脂率(0.034)和乳蛋白率(0.111)之间存在极显著正相关(P<0.01)。因此,随着胎次增高,SCC有逐渐升高趋势;随着SCC的升高,日产奶量和乳糖含量有降低趋势,而乳脂率和乳蛋白率有升高趋势;季节对乳成分和SCC均有不同程度的影响;SCC对奶牛日产奶量、乳脂率、乳蛋白率、乳糖含量均有明显影响。     

奶样不同处理方式对DHI结果的影响

为检验奶样不同处理方式对DHI结果的影响,将奶样分为直接测定、只摇匀、只预热、预热摇匀四组,进行乳脂率、乳蛋白率、乳糖率和体细胞数测定,发现减少部分处理环节虽然对乳蛋白率和乳糖率无影响,但对乳脂率和体细胞数的影响极大。测定乳成分时,奶样必须预热摇匀;测定体细胞数时,奶样不要预热,但需摇匀。由此可见,目前奶样的测定方法(预热、摇匀之后既测乳成分又测体细胞数)会导致体细胞数偏低(低于实际数)。应在奶样未预热之前先摇匀测体细胞数,然后再预热、摇匀测乳成分。     

不同音乐对奶牛产奶性能影响的研究

为了研究民族音乐、轻音乐、流行音乐对奶牛产奶性能的影响,试验选取年龄、胎次、产奶量接近、饲养管理水平完全相同的荷斯坦泌乳牛32头,随机分成2组,每组16头。试验分预试期7 d,正试期60 d。预试期开始给试验组奶牛播放音乐,对照组常规饲喂,每10 d测定单产并采集奶样1次。结果表明:0~60 d,民族音乐组平均产奶量较对照组低12.61%,体细胞数较对照组高45.14%,差异极显著(P0.01)。轻音乐组平均产奶量较对照组高10.26%,差异极显著(P0.01);奶牛乳体细胞数较对照组低41.24%,差异显著(P0.05)。流行音乐组平均产奶量较对照组低0.73%;体细胞数、乳脂、乳糖、乳蛋白分别较对照组高0.94%、0.27%、0.18%、0.63%,且差异均不显著(P0.05)。说明民族音乐可显著降低奶牛产奶量并提高奶牛体细胞数,对乳糖、乳脂和乳蛋白含量影响不大;轻音乐有提高奶牛产奶量和降低奶牛体细胞数的作用,对牛奶乳成分含量的影响不大;流行音乐有提高奶牛产奶量和降低奶牛体细胞数的作用,但其作用时间和作用效果有限,对乳成分含量的影响作用不大。     

盐酸头孢噻呋乳房注入剂对干乳期奶牛的安全性分析

为研究盐酸头孢噻呋乳房注入剂对干乳期奶牛临床使用的安全性,开展药物对健康奶牛的安全性研究,作者选择健康泌乳期奶牛12头(初产和经产各6头),四个乳区分别单次给予盐酸头孢噻呋乳房注入剂一支(规格10mL:500mg)。比较奶牛用药前后直肠温度、日产奶量、牛奶体细胞数和乳区病原菌的变化。整个试验期间对给药奶牛进行连续观察,记录是否出现红、肿、热、痛等临床症状。结果显示,与给药前相比,奶牛的直肠温度、日产奶量、牛奶体细胞数均无显著变化(P0.05),乳区病原菌数量有所减少,同时,没有增加新的病原菌。结果表明,盐酸头孢噻呋乳房注入剂对干乳期奶牛正常体温、产奶量、奶中体细胞数和乳区菌群没有不良影响,该制剂用于奶牛是安全的。     

日本学者对体细胞数与乳房炎关系的论述

测定鲜奶中的体细胞数，是判断乳房炎轻重程度的有力手段。１　体细胞的生理变动即使从健康的乳房中挤出的牛奶，也存在着一定数量的体细胞。那么，数量究竟为多少是标准呢？国际上规定，以５０万／ｍｌ以上的体细胞数定为乳房炎的基准。同时规定所检查的奶，应是挤奶前的第一把奶。奶中体细胞的种类和数量，因种种原因在不断变化，除了病因之外，还有因生理上的原因而产生变动。１．１ 由年龄而发生的变化实践证明，经产牛奶中的体细胞数要比初产牛多，年龄越大，奶中的体细胞数越多。通过乳期调查，得出平均细胞数，结果是随着产次的增加…