氟苯尼考对杂色鲍的急性毒性及组织毒理学

研究了氟苯尼考(florfen icol)对杂色鲍Haliotis diversicolorReeve稚鲍96 h的急性毒性,其LC50为(162.67±17.41)mg/L(95%置信限)。稚鲍中毒后的临床症状为:分泌大量黏液,附着力明显减弱,内脏团膨大,对外界刺激反应迟钝,呈麻痹状。组织切片观察结果表明:鲍消化腺和肾脏损伤严重,其它器官未见明显病变;随着浸浴时间和药物浓度的增加,消化腺中消化细胞空泡化,并与嗜碱性细胞逐渐从基膜脱落解体,管间结缔组织胶原纤维断裂,呈弥散状广泛坏死;肾腔上皮细胞萎缩,与基膜分离,腔体变小,微绒毛脱落,中毒严重时,肾上皮细胞融合,核解体消失。     

杂色鲍肌肉萎缩症的组织病理学研究

[目的]阐明杂色鲍肌肉萎缩症的致病机理。[方法]采用组织病理学的方法,以正常样品作为对照,对中国南方患肌肉萎缩症杂色鲍的不同组织进行了病理学观察。[结果]患病杂色鲍腹足、外套膜、鳃、肝胰腺和肠道均呈现不同程度的病理变化,病理特征主要表现为：腹足肌纤维变性、坏死,外套膜上皮脱落,鳃叶肿胀、血细胞浸润,肝细胞脱落、坏死,肠绒毛变短。[结论]此研究描述了杂色鲍肌肉萎缩症的病理变化特征,为弄清其发病机制提供理论依据。     

氟苯尼考对鲟鱼的急性毒性

研究了氟苯尼考对鲟鱼的急性毒性。采用改进寇氏法计算试验鲟鱼的半数致死剂量LD50和95%置信区间。结果表明,氟苯尼考对鲟鱼96 h的LD50为891.25 mg/(kg鱼体重),95%的置信区间为840.42～942.39 mg/(kg鱼体重),安全剂量为193.69 mg/(kg鱼体重),符合低毒标准。     

杂色鲍低温病毒病研究进展

杂色鲍是一种重要的养殖鲍品种,主要分布于中国南部沿海.但是近年来,鲍的病害频发,尤其是1999年以来暴发的鲍低温病毒病严重影响了鲍养殖产业的健康发展.首先对鲍低温病毒病的发现及其相关病原的鉴定进行综述,重点讨论了其主要病原——鲍肌肉萎缩症病毒(AbSV)的基因组及其与血蓝蛋白的关系,并介绍了最新建立起来的两种AbSV的快速检测方法.对10多年来鲍低温病毒病的研究进行系统总结,并提出具有重要研究价值的科学问题,为日后病毒形态及其与血蓝蛋白关系等方面的深入研究提供参考.     

氟苯尼考悬浮乳剂对小鼠的急性毒性试验

采用改良寇氏法测定氟苯尼考悬浮乳剂对小鼠的LD50,通过腹腔注射法对小鼠给药,连续观察7 d,结果表明,氟苯尼考悬浮乳剂的LD50为3346.57 mg/kg,95%可信限范围为2855.01～3922.76 mg/kg,符合低毒标准,该药临床应用安全.     

杂色鲍精巢显微和超微结构的研究

通过光镜、扫描与透射电镜技术对杂色鲍精巢的显微及超微结构进行研究.结果表明:精巢由精滤泡组成,滤泡中央为结缔组织小梁.精原细胞分布于小梁边缘;初级精母细胞、次级精母细胞和精子细胞离小梁较远,散乱分布.精子头部呈短子弹头状.苏木精伊红染色,精子顶体强嗜酸性,为红色,核嗜碱性,为蓝色,尾部难着色,高倍镜下为丝状.精子表面不光滑.头部可见顶体和致密的核及其共同形成的顶体下腔,核中有染色质缺失的空泡结构,核后是4～5个线粒体围绕中心粒形成的略为膨大的颈部.鞭毛轴丝为典型的"9 2"结构.     

杂色鲍野生群体与养殖群体自交和杂交子一代的育苗及工厂化养殖

利用采自越南海域的杂色鲍（Haliotis diversicolor）野生群体（Y）及取自湛江海域的九孔鲍（H diversi-color supertexta）养殖群体（z）进行群体间的杂交和群体内自繁,并对子一代F,的育苗及工厂化养殖效果进行比较。结果表明：各交配组合F,代的受精率、孵化率及幼体附着率均无显著差异（P〉0．05）;稚鲍培育期及工厂化养殖过程中,正交与反交组合F。代的壳长和成活率均显著大于自交组合组（P〈0．05）;受精360d后,正、反交组合野生鲍自繁（YY）及养殖鲍自繁（zz）F,代的壳长分别为（51．6±6．8）mm,（49．9±6．7）mm,（44．3±5．4）mm,（41．7±4．6）mm,成活率分别为（87．8±5．0）％,（89．2±4．4）％,（54．5±2．8）％,（73．1±2．4）％;野生鲍自繁（YY）F,代的壳长显著大于养殖鲍自繁（ZZ）组（P〈0．05）,但成活率显著低于养殖鲍自繁（ZZ）组。杂交组合所显示出的良好的杂种优势和对环境的适应能力表明,群体间的杂交将可能是养殖杂色鲍遗传改良的有效途径。     

微酸性电解水暂养的杂色鲍存活率及品质变化

微酸性电解水(SAEW)因其广谱杀菌作用,在果蔬保鲜、器械消毒等领域有了较多应用,但在水产品保活方面的应用较少。在水温(10±1)℃下,将平均体质量(34.3±5) g的杂色鲍(Haliotis diversicolor)在由沃汰智能电解水机和海水晶制成的SAEW中静养,以不加SAEW为对照。2 d后检测杂色鲍的存活率和菌落总数,并采用感官评定和挥发性盐基氮(TVB-N)值等方法分析了4℃贮藏后杂色鲍的品质变化。结果显示:暂养第9 d,电解水组鲍鱼存活率为66.7%,大于海水组存活率(50%);贮藏方面,9 d后海水组TVB-N值为/100 g,超过限值15 mg达到54.5,优于海水组。15 d后,电解水组鲍鱼菌落总数为5.9 log10 CFU/g,超过食品微生物可接受上限7 log10 CFU氏菌(Shewanella)为优势菌。结果表明,SAEW在水产品保活、保鲜中具有一定的应用潜力。     

杂色鲍原代细胞培养方法的优化及其在基因功能研究中的应用

优化了杂色鲍原代细胞的培养条件,并利用原代细胞进行了RNAi和外源基因表达。结果表明,较高的渗透压对血淋巴细胞培养起重要作用,淋巴细胞分离液分离血淋巴细胞更利于其生长。原代细胞培养至第5天,在细胞培养液中添加50μg My D88 dsRNA,能够显著降低My D88 mRNA的表达。p EGFP-N1转染培养5 d的鳃细胞,5 d后可以检测到绿色荧光。该研究表明可以成功培养杂色鲍血和鳃原代细胞,并且利用原代细胞可以进行功能基因表达量调低或调研究,为功能基因注释提供了便利条件。     

不同剂量氟苯尼考对罗非鱼血药浓度的影响及组织毒理学研究

为研究氟苯尼考在罗非鱼(Oreochromis niloticus)体内的吸收特征及组织毒理,在30℃实验条件下,分别按0、5、12、20、40、80、100 mg/kg的给药剂量,通过药饵单次饲喂实验罗非鱼氟苯尼考后,使用HPLC方法检测各剂量组的血药浓度,结果发现各剂量组10 h的血药浓度分别为0、1.49±0.46、2.66±0.62、5.08±0.75、10.60±2.34、13.74±2.87、14.42±0.49μg/mL(M±SD,n≥6,n为各浓度点数据量),表明随着给药剂量的增加,实验动物体内血药浓度也随之上升,但40 mg/kg剂量以上,其浓度增幅降低,提示药物利用率随着给药剂量的增加而降低。在相同试验条件下,按照0、12、20、40、100 mg/kg的给药剂量连续饲喂罗非鱼7 d以研究药物对罗非鱼的组织毒理特性,组织切片显示20 mg/kg以下剂量组未见明显病变,在高剂量组(40 mg/kg、100 mg/kg)则出现了剂量依赖的肝肾细胞损伤现象,并且该损伤在继续饲养7 d的情况下未见修复。建议生产上的给药剂量不高于20 mg/kg,以免造成机体组织损伤,利用率降低及环境污染等问题。     

杂色鲍的杂交育苗研究

以受精率、幼体附着率、幼体存活率、稚鲍存活率和日生长速度作为衡量标准,研究了西沙群体（XS）、台湾群体（TW）、海南群体（HN）和越南群体（YN）4个不同地理种群杂色鲍的杂交效果。结果表明：在5个杂交组合中,杂交效果优劣顺序为：XS♀×TW♂〉XS♀×YN♂〉XS♀×HN♂〉TW♀×YN♂〉YN♀×HN♂;受精率最大值出现在TW♀×YN♂组合,为（98.15±7.4）%;幼体附着率最大值出现在XS♀×YN♂组合,为80.41%;幼体存活率、稚鲍存活率和日生长速度出现在XS♀×TW♂组合,分别为73.76%,81.2%和140.7μm.d。     

九孔鲍5个家系遗传多样性的AFLP分析

利用扩增片段长度多态性(AFLP)技术对九孔鲍第5代选育核心家系的遗传多样性进行了分析。5对引物组合共扩增得到258个片段,其中184个是多态片段,占总带数的71.32%。各家系的多态位点百分率和平均杂合度分别为78.43%~97.06%,0.214 3~0.265 3。家系间的Nei’s遗传相似系数和遗传距离分别为0.990 8~0.998 6,0.001 4~0.009 2。AMOVA分析结果表明:39.3%变异来源于家系间,60.7%变异来自家系内。家系间两两配对的φST值介于0.030 6~0.039 2之间,各家系间的遗传分化不显著(P0.001)。     

皱纹盘鲍与九孔鲍杂交的研究

采用皱纹盘鲍与九孔鲍进行杂交,并与两亲本自交进行育苗比较.结果表明：自交组的受精率、孵化率以及存活率显著高于杂交组（P〈0.05）;皱纹盘鲍（♀）×九孔鲍（♂）和皱纹盘鲍（♂）×九孔鲍（♀）杂交的受精率分别为0.9%和3.2%,受精率存在显著差异（P〈0.05）,而孵化率分别为12.4%和13.1%,二者差异不显著（P〉0.05）,二者之间幼体存活率的差异也不显著（P〉0.05）;自交组和杂交组之间的鲍生长速度存在明显的差异（P〈0.05）,杂交组合的生长速度明显比自交组合的要快;但杂交组中稚鲍的存活率和自交组之间差异不显著（P〉0.05）.     

九孔鲍(Haliotis diversicolor supertexta)育苗期养殖水体细菌的群落结构

为研究九孔鲍(Haliotis diversicolor supertexta)育苗期养殖水体细菌的群落结构,用细菌通用引物构建了细菌16S rRNA基因克隆文库.从文库中随机挑选31个克隆子进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析,得到20个不同的RFLP带型.对代表性克隆子进行测序,序列分析和系统进化分析结果表明鲍苗养殖池水体中细菌遗传多样性非常丰富.主要分为3大类群:γ-变形菌纲、α-变形菌纲和黄杆菌纲细菌,分别占58%、32%和10%.γ-变形菌纲细菌中以弧菌最多,包括已知的鲍病原弧菌,其次是海洋螺菌目细菌.α-变形菌纲细菌主要与GenBank库中未培养的克隆子序列最相似,其中红细菌科细菌最丰富,占所分析克隆子数目的26%.本研究结果表明九孔鲍育苗期养殖水体中存在大量未培养的、未知菌属的细菌.     

氨氮对九孔鲍过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活力的影响

通过测定不同氨氮条件下的九孔鲍内脏囊中的过氧化氢酶（CAT)和超氧化物歧化酶（SOD）活力，观察氨氮对九孔鲍CAT和SOD酶活力的影响，实验结果表明：不同氨氮浓度下的这两种酶活力不同，CAT活力随氨氮浓度的升降而变化，当氨氮浓度为3－4mg/L时，其活力高于对照组，当浓工增大至5－6mg/L时，CAT活力低于对照组；在氨氮为1－4mg/L时，SOD活力随氨氮浓度增大而上升，在4mg/L时达到最运，而当氨氮增至5－6mg/L时，SOD活力下降，不同温度下的氨氮浓度对九孔鲍的CAT和SOD酶活力变化有一定的影响。     

氨氮对九孔鲍过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活力的影响

通过测定不同氨氮条件下的九孔鲍内脏囊中的过氧化氢酶（CAT)和超氧化物歧化酶（SOD）活力，观察氨氮对九孔鲍CAT和SOD酶活力的影响，实验结果表明：不同氨氮浓度下的这两种酶活力不同，CAT活力随氨氮浓度的升降而变化，当氨氮浓度为3－4mg/L时，其活力高于对照组，当浓工增大至5－6mg/L时，CAT活力低于对照组；在氨氮为1－4mg/L时，SOD活力随氨氮浓度增大而上升，在4mg/L时达到最运，而当氨氮增至5－6mg/L时，SOD活力下降，不同温度下的氨氮浓度对九孔鲍的CAT和SOD酶活力变化有一定的影响。