土壤中棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.Vasinfectum)消长规律研究初报

湖北省棉花枯萎病从1964年以来由零星病株扩散到点片发生危害,早已成为主要棉区的严重棉病。为了协同全国有关单位弄清土壤中病菌消长规律,给综合防治该病提供理论根据,尽快的控制或消灭其危害。兹将本年研究结果简要报导为后,以供参考。     

棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.Vasinfectum)突变体的诱发与鉴定

通过对32个棉花枯萎病菌菌株进行的突变体诱发与鉴定实践及技术方法探索，进一步验证了可以采用KClO3培养基来诱发突变体，并利用各突变体对不同N源的利用能力差异而采用MM，MH，MA，MO2培养基对各突变体类型进行鉴定。实验结果显示绝大多数菌株（93．7％）在KClO3培养基上能诱发出突变体，但多数（85％）突变体类型不全，且不同菌株诱得突变体的难易不同，个别菌株很难诱发到突变体。各突变体的诱发率高低依次为nit1〉nit3〉nit8〉nitM，与国内外相关报道结果基本一致。     

西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)营养体亲和群研究

从浙江各地、江苏南部和上海等地采集的西瓜枯萎病株和其他瓜类植株上,分离纯化尖孢镰孢霉(Fusarium oxysporum)菌种23个(每个菌种来自一个植株样本).接种试验表明:酉瓜植株上分离的19个菌种,有16个对长蜜、新红宝和圳宝等3个酉瓜品种表现为致病性,而其他菌种表现为非致病性.所有23个菌种均获得抗氯酸盐的硝酸盐营养突变株(nit mutant).根据来自同一菌种nit突变株的营养体亲和性与突变类型鉴定,选择3个西瓜致病菌的Nit M类型突变株(W 024～5,W 072～4和W 014～9)为营养体亲和性测试株.各菌种上获得的nit突变株分别与测试株作营养体亲和性配对反应,23个菌种可划分成8个营养体亲和群(VCG)和1个营养体自身非亲和类型.16个西瓜致病菌中,除一个为营养体自身非亲和类型外,其余均属同一亲和群(M1001),而与西瓜非致病菌不存在营养体亲和反应.由此显示:营养体亲和群与西瓜枯萎病菌存在相关性,而与地理分布无关.     

棉花枯萎病菌抑菌土的抑菌因子研究

棉花枯萎病菌抑菌土的抑菌因子研究收稿日期：１９９５－０９－１１１９９０～１９９１年辽宁省经作所魏庆琛、刘澍才参加了研究工作。李长兴叶景凯曹桂艳马存简桂良（辽宁省经济作物研究所）（中国农科院植保所）棉花枯萎病重病田或枯萎病圃，连续种植多年抗病品种...     

牛蒡寡糖-钕配合物对西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)的影响

[目的]确定牛蒡寡糖－钕配合物对病原菌的最佳作用浓度。[方法] 采用平板培养和液体培养法,研究了不同浓度牛蒡寡糖－钕配合物对尖镰孢菌菌落直径、果胶酶活性、菌丝生长量和菌丝细胞膜透性的影响。[结果] 在平板培养试验中,2～180 mg/L的牛蒡寡糖－钕配合物促进菌落扩展,但菌丝稀疏,200～400 mg/L 的牛蒡寡糖－钕配合物抑制菌落扩展,菌丝稀而薄。在液体培养试验中,2～400 mg/L的牛蒡寡糖－钕配合物抑制菌丝生长,抑制率为4.3%～64.4%,随着牛蒡寡糖－钕配合物浓度的升高,其抑制作用加强;2～400 mg/L 的牛蒡寡糖－钕配合物降低了果胶酶活性;当测定时间为15、30、60、90、120和180 min 时,2～400 mg/L的牛蒡寡糖－钕配合物增加了菌丝细胞膜透性。[结论] 该研究为牛蒡寡糖-钕配合物在植物上的合理应用提供了理论依据。     

棉花枯萎病菌的寄主植物初步研究

自爱迪凯生(Atkinson,1892)提出引起棉花枯萎的病原菌是萎蔫镰刀菌(FusariumVasinfectum Atk)以后,围绕棉花萎蔫镰刀菌对其他植物能否致病的问题,国外曾进行了许多研究.据1975年衣拜尔氏(Ebbels)的统计,在棉花枯萎病田里,能够直接分离到病原菌的植物有棉花、黄秋葵、大豆、烟草、大麦及多种棉田杂草,若用人工接菌方法,则寄主范围更广,计有40余种.国内也进行过研究和调查,许如琛等的试验认为,棉花枯萎病菌仅能侵染棉花,在四川除秋葵外并不能感染其他的作物.棉花枯萎病菌,在棉花植株上寄生后,罹病显症的植株极易分离出病原菌.然而,     

一株Fusarium oxysporum f. sp. niveum拮抗菌的筛选、鉴定及其抑菌特性

为筛选西瓜枯萎病拮抗菌株并探究其抑菌特性,以齐齐哈尔市青昕蔬菜基地根际土为材料,采用平板对峙法筛选到1株能高效抑制西瓜专化型尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f.sp. niveum,Fon)的拮抗菌株,通过形态特征、16S rDNA、gyrA和gyrB序列分析鉴定其菌种;通过盆栽试验验证拮抗菌株对西瓜枯萎病的抑制作用;采用生长速率法研究拮抗菌株不同生长时期的无菌发酵滤液及其不同贮存条件下的抑菌能力;利用扫描电子显微镜(SEM)和共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)观察并分析无菌发酵滤液对Fon孢子形态和膜完整性的影响。结果表明,拮抗菌株WD为Bacillus amyloliquefaciens,能有效抑制西瓜枯萎病的发生,抑制率达到57.57%,其无菌发酵滤液在衰亡期有较高的抑菌能力,对Fon菌丝生长抑制率为54.32%;无菌发酵滤液对温度、pH具有较高的耐受性,30 ℃、pH 7时抑菌活性最强,抑菌率可达58.36%;在4 ℃贮存至少45 d,且紫外光照120 min内对其抑菌活性没有影响;Fon孢子暴露在WD无菌发酵滤液下,孢子表面皱缩凹陷,膜完整性被破坏。综上所述,Bacillus amyloliquefaciens WD是1株高效的拮抗菌株,为西瓜枯萎病生防菌剂的研发与利用奠定了基础。     

新疆棉花枯萎病菌营养体亲和性的初步研究

将分离自新疆５个不同地点的棉病株或棉田土的７个菌株经单孢分离得到１８个单孢株，经鉴定均为尖孢镰孢。７个菌株的１８个单孢株分别在ＫＰＳ培养基上诱得数量不等的ｎｉｔ突变体，将它们分别与两个采自老病区莎车的棉枯萎病菌株进行营养体配对试验，结果显示７个菌株分别归属２个营养亲和群（ＶＣＧ），其中与莎车菌株明显亲和，属Ｖ１的６个菌株与莎车菌株应同属于尖孢镰孢萎蔫专化型。同一菌株的不同单孢株与莎车菌株的ＣＩ不同，反映了各单孢株所产ｎｉｔ突变体的突变类型的差异；而不同菌株与莎车菌株的ＣＩ不同则在一定程度上体现了遗传上的差异。另营养体亲和产生的亲和带形态，不同菌株有差异，且具一定稳定性     

新疆棉花枯萎病菌生理小种的初步研究

从全疆不同植棉区采集棉花枯萎病病株 ,经分离纯化和单孢分离获得尖孢镰刀菌菌株 ,从中选 2 0个代表菌株 ,用目前国内外统一使用的一套鉴别寄主进行生理小种鉴定 ,初步鉴定结新疆棉区棉花枯萎病菌以7号小种为主。     

种衣剂对大豆根腐病菌(Fusarium.oxysporum)抑制作用的研究

以无菌水为对照,以ND种衣剂及另五种新型种衣剂为处理,通过抑菌试验、有重复二因素方差分析及多重比较初步研究了六种衣剂对大豆根腐病菌——尖孢镰刀菌(F.oxysporum)的抑制效果。结果表明：化控种衣剂Ⅰ对大豆根腐病菌具有明显的抑制作用,其效果略好于ND种衣剂;生物化控种衣剂Ⅱ对大豆根腐病菌具有抑制作用,但效果不佳。     

尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum Schl.）的生长特性

【研究目的】研究尖孢镰刀菌的生长特性,寻找培养过程的异质性指标。【方法】供试菌株为黄瓜尖孢镰刀菌F-H.6.5-030318-J2和花生尖孢镰刀菌F-P.5.0-030710,培养基采用PSA培养基,装液量为100ml/250ml,接菌量从培养7d的平板上打取3个6mm的菌片,培养温度为25±1℃,摇床转速为110r/min,培养10d,观察测定发酵液颜色、OD值、pH值、菌丝干重变化,并利用聚类分析方法划分生长阶段。【结果】在培养过程中,尖孢镰刀菌发酵液的颜色、OD值、pH值和菌丝干重都会随着培养时间而变化。在相同的培养条件下,来源于不同寄主的尖孢镰刀菌菌株之间在颜色和OD值变化存在着显著性差异,而pH值和菌丝干重变化未表现出显著性差异。来自黄瓜和花生的尖孢镰刀菌菌株的生长分为3个阶段:1￣2d为适应阶段,3￣5d为对数生长阶段,6￣10d为稳定阶段。【结论】尖孢镰刀菌在培养过程的色素变异和OD值的变化可作为菌株培养的表征性特征。     

新疆棉花枯萎病菌营养亲和群的初步研究

从全疆各植棉区采集棉花枯萎病病株 ,经单孢分离获 49个尖孢镰刀菌菌株 ,接种试验表明 :49个菌株均使棉花产生枯萎病症状 ,利用氯酸钾诱变棉花枯萎病菌产生抗氯酸盐的硝酸盐营养突变株 (nitmutant) ,49个菌株共诱发获得 336个 nit突变株 ,将获得的 nit突变株作营养亲和性配对反应 ,可将 49个菌株分为 4个亲和群 ,46个菌株属同一亲和群 ,它们均与 7号小种的 nit突变株相亲和 ,其它 3个菌株分别属于其它亲和群。     

新疆棉花枯萎病菌营养亲和群的初步研究

从新疆各植棉区采集棉花枯萎病病株,经分离纯化获４９个单胞菌株。接种试验表明：４９个菌株均使棉花产生枯萎病症状。利用氯酸钾诱变棉花枯萎病菌,产生抗氯酸盐的硝酸盐营养突变株,４９个菌株共诱发获得３３６个ｎｉｔ突变株,将获得的ｎｉｔ突变株作营养亲和性配对反应,可将４９个菌株分为４个亲和群,其中４６个菌株属同一亲和群,它们均与７号小种的ｎｉｔ突变株相亲和,其余３个菌株分别属于其它亲和群。     

棉花枯萎菌（Fuarium oxysporum vasinfectum）单孢菌系间的遗传差异

提取棉花枯萎菌ＣＦ３中的１５个单孢菌系基因组ＤＮＡ，用ＲＦＬＰ分析其遗传多样性，可以将１５个单孢菌系划分为２个杂交类型。致病性测定没有差异。对于１号和６号单孢菌系中新出现的ＤＮＡ片断的功能还需进一步证实。     

甘薯根腐病菌[Fusarium Solani(Mart.)Sacc.f.sp.batatas McClure对棉花和蕹菜的侵染测定

甘薯根腐病是我国新发生的一种毁灭性病害。由于它属于一种土传病害,因此有人提出了轮作防病的措施。在所提出的参与轮作的作物中,棉花被列为其中的一种。鉴于甘薯根薯病菌的寄主范围,迄今研究报道甚少,棉花参与轮作能否取得积极的防病效果?此外,还考虑到甘薯[Ipomoea batatas(L.)Poir]为旋花科植物,与它同科的蕹菜(I.aquatica Forsk.)是否也有受到根腐病菌感染的可能?据此,我们于1980—1982年进行了以下试验。     

枯草芽孢杆菌S6抗棉花枯萎病菌拮抗蛋白的分离纯化与抑菌活性研究

为了探寻枯草芽孢杆菌S6菌中对棉花枯萎病菌有拮抗作用的蛋白,将S6菌进行液体发酵培养,初步提取得到了粗蛋白提取液。粗提液经硫酸铵沉淀、Sephadex G-50脱盐、Sephadex G-100凝胶层析、DEAE-52纤维素离子交换层析,得到了对棉花枯萎病菌有高效拮抗作用的蛋白质,纯化倍数达17。形成分离纯化S6菌株的棉花枯萎病菌拮抗蛋白的可靠技术路线,为研究和生产防治棉花枯萎病菌的生物制剂提供了理论基础。     

人参锈腐病菌（Cylindrocarpon destructans.）生物学特性的初步研究

本文对人参锈腐病菌〔Cylindrocarpon destructans(zinss)Scholten〕生物学特性进行了较系统的试验研究。结果表明:人参锈腐病菌在PDA和查彼氏培养基上生长良好,菌落厚,深褐色;该菌对碳源的利用以甘露醇为最好,缺碳生长不好;对氮源的利用以蛋白胨为最好;该菌在相对湿度为79.3～90％生长缓慢,在95％以上生长很好;在PDA培养基上生长速率以第5d增长较快。该菌最适pH值为5.0～7.0,在自然光照射下菌落厚,深褐色,在连续黑暗条件下生长最差;生长最适温度20～25℃,在57℃条件下10min为该菌的致死温度。