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1.
对中国１３个省市分离到的２９个肾病变ＩＢＶ毒株作了Ｓ１基因的ＲＴ－ＰＣＲ／ＲＦＬＰ特性鉴定用相同的一对引物,８个毒株－广东０１／８３,河南／０４／９４,河南／０５／９４,内蒙／０１／９３,江苏／０１／９３,河南／０１／０３、天津／０２／９３,内蒙／０２／９３,经ＲＴ－ＰＣＲ扩增获得了包含有Ｓ１基因ｃＤＮＡ的１７３４ｂｐ的片段,河南／０６／９５的为－１０００ｂｐ左右的片段;其它２０个毒株没有结果。经 相似文献
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鸽Ⅰ型禽副粘病毒F基因克隆及序列分析 总被引：1，自引：0，他引：1
利用ＲＴ－ＰＣＲ技术获得了编码鸽Ⅰ型禽副粘病毒ＧＤ－Ｐ１分离株Ｆ０裂解位点附件８８４ｂｐ的Ｆ基因ｃＤＮＡ片段,并将其克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ Ｅａｓｙ质粒中,获得了重组质粒Ｔ－ｐＰＭＶ－Ｆ－Ｉ,核酸序列测定和分析表明,该片段与新城疫病毒强毒株Ｆ４８Ｅ９和ＨＥＲ／３３相应区域的同源性分别为８７．５％和８８．１９％,与新城疫病毒弱毒株ＬａＳｏｔａ和Ｂ１株的同源性分别为８３．８３％和８４．１５％。该病毒Ｆ０裂 相似文献
3.
本研究利用对应于ＰＲＲＳＶＡＴＣＣＶＲ－２３３２株及ＬＶ株ＯＲＦ５基因保守序列的１对均为２５个碱基的引物１００５ＰＳ、１００６ＰＲ对ＰＲＲＳＶ中国分离株Ｂ１３进行ＲＴ－ＰＣＲ,扩增出了包括完整ＯＲＦ５基因的ＤＮＡ片段,片段长约７３０ｂｐ。将此片段定向克隆入ｐＵＣ１８载体的ＥｃｏＲＩ和ｓｔＩ位点之间,获得了Ｂ１３ＯＲＦ５基因与ｐＵＣ１８载体的重组质粒。通过ＥｃｏｒＩ／ＰｓｔＩ、ＥｃｏｒＩ／ＨｉｎｄⅢ 相似文献
4.
为探索鸽新城疫的流行特点，在分子水平上阐明鸽新城疫病毒分离株鸡新城疫毒株之间的相互关系，我们用ＲＴ－ＰＣＲ技术获得了分离株Ｆ０裂解位点附近３００ｂｐ的基因片段，将其克隆到ｐＵＣ１９载体上得到一重组克隆ｐＮＤＶ２１，序列分析表明，插入片段与鸡析城疫强毒Ｔｅｘａｓ相应区域的同源性为８７．７％，而与弱毒株Ｄ２６／７６及Ｌａ Ｓｏｔａ的同源性分别是９１．７％和９８％。 相似文献
5.
从云南省弥勒县采集典型病株接种蔓陀萝，植斑分离，经免疫电镜（ＩＥＭ）鉴定为ＴＭＶ（Ｔｏｂａｃｃｏ ｍｏｓａｉｃ ｖｉｒｕｓ），在红花大金元品种中以ＴＭＶ普通株作对照进行致病力测定，确定为强毒株系。以烟草花叶病毒ＲＮＡ云南强毒株系为模板。根据国内外研究结果自行设计、合成寡核苷酸引物，通过ＲＴ－ＰＣＲ体外扩增，Ｅ．ｃｏｌｉ菌株ＤＨ５ａ克隆，获得了云南烟草５４ＫＤ（ＴＭＶ复制酶）全基因片段，顺序分析表明 相似文献
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用RAPD和RFLP定位水稻香味基因（Ⅱ） 总被引：3，自引：0，他引：3
用ＲＡＰＤ引物Ｊａｓ１．５从亲本ＣＴ９９９３中扩增出的多态性产物１．５ｋｂ片段，经ＮｃｏＩ酶切后获得的一条０．５ｋｂ片段，将其制备成ＲＦＬＰ探针ｊａｓ５００，选用覆盖整个水稻ＲＦＬＰ图谱的１２５个随机克隆和ｊａｓ５００对ＣＴ９９９３／ＫＤＭＬ１０５的Ｆ２群体进行检测。 相似文献
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RT-PCR和Digoxigenin标记的核酸探针检测鸡传染性支气管炎病毒试验研究 总被引：1，自引：0，他引：1
用２对已发表的引物和１对自行设计的引物对同一ＩＢＶＨ１２０株进行ＲＴ－ＰＣＲ，分别获得了Ｓ１基因上与引物设计相一致的１７２０ｂｐ，２２８ｂｐ，６０２ｂｐ，的扩增片段。用自行设计的引物对７个毒株（Ｈ１２０，Ｈ５２，Ｍ４１，Ｃｏｎｎ，Ｇｒａｙ，Ｔ，Ｈｏｌｔｅ）和５个分离株（宜毒，上毒，云毒，ＨＫ，１１８）的含毒尿囊液或纯化病毒进行ＲＴ－ＰＣＲ。结果除Ｈｏｌｔｅ株，２个分离株（宜毒，云毒）外，其余均被成功地扩增出６０２ｂｐ的片段。将ＩＢＶＨ１２０株０６ｋｂＰＣＲ产物用Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记为探针，分别与上述各ＩＢＶ毒株的核酸及其扩增产物进行核酸杂交，均呈现阳性反应，而该探针不与ＩＢＤＶ和ＮＤＶ的ＤＮＡ，ＥＤＳ－７６病毒的ＤＮＡ及正常鸡胚尿囊液抽提物反应。ＲＴ－ＰＣＲ和核酸杂交技术提供了直接从尿囊液中快速检测出病毒，作为诊断ＩＢＶ的新方法。 相似文献
9.
为了从植物组织中快速检测李坏死环斑病毒(Ｐｒｕｎｕｓｎｅｃｒｏｔｉｃｒｉｎｇｓｐｏｔｖｉｒｕｓ,ＰＮＲＳＶ) ,根据该病毒ＲＮＡ 3序列设计引物 ,对感病和健康组织总ＲＮＡ进行ＲＴ—ＰＣＲ ,结果从感病组织中扩增出了大约 450ｂｐ的目的版段 ,而健康组织中无此扩增带。将此ＰＣＲ产物连接到ｐＧＥＭ -Ｔ -ｅａｓｙ载体 ,转化大肠杆菌ＤＨ5α菌株 ,得到了含有目的片段的重组子 ,并采用双脱氧终止法进行序列分析 ,结果与美国报道的李坏死环斑病毒 (ＰＮＲＳＶ)ＲＮＡ 3序列对应部分核苷酸基本一致 (其同源性达93 6%) ,这表明应用ＲＴ -… 相似文献