病原菌致病性胞外产物(ECP)的研究进展

许多病原菌能分泌多种胞外产物,如蛋白酶、磷脂酶、脂肪酶、明胶酶及溶血素等。微生物分泌的明胶酶、蛋白酶、淀粉酶、磷脂酶属于胞外酶,在细菌致病中可以和溶血毒素一起进行协同作用,分解破坏宿主组织成分。笔者综述了病原菌的致病性胞外产物,以及研究胞外产物的方法。     

微山湖河蟹养殖区与非河蟹养殖区细菌胞外酶的比较研究

为了研究微山湖河蟹养殖区与非河蟹养殖区水体和底泥中异养细菌胞外产酶（蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、脲酶）的差别．对这2处环境中的微生物进行了初步筛选和分离,得到25株菌,分别在含有蛋白质、脂肪、淀粉、脲的固体培养基上培养观察。并测量记录菌落和菌圈大小。结果表明,河蟹养殖区产蛋白水解酶和脂肪水解酶的细菌明显多于非河蟹养殖区,而产淀粉水解酶和脲酶的细菌数量两者相差不大。     

维氏气单胞菌TH0426胞外产物酶活性及免疫原性分析

为研究维氏气单胞菌(Aeromonasveronii)胞外产物的合成及其功能,本试验采用超滤浓缩法提取Aeromonasveronii TH0426的胞外产物,通过平板琼脂扩散法对其主要酶成分进行初步研究,对蛋白酶、脂酶、卵磷脂酶、淀粉酶、脲酶、明胶酶和溶血活性进行测定,对斑马鱼腹腔注射胞外产物测定其致病性,并对其免疫原性进行初步分析。结果显示,菌株胞外产物具有脂酶、淀粉酶、蛋白酶和溶血活性,人工感染试验结果表明,菌株胞外产物对斑马鱼具有致病性,其半数致死量为3.355 0μg/条。SDS-PAGE表明,ECP由19条蛋白带组成,利用鲤鱼抗ECP血清进行Western blot显示,组成ECP的19条蛋白带中有5条具有免疫原性,能够引发机体的免疫应答反应产生抗体,其相对分子质量为别为110 000,47 000,45 000,42 000和38 000,为Aeromonasveronii胞外产物亚单位疫苗的研制与开发提供理论依据。     

溶藻弧菌胞外产物对大黄鱼的致病性

采用杯碟法测定了由网箱养殖濒死大黄鱼体内分离的溶藻弧菌胞外产物的成分及酶活性 ,并用胞外产物粗提液对大黄鱼进行致死试验 ,电镜观察了致死大黄鱼肝、肾、脾等组织的细胞病变。结果表明 ,溶藻弧菌胞外产物具有明胶酶、淀粉酶、酪蛋白酶、脂肪酶、卵磷酯酶、几丁质酶以及溶血活性 ,该胞外产物对大黄鱼具有明显的致死作用 ,可造成大黄鱼肝、肾、脾等组织严重病变     

青虾源维氏气单胞菌胞外产物生物学特性及蛋白成分分析

为了研究维氏气单胞菌胞外产物在青虾感染中的致病作用以及维氏气单胞菌的致病机理,本试验以青虾源维氏气单胞菌QXF0711B为研究对象,提取其胞外产物,采用打孔法测定其胞外产物的酶活性,并对溶血活性进行溶血谱分析,同时分析其致病性。应用液相质谱与串联质谱相结合方法(LC-MSMS)对其胞外产物蛋白成分进行鉴定,利用Gene Ontology(GO)对已鉴定蛋白进行生物学过程、分子功能和细胞组分的分类分析。结果表明:QXF0711B菌株胞外产物具有淀粉酶活性、脂肪酶活性、蛋白酶活性和溶血活性,不具有明胶酶活性;其可溶解多种动物红细胞,尤以对鱼类红细胞溶血性更强,但对鸡、鸭红细胞无溶血活性。通过对菌株胞外产物蛋白成分分析显示有90种蛋白:共参与45种生物学过程,主要涉及碳水化合物代谢过程、运输等;共有46种分子功能,主要涉及DNA结合、ATP结合、金属离子结合等;为12种细胞组分,主要包括膜的有机组成、细胞质、细胞外膜等。     

乌鳢源维氏气单胞菌胞外产物的生物学活性分析

为研究维氏气单胞菌胞外产物在乌鳢感染中的致病作用以及维氏气单胞菌的致病机理,以乌鳢源维氏气单胞菌WL161为研究对象,提取其胞外产物,采用打孔法测定其胞外产物的酶活性,并对与毒力密切相关的溶血活性进行进一步的溶血谱研究,同时分析其致病性。应用LCMSMS方法对其胞外产物蛋白成分进行鉴定,利用Gene Ontology(GO)对已鉴定蛋白进行生物学过程、分子功能和细胞组分的分类分析。结果表明,WL161菌株具有淀粉酶活性、脂肪酶活性、蛋白酶活性和溶血活性,不具有明胶酶活性;ECP对其他多种动物红细胞均有溶血活性,对鱼类红细胞溶血性较强,但对鸡红细胞无溶血活性。其胞外产物共检测出118种蛋白,共参与40种生物学过程,主要涉及碳水化合物代谢过程、几丁质分解代谢过程、DNA结合等;69种分子功能主要涉及ATP结合、金属离子结合、碳水化合物结合等;19种细胞组分主要包括胞外区、细胞质、细胞外膜等。     

两株益生芽孢杆菌的安全性及酶学性质研究

试验旨在研究两株芽孢杆菌的安全性及产酶特性。对两株芽孢杆菌进行了急性毒性试验、慢性毒性试验、细菌易位试验、有害代谢产物检测、溶血试验、产酶性能定性和产淀粉酶、蛋白酶的定量试验。结果显示：两株芽孢杆菌的安全性良好,无急性毒性、慢性毒性,不会对组织器官产生损害、不易位、不产生有害代谢产物、不溶血。解淀粉芽孢杆菌SSYB株的产淀粉酶能力高于枯草芽孢杆菌LLYB株,但LLYB株的产木聚糖酶、纤维素酶、蛋白酶、β-甘露聚糖酶和β-葡聚糖酶能力均优于SSYB株,两株芽孢杆菌均无产植酸酶和脂肪酶的能力。SSYB株的产蛋白酶活力为16.6 U/mL,产淀粉酶活力为1.79 U/mL,LLYB株的产蛋白酶活力为50 U/mL,产淀粉酶活力为1.6 U/mL,与定性测定时两株菌产酶趋势一致。研究表明,两株芽孢杆菌的安全性良好,具有产多种生物酶的能力,在饲料添加剂研发方面具有一定的应用前景。     

大鲵肺炎克雷伯菌的部分生物学特性与致病性分析

为确定从患病大鲵分离鉴定到的肺炎克雷伯菌的生物学特性及其对大鲵的致病性,本研究采用比色法和平板扩散法对肺炎克雷伯菌的生长条件及胞外产物进行研究,并对人工感染该菌的大鲵主要靶器官进行组织病理学分析。结果表明:肺炎克雷伯菌最适宜在37℃、pH7.5和1.0%NaCl浓度的条件下生长;其胞外产物具有脂肪酶、蛋白酶、卵磷脂酶活性,无淀粉酶、明胶酶、脲酶及溶血活性;感染该菌后大鲵各器官均表现出不同程度的炎性反应,其中以肝炎和坏死性脾炎最为明显。本研究确定了肺炎克雷伯菌的最适生长条件,分析了其胞外产物主要成分,并对其感染大鲵后主要靶器官的组织病理变化进行了探究,为该菌的有效防控与致病机理的研究奠定了基础。     

致水貂出血性肺炎铜绿假单胞菌胞外产物生物活性及免疫保护力分析

胞外产物在细菌致病过程中发挥重要作用,为探索胞外产物在铜绿假单胞菌致病过程中的作用,首先从铜绿假单胞菌培养液提取其出其胞外产物,利用小鼠模型分析其致病性,并通过细胞证实了该产物对巨噬细胞功能的抑制作用,进一步测定其胞外产物的酶活性并利用LC-MSMS方法对铜绿假单胞菌胞外产物蛋白成分和功能进行分析。结果表明,铜绿假单胞菌胞外产物对小鼠有致病性,能够显著抑制巨噬细胞吞噬细菌活性,其具有淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶、卵磷脂酶活性和溶血活性可能在这一过程中发挥关键作用。LC-MSMS分析鉴定所提纯的胞外产物中有153种蛋白成分,涉及多种酶类、细胞结构蛋白和功能性蛋白。用低剂量胞外产物免疫动物对于铜绿假单胞菌感染具有较明显的保护率,可达90%。本试验为揭示铜绿假单胞菌致病机理,研制新型疫苗奠定基础。     

家蚕肠道产酶菌的分离与筛选

探明家蚕肠道菌在食物消化过程中的作用,有助于微生态饲用添加剂的开发研究。从家蚕肠道中分离出30株菌株,并研究了它们的胞外淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶和脂肪酶的产酶能力。在家蚕肠道中存在着可以分泌蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶的菌株。在分离到的30株肠道菌株中,产4种酶的有1株菌,产3种酶的有4株菌,产2种酶的有2株菌,产1种酶的有11株菌,不产酶的有12株菌。在产酶菌中,有9株菌株能分泌蛋白酶,能分泌脂肪酶和纤维素酶的各有7株菌,有8株菌株能分泌淀粉酶。家蚕肠道菌中的各种产酶菌高达60%,表明了肠道菌在家蚕食物消化过程中的重要性。     

Comparison of in vitro and in situ methods in evaluation of forage digestibility in ruminants

The objective of this study was to compare the application of different in vitro and in situ methods in empirical and mechanistic predictions of in vivo OM digestibility (OMD) and their associations to near-infrared reflectance spectroscopy spectra for a variety of forages. Apparent in vivo OMD of silages made from alfalfa (n = 2), corn (n = 9), corn stover (n = 2), grass (n = 11), whole crops of wheat and barley (n = 8) and red clover (n = 7), and fresh alfalfa (n = 1), grass hays (n = 5), and wheat straws (n = 5) had previously been determined in sheep. Concentrations of indigestible NDF (iNDF) in all forage samples were determined by a 288-h ruminal in situ incubation. Gas production of isolated forage NDF was measured by in vitro incubations for 72 h. In vitro pepsin-cellulase OM solubility (OMS) of the forages was determined by a 2-step gravimetric digestion method. Samples were also subjected to a 2-step determination of in vitro OMD based on buffered rumen fluid and pepsin. Further, rumen fluid digestible OM was determined from a single 96-h incubation at 38°C. Digestibility of OM from the in situ and the in vitro incubations was calculated according to published empirical equations, which were either forage specific or general (1 equation for all forages) within method. Indigestible NDF was also used in a mechanistic model to predict OMD. Predictions of OMD were evaluated by residual analysis using the GLM procedure in SAS. In vitro OMS in a general prediction equation of OMD did not display a significant forage-type effect on the residuals (observed - predicted OMD; P = 0.10). Predictions of OMD within forage types were consistent between iNDF and the 2-step in vitro method based on rumen fluid. Root mean square error of OMD was least (0.032) when the prediction was based on a general forage equation of OMS. However, regenerating a simple regression for iNDF by omitting alfalfa and wheat straw reduced the root mean square error of OMD to 0.025. Indigestible NDF in a general forage equation predicted OMD without any bias (P ≥ 0.16), and root mean square error of prediction was smallest among all methods when alfalfa and wheat straw samples were excluded. Our study suggests that compared with the in vitro laboratory methods, iNDF used in forage-specific equations will improve overall predictions of forage in vivo OMD. The in vitro and in situ methods performed equally well in calibrations of iNDF or OMD by near-infrared reflectance spectroscopy.     

大庆市羊东毕吸虫病流行病学调查

对大庆市羊东毕吸虫病的流行病学进行了调查研究。结果表明，大庆有3种东毕吸虫，即程氏东毕吸虫（O.cheni)、土耳其斯坦东毕吸虫（O.turkestanica)和土耳斯坦东毕吸虫结节变种（O.turkestanican var.thuberculata)；中间宿主螺类有1种，即卵萝卜螺；东毕吸虫病在大庆分布很广，所调查的4区2县均有发生，羊东毕吸虫平均感染率分别为50．33％，平均死亡率为21．12％，大庆羊急性病例发病时间为8月上旬至10月下旬，慢性病例为11月上旬至翌年2月中旬。     

ELISA试验在防制猪伪狂犬病中的应用

猪伪狂犬病是由伪狂病病毒(Pseudorabies virus PRV)引起的急性传染病。其特征是成年猪常为隐性感染，可有流产、死胎、呼吸系统症状，新生仔猪除神经症状外还可侵害消化系统，并伴大批死亡。本病已经给全世界的养猪业造成严重的损失，我国许多地区已报道该病。为进一步探讨该病的控制、净化措施，我们对12个养猪场共856分血清采用美国嗍公司的ELISA试剂盒进行了抗体检测。     

Estimate of economic impact of fowl cholera in turkeys in Georgia in 1986

Information gathered from cases of fowl cholera (FC) in commercial turkey flocks through case records, flock records, and telephone and mail surveys was used to estimate disease costs. The cost to the Georgia commercial turkey industry in 1986 from preventive measures, treatment of outbreaks, and production losses from the disease was estimated at $634,545. The cost of FC per kg of live production was estimated to be $0.015.     

中国圈养野生动物疫苗使用调查

2005年对中国动物园协会单位中的18家动物园饲养野生动物疫苗免疫情况进行调查。受调查动物园在野生动物疫苗使用和动物种类方面具有一定的代表性。调查结果显示动物园动物现共使用18类36种疫苗,预防31种疫病。其中哺乳动物使用14类24种疫苗,预防24种疫病;禽类使用4类12种疫苗,预防7种疫病。使用范围最广的有禽流感、犬瘟热疫苗等、新城疫疫苗、猫瘟热疫苗等。共有24目58科动物接种疫苗,其中食肉动物类1目8科,食草动物类3目9科,杂食动物类2目3科,禽类18目38科。研究结果提示应加强动物园之间疫病信息交流、防疫资源的利用、疫病监测和研究,加大对动物园动物疫病的研究投入,逐步建立动物园动物统一的防疫规程。     

Use of cyclocryotherapy in management of glaucoma in dogs

In 5 cases of glaucoma (2 from trauma, 2 from narrowed drainage angles, 1 secondary to lens extraction), cyclocryotherapy was used to control intraocular pressure. In all cases the intraocular pressure decreased, with the usual result being a cosmetic and painless but blind eye.     

Efficacy of parvaquone in the treatment of naturally occurring theileriosis in cattle in Iraq

Summary Parvaquone was tested in cattle infected withTheileria annulata when they were presented at clinics in the vicinity of Baghdad. Out of over 200 cases presented with suspected theileriosis between July 1984 and July 1985, the drug was used in 45 cases where theileriosis was confirmed by microscopic examination of blood and lymph node biopsy smears. Twenty seven of the cases were considered mild and 18 cases severe. Weights of the cattle were estimated and parvaquone was administered by intramuscular injection at a nominal dose of 20 mg/kg. A single treatment with parvaquone was used in 25 cases and 20 cases were treated twice but there was no correlation between severity of disease and the number of treatments given. Twelve cases (27%) also received antibacterial therapy. All cases were in exotic cattle or cattle born from exotic (imported) cattle and 64% of the cases were in cattle under six months of age. Temperatures dropped immediately after treatment and the majority were normal (below 39.5°C) by two to three days after the first treatment. Of the 45 cases treated 43 recovered. This compares very favourably with a previously reported mortality of 66% in untreated imported cattle in Iraq.

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Eficacia Del Parvaquone En El Tratamiento De La Theilerosis Natural En Ganado En Iraq

Resumen Se trató ganado infectado conTheileria annulata en forma natural con parvaquone, en clínicas veterinarias localizadas en la vecindad de Baghdad. De 200 casos admitidos con sospecha de theileriosis, entre julio 1984 y julio 1985, la droga se usó en 45 casos confirmados mediante el examen microscópico de frotis de sangre y biopsias de ganglios linfáticos. Veintisiete de los casos se consideraron moderados y 18 casos severos. Se estimaron los pesos de los animales enfermos, suministrandoles parvaquone vía intramuscular en dosis nominales de 20 mg/kg (rango 16–35 mg/kg). Se utilizó un solo tratamiento con parvaquone en 25 casos clínicos, mediante la aplicación de una sola inyección y se aplicaron dos inyecciones en 20 casos (doble tratamiento), sin que se encontrara correlación alguna entre la severidad de la enfermedad, recuperación y número de tratamientos. Doce casos (27%) recibieron también algún tratamiento antibacteriano. Todos los casos de theileriosis se presentaron en ganado exótico o nacido de ganado exótico (importado) y 64% de los casos ocurrieron en ganado bajo los seis meses de edad. La temperatura bajó inmediatamente después del tratamiento, normalizándose dos o tres días después de tratamiento (bajo 39.5°C). De los 45 casos tratados 43 se recuperaron. Se informa una mortalidad previa de 60% en ganado importado no tratado contra theileriosis en Iraq.

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Efficacite De La Parvaquone Pour Le Traitement De La Theileriose Naturelle Des Bovins En Irak

Résumé La parvaquone a été essayée pour le traitement de bovins infectés parTheileria annulata lorsqu'ils étaient présentés aux cliniques des environs de Bagdad. Sur plus de 200 cas présentés pour suspicion de theilériose entre juillet 1984 et juillet 1985, le médicament a été utilisé dans 45 cas où la theilériose était confirmée par l'examen microscopique du sang et de biopsies de ganglions lymphatiques, 27 cas étaient considérés comme des atteintes modérées et 18 comme des cas graves. Les poids des animaux étaient estimés à l'oeil et la parvaquone administrée par voie intra-musculaire à la dose normale de 20 mg/kg (soit 16 à 35 mg/kg). Un traitement unique à la parvaquone a été pratiqué dans 25 cas et il a du être renouvelé dans 20 cas mais il n'y avait pas corrélation entre la gravité des symptômes et le nombre de traitements requis. Dans 12 cas (27%) une thérapie antibactérienne a également été mise en oeuvre. Tous les malades étaient des animaux importés ou issus d'animaux importés et dans 64% des cas les animaux étaient âgés de moins de 6 mois. Les températures ont chuté immédiatement après le traitement et, pour la plupart, étaient normales (moins de 39°5) deux à trois jours après le traitement—sur 45 animaux traités, 43 ont guéri. Ces résultats apparaissent très favorables par rapport à la mortalité de 66% rapportée antérieurement et affectant les bovins non traités en Irak.