滇重楼新病毒ParV1的分子变异分析及致病性测定

为明确云南省引起滇重楼（Paris polyphylla var. yunnanensis）病毒病的病原,以昆明市发现的花叶、斑驳症状的滇重楼叶片为样品,进行透射电镜观察、高通量测序和反转录（RT-PCR）检测。结果表明,观察到大小约（700～1 000）nm×13 nm的线状病毒粒子;基于高通量测序结果设计特异性引物进行RTPCR扩增并克隆,得到1条全长为10 066个核苷酸（nt）的病毒序列,将该病毒暂命名为Paris virus 1(ParV1);BLAST比对分析表明,ParV1与马铃薯Y病毒属（Potyvirus）中的浙贝母花叶病毒（Thunberg fritillary mosaic virus,TFMV）具有最高为65.1%、68.9%的核苷酸及氨基酸（aa）序列同源性;多序列比对分析显示,ParV1多聚蛋白与potyviruses具有49.6%～65.1%的nt序列同源性及47.1%～68.9%的aa序列同源性;基于多聚蛋白氨基酸序列构建的系统发育树表明,该病毒与TFMV亲缘关系较近且聚为一个单独的分支。综上所述,确定ParV1属于Potyvirus的一种新病毒。将含P...     

超声波对滇重楼种子萌发能力的影响

研究超声波处理时间、温度、功率对滇重楼(Paris polyphylla var.yunnanensis)种子萌发的影响,寻找其萌发的最佳条件。通过室内常规发芽试验,统计滇重楼种子在不同超声波处理时间、温度、功率条件下的发芽率和发芽指数。结果表明,滇重楼种子经适当的超声波处理,缩短了萌发时间,提高了发芽率和发芽指数。40 min、50℃、200 W的超声波处理条件最适宜于滇重楼种子萌发。     

滇重楼授粉特性的初步研究

通过对滇重楼授粉特性初步研究,结果表明:①滇重楼是常异花授粉植物,且不存在无融合生殖;②自然界中的滇重楼通过昆虫进行传粉,属虫媒植物;③滇重楼自花授粉结籽率低,人工异花授粉是提高种子产量的有效措施;④滇重楼的最佳授粉期是在花粉囊裂开后的第5天,花粉囊裂开后的5 d内完成人工授粉效果最好,授粉后到完成受精有效时间为24~96 h。本文为滇重楼育种和提高种子产量提供科学依据。     

滇重楼辣椒轻斑驳病毒分离物的鉴定及全基因组序列分析

滇重楼(Paris polyphylla var. yunnanensis)是多年生草本植物,其药用部位为地下根茎,是一种重要的中药材。为明确侵染滇重楼的病毒病原,对采自云南省曲靖市的滇重楼进行透射电镜观察、DASELISA和RT-PCR技术检测。在透射电镜下观察到杆状病毒粒子,大小为(200～300)nm×(20～36)nm。对采集到的7份病样进行DAS-ELISA检测,结果表明,其中5份病样呈阳性。通过RT-PCR技术扩增、克隆获得1个全长为6 357 bp的曲靖分离物PMMoV-QJ的全基因组序列。将PMMoV-QJ的全基因组序列与国内外已经报道的10个PMMoV分离物进行同源性分析比对,其同源性为99.42%～99.81%。基于全基因序列的系统发育分析表明,PMMoV-QJ与韩国分离物亲缘关系密切。本研究明确了该分离物的亲缘关系,从分子水平鉴定该分离物,为后续滇重楼病毒病的预防提供理论依据。     

滇重楼种子休眠机理研究

【研究目的】探讨滇重楼种子休眠机理,为打破种子休眠促进滇重楼实生育苗提供理论基础。【方法】采用重量法、胚率测定、ELISA等方法对种子吸水特性、萌发抑制物及种胚休眠与发育的内源机理进行了研究。【结果】种子不存在吸水障碍,与休眠无关;滇重楼种子中存在着萌发抑制物;滇重楼种子休眠属于形态学-生理学休眠类型;内源激素ABA和GA3在滇重楼种子休眠与萌发过程中起着重要作用,ABA是引起休眠的关键因素,ABA含量的降低是滇重楼种胚发育的始动因子,GA3有助于种子的生理后熟。【结论】滇重楼种胚发育不完全、种子中存在萌发抑制物质是种子休眠的主要原因。萌发抑制物的存在可能抑制了种胚发育,而与生理学后熟过程无关。在自然条件下,滇重楼生境中较长的低温时期可能是滇重楼种子具有较长时间休眠的外界原因。     

林药复合种植的滇龙胆中元素的化学计量特征研究

药用植物复合种植是对传统中药材种植模式的优化,在一定程度上可缓解中药材与作物争地的矛盾,对中药资源的保护与可持续发展具有重要意义。试验通过采集单一种植模式的滇龙胆(Gentiana rigescens Franch.ex Hemsl.)样品以及滇龙胆与茶树[Camellia sinensis(L.)O.Ktze]、大叶桉(Eucalyptus robusta Smith)、木瓜[Chaenomeles sinensis(Thouin)Koehne]、旱冬瓜(Alnus nepalensis D.Don)、核桃(Juglans regia L.)、杉木[Cunninghamia lanceolata(Lamb.)Hook.]、木果石栎[Lithocarpus xylocarpus(Kurz)Markg.]等林药复合种植模式的滇龙胆样品,用微波消解-ICP-AES法测定各滇龙胆样品中的Ca、Mg、Fe、Zn、P、Cu、Mn、Cd、Pb、Ni、Sr、Ti等元素含量,以探明不同种植模式下滇龙胆植株中元素的化学计量特征。结果表明,该方法的加标回收率在95.40%~108.25%,相对标准偏差在0.26%~2.08%。其中滇龙胆根中的元素含量排序为Ca、Fe、Mg、P、Mn、Zn、Ti、Sr、Ni,茎、叶中的为Ca、Mg、P、Fe、Mn、Zn、Sr、Ti、Ni。以滇龙胆-茶树复合种植模式的P元素含量最高,其在根、茎、叶中分别为1 384.73、1 640.12、2 399.04μg/g;滇龙胆-旱冬瓜复合种植模式的Fe和Ti元素含量最高;滇龙胆-大叶桉复合种植模式的Mg元素含量最高,其根、茎、叶中分别为1 486.08、2 770.99、4 673.24μg/g;滇龙胆-核桃复合种植模式的Sr元素含量最高,其根、茎、叶中分别为37.02、52.80、34.63μg/g。重金属元素Cd与Ca、Fe、Ni元素含量之间呈显著或极显著正相关,相关系数分别为0.741、0.929、0.893;Ni与Fe、Ti含量之间呈显著或极显著正相关,与Pb含量之间呈显著负相关;Mg与Cu含量之间呈显著正相关,Mn与Sr含量之间呈极显著正相关。     

不同栽培密度对滇重楼生长的影响研究

目的:探讨不同栽培密度对滇重楼根茎增重倍数、存活率及产量的影响,为确定合理的栽培措施提供依据。方法:比较了7个不同栽培密度条件下滇重楼生长情况。结果:优选出最适宜的栽培密度。结论:10 g左右的种苗,最适宜的种植密度为10 cm×20 cm。     

鹅不食草抗肿瘤活性的研究

[目的]研究鹅不食草的抗肿瘤活性成分.[方法]利用柱色谱和反相HPLC等手段进行分离纯化,应用NMR等方法鉴定结构及进行了MTT法抗肿瘤试验.[结果]从鹅不食草中分离鉴定了化合物1（Dihydrohelenalin）、化合物2（Helenalin）、化合物3（Brevilin-A）、化合物4（Amicolide C）和化合物5（Arnicolide D）,并且均具有一定的抗肿瘤细胞活性.[结论]5个化合物有一定抑制肿瘤细胞生长作用.     

桂花品种组合延长最佳观赏期的方案研究

为使桂花专类园中花期景观保持相对平衡,开花期保持最佳观赏状态的植株数量比较匀称,对安徽省现有品种进行2年物候观察,根据花期选择出早、中、晚花以及间花品种,初步拟定比例为3.5∶3∶3∶0.5,适当增加早花品种、晚花品种,少量使用间花品种,以弥补各秋桂品种间隔无花时的观赏效果.     

滇重楼内生真菌的分离及其对滇重楼种子胚发育的效应(英文)

[目的]本研究旨在分离滇重楼的内生真菌并探究其对内生真菌胚发育的效应。[方法]分离滇重楼的内生真菌并进行形态学鉴定,并用石蜡切片和显微照相术研究内生真菌并探究其对滇重楼种子胚发育的效应。[结果]从滇重楼根状茎中分离到9种属于3目、5科、7属的内生真菌,即PPYEF-1,PPYEF-2,PPYEF-3,PPYEF-4,PPYEF-5,PPYEF-6,PPYEF-7,PPYEF-8和PPYEF-9。除了PPYEF-4(枝孢霉属)外,其他真菌都能促进滇重楼种子的胚发育,大多数达到极显著或显著水平;PPYEF-9(木霉属)能导致滇重楼种子发育的最长胚长和最高胚率。[结论]本文可为滇重楼内生真菌在打破滇重楼种子休眠中的应用提供参考。     

滇重楼种子萌发关键技术研究

为研究滇重楼种子萌发技术,采用不同温度和不同基质对滇重楼种子进行处理,观测其对滇重楼种子萌发的影响。结果表明:18~20℃恒温条件最适宜滇重楼种子萌发,在恒温条件下,处理55 d后种子开始萌发,处理130 d后沙与基质处理种子萌发率分别为91%和95%;变温(室温)条件下,种子所需萌发时间较长,处理120 d左右种子才开始萌发,管理成本增加,与恒温条件处理相比萌发率较低,190d试验结束时,沙与基质处理的种子萌发率分别为73%和80%。可见,恒温处理缩短萌发时间,对重楼育苗具有重要意义。     

滇重楼种子萌发及组织培养研究

研究了滇重楼种子休眠的解除方法以及外植体处理、培养条件对其幼苗生长发育的影响。结果表明,滇重楼种子在连续经过4℃低温层积4~5个月、红外光照射30 min、二次变温(4℃-40℃-20℃)处理、混合液(19 mmol/L KNO3+800 mg/L GA3)保湿7d后,休眠能得到明显解除,播种在营养钵(珍珠岩:蛭石=1:1)中60 d,萌发率可达40%;对胚根长至2 cm的萌发种子进行HgCl2消毒的最合适时间是10 min,既能控制污染率又不伤及胚芽的活性;在22℃、每天光照12 h(1 000 lx)的条件下,去除胚乳的幼芽在附加0.5 mg 6-BA和0.5 mg IAA的MS培养基上培养30 d后即可长成具有单叶的完整植株。     

滇重楼2种真菌性叶斑病的初步研究

对栽培滇重楼病害进行调查、鉴定,明确滇重楼白霉病由半知菌类的柱隔孢(Ramularia)引起,褐斑病由细交链孢菌(Alter-naria tenuis Nees)引起,并针对这2种病害提出了建议性的生态防治措施。     

滇重楼栽培技术及有效成分积累研究综述

综述了滇重楼繁育技术、施肥技术和病虫害防治技术以及有效成分积累规律等方面的研究进展,为滇重楼的栽培管理和有效成分积累提供了一定的参考。     

滇重楼的花粉活力测定方法比较

[目的]为提高滇重楼的繁殖效率。[方法]将滇重楼开花植株裂开花药的花粉轻轻涂抹载玻片上,分别用碘-碘化钾(I2!KI)染色法、氯化三苯四氮唑(TTC)染色法、醋酸洋红染色法和略有改动的荧光素二醋酸酯法对滇重楼花粉活力进行测定。[结果]氯化三苯基四氮唑染色法的染色率较低,仅为27.51%;醋酸洋红染色法和荧光素二醋酸酯法的染色率较高,分别为91.30%和90.55%,而且所测数据较为接近;碘-碘化钾染色法虽然能将花粉染上色,染色率为94.80%,但染上色的花粉包含退化的花粉和失活的花粉。[结论]醋酸洋红染色法和荧光素二醋酸酯染色法的染色率较高,能较好地区分出有活力的花粉和失活的花粉,而且能较为准确地反映滇重楼花粉的生活力。     

温度对滇重楼种子萌发的影响

[目的]研究滇重楼种子萌发的最适温度条件。[方法]采用不同的温度条件(15、20、25℃)对滇重楼种子进行培养,观测其对种子萌发的影响。[结果]20℃恒温条件下,培养55 d后,种子开始萌发,100 d后萌发率为98.89%,根的生长情况也最好;15和25℃条件下培养的种子,萌发率低,萌发不整齐,根生长缓慢。[结论]20℃恒温是滇重楼种子萌发及根系生长最适宜的温度条件。     

云南重楼的高产优质栽培技术初探

云南重楼栽培技术研究主要以解决产量问题为目的,重楼内含物含量的高低往往在研究中被忽视,为了实现重楼高产优质的目标,将云南重楼重新还原于与原生境相似的地块下进行种植,在研究平均净增产量与环境因子关联程度的同时,结合内含物含量加以分析。结果表明,平均净增产量高的内含物含量不一定高,内含物含量高的平均净增产量也不一定高;为了实现高产优质的目标,利用云南重楼各试验点收集的环境因子数据,采用灰色系统理论加以科学的分析,得出以下结论,在14个环境因子中,有效氮、有机质、全氮、全磷、有效磷和有效钾这6个土壤因子与平均净增产量和内含物含量关联密切,其中,有效氮和全氮主要影响云南重楼根茎平均净增产量,有效磷和全磷主要影响云南重楼内含物含量的积累。有机质在平均净增产量和内含物含量协同发展中起重要的作用。