荧光法测定中药材北柴胡中总黄酮的含量

[目的]建立以槲皮素为标准品用测定北柴胡中总黄酮含量的新方法。[方法]北柴胡黄酮用超声波提取,用荧光法测定总黄酮含量。[结果]当槲皮素浓度在6.7×10-6～6.0×10-4g/L时,荧光强度和槲皮素浓度呈良好的线性关系,其线性回归方程为y=531.840 48x-3.544 48,R2=0.999 03,该方法的检出限为2.51×10-7g/L;北柴胡中总黄酮的平均含量为5.045 2μg/g,RSD=5.61%,平均回收率98.44%。[结论]该方法操作简便,准确度高,可用于北柴胡药材的质量控制。     

利用荧光分析法测定玉米须中的总黄酮含量

根据黄酮类化合物能与Al3+形成稳定的荧光络合物,建立一种测定玉米须总黄酮的新方法。用60%乙醇溶液,在功率400W下超声处理20min,提取玉米须有效成分;以芦丁为标样,选择激发波长为λex=445nm,发射波长为λem=542nm,采用荧光分光光度法测定玉米须中总黄酮含量,并进行加标回收实验,以验证方法的准确性。方法检出限为1.08×10-9mol/L,线性范围在0～0.04mg/mL之间;线性回归方程:y=216.63x+137.93,相关系数r=0.999 7,平均回收率为98.3%～100.8%,相对标准偏差(RSD)为0.88%。这种方法操作简便、快速、准确,具有良好的分析应用前景。     

柴胡多糖的分子量测定及单糖组成分析

[目的]从柴胡中提取分离柴胡精多糖（BPP2）,并对其分子量和单糖组成进行研究。[方法]采用水提法提取柴胡精多糖（BP）,用DEAE纤维素柱色谱进行分离纯化,采用GPC法测定BPP2的分子量,TLC、HPLC法对其单糖组成进行研究。[结果]BPP2的分子量约为67836,由鼠李糖（Rha）、木糖（Xyl）、阿拉伯糖（Ara）、半乳糖（Gal）和葡萄糖（Glc）5种单糖组成,其摩尔比为2.19∶1.00∶3.21∶2.27∶2.44。[结论]柴胡多糖BPP2是由5种单糖组成的纯一杂多糖,分子量为67836。     

北柴胡药材的HPLC指纹图谱研究

[目的]建立北柴胡药材的HPLC指纹图谱研究方法。[方法]采用Zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm ID,5μm)色谱柱,在柱温25℃、检测波长220 nm、流速为1.0 ml/min的条件下,以乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相对9个不同产地的柴胡样品进行梯度洗脱,分析其指纹图谱。采用国家药典委员会出版的《中药色谱指纹图谱相似度评价》(2004年A版)软件,对9个不同批次的北柴胡药材指纹图谱进行相似度分析。[结果]各批北柴胡药材中均有11个特征峰,各峰分离度良好,各批次药材间共有峰的相对保留时间RSD均<1.0%,药材间相似度均>90%。[结论]该研究采用HPLC法,以柴胡皂苷a为内参比峰,建立了北柴胡药材的HPLC指纹图谱,方法稳定、重现性好,可有效控制北柴胡药材的质量。     

柴胡种子生物学性状研究

为明确柴胡种子的生物学性状,探讨柴胡种子发芽进程的变化规律,测定了l2种柴胡种子的大小、千粒重、生活力、发芽率,并对其千粒重、生活力、发芽率3项指标进行差异显著性分析和相关性分析。结果表明,12种柴胡种子的3项指标均达到显著水平,发芽率和生活力的相关系数最大,为0.86且达到极显著水平,品种间的发芽率差别很大,发芽进程也不相同,‘中柴一号’等高发芽率品种的发芽起始日早,发芽延续时间长且有发芽高峰期;‘左权柴胡’等低发芽率品种发芽起始日晚,发芽延续时间短且日发芽数较恒定,无发芽高峰出现。筛选出的高发芽率品种,对柴胡良种选育和实际生产都有重要的指导意义。     

柴胡种子生物学性状研究

为明确柴胡种子的生物学性状,探讨柴胡种子发芽进程的变化规律,测定了l2种柴胡种子的大小、千粒重、生活力、发芽率,并对其千粒重、生活力、发芽率3项指标进行差异显著性分析和相关性分析。结果表明,12种柴胡种子的3项指标均达到显著水平,发芽率和生活力的相关系数最大,为0.86且达到极显著水平,品种间的发芽率差别很大,发芽进程也不相同,‘中柴一号’等高发芽率品种的发芽起始日早,发芽延续时间长,且有发芽高峰期;‘左权柴胡’等低发芽率品种发芽起始日晚,发芽延续时间短且日发芽数较恒定,无发芽高峰出现。筛选出的高发芽率品种,对柴胡良种选育和实际生产都有重要的指导意义。     

荧光分析法测定香椿叶总黄酮含量的研究

[目的]采用荧光分光光度法测定香椿叶中总黄酮含量。[方法]根据黄酮类化合物的荧光性质,以芦丁为标样,在激发波长λex=436nm、发射波长λem=505nm条件下,考察了溶剂、pH值、表面活性剂及放置时间对荧光强度的影响。[结果]在浓度95%乙醇中加入pH值7的缓冲液,芦丁的荧光强度最大。该方法检测限为2.62×10-7mol/L,线性范围在1.16×10-7～4.86×10-5mol/L之间,其线性回归方程为y=1.352x＋12.712,相关系数r=0.9976,相对标准偏差1.07%。[结论]用荧光分光光度法测定香椿叶中总黄酮含量的准确度和精密度都较高,且操作简便,成本低。     

庆阳柴胡根腐病病原物的分离与鉴定

采用组织分离法对感染根腐病的柴胡病原菌进行分离纯化,按照离体根部接种法,采用刺伤和无刺伤接种两种方式进行致病性测定,结合形态学观察和分子生物学方法鉴定致病菌的种类。结果表明,庆阳地区柴胡根腐病致病菌主要有尼伦伯格镰刀菌、尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌、锐顶镰刀菌和燕麦镰刀菌,在柴胡种植栽培过程中尽量保持植株的完整性,有利于降低根腐病发病率。     

柴胡转录组SSR的分布及序列特征分析

【目的】分析柴胡转录组中SSR的分布及序列特征,为开发多态性良好的、功能基因相关的SSR标记提供理论依据。【方法】以不同温度处理的柴胡种子为材料,经高通量转录组测序后,使用Trinity对测序结果进行de novo组装,并利用MISA对组装得到的Unigenes进行SSR位点搜索,最后统计分析SSR的分布及序列特征。【结果】从转录组数据组装获得244194条Unigenes,其N50值为1036 bp,平均长度791 bp,总长度193138105 bp。从Unigenes序列中共检测到50303个SSR位点,去除20405个复合型SSR位点,以29898个单一型SSR位点为后续分析对象。转录组SSR的出现频率为12.24%,平均分布距离6.46 kb,主要重复基元类型为二核苷酸,共17105个,占SSR总数的57.21%,其次为三核苷酸和单核苷酸,分别占SSR总数的20.75%和20.46%,四核苷酸~六核苷酸重复基元数量均较少。转录组SSR中,共有97种重复基元,其中二核苷酸和三核苷酸重复基元分别以AT/AT和ATC/GAT为主,分别占SSR总数的33.33%和3.98%;重复次数5~10次的SSR位点数量最多,共27942个,占SSR总数的93.46%。转录组SSR序列长度存在明显差异（12~76 bp）,平均长度15.28 bp。【结论】柴胡转录组的SSR位点出现频率较高,类型较丰富,具有开发出高多态性SSR分子标记的潜力,将其用于柴胡的遗传多样性分析、种质资源评价及分子标记辅助育种等研究。     

不同处理方法对柴胡种子萌发的影响

对来自山西的黑柴胡种子进行温度、清水浸种、沙藏处理和KMnO4药剂处理试验,以研究不同条件对种子萌发率的影响。结果表明:柴胡种子萌发的适宜温度为20℃;沙藏7～12d能明显促进柴胡种子的萌发,但不能使萌发的启动日提前;清水浸种不能提高发芽率,但可使启动日提前;0.25%、0.5%、0.75%的KMnO4溶液处理对柴胡种子萌发具有不同程度的抑制作用。建议柴胡种子萌发的适宜处理为:在20℃下清水浸种12h,沙藏处理7～10d,发芽率和出苗率较高,苗子生长比较整齐。     

河北道地药材紫菀中总黄酮的荧光分析

以槲皮素为标准品,用荧光分光光度法测定中药材紫菀(Aster tataricus L.f.)中总黄酮含量,该方法的检出限为2.51×10-7 g/L,线性回归方程为y=531.840 48x-3.544 48,相关系数R2=0.999 03,线性范围为6.7×10-6～6.0×10-4 g/L;紫菀中总黄酮的平均含量为4.896×10-3g/L,样品测定的RSD为0.92％,平均回收率为93.19％.该方法操作简便、准确度高,可以为中药材紫菀质量控制提供参考.     

柴胡根腐病致病菌生物学特性研究初报

根腐病是目前对柴胡为害最为严重的病害之一,此文对该病病原茵的生物学特性进行了研究.结果表明,致病菌生长最适温度为25～30℃,最适pH 6～8,在麦汁培养基上较在PDA培养基上容易产孢.孢子萌发的最适条件是20～25℃,pH 4～6和100%相对湿度.孢子在25℃水滴中3h后开始萌发,10 h时全部萌发,孢子临界致死条件为51℃,10 min.     

柴胡腐解液对3种作物的化感作用研究

以白菜、玉米、小麦为受体材料,采用室内生物测定法测定不同质量浓度柴胡植株地上部分和地下部分的腐解液对3种作物种子萌发及幼苗生长的影响,筛选适宜柴胡后茬种植的作物种类。结果表明:柴胡腐解液对白菜和玉米种子各发芽指标均有不同程度的抑制作用,抑制率分别为1.02%~100.00%和1.12%~89.25%;对白菜幼苗有抑制根长和促进苗高的双重作用;对玉米幼苗根长和苗高均有不同程度的抑制作用,抑制率为3.05%~85.93%。柴胡腐解液对小麦种子发芽率、幼苗根长和苗高均有抑制作用,且随浓度升高抑制作用增强;地上部分腐解液对小麦种子发芽势、发芽指数、活力指数的化感作用呈现低促高抑的效应,而地下部分腐解液则表现出随着浓度升高抑制作用逐渐增强的趋势。隶属函数分析表明,柴胡地下部分腐解液对受体作物的抑制作用大于地上部分腐解液。柴胡腐解液对白菜的化感抑制作用最强,对小麦的化感抑制作用最弱。因此,与白菜和玉米相比,小麦更适合作柴胡的后茬作物。     

唐山地区柴胡根腐病病原菌分离鉴定及生物学特性研究

柴胡根腐病在河北唐山地区呈逐年加重趋势,严重影响了柴胡的产量和质量。为了明确唐山地区柴胡根腐病病原菌的种类,在对柴胡根腐病菌分离纯化的基础上,通过菌落形态观察与病原菌16s rDNA分析,鉴定病原菌种类,并分析了病原菌的生长特性。结果表明:通过对分生孢子等形态学观察,初步认为柴胡根腐病病原菌属镰刀菌属;应用rDNA ITS区的通用引物对病原菌基因组DNA进行PCR扩增,PCR产物测序后经BLAST分析,检测结果与形态学鉴定结果一致,确定病原菌是腐皮镰刀菌(Fusarium solan)i。菌丝体在PDA培养基中的最适生长温度为25℃,适宜生长pH值为6~8。致病菌孢子在30℃时萌发率最高;适宜萌发pH值为6~8;孢子在25℃水滴中2 h后开始萌发,9 h后萌发率达到100%;孢子临界致死条件为50℃、10 min。     

柴胡不同部位中8种微量元素的综合评价

[目的]综合评价柴胡不同部位中的8种微量元素。[方法]采用因子分析方法对柴胡的花、叶、茎、根中微量元素含量数据进行分析,找出了柴胡中Ca、Mg、Na、K、Fe、Mn、Cu、Zn8种元素之间的关系,结合SPSS统计软件,对柴胡不同部位中微量元素进行定量定性综合评价。[结果]Fe与Mg、Na、K相关极显著,Mn与Ca显著相关。第1公共因子F1在指标Mg、Na、K、Fe、Zn上有较大的载荷,第2公共因子F2在指标Ca、Mn、Cu上有较大的载荷。柴胡不同部位中8种微量元素含量高低顺序为：根〉叶〉花〉茎。[结论]该研究为大规模合理开发柴胡资源,以及为柴胡的药物功效学和微量元素的研究提供科学的依据和理论基础。     

不同产地北柴胡质量的灰色模式识别研究

[目的]将灰色关联分析用于不同产地北柴胡质量的评价。[方法]在灰色关联分析的基础上,构建一个评价中药质量的模式识别模型。[结果]综合评价结果与实际情况基本相符。[结论]与统计模式识别模型相比,灰色模式识别有计算简便、适应范围广的特点。     

北柴胡不同器官化学成分含量的比较研究

分别对3个种源北柴胡在同地种植后收获期的根、茎、叶、花中的总黄酮、可溶性多糖、醇溶性浸出物和地上部分挥发油含量进行了测定和分析.结果表明,3个种源北柴胡不同器官化学成分存在差异,禹州种源北柴胡的叶片总黄酮含量最高,为0.41%;建昌种源北柴胡的根可溶性多糖含量最高,为2.1%,花醇溶性浸出物含量最高,为23.6%,地上...     

覆膜处理对北柴胡幼苗生长的影响及评价

研究在种子萌发期进行不同覆膜处理对北柴胡幼苗生长情况的影响,筛选适宜覆膜材料,为北柴胡大田栽培提供参考。本试验选用北柴胡幼苗为试验材料,对北柴胡种子在种子萌发期进行草席、黑色地膜、白色地膜、遮阳网4种不同覆膜处理,不覆膜为对照(CK);种子萌发后撤去遮盖物,并对萌发3个月后的北柴胡幼苗进行相关生理生化指标测定;最后,利用隶属函数分析对柴胡的生理指标进行综合评价。结果表明：不同处理对不同指标影响不同;其中地上、地下干鲜重比值、可溶性糖含量均以草席覆膜为最高;叶绿素含量、可溶性蛋白含量以黑色地膜覆膜处理最高;游离氨基酸含量以对照为最高。综合评价认为,黑色地膜覆膜处理组对北柴胡幼苗生长的影响最为显著。     

北柴胡和狭叶柴胡的过氧化物酶及酯酶同工酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，对采自不同地区的12个柴胡样本进行过氧化物酶和酯酶同工酶分析．结果表明，12个柴胡样本的过氧化物酶和酯酶同工酶分别出现10条和8条酶带，2条和1条共有带．聚类分析结果表明，北柴胡和狭叶柴胡的亲缘关系较远，可认为是同属不同种；北柴胡在种内存在一定的地理环境差异．     

柴胡不同部位8种元素的因子和聚类分析

运用化学计量学方法,结合SPSS统计软件,对柴胡花、叶、茎、根中Ca、Mg、Na、K、Fe、Mn、Cu、Zn8种元素进行因子分析和聚类分析研究,为大规模合理开发利用柴胡资源,以及为柴胡的药物功效学和元素的研究提供科学的依据和理论基础.