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相似文献
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1.
羊血铜锌超氧化物歧化酶的提取   总被引:3,自引:0,他引:3  
用低深度氯化钠与羊血浆匀浆,采用75℃加热,硫酸铵分级沉淀、透析,柱层析等方法,从羊血中提取铜锌超氧化物歧化酶(Cu.Zn-SOD)其比活性为4632U/mgpr,紫外吸收峰在260nm。实验还表明,硫酸钾缓冲液浓度对Cu.Zn-SOD活性有显著影响。  相似文献   

2.
目的从鹿血红细胞分离铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD),并对其部分性质进行研究。方法用氯仿-乙醇除杂蛋白、丙酮沉淀、热变性、DEAE-32柱色谱等方法,对鹿血红细胞Cu,Zn-SOD进行分离纯化。结果得Cu,Zn-SOD干粉2.2mg;比活13707.27u/mg蛋白;活力回收64.81%;纯化倍数为169.73。理化性质分析表明:该酶的最大紫外吸收波长为265nm,相对分子量约为32000D。相对亚基分子量约为17000D;pH在5~9范围内稳定性很好,在40~60℃内保温30min酶活基本不变,2mmol/LSDS对此酶没有明显的抑制,该酶对H2O2和KCN敏感。结论鹿血红细胞含有丰富的Cu,Zn-SOD。  相似文献   

3.
树莓超氧化物歧化酶的分离纯化和部分性质研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
树莓SOD粗酶液经硫酸铵分级沉淀、SephadexG-100柱层析,同时对比DEAE-52柱层析和金属螯合亲和柱层析,并对其部分性质做了研究。从树莓中纯化得到3种Mn-SOD同工酶:SODⅠ、SODⅡ、SODⅢ。结果表明经金属螯合亲和柱层析的回收率和纯化倍数远高于DEAE-52柱层析。3种SOD对KCN和H2O2均不敏感,最大紫外吸收峰均为280 nm,SODⅠ和SODⅡ受温度影响较小,SODⅢ受温度影响稍大,pH值在7~9范围内3种SOD的相对酶活力较高。  相似文献   

4.
豌豆种子超氧化物歧化酶的纯化及性质   总被引:8,自引:0,他引:8  
从豌豆种子提纯了超氧化物歧化酶(SOD),纯酶比活性为7844×103U/g。该酶受KCN和H2p2的强烈抑制,不受乙醇一氯仿混合液影响,说明为Cu、Zn-SOD。酶分子量和亚基分子量分别为32100×和14400,表明该酶是由两个相同亚基组成。该酶在70℃以下和pH5.0~11.0范围内较稳定,紫外区最大吸收波长为259nm。  相似文献   

5.
经热变性,丙酮分级沉淀,DEAE琼脂糖离子交换层析和Superdex-200凝胶层析,从南方鲶肝中分离纯化获得超氧化物岐化酶.该酶的比活为806.84 U/mg,提纯倍数为336.18,分子量为46.0 kD,亚基分子量为15.2 kD.该酶在20~60℃温度范围内稳定性较好,在pH 4~8范围内活性稳定,对H2O2敏感,对KCN不敏感.Mg2+,Fe2+离子对该酶有激活作用,Zn2+,Pb2+,Ca2+,Cd+离子对该酶有抑制作用.  相似文献   

6.
徐凡  吴媚 《广东农业科学》2013,40(10):146-148
采用硫酸铵沉淀,SephadexG-100层析和DEAE-Sepharose纯化烟草中的谷草转氨酶(GOT),并对酶的最适温度、最适pH值和金属离子对酶活力的影响等进行了研究。结果表明,该酶最适反应温度为37℃,最适pH范围为8.5~9.0,Mn2+、Zn2+,Fe2+对GOT起激活作用,最佳氨基供体为L-天冬氨酸,酶促反应的Vmax为0.575μmol/L·min袁L-天冬氨酸和a-酮戊二酸的米氏常数分别为0.929μmol/L和0.105μmol/L;研究还表明,GOT不能催化吡哆胺转变为吡哆醛,证明在植物体内有另外一种转氨酶催化该反应,为植物体内VB6代谢途径的进一步研究提供了依据。  相似文献   

7.
将从芦荟叶中提取的SOD溶液,通过丙酮沉淀、热变性、DEAE-琼脂糖柱层析s、ephacryl S-200凝胶过滤,获得芦荟超氧化物歧化酶同工酶Ⅰ电泳纯产品Fe-SOD。该同工酶经凝胶过滤测定全分子量为46 kD及SDS-PAGE测得亚基分子量为23 kD,由2个亚基组成。经等电点聚焦电泳测得该SOD酶同工酶Ⅰ的等电点为pH8.9。  相似文献   

8.
蛹虫草超氧化物歧化酶的分离纯化及性质研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
苏瑛  唐咏  王成春 《安徽农业科学》2005,33(8):1388-1389
以蛹虫草为材料,经过硫酸铵盐析、SephedexG!75柱层析和DEAE!52柱层析,得到纯化的超氧化物歧化酶(SOD),经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一蛋白区带,此酶比活力为17855.73U/mg,纯化倍数为53.7,回收率为21.8%。该酶在40℃保温150min,活性不变;在pH值5.0~9.0有较好的稳定性。该酶每亚基含1原子铁,对H2O2和乙醇-氯仿溶液敏感。  相似文献   

9.
作者通过工作实践和文献总结,介绍了常用超氧化物歧化酶(SOD)纯化工艺,并对建立和完善制备高纯度SOD的最佳工艺进行了讨论。  相似文献   

10.
桑叶超氧化物歧化酶的提纯和性质的研究   总被引:8,自引:0,他引:8  
桑叶超氧化物歧化酶能抑制肾上腺素的自动氧化和三氯硝基四氮唑蓝的光化还原,可以根据SOD对肾上腺素的自动氧化的抑制作用为酶活性的定量测定。桑叶SOD活性能被KCN抑制但不受氯仿-乙醇影响,在表明桑叶SOD为Cu-ZnSOD。它的粗提液经聚丙烯酰胺凝胶电泳及NBT的酶活性染色,在蓝色背景上有两条无色透明的同工酶谱带。桑叶粗提液经纯化比活提高2.7倍,其分子量为35000,纯化后的桑叶SOD有同样的光吸  相似文献   

11.
以新鲜牦牛血为原料,采用微波加热及有机溶剂提取相结合的方法提取牦牛血红细胞中的超氧化物歧化酶.结果表明:通过单因素及正交试验对提取工艺进行优化,得出最优工艺条件为:微波处理时间为16s,无水乙醇添加量为0.5倍,氯仿添加量为0.25倍,丙酮添加量为1.6倍,在上述条件下提取的超氧化物歧化酶的活力可达67.137U.mL-1.  相似文献   

12.
用连苯三酚自氧化法测定家蚕血液中超氧物岐化酶活性的结果表明,家蚕血液中超氧物岐化酶活性不仅在品种间存在差异,而且在同一品种的雌雄体间亦存在明显差异,不同发育期其血液中超氧物岐化酶的活性和同功酶均有差异.幼虫期同一品种雄蚕血液中超氧物岐化酶活性高于同一生长期的雌蚕,五龄蚕超氧物岐化酶活性低于四龄蚕.幼虫期与蛹期超氧物岐化酶聚丙烯酰胺凝胶电泳显示出活性谱带亦不相同,幼虫期多为一条活性带,且活性带峰值是雄蚕高于雌蚕;而蛹期有的品种出现两条活性带,其峰值则显示出雌蚕高于雄蚕  相似文献   

13.
超声波对菜豆种子超氧化物歧化酶活性的影响   总被引:6,自引:0,他引:6  
菜豆种子粗酶液经乙醇-氯仿、丙酮沉淀、DEAE-纤维素柱层析和Sephadex G-75柱层析,获得比活力为127.45U/mg的超氧化物歧化酶(SOD),该酶活性受H2O2和KCN强烈抑制,经电泳鉴定为3种SOD同工酶,部分纯化的SOD证明为Cu,Zn-SOD,经不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳获得其中1种电泳纯的酶,超声波处理此酶后,酶活力发生改变,适宜的超声波参数能显著提高酶活力,经超声波处理后,SOD的紫外吸收光谱无明显变化,而紫外差示光谱在一定波长范围内出现正峰和负峰。  相似文献   

14.
In this study, a gene encoding a superoxide dismutase (SOD) was cloned from senescent leaves of cotton (Gossypium hirsutum), and its expressing profile was analyzed. The gene was cloned by rapid amplification of cDNA ends (RACE) method. Northern blotting was used to show the profile of the gene expression, and the enzyme activity was mensurated by NBT deoxidization method in different growth periods. The full length of a gene of cytosolic copper/zinc superoxide dismutase (Cu/Zn-SOD) was isolated from cotton (GenBank Accession Number: DQ445093). The sequence of cDNA contained 682 bp, the opening reading frame 456 bp, and encoded polypeptide 152 amino acids with the predicted molecular mass of 15.03 kD and theoretical pI of 6.09. The amino acid sequence was similar with the other plants from 82 to 87%. Southern blotting showed that the gene had different number of copies in different cotton species. Northern blotting suggested that the gene had different expression in different tissues and development stages. The enzyme activity was the highest in peak flowering stage. The cotton cytosolic (Cu/Zn-SOD) had lower copies in the upland cotton. The copper/zinc superoxide dismutase mRNA expressing level showed regular changing in the whole development stages; it was lower in the former stages, higher in latter stages and the highest at the peak flowering stage. The curve of the copper/zinc superoxide dismutase mRNA expressing level was consistent with that of the Cu/Zn-SOD enzyme activity. The copper/zinc superoxide dismutase mRNA expressing levels of different organs showed that the gene was higher in the root, leaf, and lower in the flower.  相似文献   

15.
从感病的豆天蛾幼虫中分离和纯化了一种新的豆天蛾核型多角体病毒(CbNPV).为进一步了解该病毒的分子生物学特征,提取了基因组DNA,采用Shotgun方法构建了病毒DNA的文库,对其中一些克隆分析发现一长度为465 bp的读码框,编码154个氨基酸,在GenBank中没有发现同源性极高的核苷酸序列.但该基因的编码产物与sod基因同源性较高,与NPVs及GVs的同源性分别为67%~82%和54%~59%,并且更接近于II类NPV.在CbNPVsod基因的氨基酸序列中一些与SOD活性相关的位点及维持空间构型二硫键的位点均保守.CbNPV的全基因组序列有待进一步解析.  相似文献   

16.
以早粳1号、浙辐9号和威-48水稻品种为材料,研究旱地和水田育秧秧苗的超氧物歧化酶(SOD)活性、电解质渗透率和发根力.结果表明:旱育秧叶片SOD活力分别比水育秧增高18.19%、8.56%和7.25%,旱地和水田育秧影响编码SOD基因的表达量,前者高于后者;旱育秧电解质外渗率低于水育秧,发根力强于水育秧,旱育秧耐寒性较强.  相似文献   

17.
根据植物超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的保守区设计特异性引物,通过RT-PCR技术,克隆杨梅叶超氧化物歧化酶保守区之间的cDNA序列.该序列长233 bp,编码一段由77个氨基酸残基组成的SOD保守区片段,该肽段具有Cu/Zn SOD的特征序列.序列同源性分析表明,该序列与Genba...  相似文献   

18.
铅污染对辣椒幼苗生长及SOD和POD活性的影响   总被引:34,自引:1,他引:34  
铅污染对辣椒幼苗生长、超氧化物岐化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性影响的试验结果表明铅毒害可明显降低辣椒种子萌发率、株高和根长,即抑制幼苗生长.铅对SOD活性有抑制作用,其敏感浓度范围是40~80mg@L-1.铅对POD活性也有抑制作用,并表现出抗性活性.  相似文献   

19.
目的:探讨扩张型心肌病(DCM)患者红细胞免疫功能与过氧化脂质的关系。方法:选取本院DCM患者共118例,按NYHA标准分组,心功能Ⅱ级组4l例、Ⅲ级组37例、Ⅳ级组40例;健康人对照组48例。两组同步检测红细胞C3b受体、血浆丙二醛(MDA)及红细胞超氧化物歧化酶(SOD)水平,其中,红细胞C3b受体检测采用红细胞酵母菌混合花环法,MDA采用硫代巴比妥酸(TBA)法测定,红细胞SOD测定采用邻苯三酚自氧化反应法,并作比较和相关分析。结果:DCM心功能Ⅳ级患者红细胞受体花环率(RBC—C3bRR)和红细胞免疫复合物花环率(RBC—ICR)较心功能Ⅲ级、Ⅱ级患者及对照组均明显降低,差异具显著意义(P<0.0l,<0.05)。相关分析表明.RBC—C3bRR与MDA呈高度负相关、与SOD呈中度正相关,相关系数分别为-0.83和 0.72。结论:DCM患者存在红细胞免疫功能下降及LPO增加,并随心功能的减弱而加重,这可能与脂质过氧化损伤有关。  相似文献   

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