DNA疫苗及其在流感病毒疫苗研究中的应用

DNA疫苗能够诱导广谱免疫反应，已被广泛应用于预防性疫苗和针对各种感染性疾病、肿瘤、自身免疫性疾病和过敏性疾病的免疫治疗的临床试验。自DNA疫苗技术出现，A型流感病毒就与其紧密地联系在一起，已被广泛应用于小鼠和其他动物模型以研究DNA疫苗的免疫作用和机理。     

核酸疫苗研究进展

核酸疫苗是90年代发展起来的新方法，它是继病原体疫苗、亚单位疫苗之后的第三代疫苗。核酸疫苗着重于DNA疫苗的研究，直接用“裸”质粒DNA(未与类脂之类传送工具相连的DNA)提供具有免疫原性的抗原，并经MHCⅠ类、Ⅱ类分子加工提呈，能够诱导机体针对质粒编码的抗原产生强而持久的细胞免疫和体液免疫，刺激机体产生免疫记忆。     

DNA疫苗免疫佐剂的研究及应用

DNA疫苗是近年来出现的一种新型疫苗,能够诱导机体免疫系统产生体液免疫和细胞免疫,在预防和治疗人和动物的疾病中发挥重要的作用。随着DNA疫苗研究的深入和扩展,用于提高DNA疫苗免疫效果的免疫佐剂也逐渐开展起来。本文就新型细胞因子佐剂、趋化因子和协同刺激分子佐剂、补体分子佐剂和CpGDNA佐剂的研究作一综述。     

核酸疫苗的应用现状和发展前景

核酸疫苗是将编码某种抗原蛋白的外源基因（DNA）与质粒重组后直接导入动物细胞内，并通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白，诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。因此，核酸疫苗也称基因疫苗。它包括DNA疫苗和RNA疫苗，其中DNA疫苗由于不需任何化学载体，故又称裸DNA疫苗。同单链RNA相比，双链DNA具结构稳定、操作简单等许多优点，所以DNA疫苗比RNA疫苗更受学者们的青睐。１核酸疫苗在疾病防治方面的应用自１９９０年，Wolff发现DNA能直接诱导机体产生免疫应答以来，通过国内外学者的不断努力，…     

弓形虫重组蛋白质疫苗和DNA疫苗的试验研究

目的:研究分析弓形虫重组蛋白质疫苗和DNA疫苗的实验研究方法。方法:拟分别构建含弓形虫靶抗原SAGl和GRA2的重组蛋白质疫苗和DNA疫苗,辅以合适的佐剂,优化免疫策略,选择合适途径免疫BALB/c小鼠,检测疫苗诱导小鼠的细胞免疫和体液免疫水平,最后进行免疫鼠抗攻击感染实验,观察小鼠生存时间,评价疫苗和佐剂的免疫保护效果,探讨疫苗和佐剂的作用性质与机理。结果:重组酵母表达载体pGAP-SAGl.GRA2成功构建,经PCR、酶切和测序鉴定正确;重组蛋白SAGl-GRA2在毕赤酵母中分泌表达,经Western blotting鉴定具有免疫原活性。弓形虫重组DNA疫苗pVAXl-GRA2、pVAXl-SAGl和pVAXl-SAGl-GRA2以及基因佐剂pVAXl-SPreS2成功构建,分别在HFF细胞中瞬时表达目的蛋白,经RT-PCR鉴定mRNA正确转录,Wester boltting鉴定表达产物具有免疫活性。结论:以SAG1-GRA2作为弓形虫蛋白质疫苗能够诱导小鼠产生体液免疫,同时也能够诱导小鼠产生Th1型细胞免疫,具有一定程度的抗弓形虫感染保护作用。     

DNA疫苗在动物医学中的应用

近年来，许多畜禽病毒性传染病已不能依靠传统疫苗如灭活疫苗、弱毒疫苗等对其进行防治，DNA疫苗的出现使得这一状况得到改善。编码病毒、细菌和寄生虫等不同种类抗原基因的质粒DNA，能够引起脊椎动物如哺乳类、鸟类和鱼类等多个物种产生强烈而持久的免疫反应。DNA疫苗被人们称为继灭活疫苗和弱毒疫苗、亚单位疫苗之后的“第三代疫苗”，具有广阔的发展前景。１DNA疫苗简介DNA疫苗又称核酸疫苗或基因疫苗，是编码免疫原或与免疫原相关的真核表达质粒DNA（有时也可是RNA），它可经一定途径进入动物体内，被动物宿主细胞摄取后能转录…     

出血性大肠杆菌感染疫苗的研究进展

介绍了国内外出血性大肠杆菌感染疫苗的研究概况，包括Stx类毒素疫苗、亚单位疫苗、结合疫苗、减毒活菌苗及一些新型疫苗研究的技术发展和最新成果。其中Stx类毒素疫苗肠外注射免疫在兔子和猪中已经显示具有保护效果；利用弱毒霍乱弧菌或沙门氏菌载体表达Stx的减毒活菌苗免疫小鼠能产生中和肠毒素的血清抗体；此外还发展了多种以特异性多糖为基础制备的结合疫苗；近年来通过构建真核细胞质粒pStx2B和pStx2△A发展的DNA疫苗，诱导小鼠产生了抗Stx2体液免疫反应。     

动物预防用DNA疫苗的研究进展

动物预防用DNA疫苗又称核酸疫苗或基因疫苗，是编码免疫原或与免疫原相关的真核表达质粒DNA(有时也可是RNA)，它可经一定途径进入动物体内，被动物宿主细胞摄取后能转录和翻译表达出抗原蛋白，此抗原蛋白能够刺激机体产生非特异性和特异性两种免疫应答反应，从而起到免疫保护作用。     

表达H1N1、H3N2猪流感病毒HA基因重组质粒在小鼠的免疫效力

应用已构建的真核表达质粒pCI-H1-HA、pCAGGS-H1-HA、pCI-H3-HA和pCAGGS-H3-HA作为DNA疫苗，利用BALB／c小鼠进行免疫保护试验，通过测定不同免疫期HI抗体滴度、分析攻毒后BALB／c小鼠体重变化及肺脏病毒含量，评价DNA疫苗的免疫效力。结果表明：构建的DNA疫苗均可诱导小鼠产生免疫力；BALB／c小鼠体重变化统计学分析显示，免疫组与对照组差异极显著（P〈0．01），pCAGGS表达载体构建的DNA疫苗免疫效果优于pCI表达载体构建的DNA疫苗（P〈0．05）。     

DNA疫苗研究进展

DNA疫苗是一种新型的疫苗，能够诱发体液免疫和细胞免疫。本文简单介绍了DNA疫苗作用机理，产生的免疫反应，在畜禽传染病中的应用及免疫影响因素，并分析了DNA疫苗的安全问题及其应用前景。     

以乳酸杆菌为载体的口蹄疫病毒VP1基因DNA疫苗猪体免疫试验

给猪口服和肌肉注射以乳酸杆菌为载体的口蹄疫病毒VP1基因DNA疫苗（L．acido SFMD-1），以正向间接血凝试验（IHA）和MTT方法分别检测了免疫后FMDV VP1抗体的动态变化和特异性T细胞增殖反应情况，并与商用FMD油佐剂疫苗、裸质粒FMDV VP1基因DNA疫苗诱导的特异性免疫抗体水平进行了比较。结果显示，口服组猪在免疫后第21d抗体效价达到了1：2^7.7，而肌肉注射组猪为1：2^3.3。加强免疫后2周，口服免疫组抗体水平下降到1：2^5.3，到第3周快速上升到1：2^8；与此相对应，肌肉途径免疫组猪抗体效价缓慢地从1：2^5.3上升到1：2^6.7。口服途径和肌肉注射途径的刺激指数（SI）分别为1．93和2．00，2种免疫途径都可以诱导特异性T细胞增殖反应。证实，该疫苗能够在猪体诱发VP1特异性T细胞和B细胞反应，以乳酸杆菌为载体是DNA免疫和预防猪口蹄疫的一种极有前景的方法。     

核酸疫苗的研究进展

核酸疫苗又称基因疫苗，包括DNA疫苗和RNA疫苗。目前研究最多的是DNA疫苗，由于其不需要任何化学载体，又称裸DNA疫苗，主要是利用基因重组技术直接将编码抗原蛋白的外源抗原基因导入动物体细胞内，在宿主细胞中表达外源抗原基因，诱导宿主产生对该抗原的免疫应答，从而使被接种动物获得免疫保护。     

核酸疫苗研究进展

核酸疫苗 (DNA疫苗 )是 2 0世纪 90年代诞生的一种新型疫苗 ,具有能够激发机体全面免疫反应、不散毒、便于储存和运输等优点。抗原递呈细胞在 DNA疫苗诱导产生的 CTL反应中起主导作用。 DNA疫苗的运输载体 (脂质体、减毒突变的胞内菌等 )、佐剂 (细胞因子等 )以及疫苗接种方法和途径等因素可以提高和改变 DNA疫苗的免疫效果与反应类型。 DNA疫苗自诞生以来 ,其安全性一直是人们关心的问题 ,也是 DNA疫苗得以日后应用于临床的关键。     

DNA疫苗的研究进展

大约十年前,人类进入第三次疫苗革命阶段,其起始标志是Wolff在一次实验中偶然发现,他将裸露的DNA注射到肌肉中结果得到了表达的蛋白产物.自1993年起,Robinson首次报道了禽流感病毒(AIV)DNA疫苗研究成功,紧接着Ulmer证实了表达流感病毒核蛋白的质粒DNA不仅能诱导小鼠的特异性细胞免疫反应,而且可对不同血清亚型的异源流感病毒产生交叉免疫保护.在大量实验工作的基础上,一种新的疫苗——DNA疫苗诞生了,其概念可表述为将编码某种抗原蛋白的外源基因(DNA)与质粒重组后,直接导人动物细胞内,并通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白,诱导宿主细胞产生对该抗原蛋白的免疫应答,从而达到预防和治疗疾病的目的.     

基因工程疫苗在兽医领域的应用

基因工程疫苗即利用DNA重组技术，将病原的保护性抗原编码基因片段定向插入载体或表达系统中，使之能够实现体内或体外的高效表达进而制成疫苗，如亚单位疫苗、重组活载体疫苗、基因缺失疫苗和核酸疫苗等。相较于传统疫苗，基因工程疫苗能不断刺激机体免疫系统产生长期免疫；避免因病原体变异而造成免疫逃避；一个质粒载体可克隆多个抗原基因组成多价疫苗，提高了疾病的防治效率和效果，是未来的主要发展和研究方向之一。文章对基因工程疫苗在兽医领域的研究进展进行了概述，旨在为相应研究与实践提供一定参考。     

禽类DNA疫苗研究进展

新型疫苗的研究对于禽类传染病的防制意义重大。传统疫苗是基于抗原刺激机体产生特异性抗体的原理,它们大多数激发机体的体液免疫,很难启动细胞免疫。脱氧核糖核酸(DNA)疫苗作为第3代疫苗,具备传统疫苗和其它基因工程苗不可比拟的优点,能够诱导全方位的免疫反应且使用更安全更方便,DNA疫苗是将外源基因与真核质粒重组后直接导入细胞内,使外源基因在宿主细胞内表达合成保护性抗原蛋白。这是模拟病毒自然感染提呈过程,既能产生细胞免疫,又能产生体液免疫。文章对DNA疫苗在禽类应用的可行性和应用研究新进展作了综述。     

核酸疫苗的特点及在畜禽疫病防制上的应用前景

核酸疫苗，又称基因疫苗，包括DNA疫苗和RNA疫苗，其中DNA疫苗又称为裸体DNA疫苗或裸DNA疫苗。与传统疫苗相比，核酸疫苗具有很多优点，被誉为是第三次疫苗革命。本文主要就核酸疫苗的特点、免疫机制与在畜禽疫病防制上的应用前景等方面简述如下，供参考。     

PRRSV GP5蛋白及猪IL-18基因共表达核酸疫苗免疫原性试验

本试验通过分子克隆技术分别构建了单独表达猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）GP5基因以及PRRSVGP5基因和猪IL-18基因共表达的重组核酸疫苗质粒（pEGFP—GP5和pEGFP—ILl8-GP5）,并进行仔猪免疫原性研究,对构建的PRRSV核酸疫苗所诱导的体液免疫和细胞免疫水平进行检测,进一步研究了PRRSV核酸疫苗免疫效果以及猪IL-18基因对PRRSV核酸疫苗免疫调节作用的影响。同时,调查了商业上应用不同类型的PRRSV疫苗诱导的免疫效果,并与核酸疫苗免疫效果进行比较。结果表明,IL-18作为免疫佐剂在疫苗免疫猪后诱导的病毒特异性细胞免疫反应方面具有很好的调节作用,共表达IL18-GP5蛋白能够明显的改善DNA疫苗的免疫效力,增强抗PRRSV的免疫保护。因此,DNA疫苗做为一种新一代疫苗可用于对抗高致病性PRRSV感染。     

牛分枝杆菌三价组合及融合DNA疫苗免疫效果的研究

分泌性蛋白Ag85B、MPB64和ESAT-6为Mycobacterium boris的主要保护性抗原,在诱导机体免疫反应和抵抗感染中发挥重要作用。本研究以peDNA3．1（＋）为载体,构建了由上述3种抗原基因构成的不同疫苗：3基因融合（peDNA-MPB64-Ag85B-ESAT-6,pCMAE）DNA疫苗和三价（pcDNA-Ag85B＋peDNA-MPB64＋pcDNA-ESAT-6）DNA疫苗,评价各种DNA疫苗诱导的体液免疫、细胞免疫及以BCG攻毒后的免疫保护水平。试验结果表明,多基因融合DNA疫苗免疫后的小鼠血清抗体水平、淋巴细胞增殖（SI值）、gamma interferon（IFN-γ）和interleukin-2（IL-2）水平明显高于其他各组（P〈0．05）,攻毒保护效果也优于多价DNA疫苗,达到了BCG疫苗的免疫保护水平,表明本研究制备的融合DNA疫苗具有良好的应用前景。     

诱导免疫的基因—DNA疫苗

作为一种全新的疫苗，ＤＮＡ疫苗具有多方面的优越性，可同时诱导细胞免疫和体液免疫，其本身具有佐剂效应，也可通过其他途径优化免疫应答，本文综述了ＤＮＡ疫苗的优点、接种方式、引起免疫应答的类型以及优化途径；同时也探讨了目前需要解决的问题及其应用情况。