灵芝孢子粉破壁前后质量对比研究

旨在探究灵芝孢子粉破壁前后水分、总灰分、浸出物、多糖及总三萜含量的变化,为市售灵芝孢子粉产品的质量评价及临床应用提供理论依据。参照2015版《中国药典》四部通则方法分别测定灵芝孢子粉的水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物及重金属含量等;采用显微和薄层色谱法对灵芝孢子粉进行性状鉴别;采用紫外-分光光度法对灵芝孢子粉中粗多糖、总三萜含量进行测定。结果显示,在显微镜下,未破壁灵芝孢子粉呈完整卵形,破壁孢子粉呈不规则碎片;10批破壁与未破壁孢子粉水分平均含量分别为8.16%、10.77%;总灰分平均含量分别为0.87%、0.64%;酸不溶性灰分平均含量分别为0.31%、0.16%;浸出物平均含量分别为5.86%、7.48%;多糖平均含量分别为1.54%、0.99%;总三萜平均含量分别为4.22%、2.32%。说明灵芝孢子粉破壁前后化学成分含量有差异,破壁孢子粉主要成分多糖与总三萜含量均高于未破壁孢子粉,因此认为破壁的灵芝孢子粉质量优于未破壁的灵芝孢子粉。     

破壁时间对灵芝孢子粉中有效成分测定的影响

比较了机械法不同破壁时间对灵芝孢子粉破壁率、多糖、脂肪、腺苷含量测定及核苷和三萜类HPLC图谱测定的影响。结果表明:破壁率有随破壁时间增加呈提高的趋势,但破壁20 min、30 min、50 min的破壁率无显著性差异;孢子粉中的油脂以及三萜类的成分,只有在破壁后才能被释放,破壁10 min后已能使这些有效成分充分溶出,而破壁与否及破壁时间对多糖和腺苷含量的测定结果无显著性影响。     

不同菌草基质栽培灵芝多指标质量评价

【目的】以水溶性浸出物、灵芝多糖肽、灵芝酸、灵芝甾醇、单糖组成和分子量特征图谱为指标综合评价不同菌草基质栽培灵芝的品质。【方法】采用HPLC法测定多糖肽、灵芝酸、甾醇含量和单糖组成,运用统计学方法比较不同基质栽培灵芝的差异及其相关性。【结果】不同栽培基质的水溶性浸出物含量为14.21%～17.35%,灵芝多糖肽含量为3.80%～6.63%,灵芝酸总量为0.24%～0.53%,甾醇含量为31.43～69.16μg·g-1;主成分分析筛选出2个主成分,累计方差贡献率84.63%;相关性分析显示浸出物与活性成分呈正相关;单糖组成主要是葡萄糖和少量甘露糖;分子量特征图谱标定了6个共有峰,组间相似度大于0.98。【结论】不同基质栽培灵芝的活性物质含量存在显著差异,其中灵芝多糖肽和灵芝酸可作为灵芝质量评价重要指标;类芦、芦竹和五节芒栽培灵芝富含活性成分,这为科学利用菌草栽培灵芝提供参考。     

一种新的综合法破壁灵芝孢子技术

以微波预处理对灵芝孢子进行脆化,采用正交试验法对影响灵芝孢子含水量、脆化率的因素进行了试验和分析,获得了微波的最佳工艺组合,并结合气流粉碎进行破壁。结果发现,当温度为40℃、功率为9 k W、处理时间达到30 min时微波预处理的效果最好。与预处理前相比,经过预处理后的灵芝孢子采用气流粉碎的破壁率明显提高,而粉碎所用时间大大缩短。气流破壁灵芝孢子的多糖和三萜含量较破壁前显著增加,同时不会引入重金属杂质。     

破壁灵芝孢子粉破壁率测定的研究

通过筛选,得到7％的硫酸锌溶液与无水乙醇以10：1（体积比）的混合溶液能使灵芝孢子更好的悬浮。利用该悬浮体系,辅以超声60min和涡旋处理30s,通过血球计数板对不同质量的孢子粉进行计数,建立未破壁灵芝孢子粉质量和孢子数之间的标准曲线,对同批未知破壁率的破壁孢子粉的破壁率进行检测,并人为混合7个标准破壁率的破壁孢子粉对该方法的准确度和精密度进行试验。结果表明：在该悬浮体系下,灵芝孢子粉在0．01～0．05g/25mL与孢子数线性关系良好。     

一种新复合酶处理的灵芝孢子粉破壁研究

以重组膨胀素和纤维素酶为材料,对灵芝孢子进行破壁研究.镜检计算其破壁率,并检测破壁灵芝孢子总三萜含量.结果表明,采用复合酶发酵液与机械处理的破壁灵芝孢子相比,其灵芝总三萜含量较高.     

安徽大别山区金寨产灵芝子实体质量分析

[目的]分析安徽大别山区金寨人工种植灵芝的质量。[方法]依据2015版《中国药典》,采用薄层色谱法(TLC法)鉴别灵芝子实体,采用灰分测定法、浸出物测定法分别测定其灰分、浸出物含量,采用紫外分光光度法(UV法)测定其中多糖、三萜及甾醇含量。[结果]灵芝子实体供试品与对照品在色谱相应位置显现相同颜色荧光斑点;灰分和浸出物含量分别小于3.2%、大于3.0%;多糖、三萜含量分别大于0.90%、0.50%。[结论]安徽大别山区金寨人工种植灵芝质量符合2015版《中国药典》要求,可用于开发保健品或疾病辅助治疗药物。     

ICP光谱法分析蒲公英茶浸出物中微量元素及其溶出特性

建立了电感耦合等离子体发射光谱法测定蒲公英茶浸出物中微量元素Zn、Cu、Mn、Li、Ni、Pb、Sr、Cd、Fe、Ba含量的方法并研究其溶出特性。在ICP光谱仪最佳工作条件下,确定待测元素波长,测定蒲公英茶样品浸出物中微量元素并加标回收,其回收率在95.7%～104.8%,相对标准偏差(RSD)在1.0%～3.2%。冲泡和煎煮2种方法对元素的溶出量影响不大,浸出物中Sr的含量较高,其次是Mn和Zn,Cd和Pb均未检出。蒲公英茶浸出物中微量元素的溶出量随着冲泡时间的增加呈线性增加。随着冲泡次数的增加,蒲公英茶浸出物中微量元素的溶出量逐渐降低。经过2次冲泡后,除了Fe的溶出率为64.5%,其他微量元素的溶出率都在93.3%～100.0%。     

超高压下灵芝孢子的应力分析

在本研究前期采用超高压超临界撞击流方法制备破壁灵芝袍子的基础上，为进一步提高破壁率。利用有限元软件对灵芝孢子在超高压下的应力分布进行了分析，得到最大应力值与加载压力之间的关系。根据灵芝孢子的构造特点，将其简化为带有加强筋的双层壁容器，得到结构在超高压下的应力分布。结果显示：加载压力与最大应力值成正比；应力最大值出现在孢壁的中部；载荷承受面与孢壁间加强筋连接处应力集中。最容易受破坏；采用血球计数法统计，在加载压力300MPa，温度130℃，撞击靶距10mm及保压时间1h的工艺条件下。灵芝孢子的破壁率为88．48％。     

铁皮石斛破壁饮片中多糖含量测定

建立铁皮石斛破壁饮片中多糖含量的测定方法,并对其进行方法学验证。用水提醇沉法提取铁皮石斛破壁饮片中的多糖,采用苯酚—硫酸法对12批次铁皮石斛中的多糖进行含量测定。结果表明:该测定方法经精密度、稳定性、重复性考察后RSD3%,加样回收率为100.94%,试验稳定可靠,可用于铁皮石斛破壁饮片中多糖含量的测定。     

新兴产区和道地产区当归质量评价

[目的]通过不同产地当归质量的研究,探讨当归道地产区(岷县)和新兴产区(天祝县、民乐县)的质量差异性。[方法]以甘肃不同产地的15份当归样品为材料,采用HPLC法测定当归样品阿魏酸的含量;采用紫外分光光度法测定当归多糖含量,根据2015版《中国药典》第四部通则中浸出物的含量测定水溶性浸出物和醇溶性浸出物,通过SPSS 21.0软件对其数据进行分析。[结果]新兴产区和道地产区样品水溶性浸出物、醇溶性浸出物无明显差异(P0.05);道地产区当归中阿魏酸含量高于新兴产区,而当归多糖含量低于新兴产区。[结论]新兴产区和道地产区当归质量差异不大;该试验为道地产区和新兴产区当归质量评价提供可靠、科学的依据。     

浙产多花黄精最适采收期及初加工试验

为确定浙产多花黄精的最佳采收期和初加工方法,采集浙江11个多花黄精分布区的种源,测定其不同生长年限和不同采收月份的折干率、水分、灰分、醇溶性浸出物、多糖及总糖含量。结果表明,不同种源地及不同采收时间均显著影响多花黄精的品质。浙产多花黄精多糖质量分数为7.48%~12.85%,浸出物质量分数为42.74%~70.87%,且以丽水庆元种源品质最优。二年生和三年生龄节折干率及醇溶性浸出物显著高于其他年份龄节,且以3年生龄节多糖和总糖含量最高,分别达到8.78%和66.4%。不同月份浙产多花黄精的折干率及多糖含量差异较大,以9月收获茎节多糖含量最高,达8.20%,总糖含量以11月茎节最高,折干率以11—1月茎节最高。经九蒸九晒后,多花黄精总糖含量由56.8%降至37.2%,多糖含量由7.93%降至4.82%。因此,浙产多花黄精最适采收期在9月至翌年1月,根茎繁殖最佳采收年限以3年生为宜。     

紫外分光光度法快速测定龙泉破壁灵芝孢子粉三萜含量

选取5种龙泉破壁灵芝孢子粉为研究对象,使用紫外分光光度法,建立了一种快速、简单、高灵敏度,专门针对灵芝孢子粉中三萜测定的方法。结果表明,该方法测得龙泉破壁灵芝孢子粉三萜含量为2.94%~3.43%。熊果酸浓度在20~140μg范围内呈良好的线性关系,精密度(RSD)为0.88%,回收率为88.6%~92.5%,完全能够满足于破壁灵芝孢子粉中三萜成分的分析研究。     

天冬蒸制工艺的优化

为提高天冬药材的加工质量,以醇溶性浸出物、水溶性浸出物、多糖(蒽酮-硫酸显色)和总皂苷(高氯酸显色)为指标,考察蒸制时间、蒸制火力和干燥温度3个影响因素,采用正交试验及综合评分法优选天冬的最佳蒸制工艺。结果表明:优选的蒸制工艺为武火蒸20min,70℃烘干。该条件下的天冬药材为黄白色、半透明,多糖、总皂苷、水溶性浸出物和醇溶性浸出物的含量分别为19.81%、6.72%、87.26%和87.61%,综合评分为0.88分。     

不同产地分心木中总黄酮及水溶性浸出物的含量比较研究

目的:测定并比较不同产地分心木中总黄酮及水溶性浸出物的含量,为进一步开发分心木资源提供科学依据。方法:以芦丁为对照品,用紫外-分光光度法测定11批不同产地分心木中总黄酮的含量。采用热浸法测定其水溶性浸出物含量。利用SPSS 24. 0软件分析不同分心木色泽与其含量的关系。结果:收集到的11个不同产地分心木中总黄酮的含量在3. 30%～6. 81%之间,水溶性浸出物的含量在9. 70%～15. 78%之间,以延安宜川分心木中总黄酮及水溶性浸出物的含量为高,分别为6. 81%和15. 78%。三个不同颜色组的分心木中总黄酮及水溶性浸出物含量间无统计学差异。结论:收集到不同产地的样品中,总黄酮及水溶性浸出物含量与外表颜色无关,延安宜川分心木中总黄酮及水溶性浸出物的含量比其他产地的分心木含量高。     

灵芝子实体微粉碎工艺优化试验

利用微粉碎技术将灵芝子实体粉碎成微粉,提高多糖的溶出率。结果表明:含水率低于10%的灵芝子实体,进行6min微粉碎,粉碎效果达到最佳。     

野生与仿生栽培刺五加叶浸出物中多糖与黄酮含量分析

依据药典中浸出物含量测定的方法,分别对刺五加叶的水提浸出物和醇提浸出物中多糖与黄酮含量进行测定。刺五加叶中醇提浸出物含量明显高于水提浸出物含量,水浸出物中,9月11日采收的仿生栽培刺五加叶水浸出物中可溶性多糖的含量最高,5月25日采收的野生刺五加叶浸出物中可溶性多糖的含量最低。醇浸出物中,7月25日采收的野生刺五加叶浸出物中总黄酮的含量最高,5月25日采收的野生刺五加叶浸出物中总黄酮的含量最低。本方法简便可靠、快速、重现性好,适用于刺五加叶浸出物中多糖与黄酮含量测定。     

几种水蕨孢子破壁方法的比较

[目的]比较不同破壁方法对水蕨孢子破壁率的影响。[方法]运用温差-机械破壁法、乙醇浸泡-超声破壁法、纤维素酶法、乙醇浸泡-纤维素酶法以及乙醇浸泡-混合酶法对水蕨孢子进行破壁,分析不同破壁方法对水蕨孢子破壁率的影响。[结果]温差-机械破壁法的水蕨孢子破壁率最低。用pH值4.5的磷酸盐缓冲溶液添加5%纤维素酶处理后,水蕨孢子的破壁率为47.08%。用50%乙醇浸泡、添加5%纤维素酶、超声破碎30 min处理,破壁率最高,达到61.22%。采用乙醇浸泡-混合酶法破壁的水蕨孢子破壁率比只加纤维素酶要低。[结论]该研究对提取和分析水蕨孢子的化学成分具有重要意义。     

茶枝屑代料栽培对灵芝生物转化率和质量的影响

添加不同用量的茶枝屑进行灵芝的代料栽培,并分析灵芝的生物转化率和灵芝多糖和总三萜的含量.结果表明:灵芝在茶枝屑代料培养基上能正常生长、出芝,产生和释放孢子,灵芝的生物转化率比杂木屑代料栽培降低了6.25％～31.33％,灵芝多糖含量高3.03％～28.28％,灵芝总三萜含量高2.62％～17.40％.认为茶枝屑可以作为...     

灵芝多糖对番茄抗灰霉病的诱导效应

【目的】诱导抗病剂可以诱导寄主植株产生系统抗病性,具有持效性和广谱性的特点。论文以番茄植株为模式植物,番茄灰霉菌（Botrytis cinerea）为目标菌,进行温室盆栽试验,以期明确灵芝多糖诱导剂对番茄灰霉病的诱导抗性。【方法】用一定质量浓度的灵芝多糖溶液（50、100、200和400 mg·L^-1）喷雾处理盆栽番茄植株第1、2片真叶（正反面）,每2 d喷施1次,共诱导3次,最后一次诱导2 d后全株喷雾接种供试菌孢子悬浮液（（1-2）×10⁶个孢子/mL）,对照组施用等量清水代替灵芝多糖溶液,与各处理平行喷雾接种番茄灰霉菌孢子悬浮液。在接种孢子悬浮液之前用注射器将番茄苗茎基部刺伤,注意伤口不能太大。然后再罩上塑料薄膜保湿24 h,接种孢子悬浮液2 d内植株遮阴处理,并用加湿器提高温室内的相对湿度,相对湿度控制在不低于90%,温度控制在（15±5）℃,接种后第3 天正常光照。通过调查植株病情指数,计算相对防治效果以评价灵芝多糖对番茄抗灰霉病的诱导效果,并且从防御酶活性、丙二醛（MDA）和叶绿素含量的变化角度评价其诱导抗性的作用机制。同时用一定质量浓度的灵芝多糖溶液（50、100、200和400 mg·L^-1）处理番茄种子并育苗,20 d后测定番茄幼苗株高、鲜重等多项生长指标。【结果】与直接施用等量清水后挑战接菌的对照组病情指数49.25相比,灵芝多糖处理组的番茄植株病情指数明显下降,在32.96-43.85。其中经400 mg·L^-1灵芝多糖处理的番茄植株病情指数最低为32.96,相对防效达到33.07%。经灵芝多糖处理的番茄植株,其体内与抗病有关的防御酶活性也发生显著变化,过氧化氢酶（CAT）和多酚氧化酶（PPO）的活性在多糖诱导第3天达到最高,分别达到162和98 U·min^-1·g^-1 FW,是对照组的2.13和1.71倍;过氧化物酶（POD）的活性在诱导后第4天达到最高值434 U·min^-1·g^-1 FW,是对照处理组的3.29倍。灵芝多糖能够系统地诱导番茄体内 CAT、POD 及 PPO 活性,显著抑制了感染灰霉菌后番茄植株叶片叶绿素含量的下降。灵芝多糖处理组的MDA含量与对照组相比有所下降,对照处理组在取样期间内MDA含量持续上升,而灵芝多糖处理组在取样期间内MDA含量呈先上升后趋于平稳的变化趋势。各质量浓度灵芝多糖对番茄种子的发芽率、芽长和幼苗株高、植株的鲜重均有不同程度的促进作用。其中200 mg·L^-1灵芝多糖浸泡的番茄种子发芽率最高,达87.3%,比对照组的发芽率77.3%提高了10.0%;且该处理对番茄幼苗的株高和地上部分鲜重的促进作用也最大,分别较对照增加了12.9%和33.3%;经100 mg·L^-1灵芝多糖处理后番茄幼苗的芽长和地下部分鲜重变化最大,与对照组相比分别提高了0.16 cm和0.33 g。【结论】灵芝多糖能够诱导番茄植株对灰霉病产生系统抗病性,同时对番茄种子发芽和番茄植株幼苗生长具有一定的促进作用。