大叶黄杨内生真菌的分离及抑菌活性研究

[目的]从大叶黄杨中找到具有抗菌活性的内生真菌。[方法]采用PDA双抗培养基从大叶黄杨茎和叶中分离内生真菌,对其分别进行液体培养,将发酵后所得的发酵液用乙酸乙酯萃取处理,以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌为试验菌株,用纸片法对分离的真菌及其次生代谢产物进行了抑菌试验。[结果]从大叶黄杨茎和叶中分离得到28株内生真菌,其中有21株内生真菌的发酵液粗提物对指示菌株有一定的抑制作用,占总分离菌株的75%。[结论]大叶黄杨内生真菌的次生代谢产物中存在着丰富的天然活性抑菌物质,可为寻找新型抗菌物质提供资源。     

雪松内生真菌的分离及抑菌活性研究

采用组织分离法,从健康的雪松松针中分离纯化得到11株内生真菌。通过平板对峙和抑菌圈法将11株内生真菌分别对10株供试病原菌进行抑菌活性试验,结果显示内生真菌至少对1株供试病原菌存在抑菌活性。内生真菌发酵液抑菌试验结果显示N03菌株对苹果腐烂菌(Cytospora mandshurica)抑制率达到80.56%,N06菌株对辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)抑制率达到80.74%。N03菌株不同天数的发酵液抑菌活性研究表明,发酵液的抑菌活性与内生真菌的生物量相关。     

胡杨内生真菌分离及其抑菌活性研究

从健康胡杨的叶、皮、枝、干、根分离获得182株内生真菌,经形态观察分类鉴定属于4目5科25属。采用两点对峙培养拮抗试验、孢子萌发试验和人工接种试验,对杨树烂皮病菌(Cytospora chrysosperma)、松苗立枯病菌(Fusarium oxysporum)、豆角炭疽菌病菌(Colleotrichumsp.)、杨灰斑病菌(Coryneum populinum)进行抑菌活性测定。结果表明,所获内生真菌菌株对病原真菌菌丝生长和孢子萌发均存在不同程度的抑制作用,其中,青霉属(Penicilliumsp.)和木霉属(Trichodermasp.)真菌的菌株抑菌效果表现最明显。青霉菌和木霉菌可迅速对病原菌菌落包围、覆盖,从而使植物病原菌生长受到抑制。孢子萌发试验中,青霉菌培养3d时的滤液可对病原菌孢子萌发产生抑制作用,表现出一定的抑菌活性。     

连翘内生真菌的分离及其抑菌活性初步研究

采用PDA培养基从连翘茎、叶中分离到19株内生真菌,对其分别进行液体培养,将发酵产物中的发酵液用高压蒸汽湿热灭菌,菌丝体晾干研磨后用丙酮提取。用发酵处理液和丙酮粗提物采用生长速率法对一些植物病原菌进行抑菌活性测定。结果表明:抑菌率在50%以上的活性菌株,发酵液组中有1株(5.26%),菌丝体组中有13株(81.25%),表明其抑菌活性成分主要为胞内代谢产物(存在于菌丝体粗提物中)。筛选出2株抗菌谱较广的内生真菌(J4和J8),其中J8对9种病原真菌抑菌活性较强,J4对6种病原真菌抑菌活性较强。     

银杏内生真菌T4抑菌活性及生物学特性的研究

采用组织法分别从银杏组织器官(根、茎、叶)中分离得到25株内生真菌。平板对峙试验结果表明,其中16株内生真菌对供试的6种植物病原真菌表现出明显的抑制作用,其中内生真菌T4活性尤为突出。菌丝生长速率法测定结果表明,T4菌株发酵液对番茄枯萎病菌(Fusarium oxysporum),苹果腐烂病菌(Cytospora mand-shurica),苹果炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides),梨黑星病菌(Venturia pirina),小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)有较强抑制作用,特别是对苹果腐烂病菌(Cytospora mandshurica)的抑制作用达到92.31%。T4菌株生物学试验结果表明,该菌株的适宜生长温度为28~32℃,其生长最适碳源为葡萄糖和麦芽糖,最适氮源为胰蛋白胨。通过形态学观察,初步鉴定内生真菌T4属于镰孢属(Fusarium sp.)。     

猫儿屎内生真菌分离鉴定及抑菌活性研究

以新鲜猫儿屎为材料,采用组织分离法从其茎、叶、果实中分离内生真菌,采用形态学方法进行初步鉴定;采用滤纸片法测定猫儿屎内生真菌次生代谢产物的抑菌活性.从猫儿屎的茎、叶和果实中共分离出91株内生真菌,分别属于6目7科15属;曲霉属为优势种属,占总量的32％;91株内生真菌具有不同程度的抑菌活性,菌种DS37、DS58、DL06和DL14的抑菌活性较强.结果表明,猫儿屎内生真菌种类具有多样性,次生代谢产物具有广泛的抑菌活性.     

两株广西地不容内生真菌的抑菌活性研究

从广西地不容块根分离出白壳菌Albonectria rigidiuscula DBR-3和黑孢霉属Nigrospora sp.DBR-5两株内生真菌,以15种动物病原菌和10种植物病原真菌为供试菌,对两株内生真菌的抑菌活性进行测定。结果表明,DBR-3对动物病原菌和植物病原真菌均有抑菌活性,其发酵产物的乙酸乙酯萃取物对12种动物病原菌的MIC为0.625~10 g/L,对10种植物病原真菌的EC50值为0.3437~7.7094 g/L。DBR-5对植物病原真菌的抑菌活性好,但对动物病原菌的抑菌活性差,DBR-5发酵产物的乙酸乙酯萃取物对10种植物病原真菌的EC50值为0.0124~0.6112 g/L,明显高于DBR-3对植物病原真菌的抑菌活性。     

核桃属植物内生真菌的分离及其抑菌活性研究

以核桃、黑核桃作为供试材料,从其茎、叶和青皮中分离得到60株真菌,经确认为其内生真茵.对这些内生真菌的培养滤波抑菌活性研究表明:核桃和黑核桃的内生真菌有广泛的抗菌谱,对棉花立枯病菌、苹果炭疽病菌、梨黑星病菌、小麦赤霉病菌和油菜菌核病菌菌丝生长具有抑制作用.     

杜仲内生真菌对植物病原真菌的抑菌活性研究

为了研究杜仲内生真菌对植物病原真菌的抑制作用,以苹果腐烂病菌(Cytospora sp.)、番茄灰霉病菌(Botrytis cintrea)、西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporium f.sp.cucumerinum)、玉米大斑病菌(Helminthos porium turcicum)和白菜黑斑病菌(Alternaria brassicae)为供试菌种,对49株杜仲(Eucommia ulmoides Oliv)内生真菌及其次生代谢物进行了抑菌活性试验。结果表明,有22株内生菌至少对3种测试菌有抑制作用,9株内生菌对6种测试菌都有抑制作用;11株内生菌的次生代谢产物至少对3种测试菌有抑制作用,4株内生菌的次生代谢产物对6种测试菌都有抑制作用。说明从杜仲内生真菌中可以选择出对植物病原真菌具有良好抑制作用的菌种。     

南蛇藤内生真菌的分离及抑菌活性初探

采用常规方法从南蛇藤的叶与果实中分离得到21株内生真菌,以PDB培养基对其进行液体培养,用高压蒸汽灭菌过的发酵处理液和丙酮粗提物对小麦赤霉菌、棉花枯萎菌、番茄叶霉菌等8种病原菌进行抑菌活性测定.结果表明,抑菌活性成分主要存在于丙酮粗提物中.筛选出1株抗菌谱较广的内生真菌Y9,其对番茄灰霉病菌、番茄早疫病菌、苹果炭疽病菌、西瓜枯萎病菌、苹果褐腐病菌、小麦赤霉病菌 6种病原菌有较好抑菌活性.     

我国猴头栽培菌株的反转录转座子间扩增多态性

IRAP作为一种新的DNA分子标记技术,具有简便、稳定、中等产率和容易得到选择性条带序列的特点。利用基于反转录转座子的分子标记技术,即反转录转座子间扩增多态性(IRAP)技术分析我国34份栽培猴头菌菌株种间遗传差异,为猴头菌道地性研究、种质资源鉴定、亲缘关系研究、品种选育和引种栽培提供了分子生物学依据。结果表明,34个猴头菌菌株间均有遗传上的差异,但遗传相关性极高,同时表明我国猴头菌栽培菌株间的遗传背景较单一。     

猴头多糖生物学功能研究

应用保健功能的评价方法,对液体发酵生产的猴头菌丝体中提取的猴头菌丝多糖进行免疫调节功能的研究.结果表明:猴头菌丝多糖可明显提高小鼠腹腔巨嗜细胞的吞噬功能,能够在一定程度上提高小鼠血清溶菌酶含量,明显促进迟发型超敏反应的发生.     

猴头不同菌株酯酶同工酶的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳(PAGE)对猴头5种不同菌株酯酶(EST)同工酶进行了研究。结果表明:猴头5种菌株的酯酶同工酶活性不同,酶谱带数为1~4条,具有特征谱带;Rf值主要集中在0.47~0.84,且具有特征谱带;苏猴19#与猴头冬2#、猴头伊春之间的亲缘关系相对近,苏猴19#与猴杰2#之间的亲缘关系相对较近,苏猴19#与猴头8412之间的亲缘关系相对较远。     

离子束注入诱变选育猴头菇高产菌株的研究

采用低能氮离子注入技术诱变选育猴头菇子实体高产菌株.实验确定了以猴头菇原生质体为材料进行低能氮离子注入,离子注入后,原生质体经再生,用菌丝拮抗实验结合酯酶同工酶酶谱分析验证菌株确实发生突变,然后分别以菌株的液体发酵菌丝生物量、固体栽培子实体生物转化率为初筛和复筛的指标,经遗传稳定性试验验证,筛选到了一株高产猴头菇菌株AHSWHT7012,其液体发酵生物量、予实体生物转化率分别较对照提高了15.8％和12.5％.试验结果表明：低能氮离子束注入诱变技术用于猴头菇育种是可行的.     

猴头菇水不溶性膳食纤维的提取工艺研究

采用酸碱浸提法进行了猴头菇水不溶性膳食纤维的提取试验,以NaOH浓度、浸提温度、料液比及浸提时间进行了单因素试验,采用L_9(3~4)正交试验优化提取工艺。结果表明,最佳提取工艺为:NaOH浓度0.3 mol/L、料液比1∶8、浸提时间2 h及浸提温度60℃。在此条件下,水不溶性膳食纤维提取率为46.03%。     

猴头菇不同基质配方的比较试验

通过对5种基质配方在猴头菇菌丝生长、子实体生物学性状及其产量方面的比较,筛选适宜猴头菇栽培的最佳基质配方,以期实现猴头菇的高效栽培。结果表明,配方5(棉籽壳14%,木屑70%,麦麸15%,石膏1%)菌丝生长较快,生物学性状优良,生物学效率为86.7%,是最佳的猴头菇基质配方,前3潮子实体平均产量最高,为433.5 g/袋,除了与配方4产量差异不显著外,与其他配方的产量差异均达极显著水平;其次是配方4(棉籽壳14%,木屑60%,香菇菌渣10%,麦麸15%,石膏1%),生物学效率为84.4%,前3潮子实体平均产量为422.0 g/袋,与其他配方的产量差异均达极显著水平,也是一种值得推广的猴头菇基质配方。     

猴头菇多糖的提取工艺优化及抗氧化活性研究

[目的]优化猴头菇多糖的提取工艺,并对其抗氧化活性进行研究。[方法]分别采用单因素试验与正交试验对猴头菇多糖的提取工艺进行优化,并以羟自由基清除力、过氧化氢清除力、还原力等试验对猴头菇多糖的抗氧化活性进行研究。[结果]猴头菇多糖的最佳提取工艺是提取温度85℃、液料比1∶20、提取次数3次、提取时间1.5 h/次;猴头菇多糖具有良好的羟基自由基、过氧化氢能力清除能力和一定程度的还原力。[结论]通过优化获得的猴头菇多糖水提工艺稳定可靠,糖得率高;猴头菇多糖具有一定的抗氧化活性,提示可能与其发挥其他药理作用相关。     

猴头菌液体发酵的环境条件试验

通过对猴头菌液体发酵的部分环境条件进行试验 ,得出其最适宜的液体发酵条件 ,同时分析了在液体发酵过程中培养基中的DO及 pH值的变化情况。结果表明 :猴头菌部分适宜的发酵条件为 :培养基起始pH值 5 0～ 6 0 ,摇瓶装量 5 0～ 75ml,接种量为 10 % ;发酵过程中DO及 pH值均降低。     

酸枣肉渣栽培猴头菇的研究

为科学利用酸枣肉渣,破解困扰酸枣加工过程中造成的资源浪费和环境污染等问题,以猴头菇为对象,在栽培基质常规配方中添加不同比例(20%、40%、60%、80%)酸枣肉渣替代玉米芯,分析其对猴头菇发菌时间、子实体产量及营养成分的影响。结果表明,随着酸枣肉渣添加量的增加,猴头菇菌丝生长速率呈下降趋势,满袋时间和出菇时间延长,当添加比例为20%和40%时,头茬产量显著高于对照,且猴头菇品质得到提升,表现在鲜菇含水量和粗蛋白含量增加,粗脂肪和粗纤维含量降低,必需氨基酸总量增加,蛋白质氨基酸组成更接近FAO/WHO提出的理想蛋白,含铁量显著增加。添加酸枣肉渣栽培猴头菇是可行的,添加比例适宜控制在40%以内。本研究为酸枣肉渣的综合利用提供了新途径,也为食用菌栽培基质拓宽了新来源。     

酸枣肉渣栽培猴头菇的研究

为科学利用酸枣肉渣,破解困扰酸枣加工过程中造成的资源浪费和环境污染等问题,以猴头菇为对象,在栽培基质常规配方中添加不同比例(20%、40%、60%、80%)酸枣肉渣替代玉米芯,分析其对猴头菇发菌时间、子实体产量及营养成分的影响。结果表明,随着酸枣肉渣添加量的增加,猴头菇菌丝生长速率呈下降趋势,满袋时间和出菇时间延长,当添加比例为20%和40%时,头茬产量显著高于对照,且猴头菇品质得到提升,表现在鲜菇含水量和粗蛋白含量增加,粗脂肪和粗纤维含量降低,必需氨基酸总量增加,蛋白质氨基酸组成更接近FAO/WHO提出的理想蛋白,含铁量显著增加。添加酸枣肉渣栽培猴头菇是可行的,添加比例适宜控制在40%以内。本研究为酸枣肉渣的综合利用提供了新途径,也为食用菌栽培基质拓宽了新来源。