贵州省某规模化猪场SIV和PCV-2感染的诊断

为快速诊断出贵州某规模化猪场猪发病原因,对送检样品进行了流行病学及临床症状调查、解剖病理观察,初步判断该猪场发病猪疑似为猪流感病毒（SIV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）或（和）猪圆环病毒2型（PCV-2）感染。为确诊病因,对送检样品进行了血清学检查和PCR/RTPCR检测,结果 PRRSV未出现目的条带,SIV与PCV-2出现目的条带,且测序结果与预期一致,表明该猪场感染有SIV和PCV-2,因此该猪场应及时进行猪流感（SI）与猪圆环病毒病（PCVD）的免疫预防,同时应加强日常管理与治疗。     

SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2和PRV交叉感染的检测

采用RT-PCR方法对37份疑似猪流感病毒(SIV)感染病料进行了病原学检测。同时,还运用PCR和RT-PCR方法对SIV阳性病料进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪伪狂犬病毒(PRV)目的基因片段的扩增。结果,扩增出了SIV特异目的基因片段,且4份病料都为混合感染,感染状况分别为SIV/PRRSV/PRV,SIV/CSFV/PRRSV三重感染,SIV/PCV-2和SIV/PRRSV二重感染。     

某规模化猪场猪繁殖障碍性疫病ELISA及六重PCR的检测分析

为了解贵州省某规模化猪场6种繁殖障碍性疫病的感染状况,试验采用ELISA试剂盒对送检的血清样品进行了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒(PCV-2)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪伪狂犬病毒(PRV)和猪细小病毒(PPV)抗体水平的检测,同时对送检的组织病料进行六重PCR检测。结果表明:CSFV、PRRSV、PCV-2、JEV、PRV和PPV的抗体阳性率分别为93.2%、52.7%、49.4%、83.8%、87.3%和78.8%,其中PRRSV免疫效果较差;另外,该猪场未免疫PCV-2疫苗,但是其抗体阳性率相当高,血清学检测结果显示,该猪场很可能存在PRRSV和PCV-2感染;送检的组织病料经六重PCR检测结果显示,该猪场存在PRRSV和PCV-2野毒感染。说明该猪场应加强猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒病的预防工作。     

PRV、PRRSV和链球菌混合感染的诊断

为了解贵州某猪场猪只死亡原因,采用流行病学调查、临床症状观察、病理剖检诊断、细菌分离鉴定、生化鉴定和PCR/RT-PCR检测诊断等方法对发病死亡猪只进行诊断。结果表明:根据流行病学调查、病理剖检初步诊断送检病猪疑似猪瘟(CSF)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪细小病毒病(PP)、猪伪狂犬病(PR)、猪流感病毒(SI)和细菌感染,经病毒核酸检测,结果猪伪狂犬病病毒(PRV)PCR检测和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)RT-PCR检测均检出特异性条带,判断为阳性;细菌分离培养、生化鉴定确诊为链球菌感染。说明造成该猪场猪只发病死亡的原因为PRRSV、PRV和链球菌混合感染。     

对部分不明原因高热发病猪场的主要疫病调查报告

2007年以来广西一些猪场出现不明原因高热发病和死亡率的现象,为了解其病因,我们应用PCR和RT-PCR技术,对来源于8个发病猪场的89份病料进行猪瘟病毒(CsFV)、猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)猪伪狂犬病(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)的调查.结果发现89份病料中检出CSFV阳性样品8份,阳性率8.99%,PRRSV阳性样品43份,阳性率48.31%;PRV阳性3份,阳性率3.37%,PCV-2阳性24份,阳性率26.97%;同时存在CSFV、PRRSV、PRV和PCV-2不同程度的混合感染现象,其中PRRS和PCV-2混合感染最为严重,阳性率达7.87%.调查结果表明,我区部分不明原因高热的发病猪场均不同程度存在CSFV、PRRSV、PRV和PCV-2感染的现象,特别是PRRSV感染情况极为严重,提示PRRSV可能是我区一些猪场出现不明原因高热发病死亡的主要原因.     

2005～2006年广西地区猪流感的分子流行病学调查

为了解广西猪群中猪流感(Swine influenza,SI)的流行情况,本调查主要采用RT-PCR方法,对2005~2006年从12个规模猪场随机采集的530份猪鼻腔棉拭子(不同年龄段)和108个猪场送检的239份有呼吸道症状病猪的组织病料样品(肺、脾和淋巴结等)进行了SIV检测;同时,对SIV阳性组织病料样品进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪细小病毒(PPV)的检测,以确定猪群中SIV的感染以及与其他病毒混和感染情况。结果显示:从不同年龄段猪的鼻腔棉拭子中均能检测到SIV,且平均阳性率为15.85%(84/530)。从11个市30个猪场54份的组织病料中检出SIV,组织病料和猪场的平均阳性率分别为22.59%(54/239)和27.78%(30/108)。SIV常常与PRRSV、PCV2、CSFV、PPV和/或PRV二重或多重混和感染,占检测样品的19.25%(46/239),其中以SIV与PCV2和PRRSV混合感染最为常见,阳性率分别占检测样品的13.81%(33/239)和8.37%(20/239)。由此可见,SIV已经感染广西猪群,且SIV常与其他病原体以混合感染的方式对广西养猪业构成潜在危害。     

神木县PRRSV与PCV-2的血清学调查

为调查猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)和猪圆环病毒病(PCVD)在陕西省神木县的流行情况,用ELISA方法对从该地区规模化猪场收集的200份血清进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病病毒(PCV-2)抗体检测,结果显示,PRRSV抗体阳性率为26.8％;PCV-2抗体阳性率为85.5％,初步证明PCV-2感染在神木县十分普遍,部分猪场PRRSV感染比例较高,应加强对这两种疾病的防疫工作.     

混合感染的情况调查

 应用套式PCR方法对采自广西境内13个市122个不同规模猪场及农村散养户的126份病料,进行了SIV的检测,并对鉴定为SIV阳性的15份病料,再分别进行PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、HPS的检测,以调查广西猪群中SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、HPS混合感染的情况。结果发现：猪群中SIV感染率为11.9%(15/126),而在所检测的15份阳性病料中,SIV混合感染十分严重,感染率为73.3%(11/15)。混合感染病毒种类最多达四重感染（SIV+PRRSV+CSFV+PCV-2）,占6.67%(1/15);三重感染(SIV+PRRSV+PCV2、SIV+PRRSV+CSFV) 占40%(6/15);二重感染（SIV+PRRSV,SIV+PCV-2）占26.6%(4/15)。调查结果表明广西发病猪群中SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2混合感染普遍存在。     

猪流感病毒与繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、圆环病毒、伪狂犬病病毒、副猪嗜血杆菌混合感染的情况调查

应用套式PCR方法对采自广西境内13个市122个不同规模猪场及农村散养户的126份病料,进行了SIV的检测,并对鉴定为SIV阳性的15份病料,再分别进行PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、HPS的检测,以调查广西猪群中SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、HPS混合感染的情况。结果发现：猪群中SIV感染率为11.9%(15/126),而在所检测的15份阳性病料中,SIV混合感染十分严重,感染率为73.3%(11/15)。混合感染病毒种类最多达四重感染（SIV+PRRSV+CSFV+PCV-2）,占6.67%(1/15);三重感染(SIV+PRRSV+PCV 2、SIV+PRRSV+CSFV) 占40%(6/15);二重感染（SIV+PRRSV,SIV+PCV-2）占26.6%(4/15)。调查结果表明广西发病猪群中SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2混合感染普遍存在。     

2013-2014年广西省主要猪病毒性传染病流行病学调查

为掌握广西猪主要病毒性传染病流行情况,为猪传染病预防方案提供依据,本研究于2013年1月1日至2014年12月31日从广西省共收集410份样品,运用PCR及RT-PCR方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、传染性胃肠炎病毒(TGEV)、轮状病毒(PORV)、猪流感病毒(SIV)的感染情况。检测结果表明,PRRSV、PCV-2、CSFV、PRV、PEDV、TGEV、 PORV和SIV的平均感染率分别为35.12%、18.54%、1.17%、0.98%、10.00%、2.44%、0和1.22%;PRRSV和PCV-2混合感染率为6.83%;PRRSV在秋、冬季节呈现高感染率为36.67%、45.31%和63.64%、48.78%,而PCV-2在春、夏、冬季节呈现高感染率为44.44%、25.00%,11.29%、19.35%和39.39%、14.63%。PRRSV和PCV-2是混合感染的主要病原,它们互相之间或是与CSFV、PEDV、PRV、SIV及副猪嗜血杆菌、链球菌等混合感染,PRRSV和PCV-2将是今后广西地区猪病防控的重点。     

集约化猪场猪呼吸疾病综合征的诊断与防治

猪呼吸道疾病综合症(简称PRDC)，是影响我国集约化猪场经济效益的主要疾病之一，它是由一种或多种细菌、病毒及其它病原体和环境因素引起的一种混合感染。发病原因通常由细菌病毒或支原体首先侵入呼吸道，破坏呼吸道的防疫屏障，进而引起呼吸道和肺部感染。PRDC得到病原可分为两类，一类是原发病原，如猪肺炎支原体(MH)、猪流感病毒(SIV)、猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)，猪繁殖与呼吸是综合征病毒(PRRSV)，     

某猪场“僵猪”致病原因分析

为分析某猪场出现"僵猪"的可能原因,对该猪场的11头"僵猪"采集血液样品,用RT-PCR方法检测猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),用PCR方法检测猪伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV-2)。结果11份样品的CSFV、PRRSV及PRV检测均为阴性,PCV-2经套式PCR检测均为阳性。对11份样品分离血清,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测PCV-2血清抗体,结果均为阳性。随后又对与11头"僵猪"同舍的部分健康猪进行了上述4种病毒的RT-PCR及PCR检测,结果均为阴性。由此推测PCV-2极有可能是该猪场形成"僵猪"的主要因素之一。     

1例保育猪呼吸道疾病的诊断报告

正江西泰和某猪场保育猪发生严重的呼吸道疾病,送检6头已死亡的保育猪。通过临床发病特征、病理剖检等初步诊断,推测导致死亡的可能病原为猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)等病毒感染,继发细菌感染。取样送至江西农业大学预防兽医学实验室进行RT-PCR/PCR检测结果表明,发病猪PRRSV、PCV-2和猪瘟病毒(CSFV)阳性,同时,从发病猪肺脏和心     

湖北省部分猪场猪"红斑病"主要病因的调查

自2001年以来,湖北部分猪场断奶仔猪出现不明原因的红斑症状并伴随高热现象,病死率高达60%。为了探索其主要致病因素,对来源于22个发病猪场的108份病料进行实验室诊断。结果108份病料中猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪附红细胞体(E.suis)和猪弓形虫的检出率分别为83.3%、33.3%、22.2%、48.1%和14.8%;同时存在PCV-2、PRRSV和E.suis等不同程度的混合感染现象,其中PCV-2和E.suis混合感染最为严重,阳性率达32.4%。表明湖北省部分"红斑病"发病猪场均不同程度存在PCV-2、PRRSV和附红细胞体感染的现象,特别是PCV-2感染情况极为严重,提示PCV-2等免疫抑制性疾病可能是湖北省一些猪场出现红斑症状的主要原因。     

猪蓝耳病毒、猪圆环病毒2型与副猪嗜血杆菌混合感染的实验室诊断及血清抗体检测

为了确定山东省莱西市某猪场送检病猪的发病原因,并调查猪群主要疫病抗体水平以便为猪场疫病防控提供科学参考依据,试验采集送检病猪病料,综合运用临床观察、病理剖检、细菌分离鉴定和病毒核酸检测等技术进行确诊;并对分离菌进行药敏试验;使用ELISA检测试剂盒对猪群的猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪蓝耳病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)4种主要病原进行检测,分析抗体水平。结果表明:送检病料经TSA培养基分离培养可见针尖状菌落,革兰氏染色镜检为阴性杆菌,生化试验鉴定为副猪嗜血杆菌;该分离细菌对大观霉素高度敏感,对头孢噻肟极度敏感;猪群中PRRSV和PCV-2为阳性,未检测出其他病毒;同场猪群的猪瘟抗体水平偏低需加强免疫,猪蓝耳病抗体水平不稳定,存在野毒感染风险。说明送检病例为PRRSV、PCV-2和副猪嗜血杆菌的混合感染,同场猪群需注意加强猪瘟免疫和猪蓝耳病抗体监测。     

贵州省PCV-3和PCV-2双重感染的诊断与分析

为了查明贵州省遵义市某猪场保育猪发生腹泻、咳喘、消瘦死亡的原因,试验采用PCR/RTPCR技术对送检样品分别进行了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪圆环病毒3型(PCV-3)的检测,并对PCR产物进行了测序分析。结果表明:送检的发病保育猪为PCV-3和PCV-2双重感染,序列分析显示该PCV-2毒株全长1 767 bp,属于PCV-2d型,且PCV-2 ORF2编码的氨基酸与疫苗株DBN-SX07-2同源性最高(94.2%)、与LG株同源性最低(91.8%);获得的PCV-3序列大小为649 bp,属PCV-3c型,与PCV-3/KU-1609毒株核苷酸同源性最高(99.2%),与PCV-3-China/GD2016毒株核苷酸同源性最低(96.4%),遗传进化关系相对复杂;抗原表位分析发现,PCV-3毒株有多个核苷酸位点突变,但变异位点均不在预测的抗原表位中。说明在贵州省不仅有PCV-3的流行,还有PCV-3和PCV-2混合感染现象的存在。     

武汉地区猪场中5种病毒性疾病的病原检测与分析

为了分析2016—2018年武汉地区猪场中5种病毒性疾病的流行情况,试验采用RT-PCR和PCR方法对2016—2018年采集的1 324份患病猪的肺脏、肝脏、淋巴结、小肠、血液等病料组织进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)5种病原的检测,统计其阳性数、阳性率及总阳性率,并分析其混合感染情况。结果表明:采集的病料组织经CSFV、PRRSV、PRV、PCV-2、PEDV特异性引物扩增均获得目的条带; CSFV、PRRSV、PRV、PCV-2和PEDV的测序结果与GenBank中的参考株相比同源性均在96.8%～99.8%之间;经统计2016—2018年间猪场中CSFV、PRRSV、PRV、PCV-2、PEDV总阳性率分别为23.0%、14.0%、6.8%、17.5%、10.6%,其中CSFV、PRRSV和PCV-2的阳性率较高,为该地区主要流行毒株;多重感染表现出逐年增高的趋势,且以二重感染为主,占检测总数的7.3%。说明武汉地区猪场中CSFV、PRRSV和PCV-2感染严重,并以多重感染为主。     

"猪高热病"的流行病学调查与主要病因分析

按浙江省出现"猪高热病"流行高峰前后两个时段,采集了53个养猪场户的病猪组织病料和114份病猪及健康猪血清样品,应用PCR或RT-PCR同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环II型病毒(PCV-2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪流感病毒(SIV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪细小病毒(PPV)等7种病毒,应用ELISA方法检测PRRSV、PCV-2、PRV(gE)三种抗体。高热病病猪的病毒检测结果表明,疫情发生前对病猪检测7种病毒性病原,检到PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV和PPV共5种病毒,检出率分别为24%、32%、34%、1.5%和0.5%,与发生疫情后的检出率比较,只有PRRSV的病毒检出率呈明显上升,从24%上升到57.7%,PCV-2病毒检出率基本持平,CSFV、PRV和PPV病毒检出率则出现下降或未检到,且流行高峰出现前后均未检到SIV和JEV。抗体检测结果显示,疫情发生后发病猪群的PRRS抗体上升最为显著,从8.97%上升到80.6%,PCV-2抗体从16.7%上升到27.8%,PR(gE)抗体下降为0,提示此次疫病是以PRRS为主要病原或诱因所致的多病原综合性传染病。     

华南地区猪圆环病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒检测分析

为了解华南地区猪圆环病毒及猪繁殖与呼吸综合征病毒的最新流行情况,采集了华南地区11个规模猪场各饲养阶段猪血清807份,用套式PCR(nPCR)检测猪圆环病毒1型(PCV-1)和猪圆环病毒2型(PCV-2);采集了若干猪场2010年1月至2011年8月期间有咳嗽、喘气、消瘦及疑似PDNS等临床症状的猪血清312份,以及无临床症状猪血清104份,以nPCR检测PCV-2,以一步法反转录PCR(RT-PCR)检测猪繁殖与呼吸综合征病毒。结果发现,所调查的11个规模猪场中只有5个检出PCV-1,所有猪场均检出PCV-2。PCV-2阳性率为30.61%,而PCV-1阳性率仅为4.21%;经产母猪和7周龄以上保育猪PCV阳性率最高;有临床症状的猪血清PCV-2阳性率为58.65%,PRRSV阳性率为37.82%,PCV-2阳性猪群中有39.89%的猪同时感染PRRSV;有症状猪群7月～9月的PCV-2感染率最高,而1月～3月最低;无临床症状猪血清PCV-2阳性率为27.9%,PRRSV阳性率为0.96%,PCV-2与PRRSV无混合感染。证明PCV尤其是PCV-2在华南地区仍广泛传播并流行,而且PCV-2与PRRSV混合感染致病情况较多。PCV-2的感染率与季节有一定的相关性,种猪带毒情况严重。     

2020年秋冬季四川省内江市无害化处理病死猪5种病毒核酸检测

为了解2020年秋冬季内江市病死猪中猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒3型(PCV-3)、猪瘟病毒(CSFV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)5种病毒感染情况,在14个病死畜禽无害化处理收集点,采集108份病料样品,采用荧光PCR/RT-PCR方法进行5种病毒核酸检测。结果显示:PCV-2、PRRSV、PCV-3、CSFV的核酸检出率分别为44.4%、33.3%、12.9%、7.4%,未检出PRV核酸;双重感染检出率为18.5%,以"PCV-2+PRRSV""PCV-2+PCV-3"为主,多重感染检出率为1.9%。结果表明,内江市病死猪群中PRRSV、PCV-2感染较为严重,PCV-3零星分布,且呈现一定的混合感染状态,而CSFV和PRV感染得到有效控制。结果提示,内江市应重点加强PRRSV、PCV-2、PCV-3感染的监测与控制。