桑叶中东莨菪素含量的测定

东莨菪素（scopoletin）是桑树的次生代谢产物之一，具有抗病毒、抗菌、抗凝血、抗炎、止痛等广泛的药理活性。采用75％乙醇浸提的方法，从27份桑树资源的桑叶中提取东莨菪素，并用HPLC法对其含量进行测定。结果显示，在所测各材料中，东莨菪素含量较高的有火桑、西庆1号、嘉陵16、沙二，含量分别为：164．2375μg／g、141．4000μg／g、109．0500μg／g、104．0375μg／g，在种间以及种内的不同材料间无规律可循。检测结果为东莨菪素的进一步研究和桑叶中功能性成分的开发利用提供了理论参考。     

莨菪类药在兽医临床上的应用

随着现代医药技术的不断发展,人们先后从莨菪类植物中提取分离出阿托品、山莨菪碱、东莨菪碱等成分。这些成分具有对抗乙酰胆碱毒蕈碱作用,即属Ｍ受体阻滞剂。其在药物分类上为抗胆碱药,统称为莨菪类药。目前,莨菪类药物上在兽医临床上的应用日趋广泛,现将其在兽医临...     

静松灵与东莨菪硷对犬复合麻醉的实验观察

东莨菪硷与静松灵对马属动物复合麻醉取得了满意的效果。静松灵的类似化合物二甲苯胺噻嗪(Xylazine)在国外广泛应用于猫、犬等的基础麻醉。在国内,静松灵用于小动物麻醉的报道不多。根据有关试验,静松灵有明显的抑制呼吸和心脏运动及镇痛不全的缺点。为此,我们选用东莨菪硷与静松灵配合,进行了犬的复合麻醉(以下简称复麻)的实验观察,获得了较好的效果,现报道如下。     

唐古特莨菪中生物碱的分离、鉴定与生物活性研究

研究唐古特莨菪中生物碱对农业害虫(螨)的生物活性,可为利用该植物研制新型植物源杀虫(螨)剂提供理论依据。本文采用柱色谱分离法从唐古特莨菪地上部分分离得到2个生物碱类化合物,通过MS、NMR确定了其化学结构,分别为莨菪碱、东莨菪碱。采用微量点滴法和玻片浸渍法测定了莨菪碱、东莨菪碱对甘蓝蚜、桃蚜等9种蚜虫和朱砂叶螨、二斑叶螨等4种叶螨的触杀活性。结果表明,莨菪碱对禾谷缢管蚜、桃粉蚜、豆蚜和绣线菊蚜具有较强的触杀作用,LC₅₀值分别为257.863,275.459,344.645和344.717 mg/L。东莨菪碱对豆蚜和禾谷缢管蚜具有较强的触杀作用,LC₅₀值分别为311.585和392.309 mg/L。对照药剂鱼藤酮对甘蓝蚜和棉蚜具有较强的触杀作用,LC₅₀值分别为399.542和436.124 mg/L。对甘蓝蚜等9种蚜虫的触杀作用,莨菪碱强于或与东莨菪碱相当;对豆蚜、禾谷缢管蚜的触杀作用,莨菪碱和东莨菪碱均强于鱼藤酮;对甘蓝蚜、桃蚜和棉蚜的触杀作用,莨菪碱和东莨菪碱均弱于鱼藤酮。莨菪碱和东莨菪碱对截形叶螨、山楂叶螨、二斑叶螨和朱砂叶螨具有较强的触杀作用。2种生物碱对4种叶螨的毒力相当,对二斑叶螨和朱砂叶螨的毒力(201.027~224.172 mg/L)均高于截形叶螨和山楂叶螨(257.014~332.698 mg/L)。对照药剂鱼藤酮对截形叶螨、山楂叶螨的LC₅₀值分别为196.847和224.592 mg/L,其毒力高于莨菪碱和东莨菪碱。     

甘青赛莨菪粗提物的杀虫活性研究

采用虫体浸渍法和叶碟浸渍法研究了甘青赛莨菪粗提物对粘虫、菜青虫和麦长管蚜虫的杀虫活性。试验结果表明,甘青赛莨菪叶甲醇粗提物对粘虫5龄幼虫的触杀活性最强,其次为茎和根皮甲醇粗提物,稀释5倍液的校正死亡率分别为28.09%,18.30%和17.07%。叶甲醇粗提物对4龄菜青虫的触杀活性最强,其次为茎和根皮甲醇粗提物,稀释10倍液的校正死亡率分别为66.67%,64.29%和60.00%。叶、茎和根皮甲醇粗提物对4龄菜青虫的拒食活性均很弱,对麦长管蚜具有一定的触杀活性,对棉蚜和桃蚜无触杀活性。     

复方山莨菪注射液治疗大肠杆菌性仔猪腹泻效果观察

应用研制的复方山莨菪注射液治疗黄白痢仔猪５７头和大肠杆菌性断奶腹泻仔猪１２９头，治愈率分别为９８．２％和１９３．０％，平均治疗次数分别为１．７次和２．１次；而同期设立的抗菌素（庆大霉素或氯霉素）对照组的治愈率分别为９３．１％和５０．０％，平均治疗次数为４．６次和４．１次．二组疗效差异显著。８３头同窝病仔猪的分组治疗试验结果是：在３．３天内，复方山莨菪注射液治疗组头均增重为０．２７８ｋｇ，而抗菌素组为０．１１６ｋｇ，差异显著．证明复方山莨菪注射液治疗大肠杆菌腹泻仔猪优于现常用的庆大霉素、氯霉素等。     

莨菪类药在兽医临床上的应用

现代发病学认为,微循环功能障碍,是各种疾病发生的共同病理基础。茛菪类药物具有抗乙酰胆碱的作用,对微循环有双向调节作用,可改善微循环,能达到异病同治的功效。兽医临床上常用的此类药有阿托品、东茛菪碱、山茛菪碱和樟柳碱等。     

酸牛奶加东莨菪碱治疗幼犬腹泻

幼犬断奶后,由饲料为主,母犬奶为辅的营养方式转变为完全依靠饲料,易发生腹泻。用酸牛奶加东莨菪碱治疗,具有易于被幼犬接受、疗程短、安全等优点。 1.临床表现 多在断奶后2～3天内发病。表现为精神不振,食欲减退,口腔干燥或粘滑湿润,舌体胖嫩或皱缩,有白色或淡黄色舌苔,口色潮红或发白,肠音亢盛,腹泻,排出泥样或水样粪便,酸臭,污染会阴部、内股侧、尾及飞节等处,严重时,腹部卷缩。     

川桑(Morus notabilis)枝条的药用化学成分分离鉴定

桑树的枝条是传统的中药材,以我国特有野生桑种质资源川桑(Morus notabilis)的枝条为材料,提取分离药用化学成分。桑枝粉首先采用95%乙醇粗提、减压浓缩,然后分别用硅胶柱色谱、D101大孔吸附树脂柱色谱、反相C_(18)柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱色谱技术以及制备型HPLC色谱仪等,对提取物中的化合物进行富集和分离、纯化,共得到13种单体化合物。经波谱分析以及与已有研究文献的相关信息对比分析,鉴定13种化合物分别为川桑素A(1)、桑辛素I(2)、桑呋喃B(3)、桑酮T(4)、桑酮C(5)、桑酮U(6)、5,5'-双丁氧基-2,2'-双呋喃(7)、异香草醛(8)、丁香醛(9)、东莨菪素(10)、反式-3,5-二甲氧基-4-羟基肉桂醛(11)、对羟基-苯甲醛(12)、川桑素L(13)。编号为2~13的12种化合物系首次从川桑中分离的已知化合物,其中,化合物13(川桑素L)为一种新的天然化合物。     

桑叶次生代谢产物分析

通过色谱分离与波谱鉴定,对桑叶次生代谢产物进行了研究。分离并鉴定了10个化合物:5,7-二羟基香豆素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5,7-d ihydroxycoum arin-7-O--βD-glucopyranoside,1);5,2,′4′-三羟基黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5,2,′4-′trihydroxyflavone-7-O--βD-glucopyranoside,2);东莨菪苷(scopolin,3);丁二酸(butaned ioic,4);3,4-二羟基苯甲酸(3,4-d ihydroxybenzoic ac id,5);山柰酚-3-O-(6″-O-2-丁烯酰)-β-D-吡喃葡萄糖苷[kaempferol-3-O-(6″-O-2-butenoyl)--βD-glucopyranoside,6];山柰酚-3,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(kaempferol-3,7-d i-O--βD-glucopyr-anoside,7);尿嘧啶(urid ine,8);胸腺嘧啶(thym ine,9);D-半乳糖醇(D-galactitol,10)。其中化合物5-10为首次从桑属植物中分离得到;化合物2为新天然产物;化合物1为新化合物。     

桑树中稀有木脂素Dadahol A的分离鉴定

木脂素是一类由苯丙素衍生物(C6—C3)聚合而成的化合物,具有抗肿瘤等重要生物活性。利用95%乙醇浸提及柱层析和薄层层析的方法,从人工三倍体桑树品种嘉陵20号中分离得到一种木脂素化合物,经波谱结构鉴定,确定其为稀有木脂素Dadahol A。该化合物的相对分子量为698,分子式为C39H38O12。从桑树中分离获得该化合物,有助于对桑树的生物活性物质和木脂素类化合物的研究。     

猪乳风味物质的SDE-GC-MS和SPME-GC-MS分析鉴定

研究采用同时蒸馏-气相色谱-质谱(SDE-GC-MS)和固相微萃取-气相色谱-质谱(SPME-GC-MS)法对猪乳风味物质进行分析鉴定。结果表明:同时蒸馏提取鉴定出分子量较小的挥发性物质21种,其中顺-1-甲基-4-(1-甲基乙基)-环己烷、萜烯醇和反-1-甲基-4-(1-甲基乙基)-环己烷为3种主要成分;而固相微萃取提取鉴定出分子量相对较大的挥发性物质22种,其中芥酸、环己基甲酸十二醇酯和十六烷基环己基甲酸酯为主要的3种;同时蒸馏提取的风味物质出峰时间均早于固相微萃取,综合两者分析显示,猪乳中主要风味成分是酯、脂肪酸、烷烃、醛、醇、酮等化合物。研究结果对模拟猪乳乳香风味,开发仔猪用饲料香味剂具有一定的参考辅助作用。     

Gas chromatography/mass spectrometry identification and quantification of isazophos in a famphur pour-on and in bovine tissues after a toxic exposure.

A sample identified as "Warbex pour-on," expected to contain 13.2% famphur, and bovine tissue samples from 2 heifers that died after exhibiting signs of organophosphate intoxication were analyzed by gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS). A product formulation problem was suspected because brain cholinesterase activities were depressed in both animals. Electron impact (EI) GC/MS of the pour-on revealed 9.7% famphur and an unidentified peak with approximately 76% of the peak area of the famphur. The unidentified peak showed a molecular ion at m/z 313, with a single Cl isotope cluster. Methane chemical ionization (MeCI) MS confirmed the molecular weight at 313 (1 Cl). A search on the molecular formula C9H17N3O3PSCl yielded a single match, isazophos. EI and MeCI GC/MS of reference isazophos confirmed the identity of the suspect peak. The concentration of isazophos in the pour-on was determined to be 6.0%. Famphur and isazophos were identified by their EI spectra and GC retention times in extracts of liver and brain from the 2 deceased animals. A GC/MS procedure utilizing selected ion monitoring (SIM) was developed for quantification of isazophos in liver, kidney, muscle, and fat of additional affected animals sacrificed at various times after exposure. Isazophos remained in animal tissues for as long as 94 days after topical exposure. Isazophos was present in fetal liver 70 days after exposure of the dam. High levels (6-3,500 ppm) of isazophos and famphur remained on the skin at 39 days postexposure.     

Production and some properties of cytotoxins produced by Campylobacter species isolated from proliferative enteropathy in swine.

Cytotoxin production by Campylobacter species isolated from proliferative enteropathy in swine was examined. Twenty-one of 29 strains of C. hyointestinalis, 10 of 27 strains of C. mucosalis and 10 of 10 strains of C. coli were cytotoxin positive. By the gel filtration chromatography of C. hyointestinalis culture filtrate, cytotoxin activities were observed in two peaks (fraction I and fraction II). Most of the cytotoxic activities lay in fraction I, which is heat-labile, trypsin-sensitive and the molecular weight was estimated at 40,000. On the other hand, fraction II cytotoxin was heat-stable, trypsin-insusceptible and molecular weight was approximately 1,000.     

水牛KDM1A/LSD1基因的克隆分析及真核表达载体的构建

本研究旨在对水牛组蛋白去甲基化酶KDM1A基因进行克隆,分析并构建真核表达载体,为研究其在水牛体细胞克隆胚胎中的作用提供基础。首先提取水牛卵巢总RNA,利用RT-PCR技术克隆得到水牛KDM1A基因并对其进行生物信息学分析。结果表明:水牛KDM1A基因编码区全长2 625 bp,预测编码874个氨基酸;水牛KDM1A与其他物种同源性较高且与生物分类学保持一致;其所编码蛋白分子式为C2375H3855N805O776S24,理论分子质量为56 872.11;其二级结构由19个α螺旋,47个β折叠,25个T转角和无规则卷曲组成;其高级结构在水牛、黄牛、人之间具有较高的相似性;本实验构建了水牛pcDNA3.1(+)-KDM1A真核表达载体,转染pcDNA3.1(+)-KDM1A可以显著提高水牛耳部成纤维细胞(BFFs)中KDM1A的表达水平;还发现卵母细胞中KDM1A的表达水平显著高于BFFs。     

高效凝胶过滤色谱法测定肽的相对分子量分布

采用高效凝胶过滤色谱法,对肽粉、酵母核苷酸和自溶酵母粉三种肽类产品的相对分子量大小及分布进行了测定。结果表明,此三种产品的相对分子量分布范围集中在2000Da以下,寡肽含量丰富,其中含有一定量的游离氨基酸和氨基酸残基。该方法简便快捷、准确性高、重复性好,适合肽类产品分子量(<1 0KD)分布的分析检测。     

牦牛死亡结构域蛋白(FADD)基因克隆与生物信息学分析

死亡结构域蛋白(FADD)是在生物细胞里起到信号转导作用的一种蛋白,在胚胎发育、细胞凋亡过程中发挥重要的生物学活性。实验以成年母牦牛的卵巢RNA为模板,利用RT-PCR技术克隆牦牛FADD基因,并进行了生物信息学分析。结果表明:牦牛FADD基因CDS区长度630 bp,编码209个氨基酸,蛋白分子式C996H1632N300O307S7,整个蛋白质带负电荷,总共原子数量3 242;分子质量23.0 ku,半衰期30 h;理论等电点6.11;消光系数18 240;不稳定指数49.08,属于不稳定蛋白;脂肪系数104.64,平均亲水系数-0.168,预测FADD蛋白为亲水蛋白。系统进化树表明,牦牛与哺乳动物亲缘关系近,与鱼亲缘关系最远,符合物种进化规律。FADD蛋白质的二级结构α螺旋、自由卷曲、β-转角和延伸链,占靶蛋白的比例分别为71.29%、22.97%、3.83%和1.91%,与三级结构相符。牦牛FADD蛋白有13.0%位于细胞核、52.2%位于细胞质、8.7%位于细胞外、13.0%位于线粒体、4.3%位于高尔基体和8.7%位于细胞骨架。该研究成功克隆出牦牛FADD基因CDS区,为进一步研究其功能提供了一定理论依据。     

牦牛FSHB基因的克隆及生物信息学分析

通过PCR技术以及生物信息学软件,对牦牛FSHB基因进行克隆和生物信息学分析。结果表明:牦牛FSHB基因的c DNA序列区长645 bp,编码的氨基酸129个;同源性和分子进化树分析结果显示,其CDS区碱基序列与普通牛的关系最近,然后依次是水牛、山羊、绵羊、梅花鹿、马、人和小家鼠。牦牛FSHB蛋白的分子量14683,分子式C637H978N170O193S18,等电点6.27,总原子数1996,半衰期估计30 h,不稳定指数45.8,脂肪指数61.9;该蛋白属于非跨膜蛋白,α螺旋、延伸链、β转角和无规卷曲分别为30、29、6和64个,所占的比例分别为23.26%、22.48%、4.65%和49.61%。该基因编码的氨基酸在第18位点和第19位点可能存在信号肽。该研究探明牦牛FSHB基因与其他种属的差异,为进一步研究牦牛FSHB基因结构、功能及其与繁殖功能的关系提供了理论基础。     

Isolation of bovine complement factor H

A bovine serum protein, initially recognized by its inhibitory effect on the hemolytic activity of the bovine alternative pathway was isolated from fresh bovine serum by polyethylene glycol precipitation and chromatography on DEAE-Sephacel, CM-Sephadex A-50 and Sephadex G-200. The protein, a single chain polypeptide with an apparent molecular weight of 158,000, was identified as factor H, a regulatory protein of the alternative complement pathway. Functional characterization of this protein as factor H was based on the following properties: binding to C3b, inhibition of factor B binding to C3b, cofactor activity in the cleavage of C3b by factor I, inhibition of fluid phase alternative pathway C3 convertase (C3b.Bb) formation and activity, and species-specific inhibition of the alternative pathway mediated hemolysis of heterologous erythrocytes. A monospecific rabbit antiserum against bovine factor H failed to react with human serum factor H.     

Isolation of the fifth component of the bovine complement system

Bovine C5 has been isolated from fresh bovine serum by a five-step procedure: polyethylene glycol precipitation, sequential ion-exchange chromatography on DEAE-Sephacel and CM-Sephadex, hydroxylapatite chromatography, and affinity chromatography. The purified C5 was a protein of apparent molecular weight 202,000 +/- 9,000 composed of two chains: an alpha-chain of molecular weight 127,000 +/- 5,000 and a beta-chain of molecular weight 74,000 +/- 2,000. The alpha-chain was cleaved by Sepharose-CVF.Bb (a cobra venom factor (CVF)-induced C3/C5 alternative pathway convertase) in the absence of any C3 or C3b. The monocarboxylic acid form of K-76, a sesquiterpene compound isolated from the culture filtrates of Stachybotris complementi, inhibited the alternative pathway of bovine serum, and the inhibited hemolytic activity was restored, in a dose dependent manner, by bovine C5. This provided the basis for a C5 functional assay throughout the purification procedure. The purified C5 showed species specificity and was functionally distinct from bovine C3.