粘细菌BD105产生的抑瘤活性物质的分离制备

从河北省微生物多样性研究与重点实验室保存的具有抑瘤活性的粘细菌BD105菌株中分离纯化了抑制人宫颈癌细胞的活性物质。应用分析型高效液相色谱对BD105菌株的发酵产物甲醇粗提液进行梯度洗脱,确定混合发酵产物的最适分离条件,再运用制备型高效液相色谱对不同组分进行分离,大量发酵后制备得到组分I（浅黄色粉末状化合物）。应用MTT法对得到的活性组分进行体外抗癌细胞活性检测,发现组分I对人宫颈癌细胞最高抑制活性达91.785%,体内动物实验也显示出高效低毒的生物活性。     

紫杉木霉ZJUF0986代谢产物及其对番茄灰霉病的抑制作用

研究了紫杉木霉ZJUF0986发酵代谢抗菌产物分离纯化及其生物活性。ZJUF0986发酵液乙酸乙酯粗提物通过硅胶柱层析和高效反相液相色谱制备纯化,分别得到Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种活性化合物,为主要活性代谢产物;采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定活性代谢产物Ⅰ对灰霉病菌的抑菌活性,结果表明,活性代谢产物Ⅰ不仅能强烈抑制菌丝的生长,而且能有效抑制孢子的萌发,其对菌丝生长和孢子萌发的EC50分别为1.100和0.891μg/mL;离体叶片和温室盆栽试验表明,20%紫杉木霉ZJUF0986发酵液乙酸乙酯粗提物稀释800倍对番茄灰霉病具有较好的防治效果。     

链球菌表面三磷酸甘油醛脱氢酶及其突变体重组蛋白的表达和纯化

表达并纯化M6型GAS表面三磷酸甘油醛脱氢酶以及其敲除C末端赖氨酸残基重组蛋白(rGAPDH和rGAPDHΔ345)。克隆了M6型GAS ATCC32175的GAPDH基因以及GAPDHΔ345基因,与pASK-IBA37载体连接后,表达蛋白并用亲和层析色谱纯化重组蛋白;对重组蛋白进行质谱检测,并用酶切方法进一步纯化目的蛋白,通过酶促反应实验测定了重组蛋白的生物活性。2种基因克隆条件稳定,蛋白表达量大,酶切后纯度高,纯化的重组蛋白具有较高的生物活性。功表达并纯化了rGAPDH和rGAPDHΔ345蛋白。     

链球菌表面烯醇化酶及其变异体重组蛋白的表达纯化

目的:表达并纯化M6型GAS表面烯醇化酶以及其敲除C末端赖氨酸残基重组蛋白(rSEN和rSENΔ434-435)。方法:克隆了M6型GAS ATCC32175的SEN基因以及SENΔ434-435基因,与pASK-IBA37载体连接后,表达蛋白并用亲和层析色谱纯化重组蛋白;通过酶促反应实验测定了重组蛋白的生物活性。结果:2种基因克隆条件稳定,蛋白表达量大,且纯化方法可靠,纯化的重组蛋白具有较高的生物活性。结论:成功表达并纯化了rSEN和rSENΔ434-435蛋白。     

薄层色谱及其在药用植物研究中的应用

综述了国内外薄层色谱研究进展,包括薄层扫描法、高效薄层色谱、制备薄层色谱、反相薄层色谱、微乳薄层色谱以及薄层色谱联用技术,并总结了近年来薄层色谱在药用植物研究中的应用。     

山药多糖提取分离纯化及生物活性的研究进展

山药多糖(Rhizoma dioscorea polysaccharide,RDP)的提取、分离纯化及生物活性等对山药多糖的深度研发具有重要意义。本文通过查阅国内外近年来有关山药多糖的提取、分离纯化及生物活性研究进行分析和总结,结果表明,山药多糖的提取方法有热水浸提法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、酶法、超声波-酶辅助提取法;含量测定方法有苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法、紫外分光光度法、高效液相色谱法(HPLC);分离纯化方法有离子交换树脂法、凝胶过滤柱色谱法。不同提取和分离纯化方法之间存有利弊,建议科研工作者对自身研究的目的、条件及研究结果对其合理选择;RDP的生物活性研究虽已取得一定进展,但更多局限于RDP粗提物,对于开发更多符合临床需求的药物制剂及相关保健产品有待进一步深入研究。     

蓖麻碱的研究与应用

蓖麻碱是一种类似吡啶酮的生物碱,是蓖麻的毒素之一。采用微波或超声波法提取,再用重结晶法可得到白色针状结晶物蓖麻碱。热榨蓖麻饼粕中含有蓖麻碱,采用化学法、物理法、生物法、微生物发酵法可脱除其中的蓖麻碱。蓖麻碱具有一定的生物活性,包括肝保护功能活性、改善记忆功能活性、杀虫活性和杀鼠活性。对蓖麻碱的结构特性、分离纯化、分析鉴定、脱除、生物活性和应用前景等作了详细介绍,提出蓖麻碱作为一种天然产物在我国具有广阔的应用前景。     

鸡免疫球蛋白 GFc(IgGFc)重链的分离纯化及其抗血清制备——Ⅰ 兔抗鸡 IgGFc 重链抗血清制备

经硫酸铵盐析沉淀、柱色谱分离纯化得到鸡血清 IgG。然后用木瓜蛋白酶水解IgG,再经 DEAE-纤维素柱色谱纯化制得 IgGFc 重链。继用 IgGFc 重链免疫家兔制备兔抗鸡 IgGFc 重链抗血清。     

鸡传染性支气管炎病毒HN99株N基因在大肠杆菌中的表达及产物免疫活性检测

鸡传染性支气管炎病毒HN99株核蛋白(N)基因PCR产物经BamHⅠ、HindⅢ双酶切,克隆入大肠杆菌原核表达载体pMAL-p2X,构建重组表达质粒pMAL-p2X-N,转化大肠杆菌TB1并进行诱导表达。通过pMALTM融合蛋白纯化系统对表达产物进行非变性纯化,将纯化的N蛋白按常规方法免疫新西兰大白兔,制备兔抗鸡传染性支气管炎病毒N蛋白的多克隆抗体,并用ELISA法检测其生物活性。结果表明,表达的重组核蛋门纯化后出现2条带,相对分子质量分别约为92和82 ku,与Western blot出现的2条蛋白带一致;纯化的重组蛋白经裂解因子作用后,出现2条蛋白带,相对分子质量分别为45和35 ku,与预期结果相符合;制备的多克隆抗体可与不同鸡传染性支气管炎病毒株发生反应,与亲本毒株的反应性略高于与其他毒株的反应性。以上结果表明,原核表达的可溶性N蛋白具有高度的生物活性,有望作为新的基因工程抗原用于鸡传染性支气管炎病毒的群特异性诊断。     

高速逆流色谱纯化红景天中的红景天甙

[目的]研究从红景天甙样品中提取红景天甙的方法。[方法]利用高效液相色谱检测技术和高速逆流色谱分离纯化技术,采用氯仿∶甲醇∶水=4∶1.5∶2为溶剂体系。[结果]经过高速逆流色谱1次纯化,红景天甙纯度为84.3%,回收率达到95.7%。[结论]高速逆流色谱技术的应用为制备高纯度红景天甙提供了一条新途径。     

药用芦丁化学成分提取方法及其药理学研究进展

介绍了传统的（热）碱提取酸沉淀法、热水提大孔吸附树脂纯化法和超声辐射法等11种芦丁的提取方法,同时对芦丁的药理学性质,特别是心脑血管方面作了详细介绍,以探索芦丁制剂的研究方向。     

核桃蛋白肽制备及脱苦研究进展

核桃蛋白肽一般以核桃蛋白为原料采用酶解法制备。综述了核桃蛋白的提取和纯化方法,酶解法制备核桃蛋白肽和提高核桃蛋白肽得率的辅助手段,以及多肽脱苦的方法,对核桃蛋白肽制备存在的问题进行了归纳,并对其制备及其脱苦的研究发展方向进行了展望。     

几丁质/壳聚糖及其衍生物在食品工业中的应用

几丁质/壳聚糖由于其独特的分子结构而具有很多特殊功能。几丁质/壳聚糖及其衍生物在食品、纺织、印染、造纸、医药、农业、环保、化工等行业有着广阔的应用。在食品工业中,可作为保健食品基料、抗菌剂、果蔬保鲜剂、液体食品的澄清剂、食用包装膜、食品废水处理、饮用水净化剂、固定化酶载体、食品加工剂、霉菌污染检测、肉制品抗氧化剂等。     

水产抗氧化肽研究进展

从水产副产物中制备天然抗氧化肽替代化学合成抗氧化剂已经越来越引起人们的关注。水产抗氧化肽具有清除自由基、抑制脂质过氧化等功效,其在医药和食品领域具有广阔的应用潜力：本文综述了水产抗氧化肽的制备及分离方法、抗氧化能力的评估方法和影响水产抗氧化肽活性的因素几方面的研究,并对其发展前景进行了展望。     

莽草酸的制备及其生物学功能研究进展

文章综述了莽草酸的理化性质、制备途径及生物学功能,重点探讨了莽草酸的来源,提取分离和纯化方法以及在抗菌抗肿瘤、抗心血管疾病、抗炎镇痛、抗禽流感等方面的应用。     

新生牛睾丸细胞的分离纯化与冷冻保存

以新生牛作为实验动物,取睾丸进行制样组织学观察,并将睾丸消化成单细胞悬液,对生精上皮细胞进行分离纯化、细胞鉴定及冷冻保存,研究不同分离纯化及冷冻保存方法对睾丸细胞的影响。结果表明,新生牛曲细精管中含有精原干细胞和支持细胞,差速贴壁法能有效分离两种细胞;精原干细胞鉴定,AKP、C-kit、OCT-4均呈阳性;支持细胞鉴定,油红O、波形蛋白均呈阳性。精原干细胞冷冻保存以10%的二甲基亚砜为冷冻剂的效果最好,支持细胞冷冻保存以10%乙二醇和0.1 mmol.L-1海藻糖组合效果最好。     

1,3-甘油二酯研究进展

甘油二酯（DG）是一种健康食用油。近年来,1,3-甘油二酯（1,3-DG）因其广泛用途日益受到人们的重视。甘油二酯是油脂的天然成分,同时也是一种多功能添加剂,在食品、医药、化工等行业有广阔的应用前景。评述了甘油二酯的制备、纯化方法和功能研究现状,对其应用情况作了介绍,展望了其开发前景。     

隐孢子虫检测方法研究进展

本文介绍了近年来用于检测隐孢子虫的方法,包括卵囊分离与纯化方法、卵囊染色镜检方法、免疫学检测方法、分子生物学检测方法。根据文献中表述的不同方法的敏感性和特异性,本文对所述方法的优缺点进行了对比分析,以便广大寄生虫病学工作者参考,在具体实践中选择比较适合的隐孢子虫检测方法。     

木霉几丁质酶和几丁寡糖的制备及提纯

[目的]为木霉几丁质酶和几丁寡糖的开发应用提供必要的技术支持。[方法]由高产几丁质酶的木霉菌株YHS-1液体振荡培养得到木霉几丁质酶粗酶液,分别测定了木霉菌株YHS-1在不同时间、不同温度下的几丁质酶活值,优化木霉产酶条件。并研究了几丁寡糖的制备及提纯方法。[结果]供试木霉最佳产酶温度为35℃,最佳产酶时间为4 d,此时酶活值为55 U。几丁质酶粗酶液通过(NH4)2SO4分级沉淀、阴离子交换柱层析、SDS-PAGE提纯后可以达到层析纯,出现单一并且峰值很高的层析峰,电泳确认2条带,分别为几丁质外切酶和几丁质内切酶。几丁寡糖用初提纯的几丁质酶与过量的胶态几丁质反应得到粗溶液,再经过蛋白质沉淀和冷冻离心后得到纯化。[结论]建立了木霉几丁质酶和几丁寡糖的制备及提纯方法,为木霉几丁质酶和几丁寡糖的开发应用提供了必要的技术支持。     

用于检测农药残留的胆碱酯酶酶源的研究进展

概述农药残留检测的现状,分析胆碱酯酶的分子类型、分布,不同来源的胆碱酯酶的特点及分离纯化方法,提出存在的问题,并展望其应用前景。