亚洲百合‘穿梭’组培快繁体系的建立

以亚洲百合‘穿梭’为试材,采用植物组织培养的方法,研究了不同浓度激素对百合鳞片诱导、不定芽增殖、小鳞茎生根培养的影响,并筛选出适宜百合组培苗生长的移栽基质,以期为亚洲百合‘穿梭’的组培快繁体系的建立提供参考依据。结果表明：百合鳞片最佳诱导培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA+0.5 mg·L^-1 6-BA+30 g·L^-1蔗糖+6 g·L^-1琼脂,诱导率最高可达74.44%,显著高于其他处理;最佳增殖培养基为MS+0.1 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 6-BA+30 g·L^-1蔗糖+6 g·L^-1琼脂,不定芽增殖数量最多,增殖系数为3.27;适合小鳞茎生根培养基为1/2MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.3 mg·L^-1 IBA+40 g·L^-1蔗糖+6 g·L^-1琼脂,平均生根数量为14.33,是其他...     

报春石斛组培快繁技术体系的建立

以报春石斛蒴果为外植体,通过对种子无菌萌发和原球茎诱导、原球茎增殖及丛生芽诱导、生根壮苗以及移栽驯化的研究,以期建立报春石斛的组培快繁技术体系。结果表明:培养基MS+6-BA 1.0mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+蔗糖20g·L^-1最适报春石斛种子无菌萌发和原球茎的诱导;原球茎增殖及丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+香蕉泥100g·L^-1+蔗糖20g·L^-1,继代培养45d,增殖系数达8.2;最佳生根壮苗培养基为MS+6-BA 1.0mg·L^-1+KT 0.5mg·L^-1+NAA 0.2mg·L^-1+香蕉泥100g·L^-1+蔗糖30g·L^-1+活性碳1.0g·L^-1,培养3个月,生根率达100%,根系较长,苗壮;3—4月是桂林地区移栽报春石斛组培苗的最佳季节,生根苗在栽培基质Ⅰ(树皮∶水苔∶珍珠岩∶蛭石=10∶2∶1∶1,体积比)的长势好于栽培基质Ⅱ(树皮∶珍珠岩∶蛭石=10∶1∶1,体积比),成活率为92.3%。     

有性三倍体杂交兰‘黄荷兰’的快速繁殖

以‘黄荷兰’试管苗为试材,采用组织培养快速繁殖方法,研究了影响有性三倍体杂交兰‘黄荷兰’根状茎诱导、增殖、分化、生根壮苗和试管苗移栽的因素,以期建立‘黄荷兰’种苗工厂化生产技术体系。结果表明:横切茎尖的起始脱分化时间早于纵切,诱导率高于纵切。切割长度、外源激素、光照强度和有机附加物对根状茎的增殖影响显著,将根状茎切割成长0.50 cm接种到MS+6-BA 1.00 mg·L^-1+NAA 0.20 mg·L^-1+土豆80.00 g·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1+卡拉粉7.00 g·L^-1+AC 0.30 g·L^-1培养基中培养40 d,根状茎增殖系数为3.18。外源激素对根状茎的分化影响显著,将根状茎掰成长1.00 cm接入MS+6-BA 1.00 mg·L^-1+NAA 0.20 mg·L^-1+蔗糖20.00 g·L^-1+卡拉粉7.00 g·L^-1+AC 0.02 g·L^-1培养基中培养40 d,芽分化率和苗分化率分别为60.00%和57.50%。将4 cm高的苗转入1/2MS+6-BA 0.10 mg·L^-1+NAA 0.50 mg·L^-1+蔗糖20.00 g·L^-1+卡拉粉7.00 g·L^-1+AC 0.50 g·L^-1中培养50 d,平均株高和根数分别为7.32 cm和3.56条。4月和10月用水草移栽,试管苗成活率分别为98.67%和99.67%。上述研究结果说明,利用组织培养快速繁殖技术工厂化生产‘黄荷兰’种苗是可行的。     

蒙古黄芪植株再生及增殖体系建立

以蒙古黄芪种子繁育而来的无菌苗获得的外植体(根、叶片、胚轴)为试材,通过设定不同浓度的生长调控激素6-BA、2,4-D、NAA,研究不同外植体在不同浓度激素的培养条件下对其愈伤组织诱导率、试管苗增殖及生根情况的影响,以期为蒙古黄芪不同组织外植体的愈伤组织诱导、植株分化及增殖培养条件提供参考依据。结果表明：以根、胚轴、叶片为外植体材料均可诱导愈伤组织产生,其中以胚轴为外植体为最优选择,愈伤组织诱导率最高达97.92%,最佳培养基为MS+2,4-D 1.0 mg·L^-1+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+蔗糖3.0%;试管苗增殖的最佳培养基为1/2MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+KT 0.5 mg·L^-1+蔗糖3.0%,再生植株平均分化率最高为92.67%;生根培养时,最适宜的培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg·L^-1+白砂糖3.0%。该试验建立了蒙古黄芪植株再生及增殖体系,在黄芪生产实践中具有重要推广价值。     

赏食兼用百合京鹤高效组培再生体系的优化

百合是重要的高档蔬菜和观赏花卉,基于鳞片的高效组织培养再生体系是百合种球规模化生产繁育的基础。本试验首次使用草甘膦为诱导分化剂,优化赏食兼用百合品种京鹤鳞片外植体的组培再生体系。结果表明：京鹤鳞片不定芽最佳诱导培养基为MS + 1.0 mg · L^-16-BA + 0.1 mg · L^-1 NAA + 2.5 mg · L^-1草甘膦 + 30 g · L^-1蔗糖,诱导系数为6.46,显著高于常规诱导培养;最佳继代增殖培养基为MS + 0.5 mg · L^-16-BA + 0.1 mg · L^-1 NAA + 30 g · L^-1蔗糖,增殖系数为4.01;最佳鳞茎膨大培养基为MS + 90 g · L^-1蔗糖;最佳生根培养基为1/2MS + 0.3 mg · L^-1 NAA + 30 g · L^-1蔗糖,生根系数为23.59。     

红芽芋脱毒试管芋诱导及植株再生

为解决红芽芋脱毒苗移栽成活率低、种苗易分化等问题,以江西地方名优芋品种‘铅山红芽芋’为材料,开展茎尖脱毒、试管芋诱导及植株再生的研究。结果表明,芋芽剥取0.2～1.0 mm茎尖接种于MS+2.0 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 NAA+3%蔗糖培养基中可诱导成苗;通过RT-PCR分子检测,0.3 mm以下茎尖培养的试管苗中未发现芋花叶病毒(DsMV);脱毒苗继代增殖最佳诱导培养基为MS+3.0mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 NAA+3%蔗糖,脱毒苗试管芋诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 NAA+8%蔗糖,最佳培养条件为温度25℃,光照54μmol·m^-2·s^-1,光周期14 h·d^-1;脱毒试管芋的最佳移栽驯化基质为草炭︰蛭石=2︰1;脱毒试管芋移栽后,成活率达97.71%,生长中未出现分化现象。脱毒芋相比未脱毒芋增产4...     

‘凤丹’牡丹幼胚愈伤组织诱导的优化和再生体系的建立

以‘凤丹’牡丹的幼胚为材料,从取样时期、切割接种方式、基本培养基和植物生长调节剂选择等方面进行再生体系优化。结果表明:授粉后60 d为‘凤丹’牡丹幼胚诱导愈伤的最佳取材时期;完全破碎切割成幼胚薄片比完整胚、1/2胚和1/4胚更容易获得高质量的愈伤组织,且褐化率较低;MS基本培养基添加0.162μmol·L^-1 H₂O₂可提高幼胚愈伤组织诱导率,但会增加褐化率,而在WPM基本培养基中添加不同浓度的H₂O₂,对愈伤诱导率和褐化率的影响不大;WPM基本培养基比MS更适于‘凤丹’牡丹幼胚再生;WPM+2.5 mg·L^-1 2,4-D+0.1 mg·L^-1 6-BA是诱导愈伤的最佳植物生长调节剂组合,诱导率可达93.33%;不定芽和不定根诱导的最佳组合分别为WPM+30 g·L^-1蔗糖+3 g·L^-1植物凝胶+0.5 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1     

卷丹转基因体系构建及岷江百合LrCCoAOMT的导入

以卷丹(Lilium lancifolium Thunb.)无菌小鳞片为试材,通过切片处理、优化农杆菌侵染浓度与时间以及重悬液和共培养基成分,构建农杆菌介导的高效遗传转化体系。结果表明,MS+1.5 mg·L^-16-BA+0.5 mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖是切片芽分化的最佳培养基,添加100 mg·L^-1抗坏血酸能有效抑制褐化并促进不定芽增殖。MS+2.0 mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖是生根诱导的最佳培养基。抗生素敏感性测试发现,培养基中添加Kan 100 mg·L^-1或Hyg 75 mg·L^-1结合Cef 400 mg·L^-1适宜抗性筛选。GUS染色分析表明,以去除大量元素的改良MS+100μmol·L^-1AS和去除大量元素的改良MS+1.0mg·L^-16-BA+1.0mg·L^-1NAA+100...     

枣77个品种果肉愈伤组织诱导培养研究

果肉愈伤组织的大量培养可为悬浮细胞体系的建立、原生质体的分离与培养、遗传转化体系的建立及次生代谢产物的研究提供物质基础。以5个发育阶段的枣果肉为试材,共计77个枣品种,选用10种培养基进行枣果肉愈伤组织诱导研究。结果表明,基因型、果实发育阶段、培养基种类及其植物生长调节剂配比对枣果肉愈伤组织诱导效果均具有显著影响。在启动培养阶段,有42个品种分别筛选出1～6种可诱导出愈伤组织的培养基;有8种培养基可以成功诱导出愈伤组织,其中G1(4.41 g·L^-1 MS+6 g·L^-1琼脂+20 g·L^-1蔗糖+0.5 mg·L^-1 6-BA+2.5 mg·L^-1 2,4-D)和G7(4.41 g·L^-1 MS+6 g·L^-1琼脂+20 g·L^-1蔗糖+0.8 mg·L^-1 6-BA+1.5 mg·L^-1 2,4-D)培养基的适用性最高,达60%,其次为G5(4.41 g·L     

兔眼蓝莓‘提夫蓝’组培快繁

以兔眼蓝莓‘提夫蓝’的幼嫩枝条为试材，采用不同浓度和种类的药剂、培养基及生长素进行组培的方法，研究了杀菌剂、培养基、生长激素对外植体灭菌、丛生芽诱发、组培苗继代繁殖、组培苗生根和组培苗移植的影响，以期为构建全面、高效的蓝莓快繁系统提供参考依据。结果表明：外植体最佳灭菌方法为10%NaClO溶液消毒15 min,污染量减少至17.34%,萌芽数为9.71个；蓝莓茎段中诱发形成丛生芽的最适宜培养基为1/2WPM+1.5 mg·L^-1ZT+0.2 mg·L^-1IBA,诱发成功率为68.36%;组培苗最适宜继代生长培养基为1/2WPM+0.1 mg·L^-1 NAA+1.5 mg·L^-1ZT,增殖倍数为5.53,平均株高达5.15 cm;而组培苗最适生根培养基为1/2WPM+0.5 mg·L^-1IBA+200 mg·L^-1活性炭（AC）,其生根率、有效生根率、根长和生根数量分别为87.16%、87.16%、4.39 cm和6.32条；组培苗最适移栽基质是苔藓，移栽成...     

美国芦荟茎尖和茎段离体培养植株再生研究

以美国库拉索芦荟（Aloe veraL.）茎尖和幼茎段为外植体,MS培养基配以不同浓度的NAA和6-BA进行离体组织培养。结果表明,以MS＋6-BA3 mg·L^-1＋NAA 0.5 mg·L^-1培养基对芽的诱导效果最佳,芽的诱导分化率最高,且试管苗健壮;增殖培养基以MS＋6-BA 2 mg·L^-1＋NAA 0.2 mg·L^-1效果最佳,有利于芽苗增殖;生根培养基用1/2 MS＋IBA 0.5 mg·L^-1＋1.5%蔗糖效果最好;芦荟外植体用0.1%升汞消毒时间以10 min为宜。通过研究采用一些措施有效地控制玻璃化苗的发生。     

色素万寿菊雄性不育植株的快速繁殖

以色素万寿菊为试验材料,采用母本资源不育株叶片、带腋芽茎段和侧芽为外植体,对不同的培养基配方条件下的生长情况进行统计,研究了灭菌处理、生长调节剂组合、AgNO3对丛生芽诱导的影响,以期快速获得遗传稳定的万寿菊雄性不育植株,为杂交育种提供基础研究材料。结果表明:以带腋芽的茎段为最佳外植体,1 g·L^-1 HgCl2灭菌10~12 min的灭菌效果最好,B1-3较易诱导丛生芽,其最佳的诱导培养基为MS+1.0 mg·L^-16-BA+0.5 mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖+7 g·L^-1琼脂,诱导率高达93%,2.0 mg·L^-1 AgNO3有利于丛生芽增殖,使B1-3丛生芽增殖率达151.6%,丛生芽生根培养后移栽成活率达95%以上。发现万寿菊离体培养过程中,外植体不同,其丛生芽诱导率不同,最佳外植体为带腋芽茎段。不同的灭菌剂的灭菌效果不同,1 g·L^-1 HgCl2灭菌效果最好;丛生芽诱导时6-BA与NAA不同浓度组合优于6-BA与IAA组合;低浓度AgNO3能够促进丛生芽诱导,高浓度反而会降低。     

花毛茛组培快繁技术研究

以花毛茛初代培养无菌苗为试材,采用MS培养基,分别向培养基中添加不同配比的细胞分裂素6-BA和细胞生长素NAA,对花毛茛进行初代诱导、增殖培养,继代生根培养,并以不同比例泥炭、蛭石、珍珠岩、河沙为基质,对花毛茛进行炼苗移栽试验。结果表明:最佳初代诱芽培养基为MS+1.5 mg·L^-1 6-BA+0.2 mg·L^-1 NAA,诱导率达100%;增殖诱导愈伤组织培养基为MS+0.5 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA,增殖系数为5.0;继代生根培养基为1/2MS+0.2 mg·L^-1 NAA,生根率89.9%;移栽最适基质为泥炭∶河沙∶蛭石=6∶2∶2,成活率100%。     

铁皮石斛人工繁育技术

以铁皮石斛商品瓶苗和盆栽苗茎段为试材,添加不同浓度6-BA、NAA,诱导茎段腋芽、原球茎和不定根,建立再生体系,快速繁殖铁皮石斛组培苗,以期为秦岭淮河一线以北地区人工繁殖铁皮石斛提供参考依据。结果表明:外植体宜采用70%酒精浸泡20 s,0.1%升汞浸泡8 min消毒;MS+6-BA 3.0~5.0 mg·L^-1+NAA 0.1~1.0 mg·L^-1适合腋芽分化和增殖,分化率92%~100%;1/2MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+土豆泥15%适合原球茎诱导增殖,增殖倍数7.7;1/2MS+NAA 0.3 mg·L^-1生根率为100%;以松针土移栽,成活率83%。     

金樱子(Rosa laevigata Michx.)叶片直接再生不定芽体系的建立

以金樱子组培苗的划伤叶片为外植体,研究了不同植物生长调节剂配比组合、暗培养时间、添加物L-脯氨酸、叶片不同部位对不定芽直接再生的影响。结果表明:当TDZ浓度为1.5 mg·L^-1、NAA浓度为0.000 5 mg·L^-1时,不定芽直接发生率最高,为9.5%;不同暗培养时间对不定芽直接诱导具有一定影响,暗培养时间为10 d时不定芽的直接发生率最高,为10.5%;添加了不同浓度的L-脯氨酸后不定芽的诱导率不增反降,所以以不添加L-脯氨酸为宜;叶片不同部位的再生率比较中,仅带叶叶柄可直接诱导出不定芽。综上所述,叶片直接再生不定芽的诱导方法是,以金樱子带叶叶柄为外植体,在直接诱导培养基上1/2MS+TDA 1.5 mg·L^-1+NAA 0.000 5 mg·L^-1+CH 100 mg·L^-1+AgNO3 10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂7.5 g·L^-1,暗培养10 d后,转至正常光周期下培养3周左右,不定芽诱导率最高,为10.5%。所得不定芽在增殖培养基MS+NAA 0.1 mg·L^-1+6-BA 1.0 mg·L^-1生长3周后,增殖系数可达到3.5左右;将丛生芽切割成单芽后转入不含任何激素的MS培养基壮苗3周,幼苗可长高至3~5 cm;再转入MS+NAA 0.1 mg·L^-1培养基中生根,1个月后生根率达95%。     

红叶石楠“红罗宾”高频再生体系优化

以红叶石楠"红罗宾"半木质化幼嫩枝条为外植体,MS作为基础培养基,通过改变激素浓度配比,探究不同激素配比对"红罗宾"茎段腋芽诱导、茎芽苗增殖及生根的影响;以不同的栽培基质分别对生根幼苗进行炼苗移栽,探究红叶石楠移栽的最适基质组成。以期为红叶石楠工厂化育苗体系的建立提供参考依据。结果表明:MS+2.0 mg·L^-1 6-BA+0.25 mg·L^-1 NAA为腋芽诱导的最佳培养基,诱导率为76.7%;MS+2.5 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA为最佳增殖培养基,35 d增殖系数达5.12;红叶石楠试管苗最适生根培养基为1/2MS+0.8 mg·L^-1 NAA,45 d生根率高达90%;1/5红壤+4/5腐殖土的移栽基质,成活率达100%。     

溆浦甜橙高效离体再生研究

本研究以溆浦甜橙实生苗为试材,对影响其离体再生的各种因素进行了研究,建立了一个高效离体再生系统。结果表明,30d龄溆浦甜橙实生苗上胚轴水平置于MT＋3mg·L^-16-BA分化培养基中,不定芽的诱导率可高达83-3％,该不定芽在MT＋0．5mg·L^-1,6-BA＋1．5g·L^-1,麦芽提取物的增殖培养基上生长良好,增殖率可达96．7％,增殖系数为3.79。生根培养基以1／2MT＋0．5mg·L^-1IBA比较适宜。这一系统再生频率高,操作简便,适合于溆浦甜橙的遗传转化。     

北美红杉组培快繁体系的建立与优化

以北美红杉1年生带芽茎段为外植体,通过基本培养基筛选和不同植物生长调节剂水平对比试验得到北美红杉组织培养的不定芽诱导、增殖、生根等生长阶段的优化配比培养基,以期建立北美红杉高效的快繁体系。结果表明:确定最佳消毒方法为75%乙醇消毒30 s,无菌水冲洗2次,再用0.1%氯化汞消毒处理10 min,无菌水冲洗4次;最佳不定芽诱导培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,不定芽诱导效果最好,诱导芽率高达2 153.3%,且芽生长健壮;最佳不定芽增殖培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,增殖系数高达15.8;最佳生根培养基配方为1/2MS+KT 1.5 mg·L^-1+IBA 1.0 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,其生根率达90.0%,根多且粗长,植株高大健壮;最佳移栽基质为V_炉渣∶V_原土∶V_腐殖土=1∶1∶1,植株成活率达91.7%。     

太行菊组织培养技术研究

以太行菊叶片、叶柄、茎尖和茎段为试材,采用MS培养基,在其中添加不同的激素对太行菊的不同外植体进行培养,研究了濒临灭绝的太行菊再生植株的方法。结果表明:太行菊的叶片、叶柄作为外植体诱导出愈伤组织的诱导率分别为44.44%和44.11%,所需时间较长,而茎尖、茎段作为外植体诱导愈伤组织诱导率分别为48.44%和68.75%,培养时间较短。茎段最适合作为诱导愈伤组织的繁殖材料。为了使茎段能更好的诱导出愈伤组织,课题组又对诱导茎段愈伤组织的激素浓度组合进行了研究,A组:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,B组:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,C组:MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,D组:MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1。试验表明,C组激素浓度组合最适合太行菊茎段的愈伤组织诱导。35 d后愈伤组织不再增加后进行继代培养,45 d后将植株转移至生根培养基1/2MS+NAA 0.12 mg·L^-1中进行生根培养。