苦豆子愈伤组织诱导及细胞悬浮培养体系的建立

以苦豆子子叶和胚轴为材料,对苦豆子愈伤组织诱导和继代增殖的最佳培养条件进行研究,旨在建立苦豆子悬浮细胞体系。结果发现,子叶和胚轴为愈伤组织生成的最佳外植体,愈伤组织最佳诱导培养基是MS+0.5 mg/L2,4-D+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA;最佳继代增殖培养基是MS+1.0 mg/L NAA+4.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L2,4-D。以胚轴诱导的愈伤组织是细胞悬浮培养的理想材料,初始接种量10%~20%,添加3%蔗糖,有利于悬浮细胞体系的生成。     

婆婆纳组织培养再生体系的建立

以婆婆纳(Veronica didymaTenore)的叶片、茎节、茎段、顶芽为外植体,接种在附加2,4-D、6-BA、NAA等不同质量浓度和组合的培养基中进行离体培养,并比较了不同培养基上不同外植体的诱导率。结果表明,诱导愈伤组织的最佳外植体是叶片,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D0.01 mg/L+6-BA1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L,愈伤组织诱导率为100%。诱导愈伤组织分化的最适培养基为MS+2,4-D0.01 mg/L+6-BA0.75mg/L+NAA1.75 mg/L,分化率为90%。诱导生根的培养基为l/2MS+NAA0.2 mg/L,生根率为90%。     

半夏叶柄愈伤组织诱导与分化最适培养基筛选

以半夏(Pinellia ternata(Thunb.)Breit)叶柄为外植体,研究不同培养基配方对诱导脱分化、愈伤组织增殖及分化的影响。结果表明,适合半夏叶柄诱导脱分化的最佳培养基是MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA;最适愈伤组织增殖培养基是MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA;最适分化培养基是MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。     

马铃薯愈伤组织诱导中激素浓度配比优化研究

[目的]对马铃薯愈伤组织诱导中的激素浓度配比进行优化研究。[方法]以鲁引1号马铃薯的幼嫩茎段、叶片和叶柄为外植体,通过在基本培养基中添加不同浓度的6-BA和2,4-D,来筛选出马铃薯愈伤组织诱导的最适的培养基。[结果]叶柄和茎段的最佳培养基配方为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D,叶片的最佳培养基配方为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L 2,4-D,愈伤组织的诱导率均可达95%以上。[结论]为鲁引1号马铃薯脱毒研究提供了技术支持。     

泰半夏小块茎的诱导及工厂化育苗研究

以泰半夏的无菌叶片、叶柄为材料,通过愈伤组织分化不定芽途径,建立泰半夏工厂化育苗植株再生体系。结果表明,以叶片、叶柄为外植体,愈伤组织最适诱导培养基分别为:MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 3.0 mg/L、MS+0.5 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA;愈伤组织在相同培养基中增殖后诱导小块茎分化的最适培养基为:MS+2 mg/L6-BA。1/2MS+0.1%活性炭+0.5 mg/L NAA培养基产生的根较粗壮、浓密。     

杜鹃红山茶愈伤组织诱导的初步研究

以杜鹃红山茶嫩茎、叶柄以及叶片为外植体,研究不同激素组合及不同外植体对愈伤组织诱导效应的影响,研究结果表明:MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA是杜鹃红山茶愈伤诱导的最佳培养基,MS+1.0 mg/L 2,4-D+3.0 mg/L6-BA+1.5 mg/L IAA是最佳的继代培养基。叶柄在愈伤诱导率及生长状况上优于其他外植体。     

半夏再生体系的建立

【目的】优化半夏再生条件,以获得优质半夏种苗.【方法】筛选出适宜的外植体后,使用3种激素2,4-D,KT,IAA利用正交设计法设置9个处理组对半夏愈伤组织进行诱导.选取长势良好,大小均一的半夏愈伤组织接于4种培养基中进行愈伤组织增殖.选取半夏叶柄诱导出的愈伤组织将其接于5种培养基中进行愈伤组织分化,观察不同培养基对半夏愈伤组织生根和出芽的影响,最后进行炼苗与移栽.【结果】在叶柄、叶片及块茎3种外植体中,叶柄是半夏愈伤组织诱导的最佳外植体;最有利于半夏愈伤组织诱导的培养基为MS+0.5 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L KT+1.0 mg/L IAA;在暗培养条件下,将半夏愈伤组织继代于MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L KT+1.0 mg/L IAA中生长最快;MS+0.2 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA培养基最有利于半夏愈伤组织的生根和出芽.     

小蓟叶片愈伤组织的诱导及增殖条件优化

[目的]建立小蓟愈伤组织的诱导及增殖培养体系。[方法]以野生小蓟无菌苗叶片为外植体,分析2,4-D、6-BA、NAA对小蓟愈伤组织的诱导及增殖的影响,确定最适宜的激素组合。[结果]单因素条件下,0.8 mg/L 2,4-D、0.9 mg/L 6-BA、2.0 mg/L NAA为小蓟叶片愈伤组织诱导的最佳浓度;MS+2,4-D 0.6 mg/L+6-BA 0.9 mg/L+NAA 2.5 mg/L培养基为小蓟叶片愈伤组织最适诱导组合。单因素条件下,2,4-D、NAA不适合小蓟愈伤组织增殖培养,MS+6-BA 0.3 mg/L为小蓟叶片愈伤最佳增殖培养基。[结论]该研究为小蓟的进一步开发利用奠定基础。     

灰毡毛忍冬愈伤组织诱导和增殖的研究

将灰毡毛忍冬茎段和叶片接种在MS培养基中,并在培养基中添加不同浓度的生长素2,4-D,6-BA,NAA,以此探讨茎段和叶片2种外植体在不同浓度的生长素组合中愈伤组织的诱导和增殖情况。结果表明:叶片诱导愈伤组织的效果比茎段好,并且叶片和茎段诱导愈伤组织的最佳培养基均为MS 2,4-D 1.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L,愈伤组织增殖培养的最佳培养基为MS 6-BA1.5 mg/L NAA 0.5 mg/L。     

小叶女贞愈伤组织培养技术研究

探讨小叶女贞愈伤组织最佳培养条件,为进一步建立悬浮培养体系奠定基础。通过选取小叶女贞幼嫩外植体接种于不同植物生长调节剂的MS培养基中,进行愈伤组织诱导与增殖研究,以纯化的愈伤组织建立悬浮细胞系。结果表明,小叶女贞愈伤组织最适诱导培养基为MS+2,4-D 0.3 mg/L+6-BA 1.5 mg/L,初期增殖培养基为MS+2,4-D 0.3 mg/L+6-BA 1.5 mg/L,长期继代培养基为MS+2,4-D 1.5 mg/L+6-BA0.3 mg/L,可获得疏松的愈伤组织。结果表明,小叶女贞通过外植体诱导与增殖愈伤组织,可建立悬浮细胞系。     

半夏愈伤组织诱导和分化再生植株的研究

研究半夏外植体愈伤组织诱导、放置方式、外植体的苗龄对分化再生植株的影响,结果表明:块茎的愈伤组织诱导效果最佳,叶片次之,叶柄最差。当MS+6-BA2mg/L+2,4-D2mg/L激素组配时,愈伤组织分化率达100%。外植体的放置方式对分化出苗有很大影响,块茎垂直放置出芽率最高,而叶柄和叶片平放于培养基效果较好。无菌苗苗龄对分化率有较大的影响,最适无菌苗苗龄为10～25d。当6-BA为3mg/L时芽增殖倍数达4倍左右,而当6-BA0.2mg/L+2,4-D0.2mg/L组配时,生根效果最好。     

刺嫩芽快繁体系的建立

[目的]研究刺嫩芽快速繁殖技术。[方法]以刺嫩芽的叶片、叶柄和幼茎为外植体进行组织培养,建立刺嫩芽快繁体系。[结果]3种刺嫩芽外植体中,叶片的愈伤组织诱导效果最好,在4种不同激素浓度的MS培养基上均能诱导出愈伤组织;MS培养基中适当增加2,4-D和少量的6-BA,可显著提高愈伤组织诱导率;最适诱导培养基为MS+6-BA2.0mg/L+2,4-D1.0mg/L,叶片诱导率高达36.7%;最佳增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D1.5mg/L;最适分化培养基为MS+6-BA2.0mg/L+2,4-D0.5mg/L,平均诱导分化率达85.0%;琼脂加入量控制在7.5～8.0g/L及适当降低6-BA的含量时,可有效防止外殖体玻璃化的产生。[结论]该研究建立的刺嫩芽快繁体系,试管苗驯化率可达85.0%,具有一定的推广与应用价值。     

耧斗菜的组织培养

以耧斗菜幼嫩叶片及叶柄为外植体,研究了不同生长调节物质对外植体愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明,在培养基MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L上诱导叶柄产生愈伤效果最好,诱导率为80.5%;在培养基MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L上叶片愈伤诱导效果最好,诱导率为92.7%。继代培养基为MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L和MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L。在培养基MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L中分化芽;分化的芽在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L中增殖。生根培养基为1/2 MS+NAA0.1 mg/L或1/2 MS+IBA 0.2 mg/L。     

崇左金花茶的组培诱导愈伤研究

[目的]探索崇左金花茶组织培养中诱导愈伤组织的途径和方法。[方法]用崇左金花茶的幼嫩叶片、幼嫩茎段和种子作为外植体,在不同激素组合培养基上进行愈伤组织诱导试验。[结果]幼嫩叶片愈伤组织诱导最佳培养基为改良MS+5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L2,4-D;幼嫩茎段愈伤组织诱导最佳培养基为改良MS+3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L 2,4-D;种子愈伤组织诱导最佳培养基为改良MS+4mg/L 6-BA+0.6 mg/L 2,4-D。[结论]该研究获得了崇左金花茶的最佳愈伤组织诱导培养基,为崇左金花茶组织培养体系的建立提供了技术支持。     

激素和外植体对辣椒愈伤组织诱导的影响

本实验以辣椒优良品种的种子为试验材料,接种在MS培养基上培养无菌苗,再分别以无菌幼苗的子叶、胚轴、根为外植体,接种在添加有不同浓度6-BA和2,4-D的MS培养基上进行愈伤组织诱导。结果表明:以下胚轴为外植体,诱导的愈伤组织质量最好和出愈率最高,愈伤组织诱导的适宜培养基为MS+6-BA0.5mg/L+2.4-D2.0 mg/L。     

6-BA、NAA对苜蓿不同外植体愈伤组织培养的影响

以新牧1号和新疆大叶两个苜蓿品种为试材,研究了7个培养基对不同无菌苗外植体愈伤组织诱导和生长影响,以及不同浓度的植物生长调节物质6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)对愈伤组织生长及分化的作用.结果表明:(1)浓度在2～8 mg/L,NAA有利于苜蓿愈伤组织的诱导,随浓度的增大呈促进作用,而在1～3 mg/L,1mg/L 6-BA有利于苜蓿愈伤组织的诱导,随浓度的增大呈抑制作用;(2)MS+2,4-D 2 mg/L+NAA 4 mg/L+6-BA 1 mg/L即MS4为新牧1号的较佳诱导培养基,MS+2,4-D 2 mg/L +NAA 8 mg/L +6-BA 1 mg/L即MS5为新疆大叶苜蓿的较佳诱导培养基;(3)以无菌苗下胚轴、子叶及叶片为外植体,确定下胚轴为诱导愈伤组织的最佳外植体.     

蒙古黄芪愈伤组织诱导及植株再生

以蒙古黄芪[Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao]种子萌发后的上胚轴、下胚轴和子叶为材料,采用MS培养基附加不同浓度植物生长调节剂进行愈伤组织的诱导,并诱导不定芽的发生,生根后得到完整的再生植株。在该过程中,采用正交试验分析6-BA、NAA、2,4-D、固化剂等条件对蒙古黄芪愈伤组织诱导和不定芽分化的影响。结果表明,下胚轴为诱导愈伤组织的最佳外植体取材部位,最佳愈伤组织诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D,最佳的不定芽分化培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,而固化剂采用0.1%Gelrite为最佳。     

适于悬浮培养的半夏疏松愈伤组织诱导及增殖技术

用半夏叶片或叶柄作外植体,通过调节植物生长调节物质的种类、浓度及培养条件,以获得适于悬浮培养的半夏疏松愈伤组织。结果表明,添加2,4-D较NAA诱导的愈伤组织疏松,将叶片接种于MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L或叶柄接种于MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L上诱导出的愈伤组织长势较好且疏松,诱导率分别达到100%和95.6%,愈伤组织鲜重分别为0.932 g和0.622 g。将上述愈伤组织以MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L培养基连续继代3次,便获得适于建立细胞悬浮培养体系的疏松愈伤组织,从而为半夏人工种子生产必须的同步化高质量人工种胚的培养提供可靠材料。     

芝麻菜愈伤组织诱导及植株再生*

 以芝麻菜(Eruca sativa Mill)无菌苗的下胚轴、子叶和子叶柄作为外植体,研究了不同的激素浓度和组合对其愈伤组织诱导和植株再生的影响。结果表明,分别以MS+0.8mg／L 2,4-D,MS+0.8mg／L 2,4-D+0.1mg／L 6-BA,MS+0.8mg／L 2,4-D+0.2mg／L 6-BA为下胚轴、子叶柄和子叶的愈伤组织诱导培养基时,效果较好,出愈率依次为86.3%,78.2%,97.6%;将下胚轴、子叶柄和子叶的愈伤组织分别转移到分化培养基MS+3.0mg／L 6-BA+0.1mg／L　NAA,MS+3.0 mg／L 6-BA+0.2mg／L NAA上再生不定芽,效果最佳,不定芽再生频率分别为72.7%,63.6%,69.2%。将不定芽切下转移至1／2 MS+0.5mg／L IBA培养基上诱导生根,生根率达81％以上。     

杜仲愈伤组织诱导与继代培养研究

[目的]对杜仲进行愈伤组织诱导及继代培养,建立愈伤组织的培养系统。[方法]以杜仲子叶、幼叶、下胚轴为外植体,接种于不同培养基中诱导和继代。[结果]不同外植体愈伤组织的诱导率高低顺序为：下胚轴〉子叶〉幼叶。子叶和幼叶在MS＋NAA 1.00 mg/L、MS＋2,4-D 1.00 mg/L培养基中诱导出的愈伤组织在MS＋6-BA 1.00 mg/L＋NAA 2.00 mg/L、MS＋2,4-D 1.00 mg/L培养基中继代培养为佳;胚轴在MS＋NAA 3.00 mg/L、MS＋6-BA 1.00 mg/L＋NAA 1.00 mg/L和MS＋2,4-D 1.00 mg/L培养基中诱导出的愈伤组织在MS＋6-BA1.00 mg/L＋NAA 2.00 mg/L、MS＋6-BA 1.00 mg/L＋NAA 1.00 mg/L和MS＋2,4-D 1.00 mg/L培养基中继代培养为佳。[结论]杜仲的子叶、幼叶和胚轴可采用多条途径实现愈伤组织的诱导和继代增殖培养,为进一步筛选高产细胞系打下基础。