豆类丝核菌次级代谢产物对小白鼠胎儿的致畸作用

将妊娠的雌鼠随机分为5组，分别灌胃给予生理盐水、10mg／kg环磷酰铵（CP）及高、中、低剂量豆类丝核菌次级代谢产物（苦马豆素含量分别为56．62、14．15、3．54mg／kg），临产前剖腹取出胎鼠，将1／2胎鼠用茜素红染色做骨骼畸形观察，另1／2胎鼠用Bouins染色做内脏畸形检查，研究豆类丝核菌次级代谢产物对小鼠胎儿的致畸作用。结果显示，3个剂量组孕鼠增重、外观畸形率、骨骼畸形率、内脏畸形率与空白对照组均差异不显著（P〉0．05），而与CP阳性对照组均差异极显著（P〈0．01）。表明，在此剂量和条件下，豆类丝核菌次级代谢产物对小鼠无明显母体毒性，对胎鼠无发育毒性和致畸作用。     

豆类丝核菌次级代谢产物的急性毒性与致突变性试验

通过经口急性毒性试验、小鼠骨髓微核试验和精子畸形试验对豆类丝核菌次级代谢产物的急性毒性和致突变性进行了研究.结果表明,以该代谢产物中苦马豆素的量计算,小鼠经口急性毒性试验的LD50为226.46mg/kg,LD50的95%可信限为158.49～323.59mg/kg,是治疗肿瘤剂量的14～84倍,属于实际低毒级药物.微核试验和精子畸形试验的各试验组与阴性对照组比较差异均不显著(P＞0.05),说明豆类丝核菌次级代谢产物无明显致突变性;各试验组之间比较差异均不显著(P＞0.05),说明微核的形成和精子畸形的形成与受试物无量效关系.结论:豆类丝核菌次级代谢产物是一种较安全的抗肿瘤药物.     

豆类丝核菌的分离

豆类丝核菌（ Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ Ｌｅｇｕｍ ｉｎｉｃｏｌａ）可引起豆科牧草及植物出现黑斑病（ｂｌａｃｋ ｐａｔｃｈ ｄｉｓｅａｓｅ）,该菌中含有流涎胺 （ Ｓｌａｆｒａｍ ｉｎｅ ） 和 苦 马 豆 素（ Ｓｗ ａｉｎｓｏｎｉｎｅ）;流涎胺能引起牛流涎等副 交感神经兴奋的症状;苦马豆素亦含于疯草（ Ｌｏｃｏｗ ｅｅｄ）中,能引起多种动物实质细胞（包括神经细胞）空泡化,从而出现神经症状。采集１６ 组豆科植物用１ ｇ／ Ｌ Ｈｇ Ｃｌ２冲洗３０～６０ ｓ,再用无菌水冲洗６ 次,取其有病变部分放入察贝克氏、豆芽汁糖琼脂及马铃薯葡萄糖琼脂三种培养基中,２５℃培养２～７ｄ,然后将菌丝转接、分纯,共获１０ 株菌。其菌丝呈蛛网状或棉絮状,菌丝褐色,在分枝处略缢束,离此不远处形成隔膜,菌丝分叉处呈直角;菌核从菌丝出发,颗粒扁平,生长于基质表面,内外颜色一致,菌丝与基质相联,菌核褐或黑色,间呈红棕色,表面粗糙,内外颜色一致,菌核表面细胞稍小,但与内部无明显界限。回接试验用绿豆,把绿豆用１ ｇ／ Ｌ Ｈｇ Ｃｌ２ 处理 ５ ｍ ｉｎ,无菌水洗６ 次,２５ ℃培养,日换水一次,于第４ 日将绿豆移入接有各株菌的少氮半固体培养基的试管内,每管１ 苗,每株菌３      

连续液相萃取法提取豆类丝核菌培养液中苦马豆素

探索从豆类丝核菌培养液中分离苦马豆素的有效方法。豆类丝核菌经改良的Czapek's培养液培养14 d后,所得培养液经浓缩、超声波-水提法、三氯甲烷萃取及二氯甲烷连续液相萃取(60～70 h)等一系列操作后,得到淡黄色粗品,粗品在90℃下减压升华得到白色晶体5 mg。经薄层色谱法(TLC)和气相色谱法(GC)检测其含有苦马豆素。确定使用连续液相萃取法可以从豆类丝核菌培养液中提取分离出苦马豆素。     

香菇多糖对雏鸡新城疫疫苗免疫的增强作用

14日龄非免疫健康罗曼蛋公鸡270羽随机均分为9组,除空白对照组外均用新城疫Ⅳ苗滴鼻、点眼免疫,28日龄二免。在每次免疫的同时,7个药物剂量组在饮水中添加香菇多糖分别达1%、2%、4%、8%、16%、32%和64%,连续3 d,免疫对照组和空白对照组不给药。分别于首免后第7、14、21和28天采血,测定血清抗体效价和外周血T淋巴细胞增殖(细胞A570值);观察给药后鸡的临床反应,于首免后第14、28天称重,计算平均体重。结果显示:香菇多糖各剂量组鸡在各时间点的抗体效价和细胞A570值均高于或显著高于免疫对照组,1%浓度组的抗体效价和2%浓度组的A570值均为最高,显著高于免疫对照组;各剂量组鸡给药后未出现任何不良反应,平均体重均高于或显著高于免疫对照组,1%浓度组最高。研究表明,香菇多糖能显著增强鸡新城疫疫苗的免疫效果,对雏鸡安全,且能促进生长,1%²%饮水浓度的效果最为显著。     

黄芪、紫锥菊、当归等中药组方对鸡免疫功能的影响

试验分5组,每组30只鸡雏,自由采食、饮水,7日龄用鸡新城疫弱毒疫苗进行免疫。1组饲料不加药物,2组在饲料中加盐酸左旋咪唑粉(0.1 g/kg),3、4组和5组在饲料中分别加入(5、10 g/kg和15 g/kg)复方中药,连续喂28 d。在28日龄,采用血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验检测中药对NDV抗体效价的影响;采用称重法检测中药对免疫器官指数的影响;采用MTT法检测中药对鸡脾淋巴细胞增殖的影响;采用ELISA法检测中药对鸡脾淋巴细胞分泌IL-4和TNF-α的影响。结果表明,复方中药组能够提高NDV抗体效价,促进免疫器官发育,刺激淋巴细胞增殖,诱导细胞因子的分泌。表明中药组方能够提高机体的免疫功能。     

怀山药多糖对鸡免疫功能的影响

目的研究怀山药多糖对鸡免疫功能的影响。方法将150羽14日龄蛋公鸡随机分成3组,每组50羽,14日龄用一羽份新支二联弱毒苗点眼滴鼻免疫;同时2个试验组分别肌肉注射怀山药多糖溶液高、低剂量各0.3ml/羽,对照组注射生理盐水0.3ml/羽,连用3d;分别于免疫用药后的第7、14、21、28、35、42天各组随机抽取8只翼下静脉采血,后分离血清,测定新城疫血凝抑制(HI)抗体效价,并于免疫后14、21、28、35、42天随机抽4只放血致死后称重,摘取胸腺、法氏囊、脾脏称重并计算指数。结果试验组特异性免疫抗体和免疫器官指数均高于对照组,在某些时间点差异显著。结论怀山药多糖能增强鸡的免疫功能,可作为免疫增强剂与疫苗同时使用。     

益母草酊剂对鸡新城疫免疫后抗体效价(HI效价)影响

鸡群在接受新城疫苗免疫的同时 ,使用益母草酊剂 ,可以使免疫鸡群血清抗体效价 ( HI效价 )提高 ,在国外已有报道。本试验采用鸡群免疫的同时 ,以益母草酊剂饮水试验 ,于免疫后 1 0天测其血清HI效价 ,结果表明试验组 HI效价值均高于对照组(高出值为 0 .96～ 1 .2 6)。目的在于探索部分中草药对鸡群体内免疫功能的影响关系 ,现报告如下。1　试验材料1 .1　新城疫 系弱毒苗山东齐鲁制药厂提供。1.2　试剂 HI试验用抗原尿囊液稳定抗原 ,HI血凝价为 1 2 80 X;生理盐水 ;微量法血凝抑制试验器材一套。1 .3　益母草山东临沂地区药材采购供应…     

米糠多糖对环磷酰胺诱导免疫抑制鸡外周血T淋巴细胞增殖活性及疫苗免疫效果的影响

为探讨米糠多糖（RBS）对鸡免疫抑制状态的调节作用,将100只7日龄健康蛋用公雏鸡随机分为对照组、环磷酰胺（CTX）组和CTX＋RBS低、中、高3个剂量组.从7日龄起,肌肉注射CTX,1日1次,连注3 d,从10日龄起,CTX＋RBS组灌服RBS,1日1次,连续5 d.14日龄时各组鸡进行新城疫疫苗免疫.在10,21,28,35日龄,测定外周血T淋巴细胞增殖反应活性和ND HI抗体效价.结果显示,CTX组鸡的外周血T淋巴细胞增殖活性和ND HI抗体效价均显著低于对照组（P＜0.01）;CTX＋RBS中、高剂量组鸡外周血T淋巴细胞的增殖活性均显著高于CTX组（P＜0.05或P＜0.01）,但低于对照组（P＜0.05或P＜0.01）;CTX＋RBS中、高剂量组鸡的血清ND抗体效价均显著高于CTX组（P＜0.05或P＜0.01）,且与对照组差异不显著（P＞0.05）.证实,肌肉注射CTX可使健康雏鸡外周血T淋巴细胞的增殖反应活性和NDHI抗体效价显著降低,导致受试鸡免疫抑制;雏鸡口服一定剂量的RBS对CTX引起的细胞免疫和体液免疫抑制具有一定的拮抗作用.     

鸡球虫病对鸡新城疫免疫的影响

我县是生态养鸡大县,山上放养柴鸡已是易县的特色。这种养殖形式决定了鸡与粪便的零距离接触,进而大大增加了球虫病的发病率。近几年来,虽然养殖户对球虫病有所控制;但是发病率仍然很高,而且它对鸡新城疫疫苗抗体效价的干扰尤为突出。严重影响着生态养鸡的发展。下面就我县一起由球虫病引发的鸡新城疫简述如下:     

益生菌对新城疫疫苗免疫雏鸡淋巴细胞增殖能力的影响

本试验以1日龄雏鸡为研究对象,采用细胞培养和MTT检测技术,通过T、B淋巴细胞增殖能力的测定,研究了益生菌对新城疫疫苗免疫雏鸡外周血液和免疫器官T、B淋巴细胞对ConA或PMA增殖能力的影响。结果表明,雏鸡ND疫苗免疫后,益生菌应用雏鸡和ND疫苗免疫雏鸡外周血液和免疫器官中淋巴细胞增殖能力均不同程度高于对照雏鸡,且益生菌联合ND疫苗免疫雏鸡较ND疫苗单独免疫雏鸡,其淋巴细胞增殖能力显著增强。NDV强毒攻击后,无论是益生菌联合ND疫苗免疫雏鸡还是ND疫苗单独免疫雏鸡外周血液和免疫器官T、B淋巴细胞增殖能力均不同程度高于对照雏鸡,而益生菌联合ND疫苗免疫雏鸡淋巴细胞增殖能力又强于ND疫苗单独免疫雏鸡。且益生菌联合ND疫苗免疫雏鸡保护率为100%,ND疫苗单独免疫雏鸡为80%,对照雏鸡发生典型新城疫病全部死亡,表明益生菌可增强ND疫苗的免疫效应,提高ND疫苗免疫雏鸡对NDV强毒攻击的免疫保护力。     

热应激对鸡免疫应答的影响

用ＩＳＡ蛋雏研究２７～３８℃昼夜节律高温对新城疫（ＮＤ）疫苗和传染性法氏囊病（ＩＢＤ）疫苗活苗免疫后体液免疫反应的影响，结果表明：ＮＤ苗或ＩＢＤ苗免疫后立即产生热应激，不论ＮＤ的ＨＩ抗体水平还是ＥＬＩＳＡ抗ＩＢＤ抗体滴度在整个实验过程中均受到显著抑制（Ｐ＜０．０５）；应激后立即免疫ＮＤ疫苗或ＩＢＤ疫苗的鸡，ＨＩ抗体水平在免疫后第５和１４天和ＥＬＩＳＡ抗体滴度在免疫后第９天和１６天与对照组相比显著降低（Ｐ＜０．０５）；应激后２４小时免疫，或免疫后２４小时至若干天遭受高温应激的鸡，抗ＮＤ和ＩＢＤ抗体水平分别在免疫后第１４天和１６天均受到显著抑制（Ｐ＜０．０５）。试验组免疫器官与体重之比与对照组间无显著性差异，但免疫器官的组织学结构都有明显的坏死和萎缩性变化     

类脂作为佐剂对新城疫灭活疫苗免疫效果的影响

对免疫新城疫(ND)类脂灭活疫苗的雏鸡分别于免疫后2、7、14、21、28、35和42 d进行法氏囊、脾脏、胸腺指数测定,以注射生理盐水、ND抗原、类脂的鸡只为对照.结果表明,免疫后2～14 d,各组指数差异不显著,14 d以后,疫苗组与其他组比较差异显著,与类脂组差异不显著.表明,类脂作为佐剂用于制备ND疫苗,具有较强的免疫增强作用.     

鸡眼区相关淋巴组织对ND疫苗点眼免疫应答Ⅱ.眼区局部T淋巴细胞亚群的变化

本研究采用流式细胞仪技术对鸡眼区相关淋巴组织(HALT)在鸡新城疫疫苗点眼免疫后的局部T淋巴细胞亚群的变化进行了研究。研究发现,LaSota 系ND疫苗点眼免疫后眼区相关淋巴组织对ND疫苗可产生良好的细胞免疫应答。免疫组结膜相关淋巴组织(CALT)和哈氏腺(HG)中CD4 T及CD8 T淋巴细胞数量于首免后迅速升高。免疫期间其百分比含量明显高于非免疫组,到40 日龄时,有恢复到正常值的趋势。     

Effect of the Immunity Efficacy of IBD Immune Complex Vaccine on ND La Sota Vaccine

1-day-old SPF chickens and commercial Jingfen chickens were vaccinated with IBD immune complex(IC) vaccine, NDV La Sota vaccine were inoculated simultaneously every one week and every two weeks.NDV La Sota immunization alone was as the control group.At the 2nd, 3rd, 4th and 5th week post inoculation, blood samples were taken and the ND HI antibody were tested.Experimental chickens were challenged with high virulent NDV at the 5th week post inoculation, the protective rate of each group was calculated.The results showed the ND HI antibody were not significant different in the combined immunization of IBD IC vaccine priming and NDV La Sota vaccine boost and NDV La Sota vaccine alone immunization (P>0.05).The results indicated that IBD IC vaccine has no immunosuppression on NDV La Sota vaccine in SPF chickens and commercial Jingfen chickens.     

重组白细胞介素- 2对固始鸡免疫机能的影响

本试验旨在探讨重组白细胞介素- 2（IL- 2）对固始鸡免疫机能的影响。应用大体解剖技术和免疫技术,对重组IL- 2对固始鸡免疫机能的影响进行了研究。注射固始鸡IL- 2的各免疫组的抗体水平均高于鸡志贺氏菌苗组,明显高于空白对照组;各免疫组抗体水平在第2～3周达到最高水平,以后在4～7周内基本保持恒定水平;注射IL- 2的各免疫组的脾脏指数、胸腺指数、法氏囊指数基本上均高于空白对照组和鸡志贺氏菌苗组。重组IL- 2可促进固始鸡免疫器官的生长发育和成熟,增强鸡的免疫机能,可抵抗各种病原微生物的感染。     

复方鸡脾组织提取液及紫术散对鸡新城疫疫苗的增益效应

复方鸡脾组织提取液和中药紫术散可使鸡新城疫(ND)疫苗诱导的鸡血清抗体效价显著上升,维持时间延长,并能提高鸡外周血B淋巴细胞EAC花环形成率、T淋巴细胞ANAE阳性率和大颗粒淋巴细胞(LGL)的百分率.由此认为,这两种制剂对鸡ND苗诱导的体液免疫和细胞免疫都具有促进效应,可作为免疫增效剂.     

鸡白细胞介素2(IL-2)对鸡免疫功能的影响

为研究鸡IL-2对雏鸡免疫功能的影响，进行了3个方面的试验。①对体液免疫及细胞免疫的影响。结果表明，鸡IL-2能明显提高鸡新城疫疫苗免疫后HI水平、T淋巴细胞增殖反应及ANAE^＋细胞百分数；②对雏鸡腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。结果表明使用IL-2与否对巨噬细胞的吞噬功能没有明显的影响；⑧人工感染法氏囊病的防治试验。在攻毒前后注射IL-2，均可明显降低发病率和死亡率。本研究结果表明，鸡IL-2可明显提高特异性免疫应答能力，与疫苗共同注射可作为佐剂提高疫苗的免疫原性，对法氏囊等病毒性疾病具有一定的防治作用。