柳生金针菇发酵培养条件优化及菌丝体多糖提取工艺

为提高柳生金针菇多糖产量,通过装液量、接种量、培养温度和培养箱转速单因素实验及正交优化试验,对其发酵培养条件进行优化。选取浸提时间、浸提温度及液料比3个因素,以菌丝体多糖提取率为指标,采用正交试验设计确定多糖提取的最佳工艺。结果表明,适宜柳生金针菇深层发酵的培养条件为:装液量120 m L/250 m L、接种量10%、培养温度23℃、培养箱转速150 r/min。菌丝体多糖提取的最佳工艺条件为:浸提时间2 h,液料比50∶1,浸提温度90℃,最佳工艺路线为:热水浸提2 h,过滤,合并3次提取液,旋转蒸发仪浓缩发酵液至原体积的1/10,4倍体积无水乙醇4℃醇沉24 h,3500 r/min离心5 min,去上清,-80℃预冻过夜,真空冷冻干燥,称重,再次溶解多糖,离心去沉淀,上清液醇沉,再次干燥,得菌丝体多糖,多糖提取率为74.39%。     

菌草栽培灰树花子实体多糖的研究

以五节芒(Miscanthus floridulus)、芒萁(Dicranopteris dichotoma)、类芦(Neyraudia reynaudiana)3种草粉按不同配比栽培的灰树花子实体与木屑栽培的灰树花子实体为试材,采用L_9(3~4)正交实验设计方法对灰树花子实体多糖提取条件进行优化,研究了不同料液比、浸提温度、浸提时间和浸提次数对灰树花子实体粗多糖得率的影响,并对灰树花子实体多糖含量进行测定;采用DEAE-Sephadex A-25离子交换柱分别对菌草栽培灰树花粗多糖与木屑栽培灰树花粗多糖进行纯化分级,利用Sephadex G-200凝胶柱层析色谱法对C-GLP1与S-GLP1进行纯度鉴定,为菌草栽培灰树花的精深加工提供参考。结果表明:水提醇沉法提取灰树花子实体粗多糖时,各因素对粗多糖提取率的影响存在差异,影响大小依次为料液比、浸提温度、浸提次数、浸提时间。菌草栽培灰树花子实体多糖提取的最佳工艺为料液比1∶40g·mL^-1,浸提温度100℃,浸提时间2h,浸提次数2次。对菌草及木屑栽培的灰树花子实体多糖分离纯化均得2个级分,C-GLP1、C-GLP2和S-GLP1、S-GLP2。纯度鉴定结果表明,C-GLP1与S-GLP1均为单一对称峰。     

灰树花液体发酵及多糖提取优化研究

对灰树花液体发酵及多糖提取相关工艺进行优化研究。试验优选后的发酵培养基配方为豆饼粉0.75%,玉米粉2.5%,葡萄糖2.5%,蛋白胨1%,KH_2PO_40.1%,MgSO_4 0.05%,VB_1 0.001%,水1000 m L,p H自然。接种量10%,140 r/min,26℃培养,100 L罐发酵120 h,灰树花菌丝体生物量为21.97 g/L,灰树花粗多糖的总产率达到3.29 g/L。灰树花多糖提取方法的比较,结果表明采取超声辅助结合水提法提取灰树花粗多糖,效果较好:在料液比1∶10,25℃超声提取30 min后,进行水提;温度100℃,提取1.5 h,浓缩后醇沉制备粗多糖提取物。试验中粗多糖的提取率达到85%,提取物中粗多糖纯度达到65%。     

荷叶离褶伞菌丝体多糖的提取及还原力的研究

荷叶离褶伞是一种具有药用功能的名贵珍稀食用菌。本试验以液体深层发酵法培养荷叶离褶伞,采用热水浸提法从菌丝体中提取多糖,用硫酸一苯酚法显色,在540nm处运用分光光度计测其吸光度值,计算多糖提取率;利用单因素和正交试验对离褶伞菌丝体多糖的提取工艺进行研究,并对其还原能力进行了研究。结果表明,影响荷叶离褶伞菌丝体多糖提取率因素的主次关系是浸提温度〉浸提时间〉料液比〉乙醇体积分数。荷叶离褶伞菌丝体多糖提取最优工艺条件是粉碎度100目、浸提温度90℃、料水比l：80（g·mL^-1）、浸提时间2h、添加3倍95％乙醇醇沉。苯酚一硫酸法测定此最佳提取工艺条件下粗多糖得率可达4．23％。多糖的还原能力均随着多糖质量浓度的提高而提高,与抗坏血酸Vc相比,荷叶离褶伞多糖的还原力较弱。     

灰树花液体摇瓶发酵的关键控制技术

<正>灰树花具有增强机体免疫力,抑制肿瘤、病毒,降低血压等功效。其子实体可通过固体栽培获得,但生长周期长,产量有限,无法满足灰树花深加工产品的加工需求。而液体深层发酵因不受子实体栽培季节的影响,不消耗林木资源,且培养周期短,成本低,产量高,有效成分的含量易于控制,已受到广泛关注。从灰树花深层发酵液和菌丝体中提取的多糖,与子实体中提取的多糖具有同样的抑制肿瘤、提高     

多糖、粗蛋白含量高的灰树花菌株筛选

为满足灰树花栽培与加工需求,提供特定优良灰树花菌株,本试验将收集的13个灰树花菌株进行人工栽培、摇瓶发酵培养,通过比较不同菌株子实体间、菌丝体间胞内多糖和粗蛋白含量,筛选出G5、G6菌株胞内多糖含量高,G5菌株适宜子实体提取胞内多糖,G6菌株适宜液体发酵菌丝体提取胞内多糖;G6、G7菌株粗蛋白含量高,G7菌株适宜子实体提取粗蛋白,G6菌株适宜液体发酵菌丝体提取粗蛋白。     

正交法优化三种灰树花多糖提取工艺

采用正交法,对传统热水浸提法,超声辅助水提法及微波辅助水提法的灰树花多糖提取工艺进行了研究。结果表明：热水浸提法的最佳工艺为pH值75,料水比为1：20,提取温度为100℃,提取时间为4h,醇沉浓度为95％。超声辅助热水授提法的最佳条件为：超声功率400W,超声时间6min,浸提时间2h,应用超声波可提高灰树花多糖提取率13．56％。微波辅助热水浸提法的最佳条件：高功率,微波时间4min,水提2h,可使灰树花多糖提取率升高29．52％。     

大白菇菌丝体多糖提取工艺的优化

用发酵法培养大白菇菌丝体,并对菌丝体进行多糖提取工艺优化试验.通过单因素和正交实验方法,测定粗多糖含量,摸索大白菇菌丝体多糖提取的最佳时间、温度、料液比、提取次数、浸提液最终浓度.结果表明:大白菇菌丝体多糖提取的最佳条件为:浸提液浓度80％,浸提时间1h,浸提温度25℃,浸提比为1:50.     

灰树花粗多糖提取和重金属去除工艺

采用L9(34)正交试验设计,考察灰树花(Grifola frondosa)子实体粉碎粒度、料液比、提取时间和提取次数对粗多糖得率和样品中总糖含量的影响;同时考察了不同种类和不同使用量的絮凝剂对灰树花粗多糖中重金属的去除效果。试验结果表明,在4个考察因素中,原料粉碎粒度对两个考察指标均有显著影响,优化的水提工艺条件为超细粉(150目,2.8125μm),料液比1/30,提取时间1h,提取2次,此提取工艺条件下的粗多糖得率和样品中总糖含量均较高;絮凝剂M(添加量为0.05%)对灰树花粗多糖中Pb,As,Hg,Cd的去除率分别为76.6%,93.6%,99.9%和97.9%,处理后的灰树花多糖产品中重金属含量符合出口要求。本试验优化的提取工艺已用于灰树花粗多糖生产,0.05%使用量的絮凝剂M可有效去除粗多糖产品中的重金属。     

不同来源灰树花多糖免疫活性初探

采用体外免疫细胞培养法,比较了用不同方法制备的灰树花子实体和菌丝体多糖的免疫活性。结果显示,稀碱提取的灰树花子实体多糖(GFAP)能够显著提高小鼠淋巴细胞的转化增殖率,同时能够显著激活小鼠巨噬细胞,并刺激巨嗜细胞产生大量一氧化氮(NO)。稀碱提取的灰树花菌丝体多糖(GMAP)对小鼠淋巴细胞与巨嗜细胞的作用与GFAP相似。热水提取的灰树花子实体多糖(GFP)与菌丝体多糖(GMP)对小鼠巨噬细胞有一定的激活作用,并能促使巨嗜细胞生成NO,但提高小鼠淋巴细胞转化增殖率的作用均不明显。     

固体发酵灵芝菌丝多糖的提取及组分分析

以苯酚硫酸法作为灵芝多糖的测定方法，研究了从固体发酵灵芝菌丝体中提取水溶性多糖的工艺，对浸提过程中的温度、时间、固液比及提取次数4个因素进行了单因素试验和正交试验，并利用Sephadex G-100凝胶色谱法和薄层层析法对主要组分GLPI进行了分子量测定和单糖分析。结果表明，灵芝多糖的最佳提取条件为浸提温度95℃，浸提时间40min，固液比1：20和提取次数为2次；GLP1分子量约为179900，初步判断为甘露聚糖。     

几个榆黄蘑菌株菌丝体和子实体多糖含量比较

采用水提醇沉法提取多糖,苯酚一硫酸比色法测定多糖含量,对7个榆黄蘑菌株的菌丝体与子实体多糖含量进行比较。结果表明,在菌丝体阶段6号菌株多糖含量最高,5号菌株多糖含量最低;子实体阶段3号菌株的多糖含量明显高于其它供试菌株,1号菌株多糖含量最低。供试菌株的菌丝体阶段和子实体阶段的多糖含量没有相关性。     

杏鲍菇菌丝体多糖提取条件的优化研究

研究杏鲍菇菌丝体中多糖的提取工艺,通过单因子试验,分析醇析条件、菌丝体破碎方法和浸提条件对多糖提取率的影响。利用正交试验对浸提温度、浸提时间和料液比进行优化研究。结果表明,影响多糖得率的主次因子依次为浸提温度、浸提时间、料液比。最优提取条件为:3倍体积95%乙醇沉淀8 h以上,超声波处理10 min,浸提温度97℃,浸提时间2 h,料液比1∶8。在应用最佳工艺时的杏鲍菇的多糖得率为6.52%。     

灰树花、鸡腿菇复合多糖的提取技术研究

以灰树花、鸡腿菇的子实体为原料,提取灰树花多糖、鸡腿菇多糖,并采用超声波水提法进行灰树花、鸡腿菇复合多糖的提取,以多糖得率为指标,分别选取了料液比、超声时间、提取温度、提取次数四个因素,进行L9（3^4）的正交设计,优化复合多糖提取工艺。     

红汁乳菇多糖提取方法初探

本文研究了以稀酸、稀碱和蒸馏水为提取剂对红汁乳菇粗多糖得率的影响 ,得出合适的提取剂为蒸馏水。进一步的正交试验表明 ,红汁乳菇粗多糖的最适提取工艺为 :加水量 1∶2 0 ,95～ 10 0℃水浴 4h ,浸提上清液浓缩比 4∶1,乙醇加入的倍数为 4。     

无苦灵芝子实体多糖的研究

本研究从灵芝子实体多糖提取前工艺开始,利用95％的乙醇溶液浸泡回流提取灵芝子实体两次,绝大部分苦味成分从灵芝子实体中分流出来。醇提后的灵芝子实体再按常规水提并浓缩多糖溶液。灵芝子实体多糖在浓缩的同时,苦味也被浓缩,因而。多糖浓缩液还需进一步脱苦。研究表明,在含1g生药/1mL的灵芝子体实多糖浓缩液中,添加0.8％的β-环状糊精(β-CD)和1.2％的羧甲基纤维素钠(CMC-Na),既能稳定灵芝子实体多糖浓缩液,又能把苦味降到最低程度,为灵芝子实体多糖保健产品的深度开发提供了优良的原料。     

醇沉条件对猴头菌多糖得率和品质的影响

以粗多糖得率和含量为评价指标,对水提醇沉制备猴头菌多糖(Hericium erinaceuspolysaccharides,HEP)工艺中主要醇沉条件进行了筛选,得出猴头菌多糖醇沉的最佳工艺条件:提取液的浓缩比(粗提液体积∶子实体干重,mL∶g)为3∶1,醇沉浓度70%,加入乙醇时浓缩液温度为40℃,醇沉时间和静置温度分别为8 h和4℃。不同醇沉浓度得到的多糖分子量分布及体外免疫活性测定结果表明,醇沉浓度为40%时,得到的多糖大分子部分占的比例较高,活性较好。醇沉浓度越高,多糖含有的小分子物质越多。     

西藏野生灵芝粗多糖提取工艺研究

采用正交试验,对影响灵芝多糖提取的4个主要因素（料水比、提取温度、提取时间、醇析浓度）进行了最佳工艺条件研究。结果表明,提取灵芝子实体粗多糖采用水提醇沉法,最优工艺条件为：料水比1∶50,提取温度90℃,提取2次,每次提取2h,90%乙醇醇析,3000r/min离心30 min取沉淀,sevage法除游离蛋白,离心取上层液即为灵芝粗多糖溶液。苯酚-硫酸法测定灵芝子实体粗多糖含量约为0.734%,这一含量在全国灵芝子实体多糖含量中处于中等水平,还有待于进一步的研究和开发利用。     

添加氧化铝对灰树花菌丝体生长及多糖产量的影响

考察添加不同浓度的氧化铝(粒径为200~300目)对灰树花(Grifola frondosa)发酵菌丝体生长及多糖(胞内和胞外粗多糖)产量的影响。结果表明,在试验添加范围内,灰树花菌球直径随氧化铝添加浓度的增加而显著变小,当添加氧化铝浓度为20 g/L时,游离菌丝体明显增多,且菌球主要表现为S型(D<0.5 cm,D：菌体当量直径,与对象具有相等面积的圆形的直径),其中L(D≥1.5 cm)、M(0.5 cm≤ D<1.5 cm)和 S 型菌丝体的比例分别为4.9%、24.3%和70.8%;添加3 g/L氧化铝时灰树花菌丝体生物量最高,达到5.81 g/L,比空白组提高了2.7倍;添加20 g/L氧化铝时灰树花胞外多糖产量达到最大,为8.46 g/L,为空白组的1.7倍左右,而菌丝体多糖产量以添加0.1 g/L氧化铝时最高,为65.6 mg/g。     

搅拌转速和通气量对灰树花多糖组成及相关酶活性的影响

考察了搅拌转速和通气量对灰树花(Grifola frondosa)菌丝体多糖和胞外多糖提取物中的单糖组成及糖合成相关酶活性的影响.结果表明:搅拌转速和通气量对灰树花胞外多糖提取物的单糖组成影响不大,其葡萄糖比例维持在95%以上;而对菌丝体多糖提取物的单糖组成及相关酶活力影响显著.4个搅拌转速梯度中,以60 r/min时,菌丝体多糖提取物中的甘露糖比例最大,为51.1%,GDP-甘露糖焦磷酸化酶(GMPPB)比酶活最高,为82 mU/mg;4个通气量梯度中,当通气量为0.50 vvm时,甘露糖比例最大(35.7%),磷酸葡萄糖异构酶(PGI)与GMPPB比酶活分别达到最高值,为547 mU/mg和67 mU/mg.