贵州生姜组培脱毒快繁体系的建立

【目的】建立贵州生姜组培脱毒快繁体系,为贵州生姜种业的工厂化育苗提供技术支撑,贵州生姜主产区生姜地方品种提纯复壮提供理论依据。【方法】以贵州省贞丰小黄姜和湄潭大白姜为材料,采用高温钝化+茎尖脱毒技术进行组织培养。【结果】采用高温钝化及茎尖分生组织培养能够有效脱毒,诱导2种生姜产生不定芽的最适培养基为MS+6-BA 2～3mg/L+NAA 0.1mg/L,增殖快繁最适培养基为MS+6-BA 5mg/L+NAA 0.1mg/L+0.2%活性炭,增殖倍数可达6.9～7.3倍;筛选出适合脱毒苗移栽的基质为泥炭土∶珍珠岩=5∶1,穴盘规格为128孔,移栽成活率可在96%以上;田间定植时适当遮阴可显著提高脱毒苗的成活率。【结论】在贵州生姜组培脱毒快繁体系下,可促进生姜幼芽的分化和增殖及姜苗的健康成长。     

莲藕茎尖培养技术的初步研究

对莲藕茎尖培养进行研究，探明初代培养中最适外植体转绿和分化的培养基为ＭＳ＋６－ＢＡ１．６ｍｇｌ／Ｌ茎尖分化率为５８．１％，最适已分化外植体形成幼苗的培养基为ＭＳ＋６－ＢＡ０．３ｍｇ／Ｌ经５０ｄ培养，生长量平均增加１９．２倍，繁殖系数为４．４７；适宜培养苗生根的培养基为ＭＳ＋６－ＢＡ０．１ｍｇｌ／Ｌ＋ＮＡＡ２．０ｍｇ／Ｌ＋蔗糖５％；莲藕茎尖培养的最佳取材期为莲藕萌发期；从茎尖接种培养幼苗到移栽需经４～５个月。     

甘薯茎尖培养和脱毒效果研究

试验以MS为基本培养基 ,附加不同浓度的BAP(苄氨基嘌呤 )和不同种类的生长素 (NAA、GA3)作为甘薯茎尖分生组织的诱导培养基。结果表明 :MS +BAP 1～ 2mg/L为较适宜培养基 ,其芽分化率和成苗率均可达 90 %。同时BAP附加低浓度的NAA ,有利于甘薯茎尖培养芽的分化 ;而附加GA3对芽的分化有抑制作用。病薯经脱毒培养后 ,生长旺盛 ,产量提高 ,品质改善 ,增产幅度为 2 0 %～ 2 2 4%。     

大蒜茎尖培养脱毒及增产效果的研究

采用山东栽培的6个大蒜品种进行茎尖培养脱毒。结果表明,最佳诱芽培养基为B_5+BA3mg/L+NAA0.1mg/L+Ad30mg/L+KT0.5mg/L,最佳诱根培养基为1/2 B_5+BA0.01mg/L+NAA0.05mg/L。脱毒大蒜的蒜薹比对照增产58～175％,蒜头增产23～114％。本文还对影响茎尖培养成苗的因素,鳞茎热处理后茎尖培养的脱毒效果,脱毒大蒜无性世代的产量增长及脱毒大蒜增产的生产学基础进行了讨论。     

甘薯茎尖脱毒培养技术研究

取带１￣２个叶原基其大小约为０．３７￣０．４９ｍｍ的甘薯茎尖，放在ＭＳ＋ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋蔗糖４％＋琼脂６．５ｇ／Ｌ培养基上培养４０ｄ，成苗率为３１．２％￣１００％。电镜测出试管苗的脱毒率为９０％。大田试验统计表明，甘薯品种鄂薯１号、“５１－９３”、南薯８８的茎尖脱毒苗比正常薯块苗增产９％￣２５．５％，比病苗增产５４．１％￣１２８．９％。     

甘薯茎尖脱毒培养技术研究

[目的]探讨利用甘薯茎尖分生组织获得脱毒苗以及脱毒苗鉴定的方法。[方法]以甘薯茎尖分生组织为培养对象,通过蔗糖及外源激素单因素试验研究甘薯茎尖脱毒培养技术。[结果]甘薯茎尖分生组织生长培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L+ NAA 0.10 mg/L+蔗糖40 g/L+琼脂6.5 g/L,试管苗生根培养基为1/2MS+NAA 0.20 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L。在茎尖生长培养基上对25个甘薯品种的茎尖分生组织进行培养,结果表明,8个品种的出苗率为50.0%~79.3%,16个品种的出苗率达80.0%以上,其中,5个品种的出苗率为100.0%。在生根培养基上,试管苗生根率达100%,根多而粗壮,茎叶生长旺盛。试管苗不用炼苗,可直接从培养瓶中移栽至细河沙中,成活率达100%。以巴西牵牛作为指示植物,采用靠接法对试管苗进行脱毒鉴定,脱毒率为79.1%。[结论]该研究为甘薯茎尖脱毒苗生产提供适宜的培养基配方和简便易行的脱毒苗鉴定技术。     

植物生长调节剂对银杏茎尖生长的影响

以探明银杏枝条的生长机理为目的，用茎尖培养的方法，研究了植物生长调节剂对银杏茎尖生长分化的影响。结果：（１）萘乙酸（ＮＡＡ）促进银杏茎尖伸长生长和叶片分化，随ＮＡＡ浓度增加其作用增强，在ＮＡＡ为０．１ｍｇ／Ｌ时茎尖长度为对照的１．４７倍，分化叶数为对照的２．６２倍，茎尖干重为对照的６．４５倍。（２）玉米素（ＺＴ）抑制银杏茎尖生长，随着ＺＴ浓度增加，其抑制效应增强，在ＺＴ浓度为１ｍｇ／Ｌ时，其茎尖长     

甘薯茎尖脱毒与快速繁殖技术研究

甘薯茎尖分生组织脱毒培养与茎段快速繁殖,对培养条件和几种主要培养因子的反应十分敏感.以MS为基本培养基对甘薯茎尖分生组织与茎段进行不同激素种类和浓度试验,结果表明,IAA:6-BA为1:5～20诱导效果好,最佳诱导分化培养基为:MS+6-BA1mg/L+IAA0.1～0.2 mg/L+GA30.1 mg/L;试管苗株系经指示植物、NCM-ELISA法检测,获得了6个品种的脱毒苗.脱毒苗茎段试管快速繁殖时,不同品种之间有差异,单独使用IAA或与GA3结合使用,在28℃、光照12 h/d、液体培养效果好.     

植物生长调节剂对银杏茎尖生长的影响

以探明银杏枝条的生长机理为目的,用茎尖培养的方法,研究了植物生长调节剂对银杏茎尖生长分化的影响。结果表明：① 萘乙酸（ Ｎ Ａ Ａ）促进银杏茎尖伸长生长和叶片分化,随 Ｎ Ａ Ａ 浓度增加其作用增强,在 Ｎ Ａ Ａ 为 ０１ ｍ ｇ／ Ｌ 时茎尖长度为对照的 １４７ 倍,分化叶数为对照的 ２６２ 倍,茎尖干重为对照的 ６４５ 倍。② 玉米素（ Ｚ Ｔ）抑制银杏茎尖生长,随着 Ｚ Ｔ 浓度增加,其抑制效应增强,在 Ｚ Ｔ 浓度为 １ ｍ ｇ／ Ｌ时,其茎尖长度为对照的 ５５５１％ 。③ 赤霉素（ Ｇ Ａ３ ）对银杏茎尖伸长生长和叶片分化没有促进作用,但随着 Ｇ Ａ３ 浓度提高,茎尖干物质增加。④ 在 Ｎ Ａ Ａ 与 Ｚ Ｔ 综合处理区,当 Ｎ Ａ Ａ≤００１ ｍ ｇ／ Ｌ 时, Ｚ Ｔ 抑制银杏茎尖生长,当 Ｎ Ａ Ａ 达到 ０１ ｍ ｇ／ Ｌ时,转而促进茎尖生长。     

皖薯1号的脱毒技术和脱毒苗的增产效果

通过对皖薯１ 号的茎尖培养,筛选出最佳的茎尖分化培养基ＭＳ＋ ６ ＢＡ１ ．０ｍ ｇ／Ｌ＋ ＮＡＡ０ ．０５ ｍｇ／Ｌ;采用固体培养基培养,１８ ～２０ 天后转入１／２ ＭＳ 培养基生根成苗,成苗率达８０ ％ 左右,而采用液体滤纸桥培养只需１０ ～１２ｄ 即可转移;脱毒皖薯１号分别比未脱毒皖薯１ 号、脱毒徐薯１８ 增产２８ ％ 和１４ ．３ ％ 。     

唐昌蒲茎尖脱毒的研究

1987年～1988年作者以唐昌蒲的茎尖(0.2～5 mm)为外植体,接种于MS+BAl mg/L+NAA1 mg/L脱分化培养基上,诱导其产生愈伤组织。一个月后,将愈伤组织接到N_6+BA0.5mg/L+NAA1 mg/L+0.4～0.6％活性炭的再分化培养基上诱导其生根、成苗。所得试管苗经鉴定脱毒率可达70.8％,其脱毒率大小与接种的茎尖大小有直接关系,茎尖越小,脱毒率越高。茎尖大小与试管苗的成苗途经、成苗率、丛生苗率有一定关系。     

甘薯茎尖脱毒及组培快繁技术

[目的]研究甘薯茎尖分生组织的分化培养基配方及快繁培养的影响因素。[方法]以甘薯茎尖作为外植体,总结出茎尖分化培养前的灭菌方法,筛选出适宜的分化培养基配方、快繁培养基配方以及影响快繁的各因素。[结果]75%的乙醇30 s+0.1%升汞10 min能取得较好的灭菌效果,降低污染率;适宜的茎尖分化培养基配方为:MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.25 mg/L GA3+10 mg/L病毒唑;快繁培养基配方为:Ms+0.1~0.2 mg/L NAA+2 mg/L泛酸钙;适宜的糖用量为30 g/L;培养条件为温度28℃、光照强度2 000lx、光照时间16 h/d时脱毒苗茎段生根较快,侧芽萌发后节间适中,有利于提高繁殖系数。[结论]为脱毒苗工厂化生产提供技术支持。     

甘薯茎尖分生组织培养技术的研究

甘薯茎尖采用２％次氯酸钠水溶液消毒５～１０分钟，以ＭＳ为基本培养基，添加６—苄基氨基嘌呤（６ＢＡ）０．５ｍｇ／Ｌ，萘乙酸（ＮＡＡ）０．２ｍｇ／Ｌ腺嘌呤（Ａｄ）５ｍｇ／Ｌ，７个品种间的茎尖培养成苗率为５０～７８．１％，成苗期４３～６０天，适量的腺嘌呤可使成苗率提高５．８～２１％，成苗期缩短２０天左右。转入第二培养基的时间，以１８～２０天较好。     

品种和培养基对草莓茎尖培养的影响

草莓茎尖脱毒培养中茎尖分生组织经历了一个生长发育的动态过程 ,茎尖分生组织在培养 1周左右膨大 ,转绿 ;2～ 4周大量发生愈伤组织且芽突起陆续分化成小苗 ;丛生芽的抽生主要集中在接种后的 5～ 7周。不同草莓品种 ,其茎尖分生组织诱导生长情况不同。在相同条件下 ,鬼怒甘品种的茎尖生长速度快于丰香品种 ,长势强于丰香品种 ,而其丛生芽发生率低于后者。丰香草莓茎尖用MS作基本培养基 ,添加 0 1mg/L的NAA ,在BA浓度为 0 5～ 1 0mg/L范围内均可有效诱导愈伤组织发生和促进芽的分化。丰香草莓茎尖二次脱毒培养的出愈率 (98 0 4% )、直接成芽率 (93 47% )均高于相同条件的茎尖一次脱毒培养 (出愈率为 74 44 % ,直接成芽率为 71 11% )     

山药茎尖脱毒试管苗分化培养基的筛选

[目的]筛选山药茎尖脱毒苗分化培养基配方。[方法]选用MS为基础培养基,6-BA、2,4-D、NAA为激素处理因素和不同激素浓度处理水平的3因素3水平的试验设计,进行了山药茎尖脱毒苗分化培养基的筛选研究。[结果]MS＋2.0mg/L6-BA＋1.0mg/L2,4-D＋3.0mg/LNAA为山药茎尖脱毒苗最佳分化培养基。[结论]该培养基能达到山药茎尖离体脱分化与分化之间的一种良好的平衡,是一种进行山药茎尖脱毒苗培养适宜的分化培养基。     

生姜脱毒快繁与病毒检测技术研究

本文以感染TMV和CMV的湘西本地小黄姜为试材,采用热处理、茎尖培养结合添加病毒唑的方法进行脱毒处理以获得无病毒的优质生姜种苗,运用RT-PCR方法检测病毒,以期探讨出生姜最适宜的脱毒快繁及病毒检测技术。结果表明,将生姜块茎置于40℃条件下催芽,显微镜下剥取0.2~0.5 mm的茎尖进行培养,最佳诱导培养基的配方为MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+病毒唑40 mg/L,继代培养基中将MS培养基中的蔗糖浓度调整为80 g/L,即可实现生姜试管苗的增殖、生根及壮苗的一步培养,培养周期以30~40 d为宜。建立了一套生姜CMV和TMV 2种病毒的RT-PCR检测体系,运用该检测方法对生姜脱毒试管苗进行检测,病毒检出率为0,生姜脱毒率达100%。     

罗汉果无花叶病苗的培育

在ＭＳ附加ＢＡ０．５－１．０ｍｇ．Ｌ＾－１，ＩＡＡ１．０ｍｇ．Ｌ＾－１及Ａｄ８０ｍｇ．Ｌ＾－１培养基上建立罗汉果试管株系，分别用热处理和微茎尖进行脱除花叶病毒培育无病苗的研究，结果表有，用０．８－１．０ｍｍ微茎尖培养和用３８．５℃热处理１周后再切取２ｍｍ茎尖培养，脱毒效果最好，其脱毒率和成活率均达１００％，采用植物形态特征比较法，黄瓜作指示植物的生物学鉴定法及电镜观察法进行了小苗脱毒鉴定。研究还对     

人参果茎尖培养

将人参果不同大小茎尖接种于ＭＳ＋６～ＢＡ０．７ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．０２ｍｇ／Ｌ的培养基中,３５ｄ左右芽点长成丛生芽;丛生芽长高后,进行微型扦插,继代和长根培养基均为１／２ＭＳ;长根的再生植株可直接移入苗床。实验还表明,接种的茎尖大小对去病毒的效果有明显影响,病毒含量不受继代培养代数的影响。     

高唐栝楼茎尖分生组织培养与快速繁殖技术研究

[目的]采用茎尖分生组织培养脱毒技术培育高唐栝楼的脱病毒试管苗。[方法]对添加不同浓度外源生长调节剂的培养基进行一系列优化试验,筛选出高唐栝楼脱毒试管苗最佳繁殖培养基。[结果]在MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.10 mg/L KT培养基中诱导效果较好,技术上达到了快速繁殖规模生产的要求。经反复的病毒检测,证明脱毒试管苗脱病毒彻底。[结论]最终获得了高唐栝楼茎尖培养脱毒与诱导、增殖和生根的培养基,及其生长所需要的外部环境条件和相关配套技术。     

甘薯茎尖脱毒技术研究进展

利用茎尖分生组织培养技术培育甘薯脱毒苗是目前防治甘薯病毒病的有效方法。从甘薯病毒病的发生、甘薯茎尖脱毒技术的发展及影响因素等方面综述了甘薯茎尖脱毒技术的研究进展及发展趋势,分析了目前甘薯茎尖脱毒技术所面临的问题,并就甘薯茎尖脱毒技术的主要研究方向进行展望,以期为甘薯茎尖脱毒技术的研究与应用提供参考。