苹果叶表附生微生物区系及其有益菌的研究 Ⅱ、有益芽孢杆菌的筛选、初步鉴定和电镜观察

 在分析了同一生态条件下苹果褐斑病抗感品种的叶部微生物类群的基础上,从已获得的7株Bacilus中筛选出3株普遍对苹果轮纹病、炭疽病、霉心病具拮抗作用的菌株,再通过对其菌体代谢液中激素的定性定量分析,筛选出B₀₁₇(经鉴定为Bacilus cereus)作为本实验的益菌.扫描电镜观察表明B₀₁₇能在苹果叶面定殖和繁衍.     

苹果叶面附生微生物区系及其有益菌的研究：IV蜡质芽孢杆菌Bo17代？…

通过对一株既能促进苹果幼苗生长，又能减轻苹果叶果病害的蜡质芽孢杆菌Ｂｏ１７（经鉴定为Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ ｓｐ）的代谢液中生理活性物质的测定，表明该菌株能分泌ＩＡＡ、ＧＡ３、ＡＢＡ、ＣＴＫ等生长激素；Ｂｏ１７能产生ＶＢ１、ＶＢ２、ＶＣ等维生素；能产生与植物抗逆性直接相关的ＳＯＤ酶。能消耗１６种氨基酸，７种矿质元素，营养需求比较广泛。     

益生芽孢杆菌的筛选与鉴定

［目的］筛选具有益生作用潜力的芽孢杆菌。［方法］经高温处理从鸡肠道分离芽孢杆菌,通过抗逆性、抗菌活性等性能检测筛选菌株,通过生理生化分析鉴定菌种。［结果］筛选到2株具有益生作用潜力的芽孢杆菌LBS53和LBS8;经过生理生化试验,鉴定LBS53为枯草芽孢杆菌,LBS8为蜡样芽孢杆菌。［结论］筛选到的2株菌基本具备作为饲用芽孢杆菌制剂菌株的条件。尤其LBS53的优良生物学特性使其在饲料工业中具有良好的应用前景。     

一株胶质芽孢杆菌的筛选和鉴定

从河南铝土矿中分离到菌株LV1-2,将其接种到含伊利石矿粉的浸矿液中，170r／min摇床30℃培养7d，离心后测得接种LV1-2的溶液中的硅浓度比对照液中的增加110．02％，说明LV1-2对伊利石有脱硅作用．通过扫描电子显微镜、革兰氏染色、荚膜染色、鞭毛染色和芽孢染色的观察，生理生化特性的测定，以及16S rDNA序列的比对分析，菌株Lv1-2鉴定为胶质芽孢杆菌．     

产纤维素酶芽孢杆菌C-36的分离筛选及其鉴定

以羧甲基纤维素钠为唯一碳源,从废泥浆中经反复筛选及刚果红鉴定,获得一株高活力纤维素酶生产菌株C-36。与枯草芽孢杆菌标准菌株进行了参比试验,初步鉴定该细菌为枯草芽孢杆菌。生长条件的测定显示该菌生长pH范围较宽,在pH 7.0生长最好,在pH 8.0~10.0的碱性条件下长势较好。摇瓶发酵粗酶液的性质测定表明,该菌所产生的内切酶在pH 7.0左右酶活较高,酶活力为1.280 IU/mL。     

苹果叶面附生微生物区系及其有益菌的研究 Ⅰ.叶面附生微生物区系的初步研究

本文分析了同一生态条件下苹果褐斑病的抗感品种的叶面微生物类群，结果表明：①不同抗感品种的叶片、感病品种中已感病的叶片、未感病叶片的叶面附生微生物数量和组成不同；②苹果叶面附生微生物由真菌、细菌、酵母菌、放线菌及自生固氮菌组成；③在苹果的整个生育期里，真菌中的以Cladosporium、Alternaria、Penicillium等出现频率较高；细菌中Bacillius、Pseudomonas、Xanthomonas等的出现频率较高，放线菌有Streptomyces；酵母菌中Aureobasidium、Cryptoccaceae等的出现频率较高；④在苹果生育期中，苹果叶面微生物的数量在盛花期有所下降，以后逐渐上升，果实膨大期达到最大值。     

3株乳酸芽孢杆菌的筛选、初步鉴定及应用试验

通过对41株产酸芽孢杆菌Bacillus培养物的HPLC分析及抑菌活性和芽孢形成检测,筛选出3株能产生乳酸、有抑菌活性、易形成芽孢的乳酸芽孢杆菌.通过形态染色特性观察、Biolog系统鉴定及16S rDNA碱基序列分析,初步鉴定3株菌为芽孢杆菌SCBacillus sp.SC、芽孢杆菌TRB.sp.TR和蜡状芽孢杆菌SL1 B.cereusstrain SL1.动物饲养试验显示,乳酸芽孢杆菌益生素能提高三黄鸡血清钙、磷、总蛋白、球蛋白、溶菌酶、IgG、IgA含量及脾脏、胸腺和法氏囊指数;饲料中添加5 g/kg的乳酸芽孢杆菌益生素,可使56日龄三黄鸡的平均日增质量提高13.61%,料质量比降低18.37%.     

产角蛋白酶芽孢杆菌的分离筛选与鉴定

从长期堆积腐烂羽毛的土壤中分离出一株能降解羽毛角蛋白的细菌,经形态学观察和生理生化试验,初步鉴定为短小芽孢杆菌,且命名为短小芽孢杆菌B-15。     

一株芽孢杆菌的分离、鉴定及其抗菌效果研究

从健康牙鲆肠道内分离到一株芽孢杆菌(H-1)和鳗弧菌W-1株进行拮抗实验,表明该菌对鳗弧菌具有较强的拮抗作用(抑菌直径33.05 mm)。应用形态学、生理生化及16S rDNA序列分析方法对该菌进行了综合鉴定,结果显示,菌株H-1与枯草芽孢杆菌标准菌株同源性高达98%,故将其确定为Bacillus subtilis。     

产酸芽孢杆菌的筛选及鉴定

旨在筛选可应用于发酵食品的快速产酸芽孢杆菌,从本院实验室保存的300株芽孢杆菌中,以加有溴甲酚紫指示剂的培养基,筛选出在2 h内变色的快速产酸菌株9株,将其在37℃下140 r.min-1摇床培养24 h,筛选出pH值低、活菌数高的菌株L-1。从形态、生理生化反应、全细胞蛋白电泳以及16SrDNA序列比对方面进行分析,最终确定L-1菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。     

雅安周公山土壤苏云金芽孢杆菌菌株资源的筛选和初步鉴定

采集四川雅安市周公山土壤样品320份,利用醋酸钠-抗生素筛选法分离出苏云金芽孢杆菌132株。通过光学显微镜镜检发现,这些菌株均呈典型的苏云金芽孢杆菌形态,其伴孢晶体主要形态有长菱形、短菱形、方形、球形、不定型等。根据GeneBank中公布的cry基因序列,设计了14对杀虫cry基因的通用引物,对这132株分离菌进行的PCR-RFLP分析鉴定表明:在86株菌中分布有除cry18、cry27/29、cry34/35外的11种cry基因型,其中以cry1型最多,其次为cry2型。另46株菌未检测出cry基因。对这132株苏云金芽孢杆菌进行SDS-PAGE蛋白分析,发现杀鳞翅目、鞘翅目和双翅目的约130、80、65、75 kDa的蛋白带最丰富。     

猪源乳酸芽孢杆菌的筛选与鉴定

从健康仔猪粪中分离对仔猪黄白痢有一定防治作用的产乳酸芽孢杆菌.采用普通营养培养基37℃恒温培养24 h分离,将分离到的菌进行抑菌、耐酸、耐胆盐试验,并用相差显微镜对其进行形态特征观察,以及经生理生化试验鉴定.结果表明,两菌株经抑菌试验表明对埃希氏大肠杆菌、伤寒沙门氏菌等均有较强的抑制作用,并且能够抵抗高浓度胃酸、胆盐的...     

贝莱斯芽孢杆菌YX-3的筛选鉴定及其抑菌效果

为了分离出对多种植物病害真菌具有生防潜力的拮抗细菌,通过平板法从银杏外种皮中分离纯化到1株细菌YX-3,采用生理生化试验及16S r DNA测序鉴定细菌的分类地位,利用平板对峙法测定菌株YX-3对6种供试植物病原菌的抑制作用。菌株YX-3菌落呈乳白色,边缘光滑,培养5 d后菌落由饱满转变为中心处塌陷,菌体呈杆状,菌体大小约0.5×3.1μm,芽孢大小约0.5×1.0μm,经革兰氏染色结果为阳性,初步确定为芽孢杆菌,经分子生物学鉴定后,其为贝莱斯芽孢杆菌。贝莱斯芽孢杆菌YX-3对灰梨孢菌、禾谷镰刀菌、藤仓镰刀菌、新月弯孢菌、串珠镰刀菌、尖孢镰刀菌6种供试植物病原菌均具有抑制作用,抑制率在60%～69%之间,贝莱斯芽孢杆菌YX-3对藤仓镰刀菌的拮抗作用较强,抑菌率为69.19%±0.24%,对新月弯孢菌的拮抗作用较弱,抑菌率为60.47%±0.09%。贝莱斯芽孢杆菌YX-3对多种植物病原物具有广谱拮抗作用,具有作为生物防治菌剂的潜在价值。     

产弹性蛋白酶芽孢杆菌的筛选与鉴定

从屠宰场,牛奶场和啤酒厂附近采集的土样和污水中,通过弹性蛋白平板筛选获得209株产弹性蛋白酶的细菌菌株,将弹性蛋白水解圈和菌落直径之比(HC)比值较大的83株菌通过摇瓶复筛后得到一株酶活力较高的菌株SCEL01,产酶活性达到33 u/mL。结合形态学、生理生化特性和16SrDNA序列同源性分析,该菌株被鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。     

产几丁质酶芽孢杆菌的筛选鉴定和酶活力测定

从103份采自中国各地的土样中分离得到了312株芽孢杆菌，用平板透圈法筛选到3株产几丁质酶菌株G1、G2和G3。经鉴定，G1为短芽孢杆菌（Bacillus brevis）；G2为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）；G3为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。它们的几丁质平板上的透明圈直径以G1＞G3＞G2 ，在以Schales‘法测定壳聚糖酶活力时，其摇瓶发酵上清液的酶尖力以G3＞G1＞G2为序。本文首次报道短芽孢杆菌产生几丁质酶和壳聚糖酶。     

两株蜡样芽孢杆菌的鉴定及液体培养基筛选

通过对两株待试芽孢杆菌的卵磷脂酶等13个生理生化特征,4种氮源,12种碳源利用及动物毒理试验(小白鼠),鉴定出两株待试芽孢杆菌为蜡样芽孢杆菌 (Bacillus cereus,B.C).通过pH梯度,温度梯度,NaCl浓度梯度等试验,初步断定此三株菌最适生长条件为pH 7～8,温度37 ℃,NaCl 10 g/L;通过对Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ 5种培养基的液体培养筛选和验证实验,初步断定培养基Ⅲ在保证菌数的前提下,最为廉价,芽孢率也最高,为最适生产用液体发酵培养基;通过动物毒性实验,02、03与09号菌株作为添加剂或药剂(菌数≤109·g-1)均安全无毒.     

猪源枯草芽孢杆菌的分离鉴定及其特性研究

为筛选高生物活性的益生菌菌株,通过热处理从健康猪肠道内容物、粪便、土壤等来源筛选具有较高抗逆性的菌株,综合形态特征、生理生化特性及16S r DNA序列分析进行鉴定;通过耐人工胃液、耐人工肠液、耐胆盐、耐高温、产酶试验、药敏试验、抑菌试验来研究菌株的特性。综合鉴定菌株ZZS16-3为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),其在p H为2.0的人工胃液中,存活率可达到65.8%,在胆盐浓度为0.3%时存活率为51.2%,在100℃处理3 min后其存活率达到11.2%,可产生蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等,对于绝大多数的药物是敏感的,对金黄色葡萄球菌则有明显的抑菌效果。枯草芽孢杆菌ZZS16-3具有较强的抗逆性和潜在的益生性能,为研制微生态制剂提供了优良的菌种参考。     

大庆盐碱土中微生物的分离及芽孢杆菌的鉴定

采用平板稀释法对大庆地区盐碱土壤中微生物进行分离,并对所获得的芽孢杆菌进行分离纯化,利用生理生化指标、菌落形态和芽孢形态进行分类鉴定。在所取土样中分离到细菌、放线菌和霉菌,其中芽孢杆菌的菌落数占总菌落数的43.87%。经初步鉴定得到7株不同的芽孢杆菌,分别为Bacllus alcalophilus,B.subtilis...     

纳豆芽孢杆菌益生菌株B2的筛选与鉴定

根据纳豆芽孢杆菌水解淀粉的生物学特性,采用稀释平板分离法,从中国传统食品豆豉中筛选出2株纳豆芽孢杆菌优势益生菌株。通过比较这2个分离菌株与实验室保存的纳豆芽孢杆菌菌株的耐受性和抑菌能力,从中选出1株最优菌株B2。