利用高效毛细管电泳测定真菌代谢产物吲哚乙酸含量

建立真菌代谢产物吲哚乙酸的高效毛细管电泳检测方法,具体探讨缓冲溶液的种类、浓度、酸碱度,检测波长、有机添加剂及操作电压、进样时间等因素对检测结果的影响.结果表明,以Na<,2>B<,4>O<,7>-NaH<,2>PO<,4>(Na<,2>B<,4>O<,7>浓度为20 mmol/L)为缓冲液,在进样时间20 s、检测波长200 nm、分离高压30 kV、pH值9.0的碱性条件下可以检测吲哚乙酸含量,检测的线性范围为0.1～50.0 mg/mL,回归方程为y=11460x-1226,相关系数r为0.99992,检出限为0.15 μg/mL.     

高效毛细管电泳法用于猪尿中莱克多巴胺含量的测定

建立了高效毛细管电泳测定猪尿中莱克多巴胺残留量的方法。通过对缓冲体系的种类、浓度、酸度、分离时间、分离电压及进样时间等条件对分离影响的研究，明确了电泳分析的最佳条件。在214nm波长处，分离电压为15kV，进样时间为20s，分离时间为12min，80mmol／L的醋酸-醋酸钠（pH5．04）运行缓冲液下，莱克多巴胺得到完全分离。莱克多巴胺质量浓度与电泳峰面积在0．05—100．00μg/mL范围内呈现良好的线性，相关系数为0．9961，最低检测限为0．05μg/mL，添加回收率为82．0％～94．3％。     

毛细管区带电泳法研究杜仲叶中绿原酸含量的变化规律

以豫西南地区不同生长期杜仲叶为研究对象,建立了一种快速、简便、重现性好的毛细管区带电泳(capillary zone electrophoresis,CZE)方法测定杜仲叶中绿原酸的含量。毛细管区带电泳条件如下:运行缓冲液为20 mmol/L硼砂体系(pH值8.5),压力进样6 s,分离电压为20 kV,紫外检测波长为328 nm。该方法在0.03~0.15 mg/mL范围内线性良好,样品的回收率为98.74%~100.15%,RSD为1.5%(n=6)。不同采摘时间杜仲叶中绿原酸含量差异显著,其中6月份含量最高。     

RP-HPLC法测定鸡血浆中头孢拉定浓度

鸡血浆样品用甲醇沉淀蛋白后,过DikmacC18柱(100mm×4.6mm,5μm),柱温:室温;流动相:甲醇-0.02mol/L乙酸胺缓冲液(28∶72),pH4.9;流速:1.0mL/min;检测波长:254nm;检测器:紫外检测器;进样量:10μL。结果表明,检测线性范围为0.5～32.0μg/mL(r=0.9999);最低检测浓度为0.25μg/mL;回收率分别为92.5%、96.4%、98.9%;日内和日间变异系数均小于5%。该方法操作简便、灵敏、重现性好,适用于头孢拉定的临床药代动力学研究。     

毛细管区带电泳法测定中草药中的有机酸

阿魏酸、绿原酸、咖啡酸是三种结构相似的酚酸类化合物,本研究建立了毛细管区带电泳法测定中草药中的阿魏酸、绿原酸、咖啡酸的分析方法,以pH=8.7的150 mmol/L硼酸为缓冲溶液,在0.5 psi进样8 s,分离电压23 kV,检测波长320 nm,温度25℃的条件下进行测定。阿魏酸、绿原酸、咖啡酸的浓度在0.01~0.2 mg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数分别为0.999,0.997和0.999,其检出限分别为0.2μg/mL、0.4μg/mL和0.2μg/mL(信噪比为3∶1)。该方法用于金银花、蒲公英、蜂胶、感冒止咳颗粒等药物中阿魏酸、绿原酸、咖啡酸含量的测定,其样品平均回收率在96.0%~100.4%之间,取得了满意的结果。     

高效毛细管电泳法测定加杨叶芦丁含量的动态变化

建立了加杨叶中芦丁含量测定的高效毛细管电泳方法。用甲醇溶解样品采用超声提取,研究了缓冲溶液浓度、pH值、电压、温度及进样时间等因素对分离检测的影响;确定了最佳的测定条件:50mmol/L硼酸盐缓冲溶液(pH值为9.3),压力进样时间为5s,温度为25℃,运行电压为20kV,检测波长为254nm。在此条件下,峰面积与芦丁浓度具有良好的线性关系,平均回收率达到98.58%,方法准确。同时,利用建立的方法研究了加杨叶生长过程中芦丁含量的变化。     

食品中罂粟碱、那可丁、吗啡、可待因和蒂巴因的测定——高效液相色谱法

S本法建立了高效液相色谱法测定食品中罂粟碱、那可丁、吗啡、可待因和蒂巴因5种非法添加物的检测方法,色谱柱ZORBAX SB-C18(4.6×150 mm 5-Micron),流动相为0.1%甲酸的10 mmol/L乙酸铵溶液-乙腈(10:90),流速0.3 mL/min,检测波长280 nm,进样量10 μL,柱温30 ℃,进行定量分析。在浓度为0.01-10.00μg/mL范围内,标准曲线线性关系良好(相关系数R＞0.9990), 罂粟碱、那可丁、吗啡、可待因和蒂巴因的检出限分别是：0.05 μg/mL、0.03 μg/mL、0.1μg/mL、0.1μg/mL、0.05 μg/mL。五种生物碱加标水平在1.2、1.5 mg/kg时,回收率为88-93%,相对偏差为1.4-3.2%。该方法方便快捷,成本较低,操作简便,分析快速,可用于食品中5种非法添加物检测。     

CZE法用于肾上腺素的优化分离及其在马齿苋中含量测定的研究

[目的]采用区带毛细管电泳法实现去氧肾上腺素、肾上腺素和去甲肾上腺素3种化合物的优化分离,建立测定中药马齿苋中去甲肾上腺素的简便、快速的分离检测方法。[方法]采用未涂层弹性石英毛细管柱(60 cm×75μm i.d.,有效长度50 cm)作为分离通道,以含8 mmol/Lβ-CD的20 mmol/L硼砂(pH=9.5)为运行缓冲溶液,进样0.5 psi(3.447 kPa)×10 s,分离电压15 kV,检测波长215 nm,柱温25℃。[结果]3种肾上腺素在10 min内得到基线分离,且去氧肾上腺素、肾上腺素和去甲肾上腺素分别在16.74～267.84 mg/L(r=0.999 5),16.18～258.88 mg/L(r=0.999 2),16.181～94.16 mg/L(r=0.999 2)浓度范围内呈良好的线性关系,平均回收率(n=6)分别为99.16%、101.24%和98.96%,RSD均小于2.2%。同时,测得中药马齿苋中去甲肾上腺素的质量分数为0.052%。[结论]该方法简便、快速,可用于肾上腺素类药物的分离和含量测定。     

盐酸酸化─蒸馏─离子色谱法测定香菇亚硫酸盐含量研究

建立了盐酸酸化─蒸馏─离子色谱法测定香菇中亚硫酸盐含量的分析方法。香菇在盐酸(体积比1∶3)介质中水蒸汽蒸馏进行提取净化,采用ASRS4型阴离子抑制离子色谱检测,色谱柱为AS18(250 mm×4 mm)不锈钢柱,柱温30℃,23mmol/L KOH溶液作为流动相;流速1.0 mL/min,进样量25μL,电导检测器温度35℃;外标法定量。试验证明,该方法检测线性范围5~50μg/mL,相关系数r=0.9998,最低检出量为2.0×10-9g(S/N=3),最低检出浓度为1.6 mg/kg,香菇中亚硫酸盐添加回收率85.6%~104%,相对标准偏差1.8%~3.4%。该方法能够满足香菇亚硫酸盐质量安全控制要求。     

家蚕体内1-脱氧野尻霉素的提取与检测

对家蚕体内1-脱氧野尻霉素(DNJ)的不同提取与检测方法进行比较、筛选,结果表明,0.05 mol/L盐酸水溶液提取得率较80％乙醇溶液、25％乙醇盐酸溶液提取得率高；提取液pH对衍生化反应影响较大,适宜检测的pH范围为pH＞1.6;荧光检测器较紫外检测器对DNJ的响应强,且检测灵敏度高,检测DNJ的最佳条件为:流动相乙腈:0.1％醋酸配比=40:60 (V/V),激发波长254 nm,发射波长322 nm,流速1.0 mL/min,温度25℃,进样量10 μL.DNJ浓度在2.5～60 μg/mL的范围内线性良好(R2=0.99996),平均回收率为101.1652％,RSD值为2.7116％(n=9).     

HPLC法检测蝉拟青霉中N6-(2-羟乙基)-腺苷含量

为了建立蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae)5704s中N6-(2-羟乙基)-腺苷(HEA)含量测定方法,以去离子水为溶剂,采用超声辅助水浴法提取HEA,基于HPLC法测定其含量。经优化确定色谱条件为Agilent ZORBAX Extend-C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇∶5 mmol/L乙酸铵(含0.1%甲酸),梯度洗脱,检测波长为260 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,进样量为10μL。结果显示,HEA浓度为0.25～100.00μg/mL时,峰面积和HEA含量之间线性关系良好,R²=0.999 9,仪器的检出限为0.25μg/mL,平均回收率为97.73%～108.95%,RSD为0.37%～1.29%,测得样品中HEA含量为0.78 mg/g。该方法简便、快捷、准确、稳定,适用于蝉拟青霉5704s菌丝体中HEA的测定。     

区带毛细管电泳法测定鸡蛋中三聚氰胺的含量

为了建立区带毛细管电泳法分离测定鸡蛋中三聚氰胺的含量,以75μm×53 cm(有效长度45 cm)的未涂层石英毛细管柱为分离通道,工作电压25 kV,温度25℃,进样压力2.7 kPa,50 mmol/LTris-磷酸(pH值8.0)为背景电解质,检测波长236 nm。结果表明:三聚氰胺在1.27~71.23μg/mL范围内呈良好的线性关系,回收率和重复性良好,此方法适合于鸡蛋中三聚氰胺的质量控制。     

高效液相色谱法测定食品中5种非法添加物

本文建立了高效液相色谱法测定食品中罂粟碱、那可丁、吗啡、可待因和蒂巴因等5种非法添加物的检测方法,色谱柱ZORBAX SB-C_(18)(4.6 mm×150 mm 5-Micron),流动相为0.1%甲酸的10 mmol/L乙酸铵溶液-乙腈(10:90),流速0.3 mL/min,检测波长280 nm,进样量10μL,柱温30℃,进行定量分析。结果表明,在浓度为0.01～10.00μg/mL范围内,标准曲线线性关系良好(相关系数R2>0.999 0),罂粟碱、那可丁、吗啡、可待因和蒂巴因的检出限分别是0.05、0.03、0.10、0.10、0.05μg/mL。5种生物碱加标水平在1.2、1.5 mg/kg时,回收率为88%～93%,相对偏差为1.4%～3.2%。该方法方便快捷、成本较低、操作简便、分析快速,可用于食品中5种非法添加物的检测。     

高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量

[目的]建立一种高效液相色谱法测定烟草中烟碱的含量。[方法]色谱柱KromasiL C18(250.0 mm×4.6 mm,5.0μm),流动相为甲醇:0.02 mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液(用磷酸调节pH 6.0)=70∶30;检测波长259 nm;流速1.0 mL/min;进样量20μL;柱温30℃。[结果]溶液浓度在27.568～165.408 mg/L时峰面积与烟碱浓度呈良好的线性关系,相关系数r为0.999 0,方法的检测限(s/n=3)为0.011 mg/L,平均回收率为97.9%,相对标准偏差(RSD)为1.1%(n=5)。[结论]该方法简便易行,结果准确,可作为烟草中烟碱含量的检测方法。     

赤水河下游水产品中辛基酚和壬基酚的测定

建立了固相萃取-反相高效液相色谱法测定水产品中辛基酚和壬基酚残留量的检测方法。样品经三氯乙酸溶液提取,阴离子交换固相萃取柱净化。色谱柱为Shim-pack VP-ODS 250 mm×4.6 mm,检测波长为225 nm,流动相为甲醇-水(体积比为75∶25),流速为0.8 mL/min,进样量为20μL。辛基酚和壬基酚分别在0.13～97.92μg/mL(R2=0.996 1)、0.02～50.00μg/mL(R2=0.999 4)浓度范围内与峰面积成良好线性关系,辛基酚和壬基酚的回收率为87.4%～93.7%,相对标准偏差为1.3%～3.9%。该方法准确、快速、灵敏度高,适用于水产品中辛基酚和壬基酚的检测。     

SPE-RP-HPLC法测定桂圆中嘧菌酯残留量

建立固相萃取-反相高效液相色谱法测定桂圆中残留嘧菌酯的方法.色谱柱Shim-pack VP-ODS 150mm×4.6mm,检测波长为225nm,流动相为V(乙腈)∶V(水)=75∶25,流速为0.6mL/min,进样量为20μL.嘧菌酯在0.03～12.4μg/mL(r=0.999 4)的质量浓度范围内与峰面积成良好线性关系,检测限为0.01μg/mL,嘧菌酯的回收率为98.72%～100.20%,相对标准偏差2.26%～3.88%.该方法操作简便快速,可作为桂圆中嘧菌酯含量监测的控制方法.     

高效毛细管电泳法测定鸡蛋中环丙沙星的研究

[目的]建立高效毛细管电泳测定鸡蛋中环丙沙星含量的方法。[方法]通过对电泳缓冲液类型、离子浓度和pH值、样品溶剂种类、分离电压、分离温度和冲洗程序等电泳条件进行考察,确立测定鸡蛋中环丙沙星的高效毛细管电泳法,并测定电泳参数对检测结果的影响。[结果]在检测波长为277 nm时,最佳电泳条件为:电泳缓冲液为30 mmol/LNa2B4O7-10 mmol/LKH2PO4溶液(pH值8.53),未涂层石英毛细管(50μm×47 cm,有效长度38.5 cm)为分离通道,分离电压为18 kV。在鸡蛋中对环丙沙星的检测结果显示,在最佳电泳条件下,环丙沙星在11 min内实现基线分离,在0.25～80.00μg/ml浓度范围内其浓度和峰面积呈良好的线性关系(R2=0.999 2),平均加标回收率为101.48%,平均RSD为2.466 4%(n=5)。[结论]该方法快速简便、灵敏度高、重现性好,可用于鸡蛋中环丙沙星含量的测定。     

猪饲料中3种大环内酯类药物的高效毛细管电泳(HPCE)检测方法

建立了猪饲料中螺旋霉素、替米考星和泰乐菌素3种大环内酯类药物的HPCE检测方法.确定了该过程中缓冲溶液的pH、缓冲溶液类型及离子强度等电泳条件,同时对毛细管长度、内径及分离电压等仪器参数进行优化,得到分离的最优条件:在毛细管有效长度50 cm、内径75 μm,分离电压25 kV,40 mmol/L磷酸氢二钠-20mmol/L柠檬酸(pH2.5)缓冲液条件下,3种药物在15 min内得到完全分离.3种药物在10～100 μg/g范围内线性良好,R>0.999 3;饲料中螺旋霉素检测限为3.0 μg/g,替米考星检测限为5.0μg/g,泰乐菌素检测限为8.0 μg/g,添加回收率在74.5%～87.4%,方法的日内变异系数<8.1%,日间变异系数<7.0%.本方法简单快速,分离环境为水相,经济又环保,适用于大量样本的筛选.     

高效液相色谱法测定美洛昔康注射液美洛昔康含量

建立了测定美洛昔康注射液中美洛昔康含量的高效液相色谱法.采用C18:色谱柱(5 pm,4.6 mm x150 mm),流动相为V(甲醇):V(水,磷酸调pH值至3.0)=40:60,流速为1 mL/min,检测波长为355 nn,进样量10 μL,柱温为室温.美洛昔康浓度在5～200 μg/mL内,峰面积与浓度的线性关...     

高效液相色谱法测定噻虫嗪和功夫菊酯有效成分含量的研究

[目的]建立高效液相色谱法测定农药复配杀虫剂噻虫嗪和功夫菊酯有效成分含量.[方法]测定噻虫嗪采用Agilent ZORBAX Extend-C18色谱柱(250.0 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1％磷酸(30:70,V/V)为流动相,流速0.8～1.5 mL/min,检测波长230 nm,柱温25℃,进样量为5μL,外标法定量;测定功夫菊酯采用Agilent RX-SIL色谱柱(250.0 mm×4.6 mm,5μm),以正己烷-四氢呋喃(990:10,V/V)为流动相,流速0.8～1.5 mL/min,检测波长278 nm,柱温25℃,进样量10μL,外标法定量.[结果]样品精密度良好,48 h内稳定,样品中噻虫嗪质量浓度均大于141 g/L,功夫菊酯质量浓度均大于106 g/L,检测结果与生产车间按配方投料的结果一致.[结论]所建立的方法简便、快速、准确,可用于复配杀虫剂农药噻虫嗪和功夫菊酯有效成分的测定.