Chlex-100法快速提取甜瓜白粉病菌基因组DNA

现以白粉病菌分生孢子为材料,用Chlex-100法快速提取白粉病菌基因组DNA,并以此为模板PCR扩增出5.8S-ITS rDNA区段,以建立快速提取甜瓜白粉病菌基因组DNA的方法。结果表明:Chlex-100法是快速提取白粉病菌基因组DNA的高效方法。     

适于SSR分析的树莓基因组DNA的快速提取

通过改良CTAB法对不同品种的树莓幼嫩叶片进行DNA提取,并对得到的DNA进行了电泳检测、含量测定和SSR分析.结果表明:该方法所提DNA的纯度和产率都较高,OD260/OD280比值均介于1.7～1.9之间,OD260/OD230比值介于2.0～2.5之间,无降解现象,RNA去除干净,产率均在50～130μg/mL之间.经SSR-PCR分析条带清晰,多态性好,说明此方法提取的树莓基因组DNA完全适于SSR分析.     

柑桔组织培养材料基因组DNA的快速提取

本文介绍了一种适用于柑桔组织培养材料基因组DNA的快速提取方法,获得的柑桔基因组DNA具有较好的质量和较高的纯度,可满足进一步研究的需要。     

越橘基因组DNA的快速提取及分析

为了从富含多酚、多糖及色素的越橘叶片中提取适用于分子生物学研究的高质量基因组DNA。以越橘幼叶为实验材料,比较了CTAB、SDS、高盐低pH值3种提取方法,获得了一种以CTAB法为基础的分离高质量完整DNA的简便、快速方法。用紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳、RAPD-PCR、酶切等方法对获得的DNA进行了分析,结果表明,快速CTAB法所提取的DNA产量高、质量好,完全能够满足RAPD、PCR等分子生物学实验的要求。     

改良CTAB法提取冷季型草坪草基因组DNA的研究

为获得高质量的冷季型草坪草基因组DNA,用改良和优化常规CTAB提取方法,提取冷季型草坪草基因组DNA,并对所得DNA的质量和浓度进行了检测.结果表明:改良CTAB-B法要好于常规CTAB法和改良CTAB-A法,提取的基因组DNA的OD260/OD280在1.8～1.9之间,电泳条带清晰,RNA消化彻底,DNA无明显降解,其含量和纯度均能满足基因工程操作的要求,且酶切效果理想.     

快速粗提取致病疫霉菌菌丝DNA的方法

为满足规模分析病菌群体、认识病菌的群体遗传变异特征,以致病疫霉菌(Phytoph-thorainfestans)为材料,建立快速、简便的用于PCR扩增的病菌基因组DNA。分别大量和微量提取基因组DNA,比较2种方法所提取的DNA用于SSR标记的PCR扩增效果。结果表明:以微量粗提法所得的病菌基因组DNA质量足以用于PCR扩增,与大量提取所得的DNA的PCR扩增非常一致,并且粗提的DNA与大提的DNA一样都可以在-20℃条件下保存。基于PCR扩增的遗传标记广泛用于病菌群体的分析,该研究建立的基于玻璃珠振荡法提取疫霉菌菌丝基因组DNA的微量提取方法需材少、简便且快速有效,为规模分析疫霉菌群体奠定了基础。     

氯化苄法提取植物内生放线菌基因组DNA

以植物内生放线菌菌株GL0806123为试材,用氯化苄快速提取植物内生放线菌菌株GL0806123基因组DNA。建立用氯化苄提取植物内生放线菌基因组DNA的方法。结果表明:用氯化苄法能够成功提取植物内生放线菌菌株GL0806123基因组DNA,以此为模板PCR扩增出16S rDNA区段,测序后可用于菌种鉴定。氯化苄法是一种快速提取植物内生放线菌基因组DNA的方法。     

甜樱桃SSR标记的选择性扩增微卫星( SAM) 法筛选

 以甜樱桃‘红灯’为试材, 应用选择性扩增微卫星( SAM) 法分离、克隆了100个SSR序列, 其中81个非重复, 可用。加上搜索数据库所获得的1个SSR序列, 一共82个序列用于特异引物的设计。仅从69个序列的77个基因座设计出特异引物。合成38对特异引物, 对其中的36个基因座进行检测。其中19对引物扩增出相应大小的片段, 另外8对引物扩增出非预期片段。最后, 以27个甜樱桃种质的基因组DNA为模板, 从27对可扩增出带的引物中, 筛选出多态性引物24对, 获得了24个甜樱桃基因座特异性SSR标记。     

改良CTAB法提取草莓基因组DNA

草莓中多糖多酚含量丰富,同DNA结合生成凝胶状物,使其无法用于后期研究,恰当的草莓DNA提取方法一直未能找到。在前人工作基础上,改进了提取植物DNA的CTAB法,得到的草莓基因组DNA纯度较高,可用于后期实验所需。     

莫利甜樱桃试管快繁技术研究

利用莫利甜樱桃的茎段做外植体进行试管快繁 ,适宜的增殖培养基为MS BA 0 .8mg/L IAA0 .2mg/L ,生根培养基为 1 / 2MS NAA 0 .5mg/L ,增殖系数可达 1 0倍左右 ,生根率达 92 .5 % ,选 5片以上有效叶的健壮苗移入蛭石基质 ,移栽成活率可达 95 %以上。     

赤霉素（GA3）对甜樱桃果实性状的影响

在果实生长第Ⅲ期的始期，用ＧＡ３溶液直接喷洒果实及叶片，果实单果重比对照增加１．２０３～２．６５５ｇ，果实直径比对照增加０．１４１～０．４５３ｃｍ，果汁的可溶性糖含量比对照提高０．１５％～２．２０％，Ｆ值均达到α＝０．０１水平．果实整齐度及着色程度均显著优于对照。综合果实性状，以１０×１Ｏ－６（１Ｏｐｐｍ）为最佳浓度。     

冬季甜樱桃日光温室内的温度变化规律

明确了晴天时,甜樱桃日光温室上午8~10时为气温升温阶段,11~13时为气温高温阶段,14~16时为气温降温阶段。昼间地温变化幅度为2.3℃,连续晴天时日平均地温上升约0.3℃。阴天时,日光温室气温和地温均保持稳定下降趋势,连续阴天日平均地温下降幅度较大,是连续晴天温度上升速度的2倍。     

Genetic relatedness of sweet cherry (Prunus avium L.) cultivars from Ukraine determined by microsatellite markers

Microsatellite (SSR) markers were used to characterise 23 sweet cherry cultivars of Ukrainian, and four cultivars of non-Ukrainian, origin. To assess their genetic diversity and relatedness, 11 pairs of primers were applied to microsatellite loci, resulting in amplification of 66 SSR alleles. The mean value of the number of different alleles, and the polymorphic index content, amount to 7.333 and 0.700, respectively, demonstrating a significant genetic diversity of the investigated sweet cherry cultivars. Four highly polymorphic SSR loci (EMPAS02, EMPAS06, PceGA34, UDP98-412), which belong to the list recommended by the European Cooperative Program for Plant Genetic Resources, can be used as a minimum genetic marker set for identification of the majority of the studied cultivars; however, for successful discrimination of the most similar cultivars, more markers, located on all chromosomes of sweet cherry, appear to be necessary. Application of unweighted variable-group method using averages clustering allowed elucidation of the relatedness among the sweet cherry varieties, and showed that the Ukrainian cultivars combine genetic material of local, western European, and probably Caucasian origin; however, the origin of several cultivars still remains unclear, and should be studied additionally.     

甜樱桃休眠花芽内源激素的高效液相色谱测定

以甜樱桃休眠花芽为试材，提取生长素(IAA)、赤霉素(GA3)、玉米素(ZT)、玉米素核苷(ZR)和脱落酸(ABA)5种内源激素，通过设定不同的溶液配比，摸索出了适宜分离这5种内源激素的流动相及检测条件，得到了满意的分离效果。     

甜樱桃SSR体系的建立、优化及应用

为摸索适宜甜樱桃的SSR反应体系,利用正交设计对Mg2+、dNTPs、引物、Taq酶和模板DNA等5种因素4个水平进行筛选和优化,20μL反应体系中,Mg2+、dNTPs和引物的最适浓度为1.5mmol/L、0.2mmol/L、0.4μmol/L,Taq酶宜加入1U,模板DNA应加入10～40ng;引物的最佳退火温度为56.0～62.8℃。用10对引物及建成的反应体系对10个供试品种扩增,6%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,品种间DNA谱带多态性丰富,共有29个等位位点,证实该体系稳定可靠。     

4个甜樱桃品种在德州的引种表现及设施栽培技术

对引入山东德州的4个甜樱桃品种美早、萨米脱、布鲁克斯、拉宾斯进行了日光温室栽培试验,对其性状表现进行了观察。结果表明,4个品种均表现生长良好,适应性强,结果正常,果实品质优良,可以作为德州地区日光温室的栽培品种发展。简述了4个甜樱桃品种在日光温室的栽培技术。     

6个甜樱桃品种ACO基因多态性的检测

乙烯在植物果实成熟过程中起着重要的作用,ACC合酶(1-aminocyclop ropane-1-carboxylic acid synthase,ACS)和ACC氧化酶(1-aminocyclop ropane-1-carboxylic acid oxidase,ACO)是植物乙烯生物合成途径的限速酶。通过DNA序列分析,以不同果实成熟期的6个甜樱桃品种(Prunus avium L.)为材料,检测ACO基因的多态性。获得甜樱桃ACO基因约1 kb,与桃(P.persica)ACO基因(GenBank登录号:AF532976)序列的同源性达96%,其预测的氨基酸序列与桃、梅(P.mume)、美洲李(P.armeniaca)和欧洲李(P.domestica)等ACO的氨基酸序列同源性超过95%。该片段包括4个外显子和4个内含子,内含子符合GT-AT规律。用DNAMAN进行多序列比对分别在内含子2和内含子4内发现2个多态性简单重复序列(AT)n。内含子2有3种片段:即(AT)6、(AT)7和(AT)8;内含子4有2种片段,即(AT)5和(AT)6,组合后共得到4种ACO单倍型。研究在甜樱桃ACO基因座上发现2个SSR标记,为进一步研究ACO基因多态性与果实成熟期相关性奠定基础。     

ALA对低温胁迫下甜樱桃子房和花柱AsA-GSH循环的调控

为探索低温胁迫对甜樱桃子房和花柱AsA-GSH循环的影响,以及外源ALA对低温伤害的缓解机理,以甜樱桃‘红玛瑙’为试材,分析了不同浓度ALA对低温胁迫下甜樱桃子房和花柱AsA-GSH循环的调控作用。结果表明,喷施适量的ALA可有效降低低温胁迫下甜樱桃子房和花柱中超氧阴离子自由基(O₂^·-)和过氧化氢(H₂O₂)的积累,提高还原型抗坏血酸(AsA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量,降低氧化型抗坏血酸(DHA)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量,提高AsA-GSH循环中相关酶的活性。其中以浓度为50 mg/L的ALA作用效果最好,75 mg/L的ALA作用效果次之。为进一步明确ALA缓解甜樱桃花器官低温伤害的作用机制提供了理论依据。     

提高大樱桃矮化砧木吉塞拉试管苗移栽成活率的研究

研究了影响大樱桃矮化砧木吉塞拉试管苗移栽于温室和大田成活的因素,认为影响试管苗温室锻炼成活的最重要的因素是镰刀真菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｅｑｕｉｓｅｔｉ）引起的立枯病,使用壮苗在干净的河沙基质上培养,发病率低,成活率高,最高可达９４％以上。露天炼苗,砂壤土栽植,遮荫网覆盖等措施可提高试管苗在大田的成活率,最高可达９５％以上,几万株试管苗已成功地移栽于大田。