水蛭素对猪精液冻后质量的影响

试验用含不同浓度(0、0.02%、0.04%、0.06%、0.08%、0.10%、0.12%)水蛭素的稀释液稀释美系公猪精液,并以0.25mL细管分装冷冻。结果显示:(1)水蛭素浓度为0、0.02%时在冻后精子畸形率或水蛭素浓度为0、0.12%时冻后精子顶体完整率上存在明显的品种效应(P0.05);(2)3种公猪各浓度组(除大约克和杜洛克公猪0.02%浓度组外)冻后精子活力均显著高于对照组(P0.05),且均在浓度为0.08%时最高;除了长白公猪0.02%浓度组冻后精子畸形率显著低于对照组(P0.05)外,3种公猪各浓度组与对照组差异均不显著(P0.05);大约克公猪各试验组、杜洛克公猪0.08%浓度组及长白公猪0.02%、0.06%及0.08%浓度组冻后精子顶体完整率显著高于对照组(P0.05),且均在浓度为0.08%时最高,长白及杜洛克公猪其他试验组与对照组差异均不显著(P0.05)。结果表明,适宜浓度的水蛭素可以显著提高猪精液冻后质量,效果最好的浓度为0.08%。     

木糖醇对猪精液低温保存的影响

<正>虽然猪精液保存技术的研究已有近50年的历史[1],但其保存效果很不理想。主要原因是低温保存和冷冻保存后精子活率、顶体完整率、受精能力等都比鲜精要差[2]。在精液低温保存的过程中,精子膜的完整性对复苏后精子的活力和受精能力是至关重要     

维生素P对低温保存猪精液的影响

在猪精液稀释液(Zorlesco)中分别添加0,40,80,120,160,200μg/mL的维生素P,研究其对猪精子低温保存的影响。结果表明,维生素P的添加显著延长了猪精子低温保存时间,在各试验组中,维生素P的最适添加浓度为160μg/mL。在该浓度下,维生素P并对第3天时精子的活力、活率、顶体完整率、低渗肿胀率及线粒体活性作用效果不明显(P0.05)。在第6天时,维生素P显著地提高了精子的活力、活率、顶体完整率和质膜完整率(P0.05),但对精子线粒体活性没有显著影响(P0.05)。在保存第9天时,猪精子的活力、活率、顶体完整率、低渗肿胀率及线粒体活性与对照组相比具有显著的提高(P0.05)。     

黄芪多糖对猪精液低温保存的影响

通过在改进的猪精液低温稀释液中添加不同质量浓度的黄芪多糖(0、0.10、0.20、0.30、0.40g/L),对比7d内、4℃低温保存下猪精子的活率、活力、精子畸形率、精子质膜和顶体的完整性等参数,探讨黄芪多糖在猪精液低温保存应用的效果。结果显示,在猪精液低温保存后的质量上,0.10g/L质量浓度组与对照组差异不显著(P0.05),0.40g/L质量浓度组显著差于对照组(P0.05),0.20、0.30g/L质量浓度组显著好于对照组(P0.05),所有各组中0.30g/L质量浓度组效果最好。结果表明,在本试验条件下,适宜质量浓度的黄芪多糖可以明显改善4℃低温条件下猪精液的保存效果,其中最佳添加质量浓度是0.30g/L。     

甘草多糖对猪精液低温保存的影响

通过在猪精液低温稀释液中添加不同质量浓度的甘草多糖(0.0 g/L、0.10 g/L、0.30 g/L、0.50g/L),在4℃低温保存下于试验第1天、第3天、第7天,对猪精子的活率、活力、畸形率、顶体完整率、质膜完整率、SOD及MDA等参数进行测定,探讨甘草多糖对猪精液低温保存应用的效果.结果显示,在精子质量评价和抗...     

冬眠合剂对猪精液常温和低温保存的影响

本研究旨在探讨冬眠合剂对常温和低温条件下猪精子保存时间的影响。在猪精子常温稀释液Modena和主要成分为葡萄糖和卵黄的低温稀释液基础上,按0、1/10、1/20、1/40、1/80和1/160比例分别添加冬眠合剂(主要成分为氯丙嗪和异丙嗪,浓度均为2 mg/mL),通过测定精子活率筛选出冬眠合剂的最佳添加浓度;之后以冬眠合剂的最佳添加浓度为基础,将猪精子分别保存于17、14、12、10℃(常温稀释液),以及10、8、6、4℃(低温稀释液)条件下,测定保存时间对精子活率的影响。结果显示:冬眠合剂与常温或低温稀释液的最佳添加比例为1/40;17℃的常温保存效果最好,保存7 d后精子活率大于40%,显著高于不添加冬眠合剂的对照组;8℃的低温保存效果最好,保存14 d后精子活率大于25%,显著高于不添加冬眠合剂的对照组;添加冬眠合剂后未对精子的形态产生影响。因此,冬眠合剂能显著提高猪精子体外保存时间。     

猪精液低温保存运输箱的研制

精液的保存有两种方法,固态保存和液态保存,在生产实践中,因为猪精液低温保存的技术不成熟,所以猪精液主要以常温保存为主。由于常温保存的有效存活时间短,不便于长时间和长距离的保存运输,因此大大限制了人工授精技术的推广。为了延长猪精液的存活时间,保证母猪的受孕率,提高优良种猪的利用率,推动人工授精技术的大力发展,减少本交疾病的发生,本试验对猪精液的低温保存、低温保存稀释液的选择和猪精液低温保存运输箱进行研究。试验结果表明,猪精液低温保存的稀释液以Tris-乳糖稀释液(Tris 3.04g、柠檬酸1.3g、乳糖2.375g、青霉素0.06g、链霉素0.1g、双蒸水100mL、脱脂奶粉)的保存效果最佳(P0.05)。猪精液在低温保存运输箱的有效存活时间为(50.4±2.4)h,精液在冰箱冷藏室的有效存活时间为(59.3±15.1)h,低温保存运输箱与冰箱冷藏室之间差异不显著(P0.05)。猪精液低温保存运输箱中精液低温保存效果基本上与冰箱冷藏室中精子低温保存效果达到了一致水平。     

水蛭素对冷冻前后猪精液中过氧化氢酶活性及mRNA表达的影响

用含不同浓度(0、0.04%、0.08%、0.12%)水蛭素的稀释液稀释美系长白公猪精液,0.5mL细管分装冷冻,分别检测平衡后及冻融后精液中过氧化氢酶的活性和mRNA表达量的变化。结果显示,不含水蛭素的冷冻稀释液显著降低新鲜猪精液过氧化氢酶活性(P0.05),而含有0.08%水蛭素的冷冻稀释液显著提高冷冻保存猪精液过氧化氢酶活性(P0.05);不含水蛭素的冷冻稀释液降低新鲜猪精液过氧化氢酶mRNA的表达,含有0.08%水蛭素的猪精液平衡及冻融后的过氧化氢酶mRNA表达量最高,但差异不显著(P0.05)。结果表明,添加0.08%水蛭素显著提高冷冻前后猪精液过氧化氢酶活性(P0.05),但对过氧化氢酶mRNA表达的影响并不显著。     

猪精液体外低温保存技术新进展

伴随猪联合育种的开展及人工输精技术的推广运用,猪精液低温保存技术已成为研究的热点。精液低温保存是通过降低或抑制精子新陈代谢、维持精子质膜及顶体结构完整性,延长精子体外存活时间。主要包括:液氮超低温(-196?℃)冷冻保存、4~5?℃低温"冷休克"保存以及15~17?℃鲜精体外保存。早期研究主要集中在低温保护剂和技术方法的筛选与优化,对猪精液低温保存进行了深入探索。近年来,有关猪精液低温保存过程中抑制猪精子低温损伤、延长精子的存活寿命及提高精子的受精能力等研究取得突破性进展。该文就近年来不同保存技术、保护剂及未来重点解决的问题进行简要概述,旨在为开展相关研究以及实际生产应用提供理论参考。     

猪精液离心低温保存技术的探讨

<正> 精子在体外,精清并不能使精子的生活力保持长久,为提高其生活力,我们对猪精液通过离心清除部分精清,然后稀释,用低温保存的方法进行试验。 一、稀释液的制备:采用2种稀释液,其配制比例如表1:     

磁场对低温保存牛精液的影响

将５ｍＬ稀释后的新鲜精液分为５组,每组１ｍＬ。取其中１组作为对照组,不经磁场处理,其余４组分别放入磁化杯磁化２ｈ、５ｈ、２４ｈ和一直磁化,５组均放在冰箱０－５℃的环境中保存。对其精子活率、顶体完整率和精子存活时间进行分析,试验重复１５次。结果表明,精液经过磁化可以提高活率,并且延长了存活时间,尤以磁化５ｈ效果最明显,其存活指数比对照组提高了２３．７％,差异显著。磁场能使精液的顶体完善率下降,且随着     

磁场对低温保存牛精液的影响

将采得的13头公牛新鲜精液三倍稀释后,取10毫升分为五组,每组2毫升。四组分别放入磁化杯中磁化处理2、5、24小时及一直处于磁化状态中,另一组不经磁处理为对照组。五组均放入0—5℃的冰箱中保存。观察磁化对精子活率、顶体完整率及存活时间的影响。试验结果经磁化后精子活率下降缓慢,存活时间延长,但精子的顶体完整率下降。     

猪精液4℃低温保存技术研究

为丰富猪鲜精保存技术、改善与提高精液保存质量,本研究以市场占有率高、性能稳定和可耐受4℃低温的长效稀释剂为对照,探讨本课题组研制的4℃稀释剂(低温Ⅰ号、低温Ⅱ号)对猪精液低温保存效果的影响。结果表明:低温Ⅰ号和低温Ⅱ号稀释剂对猪精液的有效保存时间和总存活时间均显著高于对照组(P<0.05)。保存至第6天时,对照组精子活力显著降低(P<0.05),保存至第10天时,低温Ⅰ号、低温Ⅱ号、对照组精子活力分别为74.6、76.0、0;保存第10天时,对照组pH显著低于2个实验组(P<0.05);保存从第5天开始,实验组质膜完整性显著高于对照组(P<0.05)。综上,本课题组研制的稀释剂对猪精液4℃低温保存效果较好,而且低温Ⅱ号对精子活力和质膜完整性保存效果更优。     

猪精液4℃低温保存技术的研究

以精子总存活时间、有效存活时间及存活指数为检测指标,用6种稀释液稀释后4℃低温保存,从中筛选效果最好的基础稀释液配方,并进一步探讨保存前不同精液处理方法在猪精液4℃低温保存的效果;最后用筛选得出的基础稀释液和精液处理方法稀释猪精液,4℃低温保存2~3 d,用于低剂量常规部位人工授精试验,通过受胎率来探讨其繁殖潜力。结果表明:6号稀释液显著优于其他5种稀释液(P0.05);精液带精浆直接稀释的效果优于精液离心处理(P0.05);精液以1:2或1:3比例稀释更利于猪精液4℃低温保存(P0.05);低温保存猪精液低剂量常规部位人工授精是可行的。总之,通过试验得到了猪精液低温保存基础稀释液配方及保存前处理方法,该方法适合于低剂量常规部位的人工授精。     

褪黑素对湖羊精液低温保存效果的影响

为研究褪黑素对湖羊精液4℃保存效果的影响,在前期筛选的湖羊精液稀释液中添加不同浓度(0.00、0.02、0.04、0.06、0.08 g/L)的褪黑素进行4℃冷藏试验,检测湖羊精子活力和顶体完整率,以及精液中过氧化氢酶(CAT)活力和丙二醛(MDA)含量。结果:与对照组相比,添加0.02 g/L褪黑素组在保存0、24、48、72、96 h的精液中MDA含量极显著降低(P0.01);0、24、48、72 h精液中CAT酶活力极显著提高(P0.01);48 h精子活力和顶体完整率极显著提高(P0.01)。综合比较表明,在湖羊精液稀释液中添加0.02 g/L褪黑素,在48 h内能够显著提高湖羊精液4℃稀释保存的品质。     

谷胱甘肽对湖羊精液低温保存效果的影响

为探究谷胱甘肽(GSH)对湖羊精液低温保存效果的影响,在基础稀释液中分别添加了0(对照组)、2、4、8、10 mM的GSH,在4℃保存过程中对精子的活率、活力及直线速率等运动性能指标进行了检测.结果表明,与对照组相比,在保存1～3 d时,4～8 mM的GSH显著提高了精子活率(P<0.05),10 mM的GSH对精子活...     

褪黑素对羊精液低温保存效果的影响

为研究精液低温保存稀释液中添加不同浓度褪黑素对羊精液低温保存效果的影响,本试验将不同浓度褪黑素(0、10、20、40、80mg/L)添加到羊精液低温保存稀释液中,通过分析5d内各组之间的精子活率、顶体完整性、质膜完整性、线粒体活性等精子质量评定指标的差异。结果表明:经过5d的保存,20mg/L试验组对山羊精液的精子活率、顶体完整率、质膜完整率以及线粒体活性均显著高于其他试验组(P0.05)。说明适度浓度(20mg/L)的褪黑素有利于提高精子保存品质;但随着添加褪黑素浓度的升高(至80mg/L),精子低温保存效果下降明显。     

Mito-tempo对绵羊精液低温保存效果的影响

实验旨在探究不同浓度的Mito-tempo对绵羊精液低温保存效果的影响。采集8只湖羊种公羊精液,分别用含0、15、30、45、60μmol/L Mito-tempo稀释液进行8倍稀释,5℃冷藏120 h。分别在24 h和120 h检测精液品质指标（活力、活率、平均路径速度、曲线运动速度、直线运动速度、质膜完整性、顶体完整性、DNA完整性和线粒体活性）及抗氧化指标（总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量）。结果表明：在低温保存期间,30μmol/L Mito-tempo处理组精子活力、活率、平均路径速度、DNA完整性、顶体完整性、线粒体活性、超氧化物歧化酶含量和总抗氧化能力均高于对照组及60μmol/L Mito-tempo处理组（P<0.05）;在低温保存过程中,30μmol/L Mito-tempo处理组丙二醛含量低于对照组和其余各试验组（P<0.05）。由此可见,在稀释液中添加30μmol/L Mito-tempo可有效提高低温保存后绵羊精液质量。     

低温保存绵羊精液

家畜的人工授精在良种培育工作中,能起很大的作用,尤其当可能長期保存精液把它們運送到更遠的地方的時候。然而現有以0°保存精液的方法,对綿羊的精液僅僅在二到三天之內有好的受胎力。已經確定,只有抑制住精于体內生命过程的消耗,才有可能長時期的保存精液。观察証明:在近於動物体溫的溫度,精子的新陳代謝進行得特别旺盛,分解代謝的过程,使精子很快地消耗掉自己貯存的生命資源,進而衰     

稀释液中添加谷胱甘肽和透明质酸对猪精液超低温保存效果的影响

本试验在冷冻液中分别添加不同含量谷胱甘肽(GSH,1、3、5、7、9 mmol/L)和透明质酸(HA,300、600、900、1 200μg/m L)及联合添加GSH和HA,研究其对猪精液冷冻后活力、顶体完整率、体外受精胚胎卵裂率、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响。结果表明,添加GSH以5 mmol/L浓度效果较好,除卵裂率与未添加GSH组无显著差异外(P>0.05),活力、顶体完整率、SOD活性及MDA含量均与未添加GSH组存在统计学差异(P<0.05);添加HA以900μg/m L组效果较好,除卵裂率与未添加HA组不存在显著差异(P>0.05),其冻后活力、顶体完整率、SOD活性及MDA含量均与未添加HA组存在统计学差异(P<0.05);联合添加GSH和HA,以添加GSH 5mmol/L和HA 900μg/m L组效果较好,且其各指标与未添加GSH和HA组均存在显著差异(P<0.05)。结果说明,冷冻液中联合添加GSH 5mmol/L和HA 900μg/m L可有效改善猪精液冷冻效果。