野菊花提取物对小鼠血清NO、NOS的影响

目的：探讨野菊花提取物对小鼠血清中一氧化氮（NO）、一氧化氮舍酶（NOS）的影响，以研究野菊花对动物心血管系统的药理作用机理。方法：将小鼠随机分为试验组和对照组，试验组小鼠腹腔注射野菊花提取物（2ml／kg），l：K／d，连续7d。用Griess试剂法测定血清中NO的含量；化学比色法测定血清中NOS的含量。结果：试验组小鼠血清中NO、NOS含量均显著高于对照组（P〈0．05）。结论：野菊花提取物通过增强NOS活性而增加NO含量，这可能为其舒张血管内皮、降低血压的作用机理之一。     

肺动脉高压综合征发病过程中肉鸡血清和肺脏iNOS和cNOS活性变化

常规饲养条件喂养的大群AA肉鸡，按临床症状分为肺动脉高压组（M组），肺动脉高压腹水组（S组）和正常对照组（C组）。分别测定21、28、35和42日龄S组、M组和C组肉鸡的腹水心脏指数（AHI）、全心与体重比（WH／BW）、平均肺动脉高压（mPAP）、血清一氧化氮（NO）水平、肺脏和血清cNOS和iNOS活性。试验结果表明：（1）S组和M组全心与体重比值（TV／BW）以及S组血清NO水平均从28日龄起显著或极显著高于C组（P〈O．01或P〈0．05）；（2）S组肺组织cNOS水平显著或极显著低于C组（P〈0．01或P〈0．05）；（3）S组肺组织iNOS在21、35和42日龄显著或极显著高于C组（P〈0．01或P〈0．05）；（4）S组从28日龄起血清中cNOS和iNOS与C组差异显著或极显著（P〈0．01或P〈0．05）；（5）正常对照组肉鸡血清中iNOS活性在21、35和42日龄均显著或极显著低于血清中cNOS活性（P〈0．01或P〈0．05）。此研究结果提示cNOS和iNOS活性的变化与PHS发病机理有着密切的关系，并在其中发挥着重要的作用。     

浅谈实验室水质检测几项操作的注意事项

本文基于实验室水质检测操作中四个常规测定参数—微生物、高锰酸盐指数、氨氮、总氮,在操作过程中对测定结果产生影响的注意事项进行分析。     

ELISA操作中某些非特异性反应因素的消除

酶联免疫吸附测定(ELISA)是一种敏感性高、特异性强、简便易操作的酶免疫检测技术,近年来得到了广泛应用。但在实际应用中,容易产生非特异性反应,造成假阳性结果,影响结果判定。造成这些非特异性反应的因素,除了所用试剂原因之外,还有不少是由于ELISA操作过程中产生的。笔者根据几年来工作实践,将这些非特异性反应因素及其消除方法小结如下。     

诱导型一氧化氮合酶与动物疾病

一氧化氮（nitric oxide,NO)是近年来引起人们特别注意的无机气体自由基，有独特的理化性质和生物学活性，几乎对全身各个系统都有影响，其中诱导型一氧化氮合酶及其催化产生的NO在动物疾病的发生、发展过程中都起着重要的作用。     

LAMP技术操作的影响因素及注意事项

正环介导等温扩增,由日本研究人员Notomi等~([1])于2000年发表,通过DNA链上的6个区域设计出4个不同引物,还可添加环形引物反应以进一步缩短反应时间~([2])。LAMP以其反应快速、特异性强和灵敏度高等特点被应用到众多领域,且效果明显。近年来,在不同学科间的应用也日益频繁,并受到了广泛的认可。但由于其特殊的扩增原理和反应条件,在操作过程中需要引起注意,本文列举出LAMP操作中的影响因素及注意     

对影响禽流感血凝和血抑制试验因素的探讨

血凝和血凝抑制试验是检测禽流感抗体效价的一种常用方法，具有操作简便、快速、准确和灵敏等特点，在基层工作中应用广泛。但影响试验结果准确性的因素很多。本文从血液样品、试验器材、试剂和操作过程方面来进行分析．旨在避免或减少不利因素的影响．提高试验的准确性。     

一氧化氮在动物低氧适应中的生理和分子机制

近年来,国内外学者在对高原民族和高原动物低氧适应相关基因的探索中揭示了藏族的低氧适应生理机制;高含量的一氧化氮(nitric oxide,NO)舒张血管并导致高速度的血流,高速度的血流弥补了高海拔低氧。可见一氧化氮在动物低氧适应中起着重要的作用。作者对低氧条件下一氧化氮的合成、传递、生物学效应及调控表达机制进行了综述。     

确定ELISA试验阳性临界值的探讨

固相免疫酶技术建立二十多年来，在血清学和病原诊断研究中应用广泛。围绕ELISA不能深入发展的主要问题之一是至今结果判定尚无统一标准，直接影响其敏感性和特异性。在ELISA具体操作中，确定临界值随机性很大，受主观因素影响较大，易造成试验判定出现偏差。ELISA操作中存在的误差有三：技术误差，操作误差和统计误差。技术误差主要指抗原抗体间的非特异交叉反应，及抗原抗体的纯度、效价和使用浓度等。操作误差主要指试验器材处理方式和加样准确性，显色反应是结果判定是否准确的关键。在诸试验条件一致情况下，co值还受当时的温度…     

电器孵化机的调试方法

电器孵化机就是提供一定的禽胚发育所必须的条件而进行人工孵化的设备。其中温度、湿度、 通风和翻蛋是孵化所必须的，不可缺少的条件。 如果其中一项出现差错，轻者影响孵化、出雏率，重者造成种蛋全部损失。因此， 正确的调试方法是孵化前的准备工作至关重要。现就孵化机在孵化前要进行的准备工作介绍如下。 　　一、孵化蛋车及翻蛋机构的正确调试 　　翻蛋系统的调试、 保养不当会造成蛋车和传动系统变形、损坏，电机过载烧坏，掉蛋、翻蛋角度不均、 不准而压坏种蛋的现象。翻蛋系统主要有：蛋车、 导转、传动系统组成，在操作过程中必须了解三个机构的关系。蛋车工作是由传动机构带动的， 如果工作中强行操作会导致不良结果， 因此翻蛋系统在入孵前必须正确调试。调试操作过程如下： 　　1.开机检查是否有自动翻蛋功能。     

一氧化氮与病毒感染研究进展

一氧化氮(NO)作为细胞毒性介质在动物体内由巨噬细胞等效应细胞经过微生物或细胞因子等成分活化后产生广泛的生物学活性,在体内发挥着生理和病理的双重角色,在医学领域起着不容忽视的作用。它在抑制和杀灭病毒等微生物,参与机体抗感染免疫和防御功能的同时,对机体正常的组织细胞也有损伤作用。而且,细胞因子、脂多糖、免疫调节剂、微量元素、氨基酸及部分药物等对NO与病毒感染有着重要的影响。     

静脉注射L-氨基胍对肉鸡肺动脉压及其相关指标的影响

按常规饲养条件饲养AA雄性肉鸡120羽，30日龄时随机分为试验组（T组）和对照组（C组）。T组肉鸡静脉注射L-AG（40mg／kg），C组肉鸡静脉注射生理盐水。分别在注射L-AG和生理盐水1、2、4h后测定平均肺动脉压（mPAP）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性、原生型一氧化氮舍酶（cNOS）活性、一氧化氮（NO）含量、红细胞压积（PCV）、电解质浓度、pH、超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化氢酶（CAT）活性和丙二醛（MDA）含量。结果显示：（1）试验组mPAP、NO含量和iNOS活性均显著或极显著低于对照组（P〈0．05或P〈0．01）；（2）PCV和Ca^2＋在给药后2h和4h与对照组差异显著（P〈0．05）；（3）K^＋浓度在给药1h和2h后显著或极显著低于时照组（P〈0．05或P〈0．01）。结果表明，L-AG通过抑制iNOS活性，引起肉鸡肺动脉压的升高，从而推测iNOS具有调节肉鸡体内mPAP的作用并与肉鸡肺动脉高压综合征发生有着密切的联系。     

一氧化氮合酶与寄生虫感染

一氧化氮(NO)在体内由L-精氨酸在一氧化氮合成酶(NOS)的催化下生成。它是一种重要的信使分子,参与血管、气道平滑肌的调节,神经递质的传递,细胞杀伤,肿瘤细胞的溶解及内分泌激素的释放过程,与许多疾病的发生、发展密切相关;既在机体多个系统多种细胞中具有广泛的生理功能,又可能参与多种疾病的发生过程。寄生虫感染时,动物机体内由其诱发产生各种细胞因子。细胞因子激发一氧化氮合酶基因,其转录产生iNOS(induciblenitricoxidesynthase)mRNA,由iNOSmRNA指导一氧化氮合酶(iNOS)生成。iNOS以精氨酸为底物合成NO。本文就NOS的结构、生成和NO对寄生虫的作用以及影响NO抗寄生虫感染的因素作了综述。     

角蛋白酶酶活测定条件的研究

以提高羽毛粉做底物测定角蛋白酶酶活方法的准确性,试验研究了酶的制备方式、测定波长、试剂添加顺序、底物粒度大小、反应体系振荡频率、底物浓度、酶促反应温度、时间和pH值等因素对酶活的影响。结果表明:传统测定方法中使用的底物量并不符合酶促反应动力学中底物要饱和的要求,试剂添加顺序和底物粒度对酶活测定结果也有很大影响;羽毛粉测定角蛋白酶活性的最佳方法为:40 W超声波处理30 s的发酵液直接离心制取粗酶液,以45 mg过40目筛的羽毛粉做底物,按缓冲液(pH值8.8)、底物、酶的顺序加入试剂,于45℃水浴中反应,每隔15 min振荡一次,反应1 h后加入2 ml10%的终止剂TCA,于波长280 nm处进行测定。优化后条件下测得的角蛋白酶活性较优化前提高了约2.1倍。     

黄芪多糖对小鼠腹腔巨噬细胞iNOS基因表达及NO生成的影响

研究黄芪多糖(APS)在体内对小鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因表达及产生一氧化氮(NO)的影响。分别按5、25、50、100、200mg/kg体重,连续1周以腹腔注射方式给予小鼠APS。分离小鼠腹腔巨噬细胞,QRT-PCR检测小鼠腹腔巨噬细胞中iNOS的基因表达量;培养细胞24h,硝酸还原酶法检测上清中的NO含量,培养的单层巨噬细胞做吞噬中性红试验。结果显示,APS(100mg/kg和200mg/kg)可显著地促进巨噬细胞iNOS基因的表达和NO的产生,并显著(50、100、200mg/kg)增强巨噬细胞吞噬中性红功能,APS的作用呈浓度依赖性。体内条件下APS增强巨噬细胞功能的机制之一可能是促进巨噬细胞iNOS基因的表达进而催化产生NO。     

兽药制剂中氯霉素的ELISA检测方法的研究

为了检测兽药制剂中氯霉素的非法添加,优化反应条件和前处理方法,建立直接竞争ELISA方法。该方法检出限为1 mg/kg,添加回收率为81.00%～112.00%,批内和批间变异系数均小于10%,与国标仪器方法检测结果一致性好。本文建立的氯霉素直接竞争ELISA方法具有较高的精确度和稳定性,操作简单,检测时间短,可满足兽药制剂中氯霉素的检测。     

不同年龄家兔各个脑区NOS活性变化规律的研究

采用生化检测技术,借助分光光度计和一氧化氮合酶(NOS)活性测定试剂盒测定了不同年龄家兔各个脑区内NOS活性,对NOS活性在不同年龄家兔脑内衰老变化规律进行了研究。结果表明:①各年龄组小脑组织中NOS含量最高,其次是间脑、脑干、大脑皮质。②兔脑NOS活性在仔兔时基本发育到成年兔水平,以后随年龄而增长,直至衰老,到老年兔时出现显著的衰老变化,兔脑NOS活性以成年兔最高,老年兔最低。结果提示:随着动物的衰老,NOS活性降低,NO的合成量相应减少,以至于不能正常发挥NO生理条件下的调控作用,这可能与老龄动物呈现出的脑功能衰退、血管硬化和血压升高等变化有关。     

沙葱多糖对绵羊外周血淋巴细胞的调节作用研究

试验研究沙葱多糖（Allium mongolicum regel polysaccharides）对绵羊外周血淋巴细胞增殖及一氧化氮（NO）、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的影响。试验设置不同浓度（0~250μg/ml）的沙葱多糖和不同的作用时间（24、48、72 h），以MTT比色法检测淋巴细胞增殖；以培养24 h的绵羊外周血淋巴细胞为研究对象，以微板法、硝酸还原酶法分别测定NO及iNOS。结果表明，沙葱多糖浓度为50~100μg/ml时抑制淋巴细胞的增殖，当浓度为150~250μg/ml时促进淋巴细胞的增殖，且作用时间为24 h时增殖效果最强。较低浓度的沙葱多糖（50~100μg/ml）抑制淋巴细胞分泌NO，随着浓度的加大，NO分泌量增加。沙葱多糖对淋巴细胞内iNOS 活性没有显著影响（P>0.05）。因此，沙葱多糖能够影响淋巴细胞的增殖，释放 NO 及 iNOS，并且呈现量效和时效关系，说明沙葱多糖对绵羊外周血淋巴细胞具有免疫调节作用。     

巨菌草纤维素的酶解条件

纤维素酶酶解植物纤维的过程受许多因素的影响。选取酶解时间、纤维素酶用量、底物浓度、缓冲液pH值和反应温度5个因素对巨菌草(Pennisetum sp.)纤维素酶解条件进行初步研究。结果表明,各因素对该试验的影响效果依次为纤维素酶用量＞酶解时间＞底物浓度＞缓冲液pH值＞反应温度。酶解巨菌草纤维素的最佳条件:反应时间60 h,酶用量44.8 U·g-1,底物浓度10 g·L-1,pH值5.0,酶解温度45 ℃。在该条件下进行酶解反应,酶解液中还原糖含量为95.509 mg·g-1。该研究为巨菌草作为制备生物乙醇的材料提供了理论依据。     

影响琼脂扩散检测禽流感的若干因素

在诊断禽流感的工作中，一些技术条件对免疫扩散反应有一定的影响。首先遇到的问题，就是抗原和阳性对照血清反应结果不发生肉眼可见的致密沉淀线。我们知道，沉淀是蛋白质性沉淀原在含有抗体（沉淀素）的免疫血清影响下自溶液中发生沉淀的现象，沉淀作用的条件之一要有特异性的沉淀血清。当遇到抗原与抗体不发生作用或者是模糊不清的沉淀线，除抗原和阳性血清自身问题外，另一方面是技术条件的影响。如琼脂深度、酸碱度、抗原与抗体的比例、反应孔的排列和距离、琼脂板孔内表面干燥及琼脂板与平皿底部部分脱离等，使特异性的抗原和抗体（阳…